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高效液相色谱法测定海水鱼中嘌呤含量

中国食品学报 2020年第5期20卷 266-275页

作者：李婷婷任丽琨王当丰宋敏杰于海凤励建荣谢晶沈琳牟伟丽黄建联大连民族大学生命科学学院辽宁大连116600 渤海大学食品科学与工程学院辽宁省食品安全重点实验室辽宁锦州121013 上海海洋大学食品学院上海201306 大连东霖食品股份有限公司辽宁大连116000 蓬莱京鲁渔业有限公司山东烟台265600 福建安井食品股份有限公司福建厦门361022

本文建立同时检测海水鱼中腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤、黄嘌呤的高效液相色谱检测方法。对部分海水鱼可食用部分及内脏中的4种嘌呤含量进行检测。结果表明,当使用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以水-甲醇-... 详细信息

本文建立同时检测海水鱼中腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤、黄嘌呤的高效液相色谱检测方法。对部分海水鱼可食用部分及内脏中的4种嘌呤含量进行检测。结果表明,当使用Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以水-甲醇-冰乙酸-20%四丁基氢氧化铵(V/V/V/V=879/100/15/6)为流动相,设置流速为0.8 mL/min,柱温30℃,检测波长254 nm,进样量10μL时,4种嘌呤可完全分离且峰型较好。经方法学验证,得出此方法在0.1~400 mg/L范围线性关系良好,相关系数(R)在0.9998~1.0000之间,方法检出限范围0.0465~0.1056 mg/L。高效液相色谱检测方法精密度RSD在0.0200%~0.7000%之间,样品处理重复性腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤、黄嘌呤依次为1.2421%,0.9711%,0.8836%,1.9727%。加标回收率在94.2888%~102.9188%之间,适用于海水鱼中4种嘌呤的测定。经检测,不同种类海水鱼可食用部分(鱼眼睛、腹部鱼肉、背部鱼肉、鱼皮)嘌呤总含量由高到低依次为海鲈鱼、大菱鲆、金仓鱼、黄花鱼、美国红鱼、踏板鱼、鳕鱼。

关键词：高效液相色谱法嘌呤海水鱼

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酵母蛋白中4种嘌呤含量的测定及对比分析

食品研究与开发 2023年第10期44卷 177-185页

作者：武惠敏周雪巍杨瑞李库郭辉张玉玉天津科技大学食品科学与工程学院天津300457 北京工商大学中原食品实验室北京100048 酵母功能湖北省重点实验室湖北武汉480000 北京工商大学中国商业联合会味科学重点实验室北京100048

为分析酵母蛋白中嘌呤含量,建立同时测定酵母蛋白中4种嘌呤(黄嘌呤、次黄嘌呤、鸟嘌呤、腺嘌呤)含量的高效液相色谱法并进行方法学验证,然后对酵母蛋白、豌豆蛋白、大豆蛋白、乳清蛋白样品中的4种嘌呤含量进行分析。结果显示,酵母蛋白中... 详细信息

为分析酵母蛋白中嘌呤含量,建立同时测定酵母蛋白中4种嘌呤(黄嘌呤、次黄嘌呤、鸟嘌呤、腺嘌呤)含量的高效液相色谱法并进行方法学验证,然后对酵母蛋白、豌豆蛋白、大豆蛋白、乳清蛋白样品中的4种嘌呤含量进行分析。结果显示,酵母蛋白中4种嘌呤的高效液相色谱法检测分离条件:以pH3.50、20 mmol/L KH2PO4-H3PO4为流动相,流速1.0 mL/min、柱温30℃、进样量10μL、检测波长254 nm。方法验证结果显示,在0~70 mg/L的范围内线性关系良好,相关系数为0.9996~0.9997,4种嘌呤检出限范围为0.027 mg/L~0.084 mg/L,精密度为0.03%~0.08%,加标回收率为96.21%~102.50%,采用该方法测定6种酵母蛋白和豌豆蛋白、大豆蛋白、乳清蛋白9个蛋白样品中的嘌呤含量,其总嘌呤含量依次是3.507、23.369、10.479、4.057、0.162、0.090、0.574、0.388、0.125 mg/g。YP-5、YP-6、大豆蛋白、乳清蛋白4种蛋白样品是低嘌呤含量食品。

