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苦参碱通过激动大麻素2型受体对脑缺血-再灌注大鼠的神经保护作用

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中国新药与临床杂志 2014年第4期33卷 311-316页

作者：唐蜜董志蔡江晖饶梦琳何锦悦重庆医科大学药学院生化与分子药理研究室重庆400016

目的探究苦参碱通过激动大麻素2型(cb2)受体对脑缺血-再灌注大鼠的神经保护作用。方法采用改良线栓法制作大鼠局灶性脑缺血(1.5 h)-再灌注(24 h)模型。72只雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、苦参碱20 mg·kg-1组、苦参碱50 mg·kg-1... 详细信息

目的探究苦参碱通过激动大麻素2型(cb2)受体对脑缺血-再灌注大鼠的神经保护作用。方法采用改良线栓法制作大鼠局灶性脑缺血(1.5 h)-再灌注(24 h)模型。72只雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、苦参碱20 mg·kg-1组、苦参碱50 mg·kg-1组、选择性cb2受体拮抗剂AM630组和AM630+苦参碱50 mg·kg-1组。观察神经功能症状,检测梗死面积、脑组织形态学改变、凋亡细胞数、cleaved caspase-3及Bcl-2蛋白表达。结果与模型组相比,苦参碱20 mg·kg-1和50 mg·kg-1组大鼠神经功能显著改善,脑梗死体积缩小,病理形态学改变减轻,细胞凋亡数及cleaved caspase-3阳性细胞减少,Bcl-2阳性细胞显著增加(均Pcb2受体可能参与苦参碱对脑缺血-再灌注大鼠的神经保护作用。

关键词：苦参碱受体,大麻酚,cb2 再灌注损伤细胞凋亡

大麻素2型受体基因过表达与小鼠巨噬细胞焦亡的关系

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中华麻醉学杂志 2021年第3期41卷 339-342页

作者：吴唐静詹佳张宗泽王焱林吴云武汉大学中南医院麻醉科 430071

目的评价大麻素2型受体(cb2R)基因过表达与小鼠巨噬细胞焦亡的关系。方法利用慢病毒转染小鼠骨髓源性巨噬细胞,制备稳定细胞系:慢病毒LV5阴性对照细胞系LV5-NC、慢病毒LV5cb2R基因过表达细胞系LV5-cb2R-OE(OE)。采用随机数字表法将2种... 详细信息

目的评价大麻素2型受体(cb2R)基因过表达与小鼠巨噬细胞焦亡的关系。方法利用慢病毒转染小鼠骨髓源性巨噬细胞,制备稳定细胞系:慢病毒LV5阴性对照细胞系LV5-NC、慢病毒LV5cb2R基因过表达细胞系LV5-cb2R-OE(OE)。采用随机数字表法将2种细胞系分别分为3组(n=18):对照组(LV5-NC-C组、OE-C组)、LPS/ATP组(LV5-NC-LPS/ATP组、OE-LPS/ATP组)和cb2R特异性激动剂HU308组(LV5-NC-HU308组、OE-HU308组)。对照组细胞正常培养,LPS/ATP组先加入终浓度为0.5μg/ml LPS孵育5 h后,加入5 mmol/L的ATP孵育1 h。LPS/ATP+HU308组加入终浓度为0.5μg/ml的LPS和10μmol/L的HU308共孵育5 h,再给予浓度为5 mmol/L的ATP孵育1 h。采用RT-PCR法检测cb2R、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、caspase-1和消皮素D(GSDMD)的mRNA表达,采用Western blot法检测caspase-1表达,采用ELISA法检测培养液IL-18和IL-1β的浓度。结果2种细胞系中与对照组比较,LPS/ATP组NLRP3、caspase-1和GSDMD的mRNA表达上调,IL-18和IL-1β浓度升高(P0.05)。结论cb2R基因过表达并不能有效抑制小鼠巨噬细胞焦亡的发生,只有激活cb2R才可抑制。

关键词：受体,大麻酚,cb2 脂多糖类巨噬细胞细胞焦亡

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大麻素2型受体在缺血性卒中中的研究进展

中国脑血管病杂志 2020年第9期17卷 564-567页

作者：谢谦谦李文志哈尔滨医科大学附属第二医院麻醉科 150086

缺血性卒中可导致严重的中枢神经系统损伤,病死率高,且预后差。大麻素2型受体不仅分布在外周免疫器官和细胞中,在脑中也具有一定的表达和功能。研究表明,大麻素2型受体在缺血性卒中的损害机制中发挥了重要的作用。该文对近年来大麻素2... 详细信息

