检索结果-南通市图书馆

5-氨基乙酰丙酸光动力治疗下生殖道病变患者疗效

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

5-氨基乙酰丙酸光动力治疗下生殖道病变患者疗效

作者： HEKABAKILA-BANZOUZI MEDLEGE 中南大学

学位级别：硕士

【背景和目的】下生殖道病变包括宫颈上皮内瘤变(Cervical Intraepithelial Neoplasia,CIN)、阴道上皮内瘤变(Vaginal Intraepithelial Neoplasia,Va IN)和外阴上皮内瘤变(Vulvar Intraepithelial Neoplasia,VIN)。下生殖道病变主要与高危人类乳头瘤病毒(Human papillomavirus,hpv)持续感染相关。持续的hpv感染不仅会增加患者发生癌变风险,同时增加女性的心理负担。CIN是最常见的下生殖道病变,其发病率高于VIN和Va IN。CIN分为低级别和高级别鳞状上皮内病变,低级别鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)主要包括CIN 1级,高级别鳞状上皮内病变(high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)主要包括CIN 2级和CIN 3级。约60%的LSIL是暂时性的,在12-24个月内可自发消退,30%会持续存在,只有约10%在2年内进展为更高级别病变。目前,LSIL的治疗方法包括随访观察、病灶切除或消融,HSIL的治疗方法主要为冷刀切除(Cold Knife Cone,CKC)和环形电切术(Loop electrosurgical excision procedure,LEEP)。这些手术可能会引起出血、感染、宫颈粘连、不孕、流产或早产等近期和远期并发症。对于部分年轻、有再生育要求的患者而言,希望在治疗疾病的同时,有更能兼顾生育要求的保守治疗方案,特别是CIN的患者。根据2003年WHO Va IN分级系统将Va IN分为低级别阴道上皮内病变(Va IN 1级)和高级别阴道上皮内病变(Va IN 2级和Va IN 3级)。虽然Va IN的发生率低于CIN,但Va IN的检出率逐渐升高,尤其在年轻女性中。近年来,由于hpv检测、细胞学检查和阴道镜检查的广泛应用,Va IN的检出率较前增加。Va IN 1级大部分患者不需任何治疗,可自行消退,因此患者在充分阴道镜检查及活检排除高级别病变或者浸润癌的情况下,密切随访1年以上,必要时再给予治疗。治疗一般以局部治疗为主。既往一项研究表示,约10%的Va IN 2级可进展为浸润性阴道癌。Va IN 2级和Va IN 3的治疗方式包括非手术治疗和手术治疗。非手术治疗主要包括5%氟尿嘧啶软膏药物治疗,激光汽化、激光切除、冷冻和电灼物理治疗,部分患者还可采用后装腔内放射治疗。腔内放疗可引起阴道纤维化,缩窄和卵巢早衰等。因此,适用于年老,病变范围广泛或其他治疗方法无效时。对于年轻患者,需要保留生育及性功能者并不合适。光动力疗法(Photodynamic therapy,PDT)是一种新型、无创、高选择性的治疗手段。PDT是以光,光敏剂(Photosensitizers,PSs)和氧气的互相作用为基础,利用光化学反应进行疾病诊断和治疗一种技术。光敏剂是特殊的化学物质,其基本作用是传递能量。光照时,光敏剂吸收光子而被激发,又将吸收的光能迅速传递给基态氧,使其被激发产生活性氧物质,从而氧化破坏生物大分子,最终引起细胞的坏死或凋亡。光动力疗法治疗可在门诊进行,此疗法无需麻醉且无严重不良并发症,并且已有研究证实其对下生殖道病变治疗具有有效性。5-氨基酮戊酸光动力疗法(5-ALA PDT)是对下生殖道病变的高效无创的治疗方法,在清除病变的同时,不破坏组织结构,具有较好的临床应用前景。已有研究证实5-氨基酮戊酸光动力疗法在缓解CIN,Va IN病变和清除hpv方面的有效性和安全性。下生殖道的持续性hpv感染引起的CIN合并Va IN的治疗对临床医生来说更具挑战性。目前,对CIN合并Va IN的治疗尚无明确指南。因此,本研究旨在评估5-ALA PDT对CIN、Va IN和CIN合并Va IN病变患者的临床疗效。【方法】本研究共纳入自2020年7月至2021年8月期间,就诊于中南大学湘雅医院患者89例。入组标准为:1)18岁及以上患者,2)性活跃者(有性生活者),3)组织病理学诊断为下生殖道病变,4)未妊娠期女性,5)接受5-ALA PDT治疗患者,6)对5 ALA-PDT无过敏者,7)随访结束时有病理活检结果的者。排除标准为:1)未诊断为下生殖道病变;2)妊娠期女性;3)对5 ALA-PDT过敏者;4)不愿意接受5-ALA PDT治疗的患者。5)随访结束时未行病理活检者。符合纳入与排除标准的患者,签署知情同意书后,通过电子病历系统和调查问卷,收集临床信息。临床信息包括:年龄,hpv结果,薄层液基细胞学检测结果(TCT),阴道镜检查所见病变的程度及范围,转化区Transformation zone(TZ),是否存在腺上皮异常或宫颈管病变受累,组织学分级的情况。光敏剂为5-氨基酮

