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大黄鱼对5种新型非粮蛋白源表观消化率的研究

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水生生物学报 2023年第9期47卷 1416-1424页

作者：张健李磊董衍邹李学山王玲宋凯谭北平鲁康乐张春晓集美大学水产学院厦门市饲料检测与安全评价重点实验室厦门361021 广东海洋大学水产学院水产动物营养与饲料实验室湛江524088

为研究大黄鱼(Larimichthys crocea)对乙醇梭菌蛋白、小球藻、黑水虻粉、黄粉虫粉和棉籽浓缩蛋白5种蛋白质原料的干物质、粗蛋白、粗脂肪、能量和氨基酸表观消化率,试验选取初始体重为(154.0±5.3)g的大黄鱼1800尾,随机分到18个浮式网箱... 详细信息

为研究大黄鱼(Larimichthys crocea)对乙醇梭菌蛋白、小球藻、黑水虻粉、黄粉虫粉和棉籽浓缩蛋白5种蛋白质原料的干物质、粗蛋白、粗脂肪、能量和氨基酸表观消化率,试验选取初始体重为(154.0±5.3)g的大黄鱼1800尾,随机分到18个浮式网箱中,设5个试验组和1个基础组,每组3个平行。基础组投喂基础饲料,试验组分别投喂5种试验饲料,试验饲料由70%基础饲料和30%试验蛋白质原料组成,以0.1%三氧化二钇(Y2O3)为外源指示剂。结果显示,大黄鱼对5种试验原料干物质的表观消化率为56.77%—75.53%(乙醇梭菌蛋白>黄粉虫粉>小球藻>黑水虻粉>棉籽浓缩蛋白);粗蛋白的表观消化率为69.93%—89.59%(乙醇梭菌蛋白>小球藻>棉籽浓缩蛋白>黑水虻粉>黄粉虫粉);粗脂肪的表观消化率为58.58%—93.77%(乙醇梭菌蛋白>小球藻>黄粉虫粉>棉籽浓缩蛋白>黑水虻粉);能量的表观消化率为63.39%—84.33%(乙醇梭菌蛋白>黑水虻粉>小球藻>黄粉虫粉>棉籽浓缩蛋白);总氨基酸的表观消化率为76.62%—93.24%(乙醇梭菌蛋白>小球藻>棉籽浓缩蛋白>黑水虻粉>黄粉虫粉)。大黄鱼对各种蛋白质原料的氨基酸表观消化率与粗蛋白表观消化率变化趋势基本一致。结果表明:乙醇梭菌蛋白是5种原料中最适合大黄鱼的蛋白源、小球藻次之,大黄鱼对黄粉虫粉、棉籽浓缩蛋白和黑水虻粉的消化率均不佳。

关键词：新型非粮蛋白源表观消化率大黄鱼

大黄鱼slitrk3基因启动子克隆及转录调控分析

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南方水产科学 2023年第4期19卷 68-76页

作者：周锐涛岳珠峰纪焦军温靖姜丹王志勇方铭集美大学水产学院/农业农村部东海海水健康养殖重点实验室福建厦门361021

神经突触相关蛋白Slitrk3具有调节抑制性突触发育的作用。研究大黄鱼(Larimichthys crocea)神经突触黏附分子slitrk3基因的转录调控机制,可为解决大黄鱼养殖面临的生长、应激及抗逆等问题提供新思路。通过生物信息学方法对大黄鱼及其他... 详细信息

神经突触相关蛋白Slitrk3具有调节抑制性突触发育的作用。研究大黄鱼(Larimichthys crocea)神经突触黏附分子slitrk3基因的转录调控机制,可为解决大黄鱼养殖面临的生长、应激及抗逆等问题提供新思路。通过生物信息学方法对大黄鱼及其他物种的Slitrk3氨基酸进行多重序列比对和系统进化树分析,并预测大黄鱼slitrk3基因启动子区域相关的调控元件,采用双荧光素酶报告基因系统检测大黄鱼slitrk3基因启动子区域的转录活性。生物信息学分析结果显示,Slitrk3氨基酸序列在鱼类中具有较高的保守性;大黄鱼slitrk3基因启动子区域预测存在2个潜在的转录起始位点、2个CpG岛以及Sp1、GR、C/EBPα和C/EBPβ等多种转录因子结合位点。双荧光素酶报告基因系统结果显示,大黄鱼slitrk3基因启动子区域的−1970—−1614 bp、−1210—−667 bp存在正调控元件,−1614—−1210 bp、−667—−376 bp、−376—−147 bp存在负调控元件,推测−147—+16 bp为核心启动子。

