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卵黄高磷蛋白肽—亚铁螯合物的制备、结构表征及稳定性分析

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卵黄高磷蛋白肽—亚铁螯合物的制备、结构表征及稳定性分析

作者：宋璐杉天津科技大学

学位级别：硕士

缺铁性贫血是全球最常见的营养缺乏性疾病,造成该疾病的关键因素之一就是铁的生物利用度较低。与其它铁补充剂相比,肽-亚铁螯合物的生物利用度高且对机体的副作用小。卵黄高磷蛋白肽（Phosvitin peptide,PP）是一种兼具强金属离子结合... 详细信息

缺铁性贫血是全球最常见的营养缺乏性疾病,造成该疾病的关键因素之一就是铁的生物利用度较低。与其它铁补充剂相比,肽-亚铁螯合物的生物利用度高且对机体的副作用小。卵黄高磷蛋白肽（Phosvitin peptide,PP）是一种兼具强金属离子结合能力和抗氧化活性的肽,将其应用于铁补充剂的开发中,能够获得亚铁含量较高的卵黄高磷蛋白肽-亚铁螯合物（PP-Fe）,同时其抗氧化活性使得PP-Fe中的铁保持Fe状态,从而有利于小肠细胞的吸收。因此,本研究对PP和PP-Fe的制备工艺进行了优化,并对螯合物进行了结构表征和稳定性分析。以新鲜鸡蛋为原料提取卵黄高磷蛋白（Phosvitin,PV）,以酶解度、亚铁螯合活性和T-AOC抗氧化活性为指标,优化PP的制备工艺;随后,采用截留分子量为3 k Da、10 k Da和30 k Da的超滤管对PP进行超滤分离,测定不同PP组分的抗氧化活性。结果表明,PP的最佳制备工艺为:6000 U/g碱性蛋白酶酶解3 h再4000 U/g胰蛋白酶酶解2 h;PP-4（肽-亚铁螯合物,并测定其亚铁含量和抗氧化活性。结果表明,PP-Fe的最佳制备工艺为:肽-亚铁质量比为4:1、63℃、p H 4.8和43 min时,经验证亚铁螯合率为96.35±1.25%;PP-4-Fe螯合物的活性最高,亚铁含量为96.13±2.86μg Fe/mg,ABTS值和FRAP值分别为296.21±8.47μmol TE/mg和174.24±16.67μmol Fe SO/mg。对PP-4和PP-4-Fe的结构进行表征。结果表明,PP-4螯合亚铁离子后,α-螺旋含量增加、β-转角和无规则卷曲含量减少,二级结构更有序,表面光滑的不规则块状结构转变为致密片状的堆叠结构;同时PP-4-Fe的相对分子量增大,Zeta-电位值增大,H_o值升高,有荧光猝灭现象发生;PP-4螯合反应涉及的主要铁结合位点有氨基、羧基、咪唑和磷酸基。最后,分析了PP-4-Fe的稳定性,对比了V对PP-4-Fe体外胃肠道模拟的影响。结果表明,PP-4-Fe具有良好的耐热、耐盐、耐酸碱和胃消化稳定性;经胃肠道消化后,PP-4-Fe的ABTS和FRAP抗氧化活性显著加强,PP-4-Fe的透析率为74.59±0.68%,PP-4-Fe+V的透析率为81.10±0.89%,表明PP-4-Fe和PP-4-Fe+V具有良好的生物利用度。综上所述,PP-4-Fe能作为一种优良的铁补充剂。

关键词：卵黄高磷蛋白肽肽-亚铁螯合物结构表征稳定性分析

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亚铁结合卵黄高磷蛋白肽的制备及活性分析

天津科技大学学报 2023年第5期38卷 1-7页

作者：宋璐杉宋丽朱临娴乔赛凤张晓维天津科技大学食品科学与工程学院天津300457

亚铁结合多肽有利于提高人体对铁离子的吸收。本研究以卵黄高磷蛋白(phosvitin,PV)为原料,制备具有良好亚铁离子结合能力和抗氧化活性的卵黄高磷蛋白肽(phosvitin peptide,PP)。通过单一酶和复合酶的酶解工艺优化,确定了最佳酶解工艺条... 详细信息

