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牛羊粪中纤维素降解菌的筛选鉴定及产酶条件优化

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中国酿造 2024年第9期 118-123页

作者：杨金波杜中平韩睿青海大学农林科学院青海省蔬菜遗传与生理重点实验室青海高原种质资源研究与利用实验室

该研究采用刚果红染色法和滤纸条崩解法从青海天然牧场的牛羊粪中分离筛选纤维素降解菌，通过形态学观察及分子生物学技术对筛选菌株进行鉴定。以羧甲基纤维素（CMC）酶活性为筛选指标，采用单因素试验及响应面试验对其产酶条件进行优... 详细信息

该研究采用刚果红染色法和滤纸条崩解法从青海天然牧场的牛羊粪中分离筛选纤维素降解菌，通过形态学观察及分子生物学技术对筛选菌株进行鉴定。以羧甲基纤维素（CMC）酶活性为筛选指标，采用单因素试验及响应面试验对其产酶条件进行优化，并评价其对不同秸秆的降解效果。结果表明，筛选获得一株具有较高产纤维素酶活性的菌株BC-4，其被鉴定为索诺拉沙漠芽孢杆菌（Bacillus sonorensis）。单因素及响应面试验结果表明，该菌株最优产酶条件为发酵初始pH8，接种量2%，发酵温度35℃。在此优化条件下，菌株BC-4产羧甲基纤维素酶活性为93.7 U/mL。该菌株对不同秸秆均具有较好的降解效果，其中对菊芋秸秆降解率最高为26.3%。

关键词：纤维素降解菌筛选鉴定产酶条件优化秸秆降解

小站稻秸秆降解复合菌系的筛选与产酶条件优化

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中国饲料 2024年第9期 65-71页

作者：白狄纯洪梓萌郭娟娟李佳怡王金龙天津农学院农学与资源环境学院天津西青300392

为寻找一种能够科学高效地将小站稻秸秆用于秸秆还田的方法,并将其作为一种储备技术,本研究通过测定已有6组秸秆降解复合菌系的羧甲基纤维素酶活力和滤纸酶活力,筛选出2组复合菌系,并通过正交试验进行产酶条件的优化,以探索解决小站稻... 详细信息

为寻找一种能够科学高效地将小站稻秸秆用于秸秆还田的方法,并将其作为一种储备技术,本研究通过测定已有6组秸秆降解复合菌系的羧甲基纤维素酶活力和滤纸酶活力,筛选出2组复合菌系,并通过正交试验进行产酶条件的优化,以探索解决小站稻秸秆清洁生产技术的应用问题,保障小站稻的未来绿色可持续发展,为小站稻秸秆高效处理的研究提供理论基础和技术支持。本研究结果表明:复合菌系B和复合菌系F的综合酶活力均高于其他复合菌系;复合菌系B羧甲基纤维素酶最佳发酵条件为25℃,pH 8.0,接种量2%,温度为酶活力主要影响因素;复合菌系B滤纸酶最佳发酵条件为20℃,pH 9.0,接种量2%,pH为酶活力主要影响因素;复合菌系F羧甲基纤维素酶最佳发酵条件为25℃,pH 8.0,接种量2%,温度为酶活力主要影响因素;复合菌系F滤纸酶最佳发酵条件为20℃,pH9.0,接种量2%,接种量为酶活力主要影响因素。

关键词：小站稻秸秆降解复合菌系筛选产酶条件优化

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一株产纤维素酶酵母菌的筛选、鉴定及产酶条件优化

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中国酿造 2024年第9期 72-78页

作者：冉光耀唐佳代赵益梅孟卓妮龙亚飞郭敏郭举茅台学院酿酒工程系

为了筛选高产纤维素酶酵母菌，该研究利用孟加拉红培养基和刚果红培养基，从酱香型白酒酒醅中筛选产纤维素酶的酵母菌，通过形态学观察、生理生化试验及分子生物学技术对筛选菌株进行鉴定，并考察其耐受性并优化产酶条件。结果表明，筛... 详细信息