关键词： 5-氨基乙酰丙酸（5-ALA）光动力治疗（PDT）下生殖道病变人乳头瘤病毒（HPV）

不同hpv感染亚型与阴道常见微生物感染的相关性研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

不同HPV感染亚型与阴道常见微生物感染的相关性研究

作者：凌艳芝南华大学

学位级别：硕士

目的:分析不同人乳头瘤病毒（human papilloma virus,hpv）亚型感染与阴道常见微生物感染之间的相关性,为hpv感染的检测和诊疗方案优化提供科学依据,实现宫颈癌、宫颈癌前期病变甚至hpv感染的早发现、早干预、早处理。方法:选取2020.04... 详细信息

目的:分析不同人乳头瘤病毒（human papilloma virus,hpv）亚型感染与阴道常见微生物感染之间的相关性,为hpv感染的检测和诊疗方案优化提供科学依据,实现宫颈癌、宫颈癌前期病变甚至hpv感染的早发现、早干预、早处理。方法:选取2020.04.01至2020.10.31就诊于长沙市第一医院妇科门诊,行hpv分型检测且同时行阴道常见微生物检测的867名患者作为研究对象,根据hpv检测结果将患者分成四组:A组为hpv16、18型感染组;B组为除16、18其他高危型hpv感染组;C组为低危型hpv感染组;D组为hpv阴性组。同时根据患者的阴道微生物检测结果中是否存在沙眼衣原体（CT）、细菌性阴道病（BV）、滴虫性阴道炎（TV）、外阴阴道假丝酵母菌病（VVC）、支原体感染等,来分别统计每一组无阴道感染、合并单纯型阴道感染（任意一种微生物感染）、合并混合型阴道感染（含两种微生物及以上的阴道感染）的人数并进行分析。结果:1.在867名患者中,ABCD这四组合并发生阴道感染率分别为:65.98%（64/97）、67.82%（196/289）、70.59%（36/51）、52.33%（225/430）,ABC三组合并阴道感染率均高于D组,均有统计学差异（P＜0.05）。2.hpv阳性组（包括A、B、C组总和）患者的支原体感染发生率（193/437）比hpv阴性组（129/430）高,两者间有显著统计学差异（P＜0.001）;hpv阳性组合并VVC发生率（14/437）低于hpv阴性组（25/405）,且有统计学差异（P＜0.05）,而两组在BV、CT、TV之间无明显相关性。进一步分析A组与D组发生VVC感染情况,发现A组合并VVC感染率较D组低,且有统计学差异（P＜0.05,OR=0.169,95%CI为0.023～1.261）,而B组、C组分别与D组比较,均无统计学差异（P＞0.05）。3.ABCD四组之间关于支原体感染发生率比较有统计学差异,且ABC三组的支原体感染率均明显高于D组,均有统计学差异（P＜0.05）。而ABC组之间进行两两比较,均无统计学差异。ABCD四组间关于CT、BV、TV感染率均无明显统计差异性。4.ABCD四组之间关于混合型阴道感染率有统计学差异（P＜0.05）,A与D组之间、C与D组之间比较均无统计学差异（P＞0.05）,B组与D组之间比较,有统计学差异,表明B组较D组合并混合型阴道感染率更高。结论:1.hpv感染与阴道感染之间存在一定的相关性。2.支原体感染与hpv感染之间有显著联系;VVC在一定程度上可以减少hpv16、18型感染率,而与其他亚型hpv感染未见明显相关性;CT、BV、TV与hpv感染之间无明显相关性。3.混合型阴道感染（包含BV、VVC、TV、CT、支原体感染中两种及以上的阴道感染）可以增加除16、18其他高危型hpv感染风险。4.对于不同亚型hpv感染在BV、TV、CT感染率方面无明显差异性。

