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热处理对大豆油体表面的油体蛋白和外源性蛋白影响

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食品工业科技 2014年第22期35卷 106-109,113页

作者：陈业明赵路苹熊小辉阮奇珺张彩猛华欲飞江南大学食品学院江苏无锡214122

研究了热处理不同p H生豆浆和吸胀大豆种子对大豆油体上油体蛋白和外源性蛋白的影响,并通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳表征油体蛋白和外源性蛋白的变化。研究表明：热处理生豆浆和吸胀的大豆种子时,随着温度和时间的增加,都可以抑制内切蛋... 详细信息

研究了热处理不同p H生豆浆和吸胀大豆种子对大豆油体上油体蛋白和外源性蛋白的影响,并通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳表征油体蛋白和外源性蛋白的变化。研究表明：热处理生豆浆和吸胀的大豆种子时,随着温度和时间的增加,都可以抑制内切蛋白酶P34的活性,有利于油体蛋白保留在油体上;而且热处理对吸胀的大豆种子效果更显著。热处理不同p H的生豆浆时,随着热处理强度和生豆浆p H的增加,外源性蛋白（主要是大豆球蛋白、伴大豆球蛋白和过敏性蛋白Bd 30K）会从油体上逐渐解离下来。在80℃、p H8.5下处理生豆浆5－30min时,油体纯度高达97%,且含有的过敏性蛋白Bd 30K低于1%。

关键词：大豆油体油体蛋白外源性蛋白热处理过敏性蛋白

外源性蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的策略综述

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世界科技研究与发展 2015年第5期37卷 627-630页

作者：马媛媛何健民康永杰兰州大学口腔医学院兰州730000 甘肃省人民医院口腔科兰州730000

大肠杆菌表达系统因其自身众多的优点而成为表达外源性蛋白的首选,但是有些情况下,外源性蛋白在大肠杆菌中表达时因不能正确折叠而形成不可溶性的包涵体。因此,学者们为提高重组蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达采用了多种方法,包括应用促... 详细信息

大肠杆菌表达系统因其自身众多的优点而成为表达外源性蛋白的首选,但是有些情况下,外源性蛋白在大肠杆菌中表达时因不能正确折叠而形成不可溶性的包涵体。因此,学者们为提高重组蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达采用了多种方法,包括应用促溶标签、改变大肠杆菌表达菌株、分子伴侣的共表达和折叠调节器等。本综述对近几年来常用的促进外源性蛋白可溶性表达的策略进行了归纳和总结。

关键词：大肠杆菌包涵体外源性蛋白伴侣蛋白

基于亲和素-生物素双夹心测定外源性蛋白血清动态浓度的非抗体依赖新方法

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基于亲和素-生物素双夹心测定外源性蛋白血清动态浓度的非抗体依...

不同蛋白对挤压大米淀粉消化性影响及重组米制备

第八届全国免疫学学术大会

作者：余颖欣刘艳君焦德龙文李艳徐江平富宁南方医科大学基础医学院免疫教研室

背景:外源性蛋白多肽分子的体内浓度动态监测对蛋白类新药的药代动力学研究与生物大分子的基础研究均至关重要。与传统小分子药物不同,蛋白多肽分子生物半衰期短;血浆浓度低(pg/ml或ng/ml);易受机体内源性物质干扰,这决定其动态检测方... 详细信息

背景:外源性蛋白多肽分子的体内浓度动态监测对蛋白类新药的药代动力学研究与生物大分子的基础研究均至关重要。与传统小分子药物不同,蛋白多肽分子生物半衰期短;血浆浓度低(pg/ml或ng/ml);易受机体内源性物质干扰,这决定其动态检测方法的强特异性及高灵敏度。目前,主要的检测方法有免疫学分析法和放射性同位素示踪法。然而,前者要求必备特异性抗体,甚至需要可形成双夹心体系的两个不同抗体;后者需要特殊的设备与环境条件审批,以避免放射损伤及同位素污染。目的:建立一种非抗体依赖的,检测外源性蛋白多肽分子代谢动力学血清浓度及动态变化的新方法。方法:链亲和素(SA)为捕获分子,加入待测生物素标记蛋白或合成肽,辣根过氧化物酶标记链亲和素(H RP-SA)为检测分子,构成链亲和素-生物素标记大分子-酶链亲和素的双夹心体系,并进行特异性、敏感性、准确性及稳定性评价。结果:本检测体系灵敏度高,检测下限可达0.31ng/ml,且可通过改变SA包被浓度调整检出敏感度及检测范围。准确性回收率在97.8207.92%间,批内、批间差异系数分别蛋白(Biotin-HSA)与生物素标记鸡卵粘蛋白(Biotin-OVM)的小鼠血清浓度动态检测。结论:本方法不依赖抗体与放射性核素,可望在外源性蛋白多肽大分子及其药物的体内定量检测和代谢动力学研究广泛应用。