为了筛选高产纤维素酶酵母菌，该研究利用孟加拉红培养基和刚果红培养基，从酱香型白酒酒醅中筛选产纤维素酶的酵母菌，通过形态学观察、生理生化试验及分子生物学技术对筛选菌株进行鉴定，并考察其耐受性并优化产酶条件。结果表明，筛选出一株产纤维素酶菌株JXJP-Y19，经鉴定后确定该菌株为解脂耶氏酵母菌（Yarrowia lipolytica）。菌株JXJP-Y19的温度、乙醇、pH耐受性分别为39℃、8%(V/V)、3，整体表现出良好的环境胁迫耐受性能。最佳产酶条件为以麸皮作碳源，棉籽饼作氮源，接种量1%，初始pH值6，发酵温度30℃。在此优化条件下，菌株JXJP-Y19所产滤纸酶活力、外切葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶酶活分别为（0.913±0.025）U/mL、（1.272±0.025）U/mL、（0.937±0.030）U/mL，是优化前的2.15倍、1.81倍和1.94倍。菌株JXJP-Y19展现出良好的纤维素酶活力，可作为潜在菌株应用于纤维素生物降解利用。

关键词：酵母菌筛选鉴定纤维素酶产酶条件优化

紫外线诱变选育高产豆豉纤溶酶菌株及其产酶条件优化

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中国酿造 2024年第3期43卷 177-181页

作者：张文勇张恒慧王晓丽太原工业学院环境与安全工程系山西太原030008

该研究以分离自豆豉样品中产豆豉纤溶酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DC-1为出发菌株,采用紫外线诱变选育高产豆豉纤溶酶且稳定遗传的菌株,并以豆豉纤溶酶活力为评价指标,通过单因素试验及正交试验对其发酵条件进行优化。结果表明... 详细信息

该研究以分离自豆豉样品中产豆豉纤溶酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)DC-1为出发菌株,采用紫外线诱变选育高产豆豉纤溶酶且稳定遗传的菌株,并以豆豉纤溶酶活力为评价指标,通过单因素试验及正交试验对其发酵条件进行优化。结果表明,筛选出一株高产豆豉纤溶酶活力且稳定遗传的诱变菌株DC-V5,其最优发酵条件为:接种量3%、装液量70 mL/250 mL、发酵温度34℃、初始pH 6.5。在此优化发酵条件下,诱变菌株DC-V5产豆豉纤溶酶活力最高达到(451.26±11.09)IU/mL,是优化前出发菌株DC-1的1.74倍。

关键词：枯草芽孢杆菌豆豉纤溶酶紫外线诱变产酶条件优化

一株内切葡聚糖酶产生菌株的分离鉴定及其产酶条件优化

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中南民族大学学报（自然科学版） 2024年第1期43卷 24-31页

作者：赵思卡许倍滔冯喆王力张建国李晓华中南民族大学生命科学学院武汉430074 中南民族大学微生物资源与利用湖北省工程技术研究中心武汉430074 江苏神力生态农业科技有限公司江苏宜兴214211

从湖南省长沙县养殖场牛胃秸秆发酵物中分离获得了一株高产内切葡聚糖酶的菌株,命名为SCUEC7.通过菌落形态、生理生化特性及16S rDNA序列分析,鉴定SCUEC7菌株为枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis).当培养时间为12 h、pH值为6.0、培养温度... 详细信息

从湖南省长沙县养殖场牛胃秸秆发酵物中分离获得了一株高产内切葡聚糖酶的菌株,命名为SCUEC7.通过菌落形态、生理生化特性及16S rDNA序列分析,鉴定SCUEC7菌株为枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis).当培养时间为12 h、pH值为6.0、培养温度为37°C、碳源为20.0 g·L^(-1)麦芽糖、氮源为15.0 g·L^(-1)胰蛋白胨、金属离子为1.5 g·L^(-1)的Mn^(2+)的条件下,枯草芽胞杆菌SCUEC7菌株菌体生长量和内切葡聚糖酶活性均较高.在单因素实验的基础上,响应面法分析显示:培养11.9 h,初始pH值为5.9,麦芽糖含量为19.8 g·L^(-1)时,预测最高酶活力为409.0 U·mL^(-1),内切葡聚糖酶的酶活力实测值与预测值之间有较高的拟合度.SCUEC7菌株产生内切葡聚糖酶活性较高,为其秸秆饲料中的应用奠定基础.