缺血性卒中可导致严重的中枢神经系统损伤,病死率高,且预后差。大麻素2型受体不仅分布在外周免疫器官和细胞中,在脑中也具有一定的表达和功能。研究表明,大麻素2型受体在缺血性卒中的损害机制中发挥了重要的作用。该文对近年来大麻素2型受体在缺血性脑损害中的研究进展进行综述,以期为缺血性卒中寻求新的治疗靶点提供科学依据。

关键词：脑缺血卒中受体,大麻酚,cb2 脑保护综述

激动大麻素受体2对小鼠肝缺血再灌注损伤的预防效果

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中华麻醉学杂志 2014年第11期34卷 1320-1322页

作者：李勇殷霞丽吴瑶姬诺李冰冰金陵南京大学医学院附属鼓楼医院麻醉科 210008

目的探讨激动大麻素受体2对小鼠肝缺血再灌注损伤的预防效果.方法健康雄性C57BL/6J小鼠48只,体重20 ～ 30 g,采用随机数字表法分为4组（n=12）：假手术组（S组）、肝缺血再灌注组（I/R组）、大麻素受体2激动剂组（J组）和大麻素受体2... 详细信息

目的探讨激动大麻素受体2对小鼠肝缺血再灌注损伤的预防效果.方法健康雄性C57BL/6J小鼠48只,体重20 ～ 30 g,采用随机数字表法分为4组（n=12）：假手术组（S组）、肝缺血再灌注组（I/R组）、大麻素受体2激动剂组（J组）和大麻素受体2激动剂＋大麻素受体2拮抗剂组（JS组）.采用阻断肝动脉和门静脉30 min,再灌注45 min的方法制备肝缺血再灌注损伤模型.于缺血前60 min,J组腹腔注射大麻素受体2激动剂JWH133 20 mg/kg,JS组腹腔注射JWH 133 20 mg/kg和大麻素受体2拮抗剂SR144528 30 mg/kg.于再灌注45 min时,取肝组织,采用ELISA法检测肝组织TNF-α以及巨噬细胞炎症因子1α（MIP-1α）和MIP-2的含量,采用RT-PCR法检测肝组织TNF-α、MIP-1α、MIP-2和细胞间粘附分子-1（ICAM-1）的mRNA表达,并观察肝组织病理学结果.结果与S组比较,I/R组、J组和JS组肝组织TNF-α、MIP-1α和MIP-2含量升高,TNF-α、MIP-1α、MIP-2和ICAM-1的mRNA表达上调（P＜ 0.05）;与I/R组比较,J组肝组织TNF-α、MIP-1α和MIP-2含量降低,TNF-α、MIP-1α、MIP-2和ICAM-1的mRNA表达下调（P＜0.05）,JS组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）;与J组比较,JS组肝组织TNF-α、MIP-1α和MIP-2含量升高,TNF-α、MIP-1α、MIP-2和ICAM-1的mRNA表达上调（P＜0.05）.J组肝组织较I/R组和JS组减轻.结论激动大麻素受体2可对小鼠肝缺血再灌注损伤产生预防效果,机制与抑制肝组织炎性反应有关.

关键词：受体,大麻酚,cb2 再灌注损伤肝

激活大麻素2型受体对脓毒症小鼠急性肺损伤的影响:自噬在其中的作用

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中华麻醉学杂志 2018年第12期38卷 1509-1512页

作者：袁清红刘强胜刘安鹏郑菲王焱林张宗泽詹佳武汉大学中南医院麻醉科 430071

目的评价激活大麻素2型受体(cb2R)对脓毒症小鼠急性肺损的影响及自噬在其中的作用。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠24只,8~10周龄,体重20~25g,采用随机数字表法分为4组(n=6):假手术组(Sham组)、脓毒症组(Sep组)、脓毒症+cb2R激动剂HU308组(Se... 详细信息

