检索结果-南通市图书馆

化学学报 2014年第10期72卷 1085-1091页

作者：丰小敏沈爱金李先琴李秀玲邹丽娟梁鑫淼大连医科大学附属第二医院大连116023 中国科学院大连化学物理研究所中国科学院分离分析化学重点实验室大连116023

多磷酸蛋白对于生物体适应内外环境具有重要意义,而明确多磷酸蛋白的磷酸位点功能及其信号转导机制尤为关键.复杂生物样品中多磷酸化肽的低丰度、低电离的特性,以及非磷酸化肽的抑制作用,决定了质谱分析前进行多磷酸化肽富集是非常必要... 详细信息

多磷酸蛋白对于生物体适应内外环境具有重要意义,而明确多磷酸蛋白的磷酸位点功能及其信号转导机制尤为关键.复杂生物样品中多磷酸化肽的低丰度、低电离的特性,以及非磷酸化肽的抑制作用,决定了质谱分析前进行多磷酸化肽富集是非常必要的步骤.本工作采用基于巯基-烯烃点击化学法合成的混合模式材料Click TE-GSH进行单磷酸化肽和多磷酸化肽的选择性富集.我们建立了单磷酸化肽、双磷酸化肽和多磷酸化肽的顺序分段富集方法.该优化方法能抗干扰,应用于脱脂牛奶时富集到11条多磷酸化肽.与商品化固化金属亲和色谱(IMAC)材料相比,Click TE-GSH富集多磷酸化肽的选择性更好.本工作所建立的富集方法为高效富集多磷酸化肽提供新方法和新技术.

关键词：多磷酸化肽 Click TE—GSH 高效富集质谱

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

微柱液相色谱-电喷雾串联质谱检测多磷酸化肽位点

引用

色谱 2007年第4期25卷 453-456页

作者：王晖段继诚袁辉明张丽华张维冰张玉奎中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心

基于碱性磷酸酶的去磷酸化作用,发展了一种可改善多磷酸化肽电喷雾质谱检测效果的技术。将β-酪蛋白酶解产物用TiO2柱富集后,用碱性磷酸酶进行处理,并经微柱液相色谱分离后采用串联质谱进行鉴定。通过谱图中存在相对分子质量与根据氨基... 详细信息

基于碱性磷酸酶的去磷酸化作用,发展了一种可改善多磷酸化肽电喷雾质谱检测效果的技术。将β-酪蛋白酶解产物用TiO2柱富集后,用碱性磷酸酶进行处理,并经微柱液相色谱分离后采用串联质谱进行鉴定。通过谱图中存在相对分子质量与根据氨基酸序列预计的单磷酸化肽相差80的色谱峰,可以证实样品中含有单磷酸化肽。此外,经碱性磷酸酶处理后的样品的色谱峰数目的增加,说明样品中可能存在多磷酸化肽段。通过控制去磷酸化反应的程度,使四磷酸化肽的部分磷酸基团被去除,从而可以推断其中3个磷酸化位点可能处于氨基酸残基序列的第17、18和19位。

关键词：微柱液相色谱电喷雾串联质谱多磷酸化肽磷酸化位点碱性磷酸酶

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

富Ca的埃及蓝纳米片特异性富集多磷酸化肽

富Ca的埃及蓝纳米片特异性富集多磷酸化肽

引用

第21届全国色谱学术报告会及仪器展览会

作者：杨世庶古志远南京师范大学化学与材料科学学院

首次提出了基于碱土金属亲和的磷酸化肽富集法,实现了富Ca埃及蓝二维纳米片特异性选择性富集多磷酸化肽。埃及蓝纳米片具有稳定的片层结构、片层表面Ca丰度高、较大的比表面等性质,与传统的固定化金属亲和色谱法(IMAC)与金属氧化物亲和... 详细信息