关键词：生物素 (链霉)亲和素外源性蛋白动态血清浓度

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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不同蛋白对挤压大米淀粉消化性影响及重组米制备

作者：鲍惠怡江南大学

学位级别：硕士

大米作为世界上一半以上人口的主食,其快消化淀粉含量高,长期摄入不利于餐后血糖的控制,因此传统大米已不能满足追求健康或糖代谢异常人群的主食需求。利用挤压重组技术添加营养素制备具有改善消化性的重组米可为特定人群提供更多主食... 详细信息

大米作为世界上一半以上人口的主食,其快消化淀粉含量高,长期摄入不利于餐后血糖的控制,因此传统大米已不能满足追求健康或糖代谢异常人群的主食需求。利用挤压重组技术添加营养素制备具有改善消化性的重组米可为特定人群提供更多主食选择。蛋白质作为淀粉类主食中的第二大组分,其与淀粉复配不仅赋予主食营养特性,且蛋白与淀粉间的相互作用可延缓淀粉消化性。然而,目前在挤压重组米中关于外源性不同蛋白的添加对淀粉消化性影响研究较少以及具体机制尚不清晰。基于此,本文研究了外源添加的不同蛋白及蛋白水解物对挤压大米淀粉理化性质、结构特性和消化性的影响,揭示了挤压过程中蛋白降低大米淀粉消化性的机制,并进一步制备蛋白复配重组米,评估其消化性,为挤压技术制备慢消化功能性主食提供理论依据和应用实例。首先,探究不同蛋白对挤压大米淀粉理化性质和消化性的影响。通过挤压技术制备挤压大米淀粉和大米淀粉-蛋白挤出复合物,结果发现三种蛋白(大米蛋白、大豆分离蛋白和乳清浓缩蛋白)添加均降低了挤压大米淀粉的水解率和快消化淀粉(RDS)含量,提高了慢消化淀粉(SDS)和抗性淀粉(RS)含量。其中RDS含量降低范围为9.21%3.3%,SDS含量和RS含量增加范围分别为6.17%.95%和3%.06%。不同蛋白的添加降低了复合物中淀粉的膨润力和直链淀粉的浸出。快速粘度仪(RVA)结果表明,不同蛋白降低了淀粉的峰值粘度和崩解值,其中大米蛋白促进了淀粉的短期回生。流变结果表明,不同蛋白均增强了挤出复合物的凝胶特性。低场核磁共振谱(LFNMR)结果表明,不同蛋白限制了复合物中水分的流动性。X-射线衍射(XRD)和傅里叶红外光谱(ATR-FTIR)结果表明,不同蛋白增加了复合物中淀粉的相对结晶度,增强了淀粉结构的有序程度。分析相互作用力发现,挤压过程中蛋白质与淀粉间主要存在氢键和疏水相互作用。其次,进一步探究大米蛋白水解物对挤压大米淀粉理化性质和消化性的影响。根据上章结论,选用大米蛋白进行酶解,通过挤压技术制备挤压大米淀粉和大米淀粉-蛋白水解物挤出复合物。结果发现酶解程度较大的大米蛋白水解物(RPHB和RPHC)降低淀粉消化性的作用更明显,其中含有RPHC挤出复合物的RDS含量、SDS含量和RS含量分别为65.54%、15.10%和19.36%。大米蛋白水解物降低了复合物中淀粉的膨润力和直链淀粉的浸出。RVA结果表明,大米蛋白水解物降低了淀粉的峰值粘度和崩解值,且RPHC抑制了淀粉的短期回生。LF-NMR结果表明,大米蛋白水解物使复合物中部分自由水转化为弱结合水。XRD和ATR-FTIR结果表明,大米蛋白水解物使复合物中淀粉的相对结晶度和1047/1022 cm-1的值分别从11.30%增加到22.10%,从0.409增加到0.462,增强了淀粉结构的有序程度。分析相互作用力发现,挤压过程中大米蛋白水解物与大米淀粉间主要涉及氢键和疏水相互作用,ATR-FTIR结果同样佐证了复合物中氢键的存在。此外,大米蛋白水解物还显示出对淀粉葡萄糖苷酶的抑制作用。最后,基于上述研究,将大米蛋白水解物与大米粉复配制备重组米并对其进行品质分析。以感官评分为目标参数,挤压工艺参数为因子,正交实验优化得到了制备蛋白复配重组米的最优挤压条件。结果表明,挤压参数对重组米品质影响大小依次为:挤压温度>挤压水分含量>螺杆转速。最优挤压条件为:螺杆转速120 r/min,挤压温度105°C和挤压水分含量为40%。然后将制备的重组米与市售籼米和市售重组米进行食用品质、蒸煮品质、消化性和功能特性的比较。结果表明,蛋白重组米的感官品质、质构特性、蒸煮品质和糊化特性优于市售重组米,与市售籼米接近,且抗氧化活性显著高于(P蛋白重组米的消化性与市售籼米和市售重组米相比得到了显著降低(P性淀粉含量为26.39%。

