微柱液相色谱-电喷雾串联质谱检测多磷酸化肽位点

作     者：王晖 段继诚 袁辉明 张丽华 张维冰 张玉奎 WANG Hui;DUAN Jicheng;YUAN Huiming;ZHANG Lihua;ZHANG Weibing;ZHANG Yukui

作者机构：中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心 

出 版 物：《色谱》 (Chinese Journal of Chromatography)

年 卷 期：2007年第25卷第4期

页      面：453-456页

核心收录：

学科分类：081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 

基　　金：中国科学院知识创新工程重要方向项目(No.KJCX2.YW.H09) 国家自然科学基金重点基金(No.20435020)资助项目 

主　　题：微柱液相色谱 电喷雾串联质谱 多磷酸化肽 磷酸化位点 碱性磷酸酶 

摘      要：基于碱性磷酸酶的去磷酸化作用,发展了一种可改善多磷酸化肽电喷雾质谱检测效果的技术。将β-酪蛋白酶解产物用TiO2柱富集后,用碱性磷酸酶进行处理,并经微柱液相色谱分离后采用串联质谱进行鉴定。通过谱图中存在相对分子质量与根据氨基酸序列预计的单磷酸化肽相差80的色谱峰,可以证实样品中含有单磷酸化肽。此外,经碱性磷酸酶处理后的样品的色谱峰数目的增加,说明样品中可能存在多磷酸化肽段。通过控制去磷酸化反应的程度,使四磷酸化肽的部分磷酸基团被去除,从而可以推断其中3个磷酸化位点可能处于氨基酸残基序列的第17、18和19位。