首次提出了基于碱土金属亲和的磷酸化肽富集法,实现了富Ca埃及蓝二维纳米片特异性选择性富集多磷酸化肽。埃及蓝纳米片具有稳定的片层结构、片层表面Ca丰度高、较大的比表面等性质,与传统的固定化金属亲和色谱法(IMAC)与金属氧化物亲和色谱法(MOAC)相比,埃及蓝纳米片作为吸附磷酸化肽的材料,经过质谱分析后,其具有背景清晰,信噪比高,且表现出对多磷酸化肽的特异性富集,在改变有机溶剂比例以及改变酸度的条件下,其对多磷酸化肽仍然具有良好的

关键词：二维片层埃及蓝多磷酸化肽

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

基于紫外激光解离的多磷酸化位点异构肽段解析

基于紫外激光解离的多磷酸化位点异构肽段解析

引用

第三届全国质谱分析学术报告会

作者：刘哲益江游肖春雷熊行创汪涛李吉楠王方军方向杨学明中国科学院大连化学物理研究所分离分析化学重点实验室中国计量科学研究院中国科学院大连化学物理研究所分子反应动力学国家重点实验室

磷酸化是一种重要的蛋白质翻译后修饰过程,在细胞生长、有丝分裂、信号传导和细胞周期控制等生命活动中均起到了至关重要的调控作用。多位点磷酸化修饰在生物过程中能够极大丰富磷酸化蛋白质的调控功能并提高功能蛋白质调控的准确性,蛋... 详细信息

磷酸化是一种重要的蛋白质翻译后修饰过程,在细胞生长、有丝分裂、信号传导和细胞周期控制等生命活动中均起到了至关重要的调控作用。多位点磷酸化修饰在生物过程中能够极大丰富磷酸化蛋白质的调控功能并提高功能蛋白质调控的准确性,蛋白质多磷酸化修饰研究在近年来已经引起广泛关注[1-2]。在本研究中,我们构建了193 nm紫外激光-线性离子阱质谱（LTQ）联用系统,并将该系统用于三组多磷酸化肽段异构体中多个磷酸化位点的定位表征,系统考察了UVPD在多磷酸化肽质谱序列检测和修饰位点定位中的应用潜力。研究结果表明,UVPD产生的二级碎片离子种类丰富且基本消除了磷酸基团中性丢失,多磷酸化肽段中磷酸化位点微小的位置变化也可以在UVPD解离二级质谱图中得到高可信度准确定位。与常规CID二级碎裂策略相比,二级质谱图中鉴定到的碎片离子数和磷酸化位点定位碎片离子数分别平均提高了123%和104%。本工作系统考察了UVPD解离策略在多磷酸化蛋白质质谱表征中的应用前景,证明UVPD能够准确定位重要磷酸化蛋白质中的多磷酸化位点,对多磷酸化蛋白质相关细胞生命活动中调控机理的诠释有巨大应用潜力。

关键词：多磷酸化肽紫外激光解离质谱

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

酰肼基功能化硅胶在磷酸化肽富集中的应用

酰肼基功能化硅胶在磷酸化肽富集中的应用

引用

第二十届全国色谱学术报告会及仪器展览会

作者：徐林楠马雯李丽萍白玉刘虎威北京大学化学与分子工程学院

＜正＞蛋白质磷酸化是一种十分重要的蛋白质翻译后修饰过程,它在生命活动中扮演着十分重要的角色,同时也与多种疾病的发生密切相关。质谱是研究蛋白质磷酸化最为常用的手段之一,但磷酸化蛋白的天然丰度低、离子化效率低以及高丰度非磷... 详细信息

＜正＞蛋白质磷酸化是一种十分重要的蛋白质翻译后修饰过程,它在生命活动中扮演着十分重要的角色,同时也与多种疾病的发生密切相关。质谱是研究蛋白质磷酸化最为常用的手段之一,但磷酸化蛋白的天然丰度低、离子化效率低以及高丰度非磷酸化蛋白和多肽对其离子化过程的抑制作用,使得磷酸化蛋白和磷酸化肽的直接质谱检测面临的诸多困难。因此,需要采取预先的萃取富集手段来消除基质干扰并提高其检测灵敏度。