关键词：人乳头瘤病毒（HPV） hpv感染阴道感染

宫颈微生物群落中宫颈鳞状上皮内病变预警因子的筛选研究

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

宫颈微生物群落中宫颈鳞状上皮内病变预警因子的筛选研究

作者：梁月娟广西医科大学

学位级别：硕士

目的:评估阴道微生态与人乳头瘤病毒（human papillomavirus,hpv）感染及宫颈鳞状上皮内病变（cervical squamous intraepithelial lesion,SIL）的相关性,分析其对hpv感染及SIL的影响。方法:使用Pub Med、Web of Science等英文数据库系统收集2000年1月至2017年12月所有涉及阴道微生态与SIL及hpv感染相关研究的文献。采用Revman 5.3软件进行分析并计算比值比（odds ratio,OR）及其95%可信区间（95%CI）。结果:纳入的13篇文献中,与hpv感染相关因素分别为:细菌性阴道病（bacterial vaginosis,BV）（OR 2.57,95%CI 1.78-3.71,P＜0.05）、白色念珠菌（Candida albicans,VVC）（OR 0.63,95%CI 0.49-0.82,P＜0.05）、沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis,CT）（OR 3.16,95%CI 2.55-3.90,P＜0.05）、解脲支原体（Ureaplasma urealyticum,UU）（OR 1.35,95%CI 1.20-1.51,P＜0.05）;与SIL相关的因素分别为:BV（OR1.56,95%CI 1.21-2.00,P＜0.05）。阴道毛滴虫（T.Vaginalis,TV）与hpv感染（OR 1.19,95%CI 0.90-1.58,P=0.22）及SIL（OR 1.41,95%CI 0.62-3.24,P=0.41）不相关,乳酸杆菌（Lactobacillus）与hpv感染不相关,VVC与SIL（OR 0.99,95%CI 0.50-1.98,P=0.98）不相关。结论:BV可能增加hpv感染和SIL发生的风险,CT和UU可能增加hpv感染的风险,而VVC可能降低hpv感染的风险,但仍需加大样本研究证实本结果。目的:基于生物信息学方法筛选出宫颈微生物群落中与宫颈鳞状上皮内病变（cervical squamous intraepithelial lesion,SIL）进展相关的5条通路中的候选差异基因。方法:使用KEGG（https://www.***.jp/kegg/）数据库对5条通路所包含的基因进行查询,利用STRING、Cytoscape、MOCDE工具及Pub Med文献查询对基因进行筛选。通过COREMINE在线软件分析候选差异基因与细菌及SIL进展之间的相关性。结果:1.通过kegg数据库查询,共获得5条通路的基因约1442个。2.利用检索工具STRING在线数据库对每条通路的基因构建蛋白-蛋白相互作用网络（protein-protein interaction,PPI）,用Cytoscape对PPI进行可视化分析,再用MOCDE进行进一步筛选,最后得到5个蛋白互作网络图。结合Pub Med进行相关文献查询,最终初步筛选出10个候选差异基因（ATM、ABCG2、PCNA、XRCC1、HMGB1、OGG1、LIG1、SMUG1、FEN1、TDG）。3.通过COREMINE数据库进行生物学注释与文本挖掘,发现10个基因均存在于注释网络中。其中PCNA、HMGB1、OGG1、SMUG1、XRCC1与SIL进展有直接的网络关系,ATM、ABCG2、TDG、LIG1、FEN1与SIL进展存在间接的网络关系。除泉发菌属（Chitinophaga）不存在于网络外,余四种菌属均存在网络中。其中ABCG2与四种细菌均存在直接的网络关系,ATM、PCNA与不动杆菌属（Acinetobacter）存在直接的网络关系,OGG1与寡养单胞菌属（Stenotrophom）存在直接的网络关系。另外的基因与细菌也存在间接的网络关系。结论:通过生物信息学分析初步筛选出宫颈微生物群落中与SIL进展相关的10个候选差异基因,这10个基因可能是宫颈微生物群落调控SIL进展的重要候选基因,基于这些基因的研究可能为阻断SIL进展提供新靶点。目的:对生物信息学筛选出的宫颈微生物群落中与宫颈鳞状上皮内病变（cervical squamous intraepithelial lesion,SIL）进展相关的10个候选差异基因进行相关功能验证。方法:使用荧光定量PCR方法检测10个候选差异基因在38例正常宫颈组织、52例SIL组织、30例宫颈癌组织中的不同表达,使用ROC曲线分析预测差异基因预警SIL发生和进展的价值,使用Logistic回归分析与SIL发生和进展相关的危险因素。结果:1.患者临床资料分析结果显示宫颈癌组的平均年龄比正常组和SIL组均大（P＜0.05）,hpv感染率也随着宫颈病变程度的加重逐渐增加（P＜0.05）,TCT检查的严重结果也随宫颈病变程度的加重而增加（P＜0.05）,但入组病例的孕次和产次均无显著性差异（P＞0

关键词：阴道微生态人乳头瘤病毒（HPV）宫颈鳞状上皮内病变（SIL） meta分析 SIL 宫颈微生物通路基因生物信息学荧光定量PCR 宫颈癌分析 mi R-34a HMGB1

宫颈上皮内瘤变患者不同hpv基因型感染及外周血T淋巴细胞亚群分布特征分析

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

宫颈上皮内瘤变患者不同HPV基因型感染及外周血T淋巴细胞亚群分布...