关键词：枯草芽胞杆菌SCUEC7菌株内切葡聚糖酶产酶条件优化响应面法优化

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一株产中性蛋白酶菌株的筛选及其发酵产酶条件优化

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食品工业科技 2023年第1期44卷 189-199页

作者：李娜附俊杰刘军温雪瓶李丽四川轻化工大学生物工程学院四川宜宾644000 固态发酵资源利用四川省重点实验室四川宜宾644000

目前,低酶活及原料高成本严重制约了蛋白酶工业的发展,本研究采用透明圈法和摇瓶发酵法筛选出1株产中性蛋白酶的菌株,经形态学观察、生理生化实验以及16S rDNA序列分析鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),并命名为ppr3,通过单... 详细信息

目前,低酶活及原料高成本严重制约了蛋白酶工业的发展,本研究采用透明圈法和摇瓶发酵法筛选出1株产中性蛋白酶的菌株,经形态学观察、生理生化实验以及16S rDNA序列分析鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),并命名为ppr3,通过单因素实验和响应面试验对发酵培养基成分及发酵条件进行优化,结果表明:当发酵温度33℃,接种量8.5%(v/v),初始pH5.7,乳糖5.55 g/L、菜粕31.89 g/L、酵母浸粉7.09 g/L、吐温800.03%、MgSO_(4)0.04%、K_(2)HPO_(4)0.04%时,蛋白酶活为500 U/mL,相较于未优化前提高了132%。将菜粕作为培养基的发酵氮源,在一定程度上降低了成本,为农副产品的再利用提供了一个新途径,也为后续工业化生产奠定了研究基础。

关键词：贝莱斯芽孢杆菌筛选蛋白酶活产酶条件优化

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三株产几丁质酶菌株的筛选、产酶条件优化及水解虾壳的研究

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食品工业科技 2023年第5期44卷 98-106页

作者：章晓洋张译文朱思瑶王冕吕永梅余晓红盐城工学院海洋与生物工程学院江苏盐城224051

目的:筛选鉴定产几丁质酶的菌株并优化其发酵条件,最终应用于虾壳降解研究。方法:以盐城市滩涂海泥为样品,利用平板筛选水解几丁质的菌株,运用生物信息学方法鉴定菌株,通过单因素优化其发酵条件,并将筛选得到的菌株和优化后的发酵条件... 详细信息

目的:筛选鉴定产几丁质酶的菌株并优化其发酵条件,最终应用于虾壳降解研究。方法:以盐城市滩涂海泥为样品,利用平板筛选水解几丁质的菌株,运用生物信息学方法鉴定菌株,通过单因素优化其发酵条件,并将筛选得到的菌株和优化后的发酵条件用于虾壳发酵。结果:鉴定得到三株显著降解胶体几丁质的菌,分别是发光杆菌(Photobacterium ***-1)、需钠弧菌(Vibrio ***-1)和希瓦氏菌(Shewanella ***-1);优化发酵条件:发光杆菌的碳源为几丁质10g/L,氮源为NH_(4)Cl 2.0 g/L,接种量为3%,发酵液pH为6.5,温度为32℃,发酵1d酶活最高为15.37±0.55 U/mL,是优化前的4.37倍;需钠弧菌的碳源为几丁质10g/L,氮源为NH_(4)Cl 2.0g/L,接种量为3%,发酵液pH为7.5,温度为22℃,发酵2d酶活最高为40.82±6.03 U/mL,是优化前的1.60倍;希瓦氏菌的碳源为几丁质10 g/L,氮源为(NH_(4))2SO_(4)2.0g/L,接种量为3%,发酵液pH为6.5,温度为22℃,发酵1d酶活最高为25.64±3.29 U/mL,是优化前的2.47倍;三株菌均能利用虾壳产几丁质酶,但利用效率均低于几丁质,酶活力分别为10.25±0.95、32.16±2.25和21.81±4.27 U/mL。结论:本研究从盐碱地筛选得到三株产几丁质酶的菌株,优化后酶活力均得到提高,且均能利用虾壳产几丁质酶,为发酵虾壳制备几丁质酶提供新的菌株来源。

