检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

共转化法获得无筛选标记转基因小麦的研究

共转化法获得无筛选标记转基因小麦的研究

作者：宋洁西北农林科技大学

学位级别：硕士

在外源基因转化过程中，筛选标记基因在植物的遗传转化鉴定过程中起到重要作用，但是一旦获得转化植株后，标记基因的存在会带来潜在的环境安全和食品安全问题。因此，构建有效的删除筛选标记基因的转化系统，培育出无筛选标记转基因植... 详细信息

在外源基因转化过程中，筛选标记基因在植物的遗传转化鉴定过程中起到重要作用，但是一旦获得转化植株后，标记基因的存在会带来潜在的环境安全和食品安全问题。因此，构建有效的删除筛选标记基因的转化系统，培育出无筛选标记转基因植株是植物转基因工程发展的前提和保障。由于利用基因枪技术介导的共转化法具有不受物种限制、可同时转入三个或是更多基因等优点，是一种获得无筛选标记基因的转基因植株的有效方法。本研究采用基因枪法进行共转化，把抗逆相关的基因DREB1A、DREB3A与筛选基因bar共转化小麦幼胚愈伤组织，比较不同共转化方式对转化效率的影响;通过对T2代转基因植株的跟踪检测，分析目的基因与筛选标记基因的分离比率，为通过共转化法获得无筛选标记转基因小麦提供依据。本研究的主要结果如下：（1）利用基因枪技术把目的基因DREB3A、DREB1A与筛选标记基因bar分别进行了共转化：DREB3A+bar共转化小偃328、DREB3A+DREB1A共转化小偃328、DREB1A+bar共转化周麦27、DREB3A+DREB1A+bar共转化周麦27，经组织培养和连续筛选得到再生植株，四种转化方式均获得了抗性再生植株，再生植株数分别为184株、111株、32株和111株。（2）经过对T0代的再生植株进行PCR检测，四种转化方式的再生植株中DREB3A或DREB1A基因的总转化率为0.30%~2.89%，其中DREB3A+bar共转化植株3株、DREB3A+DREB1A共转化植株4株、DREB1A+bar共转化植株3株、DREB3A+DREB1A+bar三个基因共转化植株2株，共转化率为11.11%~75.00%，不同的转化方式间转化效率存在差异。在转化的过程中不仅得到了共转化植株，同时在T0代直接得到了部分不含有筛选标记基因bar的转基因植株。（3）试验对DREB4A和bar基因、W17和bar基因共转化的T2代植株进行了PCR跟踪检测，得到了只含有目的基因DREB4A的无标记基因转基因小麦25株;只含有目的基因W17的无标记基因转基因小麦5株。DREB4A+/bar－基因型的分离频率为42.38%，W17+/bar－基因型的分离频率为3.25%。由此说明目的基因和筛选标记基因共转化的转基因植株，在自交后代中会发生分离，可以筛选得到无标记基因的转基因植株。这些试验结果为进一步提高小麦的转化效率、获得无筛选标记的转基因植株奠定了基础。

关键词：小麦共转化法基因枪技术筛选标记基因

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

共转化法删除转基因植物筛选标记基因的研究

分子植物育种 2004年第6期2卷 839-845页

作者：李桂民宋凯刘立侠许守民东北师范大学生命科学学院长春130024

筛选标记基因因其在植物基因工程中的重要作用而得到了普遍应用,目前使用的筛选标记主要是抗生素抗性基因或抗除草剂基因,然而一旦获得转基因植株,它的存在不但没有必要,而且还引起人们的种种顾虑。因此如何从转基因植物中删除筛选标记... 详细信息

筛选标记基因因其在植物基因工程中的重要作用而得到了普遍应用,目前使用的筛选标记主要是抗生素抗性基因或抗除草剂基因,然而一旦获得转基因植株,它的存在不但没有必要,而且还引起人们的种种顾虑。因此如何从转基因植物中删除筛选标记基因成为植物基因工程研究的重要内容。目前已有多个系统用来删除选择标记基因,从而获得无筛选标记基因的转基因植株。其中共转化法操作简便因而得到了广泛的应用。本文综述了共转化法研究的最新进展并对其实际应用的可行性进行探讨。