关键词：酵母蛋白嘌呤高效液相色谱法精密度加标回收率

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贮藏和解冻方式对大菱鲆嘌呤含量的影响

中国食品学报 2020年第7期20卷 143-150页

作者：宋敏杰李婷婷任丽琨谢晶励建荣渤海大学食品科学与工程学院生鲜农产品贮藏加工及安全控制技术国家地方联合工程研究中心辽宁省食品安全重点实验室辽宁省高等学校生鲜食品产业技术研究院辽宁锦州121013 大连民族大学生命科学学院辽宁大连116600 上海海洋大学食品科技学院上海201306

为研究不同贮藏温度和解冻方式对大菱鲆嘌呤含量的影响,将大菱鲆分别置于4℃和-18℃贮藏,并将-18℃的样品以流水和40℃温水浸泡两种方式解冻。采用高效液相色谱法测定不同贮藏温度和解冻方式的大菱鲆鱼肉、皮和内脏中的嘌呤含量,探究大... 详细信息

为研究不同贮藏温度和解冻方式对大菱鲆嘌呤含量的影响,将大菱鲆分别置于4℃和-18℃贮藏,并将-18℃的样品以流水和40℃温水浸泡两种方式解冻。采用高效液相色谱法测定不同贮藏温度和解冻方式的大菱鲆鱼肉、皮和内脏中的嘌呤含量,探究大菱鲆体内嘌呤含量变化。结果表明:相较于4℃冷藏,经-18℃冷冻贮藏的鱼肉中嘌呤总含量更低,而采用流水解冻的方式在一定程度上抑制黄嘌呤的生成。此外,相较于鱼皮及内脏,鱼肉中的嘌呤含量最低。随着贮藏时间的延长,鱼肉中的嘌呤总含量呈先升后降的趋势,而鱼皮中嘌呤总含量随贮藏时间的延长而减少。内脏中的嘌呤含量是鱼各部位中最高的,并且在4℃贮藏条件下其含量逐渐升高。

关键词：贮藏解冻高效液相色谱嘌呤

低嘌呤、高纳豆激酶活性枯草芽孢杆菌SH21筛选及发酵条件优化

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食品与发酵工业 2021年第11期47卷 194-199页

作者：庞远祥谢远红金君华刘慧张红星北京农学院食品科学与工程学院食品质量与安全北京实验室农产品有害微生物及农残安全检测与控制北京市重点实验室北京102206

采用酪蛋白平板初筛-摇瓶复筛的方法,从自然发酵大酱中筛选获得1株高产纳豆激酶(nattokinase,NK)的菌株SH21,经16S rRNA基因序列鉴定其为枯草芽孢杆菌。以NK酶活力及嘌呤含量为指标,通过单因素试验和响应面法优化枯草芽孢杆菌SH21液体... 详细信息

采用酪蛋白平板初筛-摇瓶复筛的方法,从自然发酵大酱中筛选获得1株高产纳豆激酶(nattokinase,NK)的菌株SH21,经16S rRNA基因序列鉴定其为枯草芽孢杆菌。以NK酶活力及嘌呤含量为指标,通过单因素试验和响应面法优化枯草芽孢杆菌SH21液体发酵条件。在单因素试验的基础上,得出碳源、氮源、pH、接种量、发酵温度、发酵时间对菌株发酵液中NK酶活力和嘌呤含量的影响。采用Plackett-Burman设计筛选得到pH、接种量和发酵温度3个显著因素,结合Box-Behnken设计中心组合试验并进行响应面分析。优化后的发酵条件为pH 6.0,接种量3%,发酵温度38℃,在此条件下,NK酶活力由166.99 U/mL提升到204.52 U/mL,提高了1.22倍,嘌呤含量由75.4 mg/L降低到51.27 mg/L,降低了32%。该研究为进一步开发高NK酶活性、低嘌呤产量的枯草芽孢杆菌发酵产品奠定了研究基础。