关键词：大米淀粉外源性蛋白大米蛋白水解物消化性挤压重组米

活体成年小鼠舌黏膜下植入蛋白凝胶颗粒的方法学研究

同方学位论文库评论

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口腔颌面修复学杂志 2014年第4期15卷 199-202页

作者：李瑞奇黄晓峰张方明首都医科大学附属北京友谊医院口腔科医师北京100050

目的:建立活体动物舌黏膜植入外源性蛋白凝胶颗粒的方法。方法:出生后90.5d的C57BL小鼠经戊巴比妥钠麻醉后,于舌黏膜下植入小牛血清(bovineserum albumin,BSA)的凝胶颗粒。实验后48h,取小鼠舌组织固定、脱水、包埋、切片后进行HE染色、B... 详细信息

目的:建立活体动物舌黏膜植入外源性蛋白凝胶颗粒的方法。方法:出生后90.5d的C57BL小鼠经戊巴比妥钠麻醉后,于舌黏膜下植入小牛血清(bovineserum albumin,BSA)的凝胶颗粒。实验后48h,取小鼠舌组织固定、脱水、包埋、切片后进行HE染色、Brdu染色及PCNA染色。结果:实验后48h,小鼠舌黏膜无明显炎性病变,染色结果显示凝胶颗粒的植入对上皮内BrdU和PCNA的表达无影响。结论:本研究成功地建立了舌黏膜下植入蛋白凝胶颗粒的方法,为将来药物和蛋白质诱导活体动物器官局部增殖、分化和凋亡奠定基础。

关键词：凝胶颗粒植入活体小鼠外源性蛋白

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外源基因在曲霉菌中的表达

同济大学学报（医学版） 2003年第3期24卷 256-259页

作者：陈惠清刘钟滨同济大学基础医学院微生物教研室，上海200331

众所周知,基因工程高效表达技术使得许多从自然界中很难获得或不能获得的蛋白质得以大规模制备.除大肠杆菌、酵母和一些哺乳动物细胞被用作外源基因表达的宿主,近年来,丝状真菌中的曲霉菌由于其具有遗传背景清楚、生长迅速、易于培养、... 详细信息

众所周知,基因工程高效表达技术使得许多从自然界中很难获得或不能获得的蛋白质得以大规模制备.除大肠杆菌、酵母和一些哺乳动物细胞被用作外源基因表达的宿主,近年来,丝状真菌中的曲霉菌由于其具有遗传背景清楚、生长迅速、易于培养、产生分泌性蛋白质、大规模发酵经济的特点,也受到很大的关注.本文就曲霉菌表达外源性蛋白质的简史、优缺点以及应用等进行综述,并提出展望.

关键词：外源基因曲霉菌表达外源性蛋白重组蛋白