作者：盛小花苏州大学

学位级别：硕士

宫颈癌是目前最常见的妇科恶性肿瘤,其发病率和死亡率均位于我国女性肿瘤疾病的第二位,且疾病发生逐渐呈现年轻化的趋势。人乳头瘤病毒（HPV）是一种已被证实在子宫颈形成增生性病变的病毒,已有大约180种的人乳头瘤病毒基因型被确定,其... 详细信息

宫颈癌是目前最常见的妇科恶性肿瘤,其发病率和死亡率均位于我国女性肿瘤疾病的第二位,且疾病发生逐渐呈现年轻化的趋势。人乳头瘤病毒（HPV）是一种已被证实在子宫颈形成增生性病变的病毒,已有大约180种的人乳头瘤病毒基因型被确定,其中被认定为高危型-hpv（HR-hpv）基因型至少有15种,即16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、73和82。约90%的女性在感染病毒后3年内自发地清除病毒,而约10%的女性会持续感染,约1%的女性会发展为宫颈癌。因此,hpv持续感染是宫颈上皮内瘤变（CIN）恶性进展的关键,而吸烟、多产、长期摄入口服避孕药和免疫功能低下被认为是人乳头瘤病毒持续感染和致癌过程共同的风险因素。目前认为,宿主免疫监视功能是控制自身肿瘤形成的重要因素,而肿瘤本身可进一步导致机体免疫系统异常。高危型hpv病毒（HR-hpv）在机体免疫系统异常的情况下持续感染,通过各种方式逃逸宿主的免疫识别,使宿主不能有效激活和启动细胞免疫应答和体液免疫应答,使得患者从CIN进展到宫颈癌。在正常机体内,发挥细胞免疫主体作用的淋巴细胞在数量上与其他免疫细胞之间保持着一定的比例,对CIN患者外周血淋巴细胞亚群进行绝对计数和相对计数,可以反映患者的免疫情况。鉴此,本研究拟通过hpv基因分型联合宫颈细胞学检查,首先探讨hpv基因分型与CIN进展的关系,进而分析不同分级和不同hpv基因分型CIN患者外周血T淋巴细胞亚群表达分布特征,以期阐述感染hpv的CIN患者免疫应答的特点,分析CIN患者的整体免疫状态与hpv感染基因分型的关系,有利于研究hpv感染和CIN患者的免疫治疗策略,对hpv病毒感染治疗、预后及预防性疫苗和治疗性疫苗临床前期应用与疗效评估具有重要意义。第一部分 CIN患者hpv感染基因型分布特点初步分析目的:分析不同分级CIN患者hpv感染基因型分布特点。方法:通过宫颈液基细胞学检查,对宫颈病变者取活检标本进行CIN分级,PCR-反向点杂交法对患者宫颈脱落细胞进行hpv基因分型检测。数据处理采用SPSS26软件,计数资料采用卡方检验,P＜0.05具有统计学意义。结果:CIN患者hpv感染率比正常宫颈组织高,以HR-hpv感染为主,宫颈病变（CIN I及以上病变）组HR-hpv感染率为77.0%,其中hpv16、hpv58、hpv33、hpv52和hpv18是最常见的高危基因型。进一步分析HR-hpv基因型在不同CIN患者中的分布,结果表明,hpv16、hpv58/52/33、hpv16/18混合基因型感染率在CIN Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ三组有差异,组间差异有统计学意义,这也提示了hpv16、hpv58/52/33、hpv16/18混合基因型感染更易导致CINⅡ及以上病变发生。结论:HR-hpv感染是CIN患者一个重要的危险因素,其中hpv16、hpv58/52/33、hpv16/18混合基因型感染更易导致CINⅡ及以上病变发生。第二部分 CIN患者外周血T淋巴细胞亚群表达特征的初步分析目的:检测不同分级和不同hpv基因分型CIN患者外周血CD4+、CD4+CD45RO+、CD8+、CD8+CD38+T淋巴细胞绝对计数和相对计数,以分析不同分级CIN患者外周血T淋巴细胞免疫表型的特征。方法:经免疫荧光标记和流式细胞术分析,进行外周血CD4+、CD4+CD45RO+、CD8+、CD8+CD38+T淋巴细胞亚群绝对计数和相对计数。数据处理采用SPSS26软件,计量数据以均数±标准差表示,组间差异显著性分析采用Students T-test或单因素方差分析,计数资料的差异性分析可采用卡方检验,P＜0.05具有统计学意义。结果:与健康对照组比,不同分级CIN患者,主要是CINⅡ、CIN Ⅲ级患者外周血相对计数CD4/CD8比值下降,分别为1.09±0.30、0.99±0.26,差异有统计学意义（P＜0.05）。在HR-hpv感染组CIN患者CD4+T细胞、CD8+T细胞绝对计数分别为481±133个/UL和375±102个/UL,显著低于hpv低危型感染或hpv阴性组,差异有统计学意义（P＜0.05）。在HR-hpv混合基因型感染组,CIN患者CD8+CD38+T细胞绝对计数207±56个/UL,显著高于HR-hpv单一基因型感染组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:CIN患者局部宫颈hpv感染伴随外周血T细胞表型改变,hpv基因分型联合流式细胞术检测CD4/CD8相对计数比值、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD8+CD38+T细胞亚群绝对计数对CIN患者免疫功能评估及治疗效果和预后具有一定参考价值。

关键词：宫颈上皮内瘤变（CIN）人乳头瘤病毒（HPV）基因分型淋巴细胞亚群绝对计数相对计数 CD4 CD8 记忆T细胞活化T细胞

人乳头瘤病毒16型的衣壳蛋白L2的颗粒组装和截短表达纯化及性质鉴定

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

人乳头瘤病毒16型的衣壳蛋白L2的颗粒组装和截短表达纯化及性质鉴...