关键词：共转化法转基因植物筛选标记基因基因工程删除方法

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

共转化法及其在转基因植物研究中的应用

作物研究 2008年第S1期22卷 305-309页

作者：尹明智李栒湖南农业大学农学院国家油料改良中心湖南分中心长沙410128

随着转基因植物研究的深入,越来越多的转基因植物将问世,其安全性和稳定性也倍受关注。共转化法作为一种简单可行的培育无选择标记转基因植物的方法,以其操作简单和较高的共转化率,较好地解决了生物安全性的问题,而倍受青睐。综述了几... 详细信息

随着转基因植物研究的深入,越来越多的转基因植物将问世,其安全性和稳定性也倍受关注。共转化法作为一种简单可行的培育无选择标记转基因植物的方法,以其操作简单和较高的共转化率,较好地解决了生物安全性的问题,而倍受青睐。综述了几种已获成功的共转化方法,并讨论了其在转基因植物研究中的应用和前景。

关键词：共转化法转基因植物转基因技术

农杆菌介导的水稻双载体共转化法中部分影响因素的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

生物技术通报 2005年第5期21卷 55-62页

作者：陆美芳刘巧泉于恒秀顾铭洪扬州大学江苏省植物功能基因组学重点实验室

以T-DNA区分别只含有潮霉素选择标记基因(HPT)和GUS报告基因的双元载体pCAMBIA1300和pCAMBIA0301用于农杆菌介导的水稻共转化试验。根据经农杆菌浸染并共培养3d后水稻愈伤组织中的GUS瞬间表达情况及其稳定共转化率,测定了不同农杆菌菌... 详细信息

以T-DNA区分别只含有潮霉素选择标记基因(HPT)和GUS报告基因的双元载体pCAMBIA1300和pCAMBIA0301用于农杆菌介导的水稻共转化试验。根据经农杆菌浸染并共培养3d后水稻愈伤组织中的GUS瞬间表达情况及其稳定共转化率,测定了不同农杆菌菌株搭配及其不同浓度配比对共转化效率的影响。结果表明,在两种农杆菌菌液浓度比为1:1的情况下,农杆菌EHA105/pCAMBIA1300与EHA105/pCAMBIA0301组合共转化水稻的效率要高于其他菌株的组合;在以农杆菌EHA105/pCAMBIA1300与EHA105/pCAMBIA0301进行共转化时,两种菌液浓度比为1:2时共转化效率最高。

关键词：水稻共转化 T-DNA区 GUS瞬间表达水稻愈伤组织农杆菌介导共转化法双元载体 GUS报告基因中部选择标记基因转化效率 T-DNA

用共转化法培育无选择标记转基因植物研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

甘肃农业科技 2007年第12期38卷 33-35页

作者：叶春雷魏兵强杨随庄甘肃省农业科学院生物技术研究所甘肃兰州730070 甘肃省农业科学院蔬菜研究所甘肃兰州730070

介绍了用农杆菌介导的共转化法培育无选择标记基因转基因植物的原理、方法、影响因素以及其国内外研究进展。

关键词：农杆菌共转化法无选择标记转基因植物

基因枪介导的转PYL5基因小麦的获得与鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2015年第2期43卷 72-78页

作者：池青周鹏刘香利程绘绘赵惠贤西北农林科技大学生命科学学院陕西杨凌712100 西北农林科技大学旱区作物逆境生物学国家重点实验室陕西杨凌712100

【目的】通过基因枪介导共转化,获得转拟南芥抗旱基因PYL5的小麦植株,为转基因小麦的抗旱功能研究奠定基础。【方法】以小麦品种西农889、绵阳19和宁春16为供试材料,通过基因枪介导法将诱导型启动子Rd29A启动的PYL5基因和筛选标记基因Ba... 详细信息

【目的】通过基因枪介导共转化,获得转拟南芥抗旱基因PYL5的小麦植株,为转基因小麦的抗旱功能研究奠定基础。【方法】以小麦品种西农889、绵阳19和宁春16为供试材料,通过基因枪介导法将诱导型启动子Rd29A启动的PYL5基因和筛选标记基因Bar共转化到小麦幼胚愈伤组织中,经过除草剂PPT(Phosphinothricin)筛选和愈伤组织分化,获得再生植株。根据目标基因PYL5和Bar基因序列分别设计特异引物,对移栽成活的小麦T0代再生植株进行基因特异性PCR检测。【结果】采用基因枪分别轰击西农889的1800个、绵阳19的800个和宁春16的800个幼胚愈伤组织,经过筛选和分化分别获得了9,5和14株小麦再生植株;对转基因小麦T0代再生植株的基因特异性PCR检测结果表明,西农889、绵阳19和宁春16 Bar基因的转化率分别为0.280%,0.500%和0.750%,PYL5基因的转化率分别为0.110%,0.125%和0.500%,Bar和PYL5基因的共转化率分别为0.110%,0.125%和0.500%。【结论】PYL5基因成功转入到了小麦品种西农889、绵阳19和宁春16中。