关键词：大黄鱼 slitrk3基因启动子转录调控

大黄鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶的克隆、表达及性质

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水产学报 2022年第7期46卷 1154-1166页

作者：刘海燕杨汝晴陈玉磊张凌晶孙乐常刘光明曹敏杰集美大学海洋食品与生物工程学院

为探究大黄鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(MBSP)的性质，实验采用生物信息学方法对大黄鱼MBSP进行基因检索与筛选，通过分子克隆得到大黄鱼MBSP编码区全长cDNA并构建毕赤酵母表达系统得到重组蛋白质(Lc-rMBSP)，分析Lc-rMBSP的酶学性质... 详细信息

为探究大黄鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶(MBSP)的性质，实验采用生物信息学方法对大黄鱼MBSP进行基因检索与筛选，通过分子克隆得到大黄鱼MBSP编码区全长cDNA并构建毕赤酵母表达系统得到重组蛋白质(Lc-rMBSP)，分析Lc-rMBSP的酶学性质和二级结构并通过同源建模分析Lc-MBSP的三级结构。结果显示，大黄鱼肌原纤维蛋白中存在MBSP，在55°C下活性最高。大黄鱼基因组中注释为类胰蛋白酶的基因有16条，对这些基因与淡水鱼MBSP进行系统进化树分析和多序列比对，得到同源性较高的基因序列(Lc-MBSP)。Lc-MBSP编码区全长735 bp，共编码244个氨基酸残基。通过毕赤酵母重组表达，分离纯化得到分子量约28 ku的重组蛋白质Lc-rMBSP。表达蛋白的最适温度和pH分别为50°C和8.0。圆二色谱分析表明，温度对Lc-rMBSP二级结构具有较大的影响。Lc-rMBSP在较宽的温度范围内(40～60°C)对MHC具有较高的水解活性。Lc-rMBSP的最适底物为Boc-Leu-Lys-Arg-MCA，并且特异性切割羧基侧的精氨酸残基，而不分解赖氨酸残基。通过同源建模得到Lc-MBSP的三维结构，催化三联体由保守的His-61、Asp-105和Ser-198构成，其底物结合口袋(Ser-192、Gly-215和Ser-225)与类胰蛋白酶的略有不同，这种差异可能是导致Lc-rMBSP与其他胰蛋白酶酶学性质不同的主要原因。本研究可为海水鱼MBSP的研究提供理论参考。

关键词：大黄鱼肌原纤维结合型丝氨酸蛋白酶基因克隆性质分析圆二色谱同源建模

乳酸钠结合促渗处理对大黄鱼片冷藏期间品质变化的影响

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食品与发酵工业 2023年第14期49卷 50-59页

作者：浦天霆蓝蔚青朱圣赟赵欣宇徐振飞谢晶上海海洋大学食品学院上海201306 上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心食品科学与工程国家级实验教学示范中心(上海海洋大学)上海201306

为研究乳酸钠结合促渗处理对大黄鱼片冷藏期间品质变化影响,将样品经去头、尾和去内脏处理,用蒸馏水洗净后沥干,随机分成4组,双频超声组(dual-frequency ultrasound, DUS)、乳酸钠处理组(sodium lactate, SL)、乳酸钠-双频超声联合处理... 详细信息