关键词：枯草芽孢杆菌纳豆激酶嘌呤发酵优化响应面法

可见光催化嘌呤衍生物与芳烃的氧化偶联反应研究

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可见光催化嘌呤衍生物与芳烃的氧化偶联反应研究

作者：廖腊梅华南理工大学

学位级别：硕士

嘌呤类化合物具有抗病毒、抗肿瘤等重要的生物活性,是一类重要的医药中间体。其中,9-芳基嘌呤类似物具有抗病毒、抗真菌等活性,是潜在的肠道病毒抑制剂、抗结核药物及抗焦虑药物。芳基硼酸、二芳基碘鎓盐及芳基卤化物等作为芳基化偶联试... 详细信息

嘌呤类化合物具有抗病毒、抗肿瘤等重要的生物活性,是一类重要的医药中间体。其中,9-芳基嘌呤类似物具有抗病毒、抗真菌等活性,是潜在的肠道病毒抑制剂、抗结核药物及抗焦虑药物。芳基硼酸、二芳基碘鎓盐及芳基卤化物等作为芳基化偶联试剂,已用于实现铜介导/催化的嘌呤衍生物的N-芳基化反应。但这些反应使用的芳基化试剂需要预活化,且反应通常需要高温、金属及强碱催化,反应条件较恶劣。因此,开发绿色、新颖的合成方法直接构建结构多样的9-芳基嘌呤是目前药物化学的重要研究方向之一。近年来,可见光催化交叉脱氢偶联反应由于其具有高原子经济性、反应条件温和等优点,成为有机合成领域中倍受青睐的研究方向。本研究以吖啶盐作为光催化剂,实现了芳烃与嘌呤类化合物的交叉脱氢偶联反应,并合成了一系列N-芳基嘌呤类化合物。本研究以6-氯嘌呤和均三甲苯为模型,探索出嘌呤衍生物与芳烃直接芳基化反应的最优条件:以3 mol%吖啶盐为光催化剂,以乙腈为溶剂,以空气中的氧气为氧化剂,在蓝光照射、室温条件下反应24小时。该方法适用于C6位和C2位含不同取代基的嘌呤、苯并咪唑、三氮唑甲酯与烷基芳烃类化合物的氧化偶联反应。与传统的合成方法相比,该方法在室温条件下进行、无需添加金属和外部氧化剂,更加绿色环保。通过自由基抑制实验、开关灯实验、氧化还原电位测定和荧光淬灭实验等对反应机理进行探究,并提出一个可能的反应机理:首先,在蓝光照射下,光催化剂吖啶盐被激发形成激发态吖啶盐,其激发态与均三甲苯发生单电子转移,生成均三甲苯自由基阳离子和吖啶自由基,吖啶自由基再被氧气氧化生成超氧阴离子自由基O,并完成光催化剂的催化循环。然后,6-氯嘌呤进攻均三甲苯自由基阳离子形成中间体,中间体与O发生氢质子转移/单电子转移/氢质子转移的串联过程,最后生成目标产物6-氯-9-均三甲苯基嘌呤和副产物HO。

关键词：嘌呤光催化可见光 N-芳基化构建C–N键

乳清和复合发酵剂对羊肉干品质和嘌呤含量的影响

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乳清和复合发酵剂对羊肉干品质和嘌呤含量的影响

作者：李欣内蒙古农业大学

学位级别：硕士

本实验通过添加乳清和具有功能特性的复合发酵剂(木糖葡萄球菌、肉葡萄球菌、戊糖片球菌和植物乳杆菌比例为1:1:2:1),制作了四组发酵羊肉干,分别为对照组(自然发酵)、乳清组、发酵剂组、乳清+发酵剂组,深入研究乳清和复合发酵剂对羊肉... 详细信息

本实验通过添加乳清和具有功能特性的复合发酵剂(木糖葡萄球菌、肉葡萄球菌、戊糖片球菌和植物乳杆菌比例为1:1:2:1),制作了四组发酵羊肉干,分别为对照组(自然发酵)、乳清组、发酵剂组、乳清+发酵剂组,深入研究乳清和复合发酵剂对羊肉干理化品质和嘌呤含量的影响。为提高羊肉干色泽和口感,开发新型乳清发酵低嘌呤羊肉干提供一定的理论依据。试验结果如下:羊肉干在腌制阶段,发酵剂组的pH为5.70,显著低于其它三组(p嘌呤含量呈上升趋势,但复合发酵剂的使用主要可以抑制腺嘌呤、鸟嘌呤、次黄嘌呤的含量的升高。其总嘌呤含量为262.57mg/100g,显著低于其它三组(p<0.05)。高温烤制后,发酵剂组对尿酸含量的降解有显著的作用。