作者：姚巧缤厦门大学

学位级别：硕士

人乳头瘤病毒（Human Papillomaviruses,hpv）属于乳头瘤病毒科、乳头瘤病毒属,是一类具有蛋白衣壳的双链DNA病毒。hpv病毒可分为200多个亚型,高危型hpv的感染将大大增加女性罹患宫颈癌的概率。宫颈癌号称女性第二大杀手,仅次于乳腺癌... 详细信息

人乳头瘤病毒（Human Papillomaviruses,hpv）属于乳头瘤病毒科、乳头瘤病毒属,是一类具有蛋白衣壳的双链DNA病毒。hpv病毒可分为200多个亚型,高危型hpv的感染将大大增加女性罹患宫颈癌的概率。宫颈癌号称女性第二大杀手,仅次于乳腺癌对女性的杀伤力。另外,hpv的感染也可能导致生殖器癌、口腔癌、咽喉癌,及生殖器疣等疾病的产生。L1蛋白hpv病毒上的主要衣壳蛋白,占hpv衣壳蛋白总比例的80%至90%,能自组装成类病毒颗粒,具有良好的免疫原性。现上市的hpv疫苗均以L1的类病毒颗粒为基础研制。但L1蛋白具有较强的型别特异性,对研发广谱的hpv疫苗造成了一定的困难。L2蛋白是hpv病毒上的次要衣壳蛋白,与病毒感染、入核、以及成熟后组装等过程有关。L2蛋白上含有hpv的广谱综合表位,且型别特异性较小,具有诱导机体产生交叉综合抗体、提供交叉保护的潜能。因此,解析L2蛋白的结构对更深入地研究hpv的感染机制以及研发hpv的广谱疫苗具有重要的意义。为了研究L2的结构与功能,本研究首先开展了在杆状系统中表达L1与L2相互作用的VLPs的工作。分别通过共感染与共表达路径进行表达,此时的L1与L2蛋白上均不含相互作用位点。经鉴定,两条路径表达的VLPs均由L1蛋白组成,未鉴定到L2蛋白的存在。通过细胞沉淀中的包涵体鉴定发现,L2蛋白存在于包涵体中。由此能够推论:L1、L2蛋白在昆虫细胞中同时表达后,未能有效相互作用。后续本研究在L1与L2上分别引入了半胱氨酸点突变,期望两个半胱氨酸位点能形成二硫键,增强相互作用。随后将蛋白L1-Q317C与L2-E338C同时表达,结果显示,在共感染路径表达的VLPs中,可检测到L2蛋白,但含量极少。本研究继续通过HPLC比较了不同VLPs的出峰时间并推论出,发现颗粒中L2的含量虽少,却能增大VLPs的直径。相互作用位点的引入是具有一定的效果。免疫原性评价的结果显示,此VLPs的免疫未能诱发小鼠体内产生高滴度的L2中和抗体。这可能与L2在hpv大部分的生命周期中均存在于五聚体内部、极少暴露中和位点有关。由于上述获得的VLPs并不均一,不利于冷冻电镜结构解析,本研究进行了L1与L2蛋白相互作用的五聚体的表达工作。经SDS-PAGE/WB/HPLC/TEM鉴定后,确认可在杆状系统中表达经175位与428位双点突变的16L1蛋白,且此蛋白具有自组装形成hpv-L1五聚体的能力。除了L2-E338C,我们根据本实验室其他课题方向的研究结果,在L2蛋白上引入了新的突变位点——T421C,以期能更好地加强L1与L2蛋白的相互作用。但从鉴定结果发现,旧相互作用位点与新相互作用位点的作用效果均不明显,共表达L1与L2形成的五聚体中不含L2蛋白。第三部分,本研究通过截短表达L2部分功能域蛋白。第一轮截短后,本研究首先通过Co柱对截短的L2蛋白进行了纯化。鉴定结果显示,洗脱样品中杂蛋白含量太高,难以用于结构解析及疫苗生产。本研究继续尝试第二轮的L2蛋白的截短,使用不同的载体和截短长度,最后用Co柱对其中六个截短蛋白进行了纯化。鉴定结果显示,L2-140-340蛋白具有最佳的纯化效果,洗脱样品中杂蛋白较少,L2含量很高,纯度较高,可能以三聚体或单体的形式存在。后续将继续研究该截短L2蛋白的生物性质和活性,获得均一的L2蛋白用于结晶和结构解析。