为研究乳酸钠结合促渗处理对大黄鱼片冷藏期间品质变化影响,将样品经去头、尾和去内脏处理,用蒸馏水洗净后沥干,随机分成4组,双频超声组(dual-frequency ultrasound, DUS)、乳酸钠处理组(sodium lactate, SL)、乳酸钠-双频超声联合处理组(sodium lactate combined with dual-frequency ultrasound, SLUS)与对照组(control, CK)。14 d内每隔2 d进行微生物指标[菌落总数(total viable count, TVC)、嗜冷菌数(psychrophilic bacteria count, PBC)]、理化指标[pH值、总挥发性盐基氮(total volatile basic nitrogen, TVB-N)值、硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid, TBA)值]、质构分析(texture profile analysis, TPA)、水分迁移[持水力(water holding capacity, WHC)、低场核磁共振(low field nuclear magnetic resonance, LF-NMR)、核磁共振成像(magnetic resonance image, MRI)]、蛋白特性[内源荧光强度(intrinsic fluorescence intensity, IFI)、SDS-PAGE]等指标测定,并结合感官评定综合分析不同处理方式对冷藏大黄鱼品质变化的影响。结果得出,DUS处理可适当抑制样品贮藏前期微生物的生长,CK组和DUS组在第0天时的菌落总数对数值分别为4.31±0.02与3.22±0.09,存在显著差异(P大黄鱼的冷藏货架期延至12 d;SLUS处理方式能减缓样品贮藏期间TVC与PBC的增长,明显抑制样品贮藏期间pH值、TVB-N值与TBA值的升高,保持其良好的质构特性和感官品质;SLUS组样品贮藏期间的TVB-N值、TBA值、硬度值、弹性值与咀嚼性值自第2天与对照组间差异显著(P大黄鱼片货架期的同时,较好地保持冷藏大黄鱼的感官品质,使其货架期延至14 d,比对照组样品至少延长了6 d。该研究结果将能为大黄鱼的贮藏保鲜提供一定的理论参考。

关键词：乳酸钠双频超声大黄鱼冷藏品质

双频超声联合柠檬酸处理对大黄鱼冷藏期间品质变化的影响

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食品科学 2023年第1期44卷 246-255页

作者：朱圣赟蓝蔚青浦天霆赵欣宇徐振飞谢晶上海海洋大学食品学院上海201306 上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心食品科学与工程国家级实验教学示范中心(上海海洋大学)上海201306

为探究双频超声(dual-frequency ultrasound,DUS)和柠檬酸(citric acid,CA)联合处理对大黄鱼冷藏期间品质变化的影响,分别采用无菌蒸馏水(CK组),20/28 kHz、175 W DUS(DUS组),质量浓度8.0 g/L CA(CA组),DUS联合CA(DUS+CA组)处理新鲜大黄鱼片10 min。将4组样品处理后沥干,放入无菌袋中置于4℃条件下冷藏,每2 d进行微生物(菌落总数、嗜冷菌数)、理化(质构分析、色差、pH值、总挥发性盐基氮含量、硫代巴比妥酸反应物值)和水分迁移(持水力、低场核磁共振、核磁共振成像)指标测定,并结合感官评价,综合分析不同处理方式对大黄鱼贮藏期间的作用效果。结果表明,CA处理可有效抑制样品冷藏期间的微生物增长和脂肪氧化,CK组样品的菌落总数对数值在第8天时达到(8.26±0.02)(lg(CFU/g)),超过腐败限值,而CA组样品菌落总数对数值为(6.60±0.06)(lg(CFU/g));此时CA组样品的硫代巴比妥酸值为(0.51±0.05)mg/kg,显著低于对照组(P大黄鱼总体品质优于其他组。贮藏末期,DUS+CA组样品的总挥发性盐基氮含量为(13.79±0.57)mg/100 g,品质最佳。综合各项指标得出,20/28 kHz、175 W DUS联合质量浓度8.0 g/L CA处理可明显延缓大黄鱼贮藏期间的品质劣变,与CK组对比,其可至少延长大黄鱼冷藏货架期6 d。