关键词：乳清复合发酵剂羊肉干品质嘌呤

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预制调理低嘌呤大菱鲆鱼片的制备及品质研究

食品工业科技 2021年第2期42卷 58-62,69页

作者：孙宏李婷婷宋敏杰赵贵琴励建荣渤海大学食品科学与工程学院辽宁锦州121013 大连民族大学生命科学学院辽宁大连116600

为满足痛风患者对高蛋白、多不饱和脂肪酸鱼片的需求,研制预制调理低嘌呤鱼片。本研究在单因素研究的基础上优化工艺条件,对鱼片进行浸泡-水煮处理,从而对嘌呤进行有效脱除,制得低嘌呤调理鱼片,并采用高效液相色谱法检测嘌呤含量。结果... 详细信息

为满足痛风患者对高蛋白、多不饱和脂肪酸鱼片的需求,研制预制调理低嘌呤鱼片。本研究在单因素研究的基础上优化工艺条件,对鱼片进行浸泡-水煮处理,从而对嘌呤进行有效脱除,制得低嘌呤调理鱼片,并采用高效液相色谱法检测嘌呤含量。结果表明,花椒粉水溶液浸泡鱼片的最佳条件为:浸泡时间为45 min,花椒粉添加量为2%(w/V),加工方式为水煮,水煮时间为8 min。与新鲜大菱鲆相比,清水对大菱鲆鱼片进行浸泡-水煮处理之后,嘌呤含量减少58.07%;而利用花椒粉对大菱鲆进行浸泡并且水煮处理能够使嘌呤含量减少79.50%,花椒粉浸泡-水煮处理可显著降低大菱鲆中的嘌呤含量,表明浸泡结合水煮处理可用于脱除鱼片中的嘌呤,为预制调理低嘌呤大菱鲆鱼片的制备以及高尿酸人群的健康饮食提供指导意见。

关键词：大菱鲆鱼片嘌呤脱除花椒粉浸泡水煮

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温度控制的嘌呤烯丙基化及其重排反应研究

温度控制的嘌呤烯丙基化及其重排反应研究

作者：施肖林北京化工大学

学位级别：硕士

嘌呤是生命体中核酸碱基端的主要成分,是一种有机氮杂芳环分子,结构上由一个缺电子的嘧啶环和一个富电子的咪唑环构成。嘌呤骨架常见于药物分子,这类分子在抗微生物、抗真菌、抗肿瘤、抗病毒等方面都有显著的应用前景。因此近几十年来,... 详细信息

嘌呤是生命体中核酸碱基端的主要成分,是一种有机氮杂芳环分子,结构上由一个缺电子的嘧啶环和一个富电子的咪唑环构成。嘌呤骨架常见于药物分子,这类分子在抗微生物、抗真菌、抗肿瘤、抗病毒等方面都有显著的应用前景。因此近几十年来,嘌呤的结构修饰一直受到广大科研工作人员的关注。寻找构建有不同取代结构的嘌呤衍生物,探索其潜在的生理和药物价值,是该领域目前的研究方向。嘌呤C-2、C-6、C-8位可以通过取代等方式来进行结构修饰。由于嘧啶环缺电子性和咪唑环富电子性的特点,C-2位和C-6位常通过亲核型反应引入取代基,而C-8位主要经亲电反应引入取代基,如溴化等。这些反应中,对C-2、C-6位研究颇丰,然对C-H的活化的研究相对较少,并多集中于亲电取代中,因此本论文着重于研究嘌呤咪唑环的C-8位亲核型修饰反应。基于咪唑环的富电子特性,本文设计先用强亲电试剂三氟甲磺酸酐活化,随后用烯丙基三甲基硅烷作为亲核试剂进行亲核加成反应。结果发现,温度对该反应选择性影响很大,在氮气氛围下,三氟甲磺酸酐活化的嘌呤衍生物与烯丙基三甲基硅烷在0 C下搅拌反应,可以得到嘌呤烯丙基化产物;在60 C下反应可得咪唑环重排后的七元环烯胺产物,此外通过微波可以加速该反应进程;130 C下反应可得到C-8丙烯基嘌呤衍生物,而微波同样有助于加速该反应。该温度控制的嘌呤烯丙基化及扩环重排反应适用于N取代6-氯嘌呤衍生物,反应对于含烯基、炔基、芳基、羰基、酯基等官能团有很好的耐受性。该反应将对今后嘌呤咪唑环的修饰起到一定的指导作用。