关键词：小麦基因枪法共转化法 PYL5基因

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

同源转基因作物育种技术研究进展

分子植物育种 2018年第24期16卷 8061-8067页

作者：乔岩杨芳张成柴薇薇陇东学院农林科技学院庆阳745000 陇东学院小麦研究所庆阳745000 甘肃省旱地冬小麦种质创新与应用工程研究中心庆阳745000 西北民族大学生命科学与工程学院兰州730030

目前,传统的转基因技术对环境和食品存在潜在风险,同源转基因技术(Cisgenesis technology)作为传统转基因技术的替代技术,可以通过重组同一交配亲本和近缘种属的特定基因功能元件,使用P-DNA序列替换T-DNA区域,进而产生无标记基因,无载... 详细信息

目前,传统的转基因技术对环境和食品存在潜在风险,同源转基因技术(Cisgenesis technology)作为传统转基因技术的替代技术,可以通过重组同一交配亲本和近缘种属的特定基因功能元件,使用P-DNA序列替换T-DNA区域,进而产生无标记基因,无载体骨架的基因修饰作物。本综述总结了此技术应用过程中比较成功的3种方法:无标记基因转化法、删除选择标记基因以及利用ipt标记基因选择无载体骨架转化体,并介绍了利用植物来源的P-DNA替换T-DNA的原理和策略。同源转基因技术的应用与发展,对于转基因技术的完善和转基因作物的商业化有积极的推动作用。

关键词：同源转基因选择标记共转化法 P-DNA

基因枪法介导的转KN2基因小麦的获得及鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2014年第1期42卷 83-88页

作者：周鹏池青吕金洋刘香利赵惠贤旱区作物逆境分子生物学国家重点实验室陕西杨凌712100 西北农林科技大学生命科学学院陕西杨凌712100

【目的】获得转KN2基因的小麦植株,为研究KN2基因对提高转基因小麦抗寒性的作用,以及为利用基因工程提高小麦抗逆性奠定基础。【方法】以弱冬性小麦品种小偃22为供试材料,通过基因枪法,用含有KN2基因的植物表达载体和筛选标记基因bar共... 详细信息

【目的】获得转KN2基因的小麦植株,为研究KN2基因对提高转基因小麦抗寒性的作用,以及为利用基因工程提高小麦抗逆性奠定基础。【方法】以弱冬性小麦品种小偃22为供试材料,通过基因枪法,用含有KN2基因的植物表达载体和筛选标记基因bar共转化小麦幼胚愈伤组织,经过除草剂(Phosphinothricin,草丁膦)筛选和愈伤组织分化获得再生植株,并对得到的再生小麦植株进行PCR检测。【结果】采用基因枪法共轰击小偃22的幼胚愈伤组织1 680个,共获得再生植株17株,移栽到花盆中成活15株;根据目标基因序列设计特异引物,对成活的小麦植株进行PCR检测,结果表明获得含有bar基因和KN2基因的转基因阳性植株分别为6株和4株,转化率分别为0.36%和0.24%,bar和KN2的共转化率为0.24%。【结论】KN2基因成功地转入到小麦品种小偃22中。

关键词：小麦基因枪法共转化法 KN2基因

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

转基因植物标记基因的研究进展

河南教育学院学报（自然科学版） 2004年第1期13卷 42-45页

作者：汪琛颖郑州师范高等专科学校生命科学系河南郑州450044

随着商业化植物转基因品种的不断出现 ,人们对转基因植物的安全问题谈论得越来越多 ,其中争论的焦点之一即筛选标记基因的安全性。科学工作者尝试培育具安全选择标记基因或无选择标记的转基因植物 ,目的是提高转基因植物安全性 ,使之更... 详细信息

随着商业化植物转基因品种的不断出现 ,人们对转基因植物的安全问题谈论得越来越多 ,其中争论的焦点之一即筛选标记基因的安全性。科学工作者尝试培育具安全选择标记基因或无选择标记的转基因植物 ,目的是提高转基因植物安全性 ,使之更易为广大消费者所接受。本文就这方面的研究进展作一综述。

关键词：转基因植物标记基因安全性共转化法