目的评价激活大麻素2型受体(cb2R)对脓毒症小鼠急性肺损的影响及自噬在其中的作用。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠24只,8~10周龄,体重20~25g,采用随机数字表法分为4组(n=6):假手术组(Sham组)、脓毒症组(Sep组)、脓毒症+cb2R激动剂HU308组(Sep+HU308组)、脓毒症+HU308+自噬抑制剂3-甲基腺苷组(Sep+HU308+3-MA组)。采用盲肠结扎穿孔法构建脓毒症模型。Sep+HU308组和Sep+HU308+3-MA组于术后15min时腹腔注射HU3082.5mg/kg,15min后Sep+HU308+3-MA组腹腔注射3-甲基腺苷10mg/kg。术后12h时取肺组织,HE染色观察病理学结果,并进行肺损伤评分;采用RT-PCR法检测TNF-α、IL-18和IL-1β的mRNA表达水平;采用免疫组织化学法测定自噬相关蛋白Atg5的表达;采用Westernblot法检测微管相关蛋白1轻链3(LC3)、Beclin-1和p62的表达水平,计算LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值。结果与Sham组比较,其余3组肺组织TNF-α、IL-18和IL-1β的mRNA、Atg5表达上调,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值升高,肺损伤评分升高,Sep组和Sep+HU308组Beclin-1表达上调,p62表达下调,Sep+HU308+3-MA组p62表达上调(Pcb2R可减轻脓毒症小鼠急性肺损伤,部分机制可能与增强自噬,减轻炎症反应有关。

关键词：受体,大麻酚,cb2 自噬脓毒症呼吸窘迫综合征,成人

大麻素受体2激动剂AM1241对TGF-β1诱导的HSC-T6增殖、活化及凋亡的影响

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天津医药 2020年第7期48卷 606-610页

作者：龙翠珍舒远辉何萍王豫萍贵州医科大学医学检验学院 550004 贵州医科大学附属医院临床检验中心

目的探究大麻素受体2激动剂AM1241对转化生长因子(TGF)-β1诱导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖、活化与凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养HSC-T6,采用CCK-8法检测AM1241对空白对照组(空白培养基)、阴性对照组(未加药品)、TGF-β1组(5... 详细信息

目的探究大麻素受体2激动剂AM1241对转化生长因子(TGF)-β1诱导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖、活化与凋亡的影响及其作用机制。方法体外培养HSC-T6,采用CCK-8法检测AM1241对空白对照组(空白培养基)、阴性对照组(未加药品)、TGF-β1组(5μg/L TGF-β1)及20、40、80、160μmol/L AM1241组(5μg/L TGF-β1+20、40、80、160μmol/L AM1241)HSC-T6增殖的影响,计算半数抑制浓度(IC50)。采用流式细胞术检测阴性对照组、TGF-β1组、30μmol/L AM1241组、60μmol/L AM1241组HSC-T6凋亡情况;采用Western blot检测阴性对照组、TGF-β1组、27μmol/L AM1241组α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、凋亡相关蛋白Bax、cleaved caspase-3、JNK及磷酸化c-Jun氨基末端激酶(p-JNK)蛋白表达水平。结果与TGF-β1组比较,AM1241可抑制HSC-T6增殖能力,且呈剂量依赖性(P241的IC50为27μmol/L。30、60μmol/L AM1241组HSC-T6凋亡率较TGF-β1组明显上升,且60μmol/L AM1241组高于30μmol/L AM1241组(P27μmol/L AM1241组α-SMA和bFGF蛋白表达水平较TGF-β1组降低,Bax、cleaved caspase-3、p-JNK蛋白表达水平较TGF-β1组升高(P大麻素受体2激动剂AM1241能抑制TGF-β1诱导的HSC-T6的增殖与活化,并促进其凋亡,其作用机制可能与JNK通路有关。

关键词：肝硬化肝星状细胞受体,大麻酚,cb2 转化生长因子β1 细胞凋亡肝纤维化 AM1241

激活cb_(2)受体对MPP+诱导BV2小胶质细胞iNOS和Arg-1表达的影响

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青岛大学学报（医学版） 2023年第2期59卷 195-198页

作者：王梦雅刘曼马泽刚青岛大学基础医学院生理学教研室山东青岛266071

目的探讨激活大麻素Ⅱ型受体(cb_(2)受体)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)处理的BV2小胶质细胞M1/M2表型转化的影响。方法培养BV2小胶质细胞,将其分为对照组、MPP+组、JWH133(cb_(2)受体激动剂)+MPP+组、AM630(cb_(2)受体抑制剂)+MPP+组... 详细信息