关键词：人乳头瘤病毒（HPV）次要衣壳蛋白L2 杆状病毒-昆虫细胞表达系统相互作用 L2截短蛋白

人乳头瘤病毒16/18分型在细胞学轻度异常的低度宫颈病变中的预测价值（英文）

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology) 2017年第3期18卷 249-255页

作者： Jing YE Bei CHENG Yi-fan CHENG Ye-li YAO Xing XIE Wei-guo LU Xiao-dong CHENG Department of Gynecologic Oncology Women 's Hospital School of Medicine Zhejiang University Hangzhou 310006 China

目的:评估人乳头瘤病毒(hpv)16/18分型在细胞学正常或轻度异常的低度宫颈病变中的预测价值,为临床分流决策提供依据。创新点:目前对于细胞学正常或轻度异常的低度宫颈病变患者缺乏有效分流策略。本研究首次探索hpv16/18分型对这部分患... 详细信息

目的:评估人乳头瘤病毒(hpv)16/18分型在细胞学正常或轻度异常的低度宫颈病变中的预测价值,为临床分流决策提供依据。创新点:目前对于细胞学正常或轻度异常的低度宫颈病变患者缺乏有效分流策略。本研究首次探索hpv16/18分型对这部分患者疾病转归的预测价值。方法:新招募细胞学正常或轻度异常的低度宫颈病变患者,以6个月为间隔随访2年,采用Cox回归模型对入组hpv16/18分型结果与疾病转归进行关联分析。结论:对于hpv16/18阳性,细胞学轻度异常,且30岁及以上的低度宫颈病变患者,可以考虑比保守随访更积极的诊疗方案。

关键词：低度鳞状上皮内病变宫颈上皮内瘤变1级人乳头瘤病毒（HPV） hpv16／18分型预测价值前瞻性研究

hpv E6癌蛋白检测在宫颈癌筛查中的临床应用研究

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

HPV E6癌蛋白检测在宫颈癌筛查中的临床应用研究

作者：张玉山西医科大学

学位级别：硕士

目的:评价hpv 16/18 E6癌蛋白检测技术检测宫颈癌前病变及癌的准确性和有效性。方法:选取2014年5月-2015年1月在山西省肿瘤医院妇科就诊的25-65周岁有性生活的妇女439例作为研究对象,所有参与对象均无妊娠及宫颈外科手术史,均经过知情同... 详细信息

目的:评价hpv 16/18 E6癌蛋白检测技术检测宫颈癌前病变及癌的准确性和有效性。方法:选取2014年5月-2015年1月在山西省肿瘤医院妇科就诊的25-65周岁有性生活的妇女439例作为研究对象,所有参与对象均无妊娠及宫颈外科手术史,均经过知情同意,签署知情同意书。每位妇女均接受了TCT、hpv DNA、hpv 16/18 E6癌蛋白检测和阴道镜检查及活检。以病理学结果为标准,与hpv DNA检测相比较,评价hpv16/18 E6癌蛋白检测对CINII+的诊断价值。结果:1.在439例研究对象中,TCT、hpv DNA、hpv16/18 E6癌蛋白检测的阳性率分别为80.2%、71.1%、46.5%,且三者阳性率随着宫颈病变的逐渐加重呈逐渐增高的趋势。2.在检出CINII级以上（CINII+）的患者中,hpv 16/18 E6癌蛋白的总阳性率为66.9%（200/299）,低于hpv DNA总阳性率94.3%（236/299）,差异有统计学意义（X2=71.9,P＜0.005）。3.在检出CINII级以上（CINII+）的患者中,hpv16/18 E6癌蛋白检测的灵敏度为66.9%（200/299）,低于hpv DNA检测的灵敏度94.3%（282/299）,差异有统计学意义（X2=71.9,P＜0.005）;特异度为97.1%（136/140）,高于hpv DNA78.6%（110/140）,差异有统计学意义（X2=20.9,P＜0.005）;阳性预测值为98.0%（200/204）,高于hpv DNA90.4%（282/312）,差异有统计学意义（X2=10.5,P＜0.005）;阴性预测值为57.9%（136/235）,低于hpv DNA86.6%（110/127）,差异有统计学意义（X2=31.3,P＜0.005）;准确度为64.0%,低于hpv DNA检测的准确度72.9%。4.在检出CINII+的患者中,hpv16/18 DNA与E6癌蛋白同时表达阳性和阴性的例数为256例,二者检测的一致率为85.6%（256/299）,Kappa=0.76;在所有受检者中,二者检测的一致率为87.9%（386/439）,Kappa=0.83;二者的一致性很强。5.在CINII+患者中,TCT与hpv联合检测,灵敏度为98.9%,特异度为82.8%,准确度为81.7%;TCT与E6癌蛋白联合检测,灵敏度为97.9%,特异度为97.1%,准确度为95.0%。结论:hpv E6癌蛋白作为一种能够监测病毒致癌活性的标志物,可将其作为hpv DNA检测无法开展或开展困难的欠发达地区的初筛方法,或作为hpv DNA阳性病人或（和）TCT为ASCUS及以上病变病人分流的方法,这些都将提高宫颈癌筛查的特异度并合理分配有限的卫生资源。

