基于亲和素-生物素双夹心体系测定外源性蛋白血清动态浓度的非抗体依赖新方法

作     者：余颖欣 刘艳君 焦德龙 文李艳 徐江平 富宁 

作者机构：南方医科大学免疫学教研室广州510515 南方医科大学药学院广州510515 

出 版 物：《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)

年 卷 期：2013年第40卷第3期

页      面：266-272页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金面上资助项目(30671970)~~ 

主　　题：生物素 (链霉)亲和素 外源性蛋白 动态血清浓度 

摘      要：建立一种非抗体依赖的检测外源性蛋白多肽分子代谢动力学血清浓度及动态变化的新方法.链亲和素为捕获分子,加入待测生物素标记蛋白或合成肽,辣根过氧化物酶标记链亲和素为检测分子,构成链亲和素-生物素标记大分子-酶链亲和素的双夹心体系,并进行特异性、敏感性、准确性及稳定性评价.本检测体系灵敏度高,可达0.3125μg/L,且可通过改变亲和素包被浓度调整检出敏感度与检测范围.准确性回收率为97.82%～107.92%,批内、批间变异系数分别5.76%和8.42%,并成功应用在生物素标记人血清白蛋白(biotin-HSA)与生物素标记鸡卵黏蛋白(biotin-OVM)的小鼠血清浓度动态检测.本方法不依赖抗体与放射性核素,可望在外源性蛋白多肽大分子及其药物的体内定量检测和代谢动力学研究中广泛应用.