基因枪法介导的转KN2基因小麦的获得及鉴定

作     者：周鹏 池青 吕金洋 刘香利 赵惠贤 ZHOU Peng;CHI Qing;L(U) Jin-yang;LIU Xiang-li;ZHAO Hui-xian

作者机构：旱区作物逆境分子生物学国家重点实验室陕西杨凌712100 西北农林科技大学生命科学学院陕西杨凌712100 

出 版 物：《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 (Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition))

年 卷 期：2014年第42卷第1期

页      面：83-88页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0901[农学-作物学] 

基　　金：国家转基因生物新品种培育科技重大专项(2011ZX08002-004) 

主　　题：小麦 基因枪法 共转化法 KN2基因 

摘      要：【目的】获得转KN2基因的小麦植株,为研究KN2基因对提高转基因小麦抗寒性的作用,以及为利用基因工程提高小麦抗逆性奠定基础。【方法】以弱冬性小麦品种小偃22为供试材料,通过基因枪法,用含有KN2基因的植物表达载体和筛选标记基因bar共转化小麦幼胚愈伤组织,经过除草剂(Phosphinothricin,草丁膦)筛选和愈伤组织分化获得再生植株,并对得到的再生小麦植株进行PCR检测。【结果】采用基因枪法共轰击小偃22的幼胚愈伤组织1 680个,共获得再生植株17株,移栽到花盆中成活15株;根据目标基因序列设计特异引物,对成活的小麦植株进行PCR检测,结果表明获得含有bar基因和KN2基因的转基因阳性植株分别为6株和4株,转化率分别为0.36%和0.24%,bar和KN2的共转化率为0.24%。【结论】KN2基因成功地转入到小麦品种小偃22中。