关键词：产几丁质酶菌株产酶条件优化虾壳单因素实验

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纤维素降解芽孢杆菌筛选及产酶条件优化

中南林业科技大学学报 2022年第2期42卷 169-180页

作者：温冬灼张智魏罡张晓彤东北林业大学黑龙江省森林食品资源利用重点实验室黑龙江哈尔滨150040 东北林业大学林学院黑龙江哈尔滨150040

【目的】筛选沼气发酵液中高产纤维素酶菌株,并对产酶条件进行优化,为沼气发酵利用和纤维素酶的工业化开发提供高效菌株。【方法】利用刚果红平板染色法初筛,纤维素酶活测定进行复筛,从沼气发酵池中分离产纤维素酶菌株,并结合形态学观... 详细信息

【目的】筛选沼气发酵液中高产纤维素酶菌株,并对产酶条件进行优化,为沼气发酵利用和纤维素酶的工业化开发提供高效菌株。【方法】利用刚果红平板染色法初筛,纤维素酶活测定进行复筛,从沼气发酵池中分离产纤维素酶菌株,并结合形态学观察、生理生化特征和16S rDNA基因序列同源性分析进行鉴定。对菌株产酶培养基中碳源、氮源、硫酸镁和磷酸二氢钾添加量进行单因素优化,以滤纸酶活为指标,并在优化的基础上进行正交试验。对菌株接种量、培养时间、初始pH值、温度条件进行单因素优化,在单因素试验基础上采用响应面法Box-Behnken试验设计(BBD)优化纤维素降解菌产酶工艺的最佳工艺参数。【结果】初步确定该菌株发酵产酶培养基最佳条件为羧甲基纤维素钠含量0.75%、蛋白胨含量6%、硫酸镁添加量0.05%、磷酸二氢钾添加量0.2%;产纤维素酶最佳工艺条件为温度36℃,初始pH值为7.0,接种量4%,培养时间24 h,优化后其滤纸酶活达到98.49 U/mL,与优化前相比提高了约1.6倍。【结论】根据菌体的形态学观察、生理生化特征和16S rDNA基因序列同源性分析,表明该菌株为Bacillus amyloliquefaciens,本研究为沼气发酵利用和纤维素酶的工业化开发提供了高效菌株,建议进一步研究纤维素酶的生产利于其在工业水平上的应用。

关键词：芽孢杆菌产酶条件优化响应面滤纸酶活筛选

甜面酱微生物多样性、高产蛋白酶菌株的筛选鉴定及产酶条件优化

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中国酿造 2023年第4期42卷 103-111页

作者：魏雨萌何劲上官宗渺徐超旷华明贵阳学院食品与制药工程学院贵州贵阳550005 贵州省果品加工工程技术研究中心贵州贵阳550005 贵阳味莼园食品股份有限公司贵州黔南布依族苗族自治州550601

为解析传统甜面酱中微生物群落结构及筛选高产蛋白酶菌株,利用宏基因组学技术探究其中微生物的演替规律,通过滤纸片法与福林法从中筛选高产蛋白酶菌株,并采用单因素试验及响应面试验优化其产酶条件。结果表明,甜面酱发酵过程中的优势真... 详细信息

为解析传统甜面酱中微生物群落结构及筛选高产蛋白酶菌株,利用宏基因组学技术探究其中微生物的演替规律,通过滤纸片法与福林法从中筛选高产蛋白酶菌株,并采用单因素试验及响应面试验优化其产酶条件。结果表明,甜面酱发酵过程中的优势真菌为曲霉属(Aspergillus)、接合酵母属(Zygosaccharomyces)、威克汉姆酵母属(Wickerhamomyces);优势细菌为芽孢杆菌属(Bacillus)、拟杆菌属(Bacteroides)、假单胞菌属(Pseudomonas)。筛选到一株高产蛋白酶细菌PC9,其被鉴定为莫海威芽孢杆菌(Bacillus mojavensis)。菌株PC9最优产酶条件为:1%果糖,1%酵母浸膏,0.5%硫酸铵,1%NaCl,发酵温度28.5℃,发酵时间2.0 d、初始pH 9.0、接种量6%。在此优化条件下,碱性蛋白酶活力达到404.153 U/mL,是优化前的8.42倍。

关键词：甜面酱微生物多样性蛋白酶高产菌株筛选鉴定产酶条件优化