目的探讨激活大麻素Ⅱ型受体(cb_(2)受体)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)处理的BV2小胶质细胞M1/M2表型转化的影响。方法培养BV2小胶质细胞,将其分为对照组、MPP+组、JWH133(cb_(2)受体激动剂)+MPP+组、AM630(cb_(2)受体抑制剂)+MPP+组、JWH133+AM630+MPP+组。应用免疫印迹法检测各组诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和精氨酸酶-1(Arg-1)蛋白的表达。结果与对照组相比,MPP+组BV2小胶质细胞iNOS蛋白表达明显上升(F=9.825,q=6.346,Pcb 2受体可抑制MPP+处理的BV2小胶质细胞M1极化,并且促进BV2小胶质细胞从M1型转化为M2型。

关键词：受体,大麻酚,cb2 大麻素受体激动剂小神经胶质细胞表型一氧化氮合酶Ⅱ型精氨酸酶

大麻素Ⅱ型受体对LPS诱导小鼠黑质区COX-2和iNOS基因表达的影响

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青岛大学学报（医学版） 2023年第3期59卷 371-374页

作者：王炳超孙琳朱天立马泽刚青岛大学基础医学院生理学教研室山东青岛266071

目的探索大麻素Ⅱ型(cb2)受体对脂多糖(LPS)诱导小鼠黑质(SN)区炎症反应的作用。方法将18只8周龄雄性野生型(WT)C57BL/6小鼠随机分为WT对照组、WT LPS组和WT LPS+JWH133(cb2受体激动剂)组,12只8周龄雄性cb2受体敲除(cb2-KO)C57BL/6小鼠... 详细信息

目的探索大麻素Ⅱ型(cb2)受体对脂多糖(LPS)诱导小鼠黑质(SN)区炎症反应的作用。方法将18只8周龄雄性野生型(WT)C57BL/6小鼠随机分为WT对照组、WT LPS组和WT LPS+JWH133(cb2受体激动剂)组,12只8周龄雄性cb2受体敲除(cb2-KO)C57BL/6小鼠随机分为cb2-KO对照组和cb2-KO LPS组。对照组小鼠单次双侧SN立体定位注射生理盐水,其余各组小鼠注射等体积的LPS,然后连续腹腔注射JWH133或生理盐水14 d。应用实时荧光定量PCR技术检测各组小鼠SN中环氧化酶2(COX-2)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因的表达。结果与WT对照组相比,WT LPS组小鼠SN区COX-2和iNOS基因表达水平升高,差异有统计学意义(F=20.9、21.4,q=5.536、5.518,Pcb2-KO LPS组小鼠COX-2和iNOS基因表达明显上调,差异有统计学意义(q=4.150、5.496,Pcb2受体能够抑制LPS诱导小鼠SN区COX-2和iNOS基因的表达,缺失cb2受体能够促进LPS诱导小鼠SN区COX-2和iNOS基因的表达。

关键词：受体,大麻酚,cb2 脂多糖类炎症环氧化酶2 一氧化氮合酶

JWH133对MPP^(+)诱导SH-SY5Y细胞铁水平和DMT1表达影响

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青岛大学学报（医学版） 2021年第2期57卷 206-209页

作者：潘东马泽刚青岛大学基础医学院生理学教研室山东青岛266071

目的探讨大麻素Ⅱ型受体(cb2R)激活对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用机制。方法培养SH-SY5Y细胞,根据药物处理不同将其分为对照组、MPP+组、cb2R激动剂JWH133+MPP+组、cb2R抑制剂AM630+JWH133+MPP+组。... 详细信息

目的探讨大麻素Ⅱ型受体(cb2R)激活对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用机制。方法培养SH-SY5Y细胞,根据药物处理不同将其分为对照组、MPP+组、cb2R激动剂JWH133+MPP+组、cb2R抑制剂AM630+JWH133+MPP+组。应用激光扫描共聚焦显微镜分析技术检测SH-SY5Y细胞铁水平变化,应用免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞二价金属离子转运蛋白1(DMT1)的表达。结果与对照组相比,MPP+组细胞荧光强度明显降低,差异有显著性(F=26.620,q=10.410,Pcb2R可以抑制MPP+对DMT1蛋白表达的诱导从而调节SH-SY5Y细胞铁水平降低。

关键词：受体,大麻酚,cb2 大麻素受体激动剂金属伴侣蛋白质类帕金森病 SH-SY5Y细胞