亚铁结合多肽有利于提高人体对铁离子的吸收。本研究以卵黄高磷蛋白(phosvitin,PV)为原料,制备具有良好亚铁离子结合能力和抗氧化活性的卵黄高磷蛋白肽(phosvitin peptide,PP)。通过单一酶和复合酶的酶解工艺优化,确定了最佳酶解工艺条件:先碱性蛋白酶酶解(添加量6000 U/g、50℃、pH10、3 h),再胰蛋白酶酶解(添加量4000 U/g、37℃、pH8、2 h)。超滤分离PV水解产物,获得不同相对分子质量范围的组分,测定亚铁结合量、ABTS和FRAP抗氧化活性,结果表明相对分子质量肽组分最佳,亚铁结合量为(96.14±2.86)μg/mg、ABTS抗氧化能力为(955.61±79.74)μmol/mg、FRAP抗氧化能力为(62.30±3.94)μmol/mg,是一种潜在的铁补充剂。

关键词：卵黄高磷蛋白肽亚铁螯合活性抗氧化活性铁补充剂

卵黄高磷蛋白α-淀粉酶抑制肽的制备、鉴定及酶抑制动力学分析

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食品工业科技 2025年第1期46卷 152-162页

作者：薛天睿吕彬斐张铭冉李灿张晓维天津科技大学食品科学与工程学院天津300457

为探索卵黄高磷蛋白肽(phosvitin phosphopeptide,PPP)对α-淀粉酶的抑制作用,使其能够调控血糖水平从而缓解Ⅱ型糖尿病,本研究以α-淀粉酶抑制率为指标酶解卵黄高磷蛋白制备PPP,利用酶抑制动力学实验分析PPP对α-淀粉酶的抑制类型,采... 详细信息

为探索卵黄高磷蛋白肽(phosvitin phosphopeptide,PPP)对α-淀粉酶的抑制作用,使其能够调控血糖水平从而缓解Ⅱ型糖尿病,本研究以α-淀粉酶抑制率为指标酶解卵黄高磷蛋白制备PPP,利用酶抑制动力学实验分析PPP对α-淀粉酶的抑制类型,采用液质联用鉴定后用分子对接筛选出高活性的α-淀粉酶抑制肽,最后验证其活性。结果表明,最优酶解条件为先经胰蛋白酶(加酶量7000 U/g)再经胃蛋白酶(加酶量60000 U/g)分别酶解6 h,制得的PPP在浓度7.81×10-3 mg/mL时具有最高α-淀粉酶抑制率70.69%±1.71%。PPP对α-淀粉酶的抑制类型为混合型抑制。鉴定筛选出了两种新型的高活性α-淀粉酶抑制肽FGTEPDAK和IWGR,经验证其IC50值分别为(0.80±0.14)×10-3 mg/mL和(1.80±0.31)×10-3 mg/mL,极显著低于阳性对照阿卡波糖(3.17±0.47)×10-3 mg/mL(P<0.01)。本研究揭示PPP可作为新型降糖物质,应用于缓解Ⅱ型糖尿病的功能性食品开发中。

关键词：卵黄高磷蛋白肽复合酶解 α-淀粉酶抑制剂分子对接酶抑制动力学

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卵黄蛋白肽的研究现状与产业化应用

今日药学 2022年第12期32卷 888-897,918页

作者：闫昌誉郑钧王克祝郑维新龚海标李怡芳胡丹何蓉蓉栗原博暨南大学药学院中药与天然药物研究所广东广州510632 春雪食品集团股份有限公司山东莱阳265200

鸡蛋因其丰富的营养成为最受人们欢迎的日常食物之一,蛋白和脂质是其主要的营养成分。近年来,随着社会需求呈高层次化的发展趋势,人们在追求食品营养价值的同时,也十分关注食品的健康功能。因此,酶解技术制备的鸡蛋蛋白肽等鸡蛋深加工... 详细信息

鸡蛋因其丰富的营养成为最受人们欢迎的日常食物之一,蛋白和脂质是其主要的营养成分。近年来,随着社会需求呈高层次化的发展趋势,人们在追求食品营养价值的同时,也十分关注食品的健康功能。因此,酶解技术制备的鸡蛋蛋白肽等鸡蛋深加工产品备受人们关注。卵黄提取磷脂后产生的副产物含有丰富的蛋白资源,但其利用率与附加值不高。很多研究证明卵黄肽具有抗氧化、降血压、骨保护等多种生物活性,在健康领域具有广泛的应用前景。本文对卵黄肽的制备方法、生物活性以及产业化应用进行概述,旨在为卵黄肽的进一步开发与应用提供有益的参考。

关键词：卵黄蛋白卵黄肽卵黄高磷蛋白肽制备工艺生物活性产业化应用