关键词：大黄鱼冷藏双频超声柠檬酸组织品质

产细菌素植物乳杆菌的筛选及其细菌素对大黄鱼保鲜效果

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食品工业科技 2022年第21期43卷 9-19页

作者：许华娣高腾琪崔子杭柳春胜盘赛昆杨杰江苏海洋大学食品科学与工程学院江苏连云港222005

本研究首先利用富集培养、稀释涂布和琼脂平板扩散实验从传统发酵食品中筛选乳酸菌,采用生理生化实验、16S rDNA基因序列同源性分析对菌株进行鉴定。其次,通过排酸实验、过氧化氢排除实验、蛋白酶水解实验明确该乳酸菌所产的主要抑菌物... 详细信息

本研究首先利用富集培养、稀释涂布和琼脂平板扩散实验从传统发酵食品中筛选乳酸菌,采用生理生化实验、16S rDNA基因序列同源性分析对菌株进行鉴定。其次,通过排酸实验、过氧化氢排除实验、蛋白酶水解实验明确该乳酸菌所产的主要抑菌物质。最后,通过醇沉水提、Sephadex LH-20层析获得细菌素粗提物,并将其应用于大黄鱼整鱼保鲜。每3 d取样进行感官评价、pH测定、菌落总数测定、总挥发性盐基氮测定和质构分析,评价其保鲜效果。结果表明,所筛选获得的菌株为植物乳杆菌,命名为MMB-11。植物乳杆菌MMB-11所产细菌素对蛋白酶敏感,具有良好的酸耐受性和热稳定性。将该细菌素应用于大黄鱼保鲜发现,在保藏12 d时,MMB-11细菌素处理组、对照组和Nisin处理组菌落总数分别为3.50×10~4、1.10×10~5和4.50×10~4 CFU/g,挥发性盐基氮分别为20.91±0.66、31.37±0.21和21.44±0.45 mg/100 g。因此,相较于Nisin处理组和对照组,MMB-11细菌素粗提液对大黄鱼具有更好的保鲜效果。本研究可为大黄鱼安全无害的生物保鲜剂的开发奠定理论基础。

关键词：植物乳杆菌分离鉴定细菌素大黄鱼保鲜

酒糟大黄鱼抗菌肽FAH34的抑菌活性及热稳定性

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中国食品学报 2023年第12期23卷 247-254页

作者：李若冰刘嘉鑫金日天翁武银张志刚杨燊集美大学海洋食品与生物工程学院福建厦门361021 厦门银祥集团有限公司肉食品安全生产技术国家重点实验室福建厦门361100 大连工业大学海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心辽宁大连116034

副溶血性弧菌为常见的食源性致病菌,是影响海洋食品安全性的主要危害因子。本研究从酒糟大黄鱼中鉴定一种抗菌肽FAH34(氨基酸序列为KTISFILK),研究其对副溶血性弧菌的抑菌活性及热稳定性。结果表明,肽FAH34对副溶血性弧菌的最低抑菌浓度... 详细信息

副溶血性弧菌为常见的食源性致病菌,是影响海洋食品安全性的主要危害因子。本研究从酒糟大黄鱼中鉴定一种抗菌肽FAH34(氨基酸序列为KTISFILK),研究其对副溶血性弧菌的抑菌活性及热稳定性。结果表明,肽FAH34对副溶血性弧菌的最低抑菌浓度(MIC)值为7.80μg/mL,在FAH34作用3 h后,细菌数从5.06 lg(CFU/mL)降至0 lg(CFU/mL),显示出很强的抑菌活性。透射电镜观察发现,肽FAH34是通过破坏细菌细胞膜结构,使胞内物质外渗,从而达到杀菌的效果。经80℃、30 min及121℃、15 min处理后,肽FAH34仍能保持原有的抑菌活性,对人体LO2细胞活力(>90%)无显著影响。FAH34应用在鱼肉及腌制液中,可将其中副溶血性弧菌数量控制在0~0.40 lg(CFU/mL)范围。结论:FAH34是一种对溶血性弧菌具有热稳定性的新型抗菌肽,可作为生物防腐剂应用于水产腌制食品中。