关键词：人乳头瘤病毒（HPV） E6蛋白宫颈病变酶免疫层析法筛查

高危型人乳头瘤病毒检测对宫颈癌前病变筛查的临床价值

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

高危型人乳头瘤病毒检测对宫颈癌前病变筛查的临床价值

作者：姜霞河北医科大学

学位级别：硕士

目的：宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤，其发病率居女性恶性肿瘤的第2位。据世界范围统计，每年约有46.6万宫颈癌新发病例，其中80%发生在发展中国家。而每年我国宫颈癌新发病例有13万人，高居世界第二位。且患者趋向年轻化，年龄在35岁... 详细信息

目的：宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤，其发病率居女性恶性肿瘤的第2位。据世界范围统计，每年约有46.6万宫颈癌新发病例，其中80%发生在发展中国家。而每年我国宫颈癌新发病例有13万人，高居世界第二位。且患者趋向年轻化，年龄在35岁以下的宫颈癌患者占三分之一，上海疾控中心对上海子宫颈癌的流行趋势分析研究显示，35岁以下发病的女性比例从1970年不足2％增加到2006年超过10％。目前认为宫颈癌的发生、发展是由量变到质变，由渐变到突变的长期过程，且有报道显示，宫颈癌前病变的治愈率高达98%。故有效的筛查及恰当的干预，能阻断其向宫颈癌的进展，从而降低宫颈癌的发病率和死亡率。近40年来由于宫颈细胞学筛查宫颈癌在临床上的普遍应用，使宫颈癌前病变及宫颈癌得以早期发现和治疗，宫颈癌的发病率和死亡率已有明显下降。大量的流行病学研究和病原学研究已经明确了高危型人乳头瘤病毒（high risk human papillomavirus，HR-hpv）持续感染为宫颈癌前病变和宫颈癌发生的根本原因，故hpv检测可作为筛查宫颈癌前病变及宫颈癌的重要手段之一。但目前我国hpv检测在临床工作中尚未得到广泛应用，现阶段临床广泛应用的筛查宫颈病变的主要方法仍是宫颈液基细胞学（Liquid based cytolog，TCT），TCT受很多主观因素影响。本实验通过对比研究hpv、TCT及hpv联合TCT筛查宫颈癌前病变及宫颈癌的检出率，为临床筛查宫颈癌提供更为有价值的筛查方法，从而做到对宫颈癌的早期发现、早期干预，降低其发生率和死亡率。研究hpv分型与宫颈癌前病变的相关性，为临床随访及疗效监测提供参考。方法：选择2013年6月到2013年12月就诊于河北医科大学第二医院妇产科门诊有性生活的女性7622例，随机分组，其中6387例采用hpv检测（Cobas4800）进行宫颈癌前病变筛查，hpv16或18阳性者部分行TCT，TCT阳性者（按照TBS分类法报告，不能明确意义的非典型鳞状上皮细胞即ASC-US及以上者判断为阳性）行阴道镜，阴性者严密随访。部分直接行阴道镜检查。hpv其他12种高危型阳性者行TCT，TCT结果回报阳性者行阴道镜检查，阴性者亦严密随访。1235例使用TCT进行宫颈癌前病变的筛查，报告阳性者，部分行阴道镜检查的同时行hpv检测。部分直接行阴道镜检查。阴道镜检查必要时取宫颈活组织检查，以组织病理学诊断作为金标准（镜下未取活检者视为慢性宫颈炎）。结果： 1hpv感染者年龄平均为37.33±10.37岁，大部分集中于29-44.25岁，而文献报道hpv感染高峰年龄为17-33岁。CIN患者平均年龄为37.95±10.54岁，其中大部分集中于29-44岁之间，TCT阳性者平均年龄为39.98±17.508岁，高峰年龄为29-47岁，hpv阳性、CIN阳性及TCT阳性者年龄分布无统计学意义（X2=4.68，P=0.096＞0.05），故认为三者年龄分布无明显区别。 26387例hpv检测的患者中，hpv阳性者701例，阳性率为10.97%。其中hpv16阳性者179例，占25.53%，hpv18阳性者38例，占5.42%，其他12种高危型hpv阳性者402例，占57.34%，混合感染者82例，占11.69%。其中hpv16和hpv18阳性者中16例未行TCT而直接行阴道镜检查，镜下取活检11例，慢性宫颈炎者（包括镜下未取活检者）10例，CINI1例，CINII1例，CINIII4例，即hpv检测对宫颈癌前病变检出率为37.5%（6/16）。其余685例hpv阳性者均行TCT，TCT阳性者277例，阴性者408例，阴道镜下取宫颈活组织送病理者有208例，其中慢性宫颈炎61例，CINI53例，CINII55例，CINIII36例，宫颈癌3例，hpv联合TCT对宫颈癌前病变的检出率为53.06%（147/277）。1235例采用TCT筛查宫颈癌前病变的患者中，TCT阳性169例，阴道镜宫颈活组织检查136例，其中慢性宫颈炎者92例，CINI25例，CINII13例，CINIII6例，TCT对宫颈病变的检出率为26.03%（44/169）。经统计学分析hpv与hpv联合TCT检测宫颈高度病变的检出率无统计学意义（P=0.1＞0.05），即hpv筛查宫颈病变与hpv联合TCT筛查宫颈病变的检出率无明显差异。hpv联合TCT与TCT单独筛查宫颈癌前病变的检出率有统计学差异（P=0.00＜0.05），即hpv联合TCT筛查宫颈病变检出率较TCT单独筛查宫颈癌前病变检出率高。 3阴道镜宫颈活检病理为CINI患者59例，其中hpv16阳性10例，占16.94%，hpv18阳性4例，占6.78%，其余12种阳性36例，占61.01%，混合感染9例，占15.25%。CINII患者者57例，其中hpv16阳性19例，