关键词：磷酸化肽酰肼基功能化硅胶单磷酸化肽多磷酸化肽

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

基于纳米材料的磷酸肽选择性富集及质谱鉴定新方法研究

基于纳米材料的磷酸肽选择性富集及质谱鉴定新方法研究

引用

作者：王鑫慧南京师范大学

学位级别：硕士

蛋白质磷酸化修饰是生物体内最重要的翻译后修饰之一,调节着生命活动中许多重要过程,包括细胞增殖、分化、新陈代谢及肿瘤的发生。然而,由于磷酸化蛋白含量低,离子化效率差等原因,直接用质谱进行磷酸化蛋白质组学研究仍然面临着诸多困... 详细信息

蛋白质磷酸化修饰是生物体内最重要的翻译后修饰之一,调节着生命活动中许多重要过程,包括细胞增殖、分化、新陈代谢及肿瘤的发生。然而,由于磷酸化蛋白含量低,离子化效率差等原因,直接用质谱进行磷酸化蛋白质组学研究仍然面临着诸多困难。因此,为了完成磷酸化蛋白质组学研究,在质谱分析之前对磷酸化肽段进行选择性富集成为一个必要的前处理手段。针对上述问题,本论文开展如下研究:1.在诸多的富集方法和策略中,基于Ti的固定金属亲和层析(Immobilized Metal Affinity Chromatography,IMAC)材料因其较高的选择性、较好的重复利用率等优点在磷蛋白组质谱分析中表现出了较高的潜力。然而,传统Ti-IMAC材料水溶性较差且比表面积小的缺点极大地限制了其对亲水性磷酸肽的富集效率。为了基于一种材料克服以上缺陷,我们成功设计合成了一种以环糊精改性的碳纳米管为载体的Ti-IMAC材料(COOH-CNTs-CD-Ti)。其中,碳纳米管拥有较大的比表面积,为磷酸肽的吸附提供了更大的附着位点,而环糊精则拥有较好的亲水性,这使得Ti-IMAC材料对磷酸肽的键合更加有效。研究结果显示,COOH-CNTs-CD-Ti纳米材料对磷酸肽具有强的选择富集能力,即使磷酸肽浓度低至1×10M时仍表现出较高的灵敏性,这表明环糊精和碳纳米管的使用极大地改善了Ti-IMAC材料在磷酸肽富集过程中的缺陷,同时也为磷酸化蛋白质组学前处理提供了一种强有力的工具。2.我们进一步对生物学功能更加重要的多磷酸肽富集进行深入研究。目前多磷酸肽特异性富集研究仍处于起步阶段,所用富集材料种类有限且合成方法复杂,这既不利于多磷酸肽富集机理的阐明也不利于实际应用的推广。因而,本课题在Ti-IMAC材料的理论基础之上,结合多磷酸肽区别于单磷酸肽和非磷酸肽的独特性质,选取合成简单、性能稳定的纳米磷酸钙对多磷酸肽进行富集研究。研究结果表明,纳米磷酸钙能够有效地从磷酸肽(单磷酸肽和多磷酸肽)和非磷酸肽混合物中选择性富集多磷酸肽并具有良好的稳定性,选择特异性及重复性。同时,对存在100倍(摩尔比)牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)干扰的1 x10 M的β-酪蛋白酶切肽段样品中的多磷酸肽也完成了富集鉴定。纳米磷酸钙优良的富集性能为其在多磷酸化蛋白位点鉴定应用中提供了可能。本文从磷酸化蛋白质组学的实际应用出发,先是改善了传统IMAC材料在磷酸肽富集中的缺陷,并对影响磷酸肽富集的关键因素,如材料的亲水性以及比表面积等因素进行了详尽的讨论。随着研究的深入,本课题进一步凝练,对更加重要的多磷酸肽进行富集研究,并系统研究了多磷酸肽富集材料的性质,进而对多磷酸肽富集机理及规律进行了初步阐明。总的来说,本文不仅是对磷酸肽选择性富集方法理论的一种完善,同时也为多磷酸化位点鉴定提供了一种有效方法,为磷酸化蛋白质组学走向实际应用奠定了一定基础。

关键词：磷酸化蛋白质组学质谱分析磷酸化肽多磷酸化肽亲和富集

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：