关键词：三氟甲磺酸酐嘌呤烯丙基化扩环重排丙烯基化

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可见光催化嘌呤和醇脱氢偶联反应的研究

可见光催化嘌呤和醇脱氢偶联反应的研究

作者：罗喆华南理工大学

学位级别：硕士

嘌呤及核苷骨架在生物和药物化学中具有广泛的运用,在医药领域占据重要的地位。例如8-烷氧基嘌呤类化合物抗病毒和抗血小板凝聚等方面具有潜在的活性,目前这类化合物仍采用传统合成方法:即先对嘌呤C-H经过卤化构成C-X(X为卤素)键,再经... 详细信息

嘌呤及核苷骨架在生物和药物化学中具有广泛的运用,在医药领域占据重要的地位。例如8-烷氧基嘌呤类化合物抗病毒和抗血小板凝聚等方面具有潜在的活性,目前这类化合物仍采用传统合成方法:即先对嘌呤C-H经过卤化构成C-X(X为卤素)键,再经过芳香亲核取代历程,与甲醇钠反应实现亲核取代,得到8-甲氧基嘌呤类化合物。这样的合成方法存在反应条件苛刻,底物范围窄,反应时间长,产率低等缺陷。开发高原子经济性的绿色策略,高效地对嘌呤环进行衍生化,具有理论研究意义和潜在的应用价值。随着光催化的越来越成熟,光催化所具有的优异原子经济性、便捷性以及绿色高效性也被越来越多的人注意到,光催化通常可以避免传统合成中的导向基团以及预活化等步骤,使反应更加简洁。通过光催化,嘌呤结构修饰及其衍生物的合成有了更加高效的渠道,为非环核苷类药物的合成与应用提供了有效途径,为新抗肿瘤、抗病毒、抗菌药物的研究提供多样化的嘌呤分子库,并具有潜在的工业应用前景。本论文以醇类化合物为烷氧化试剂,在可见光和吖啶盐光敏剂的条件下基于嘌呤C-8位构筑C-O键,使嘌呤和醇一步脱氢氧化偶联得到8-烷氧基嘌呤类化合物,实现了该类化合物合成的原子经济性和过程经济性,合成出一系列8-烷氧基嘌呤类化合物。以6-甲氧基-9-苄基嘌呤和甲醇为底物,探索嘌呤C-8烷氧基化反应的最佳反应条件为:3.0mol%的10-甲基-9-均三甲苯基吖啶高氯酸盐(Acr-Mes Cl O)作为光催化剂,2.0当量三氟乙酸(TFA)作为添加剂,2.0 m L乙腈作为溶剂,在空气氛围中,室温下20 W蓝色LED灯照射反应18 h后,以93%的产率得到目标产物。该反应适用于含不同取代基的嘌呤和不同种类的伯醇、仲醇和脂环醇。共合成了20个新化合物,所有化合物都通过NMR、HR-MS、熔点等表征确定了结构。为了探究反应机理,本文开展了一系列控制实验、循环伏安法实验以及荧光淬灭实验,实验结果表明:1)6-甲氧基-9-卞基嘌呤可以把激发态光催化剂还原淬灭,而且添加剂TFA对此过程有促进作用;2)激发态的光催化剂的还原电位高于6-甲氧基-9-卞基嘌呤的氧化电位,所以6-甲氧基-9-卞基嘌呤能够被激发态光催化剂氧化;3)空气中的氧作为电子转移和质子转移的协同催化剂,最后生成的过氧化氢也在体系中被检测到。根据这些结果,本文提出了可能反应机理,为光催化嘌呤衍生化的工业化应用奠定了基础。

关键词：嘌呤可见光催化脱氢偶联 C-H活化烷氧化