关键词：人乳头瘤病毒（HPV）液基细胞学检查（TCT）阴道镜宫颈病变宫颈癌

18型人乳头瘤病毒E6蛋白突变体的制备及其对肿瘤细胞生长的影响

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

18型人乳头瘤病毒E6蛋白突变体的制备及其对肿瘤细胞生长的影响

作者：左丽君华东理工大学

学位级别：硕士

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一。人乳头瘤病毒（human papillomavirus, hpv）感染是诱发宫颈癌的根本原因,而90%以上的宫颈癌与高危型hpv（尤其16、18型hpv）感染有关。hpv表达的早期蛋白E5/E6/E7可通过与宿主细胞内PDZ结构域相互作... 详细信息

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一。人乳头瘤病毒（human papillomavirus, hpv）感染是诱发宫颈癌的根本原因,而90%以上的宫颈癌与高危型hpv（尤其16、18型hpv）感染有关。hpv表达的早期蛋白E5/E6/E7可通过与宿主细胞内PDZ结构域相互作用,营造适合其转化、增殖的体内环境,引起一系列的疾病,甚至诱导肿瘤的发生。近年研究发现hpv16-E6单一氨基酸突变体（F47R）能抑转hpv-16的效应,是一种潜在的新型抗肿瘤药物。高危型hpv18-E6蛋白与hpv16-E6相似,其上类似位点的突变是否也具有相似的抑癌效果呢?本论文就此进行了探索,并获得如下结果：（1）以HeLa细胞基因组为模板,成功扩增了hpv18-E6蛋白的编码基因,构建了其真核表达载体pcDNA3.1-E6与pEGFP-Cl-E6;利用重叠PCR与常规重组相结合法扩增并构建了hpv18-E6单突变体蛋白（F49R与F127R）真核表达载体pcDNA3.1-E6F49R, pcDNA3.1-E6F127R、pEGFP-Cl-E6F49R、pEGFP-Cl-E6F127R,利用定点突变试剂盒构建了双突变体蛋白（F49R/F127R）的真核表达载体pcDN A3.1-E6F49R-F127R与pEGFP-Cl-E6F49R-F127R。（2）将hpv18-E6及其突变体蛋白的真核载体转染细胞,RT-PCR首次显示HeLa细胞内hpv18-E6的转录、表达水平有差异。借助MTT、吖啶橙/溴化乙啶双染法、稳转细胞株生长曲线差异分析等首次证实了hpv18-E6蛋白有促癌细胞增殖的效果;而hpv18-E6突变体蛋白均能有效抑制感染hpv-18的癌细胞增殖,诱导癌细胞凋亡;hpv18-E6突变体对差异表达hpv18-E6的Hela细胞株作用效果不同;三种突变体比较而言,单突变体hpv18-E6F49R和双突变体hpv18-E6F49R-F127R的抑癌效果更好。（3）人工合成了针对大肠杆菌密码子优化的hpv18-E6突变体F49R的编码基因,成功构建该突变体与穿膜肽（TAT或R9）的融合蛋白原核表达载体,实现重组蛋白在大肠杆菌中的表达。经优化,在15。C和180rpm转速下,添加0.1mmol/LZn2+,利用终浓度为0.06mmol/L的IPTG诱导20h,重组hpv18-E6（F49R）突变体-穿膜肽（TAT或R9）融合蛋白的可溶性表达量最高。虽然重组蛋白含有His标签,但常规的Ni柱亲和层析不能有效纯化目标蛋白,通过阴离子交换层析与锌柱亲和层析相结合,获得纯度85%以上的重组hpv18-E6（F49R）突变体-穿膜肽（TAT或R9）融合蛋白,细胞实验证实重组蛋白也能有效抑制Hela细胞增殖,hpv18E6F49R-TAT和hpv18E6F49R-R9蛋白对表达hpv18-E6全长的HeLa细胞的半数抑制浓度分别约在280μg/m1和260μg/ml。

关键词：人乳头瘤病毒（HPV） E6 突变体穿膜肽重组转染表达与纯化