关键词：大黄鱼热稳定性抗菌肽副溶血性弧菌抑菌机制

大黄鱼变形假单胞菌的遗传学和血清学聚类特征初步分析

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福建农业学报 2022年第9期37卷 1109-1116页

作者：许斌福陈秀锦池洪树徐梦婷陈佳林能锋龚晖福建省农业科学院生物技术研究所福建福州350003 福建省疾病预防控制中心福建福州350002 大黄鱼育种国家重点实验室福建宁德352103

【目的】内脏白点病是冬春季大黄鱼(Larimichthys crocea)最主要的细菌性疾病,变形假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)是内脏白点病的主要病原。分析大黄鱼来源的变形假单胞菌病原聚类特征,为大黄鱼变形假单胞菌流行规律研究和科学... 详细信息

【目的】内脏白点病是冬春季大黄鱼(Larimichthys crocea)最主要的细菌性疾病,变形假单胞菌(Pseudomonas plecoglossicida)是内脏白点病的主要病原。分析大黄鱼来源的变形假单胞菌病原聚类特征,为大黄鱼变形假单胞菌流行规律研究和科学防控提供参考。【方法】克隆7株不同时空来源的大黄鱼变形假单胞菌16S rDNA、gyrB,测序并构建进化树;制备上述菌株的O-特异链血清(O抗原血清)与鞭毛蛋白血清(H抗原血清),进行菌体凝集试验。【结果】16S rDNA和gyrB序列分析表明,所有的变形假单胞菌聚为一簇;O抗原和H抗原凝集结果表明,7株变形假单胞菌以及变形假单胞菌标准株均会发生凝集反应,凝集效价也无明显区别,与荧光假单胞菌(Pseudomonas fluoresenes)、溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)和哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)不发生凝集反应。【结论】本研究所用的7株不同时空来源的变形假单胞菌亲缘关系接近,可能具有共同的起源。

关键词：大黄鱼变形假单胞菌 16S rDNA gyrB 血清菌体凝集聚类分析

基于GC-TOF-MS的大黄鱼鱼卵鱼露快速发酵过程中代谢产物分析

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食品科学 2022年第24期43卷 129-137页

作者：周静张华丹火玉明雷彩玲杜希萍梁鹏程文健陈丽娇福建农林大学食品科学学院福建福州350002 闽台特色海洋食品加工及营养健康教育部工程研究中心福建福州350002 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021

为了解大黄鱼鱼卵鱼露快速发酵过程中代谢产物的差异及变化,采用气相色谱-飞行时间质谱技术对发酵30 d的大黄鱼鱼卵鱼露进行监测。对所得的数据进行多元统计分析,根据统计学上显著差异P值不大于0.05,且正交偏最小二乘判别分析第1主成分... 详细信息

为了解大黄鱼鱼卵鱼露快速发酵过程中代谢产物的差异及变化,采用气相色谱-飞行时间质谱技术对发酵30 d的大黄鱼鱼卵鱼露进行监测。对所得的数据进行多元统计分析,根据统计学上显著差异P值不大于0.05,且正交偏最小二乘判别分析第1主成分变量重要性值投影值不小于1的条件对差异代谢物进行筛选并进行凝聚层次聚类。结果表明:大黄鱼鱼卵鱼露发酵过程中的显著差异代谢产物共有46种,其中包括10种糖、9种醇、7种氨基酸、6种有机酸、4种酯、3种醛、1种脂肪酸以及6种其他化合物。差异代谢产物主要参与的代谢通路为缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的生物合成,蛋白质消化吸收,半乳糖代谢,氨酰-tRNA生物合成,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,硫代葡萄糖苷生物合成,三羧酸循环,氨基酸的生物合成,莽草酸类生物碱的生物合成,磷酸肌醇代谢,不饱和脂肪酸的生物合成。所映射出的15种极显著差异代谢物中氨基酸类代谢物参与了多条代谢通路。本研究结果为大黄鱼鱼卵鱼露的工业化提供一定理论依据。

关键词：气相色谱-飞行时间质谱大黄鱼鱼露差异代谢产物