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β-葡萄糖醛酸酶的研究进展

临床医学进展 2022年第4期12卷 3520-3528页

作者：李桃崔童王建华西安医学院陕西西安陕西省人民医院普外二科陕西西安陕西省人民医院肿瘤内科陕西西安

β-葡萄糖醛酸酶(β-Glucuronidase, GUSB)是一种重要的溶酶体酶,参与含葡萄糖醛酸的糖胺聚糖的降解。GUSB缺乏导致粘多糖病VII型(mucopolysaccharidosis type VII, MPSVII),导致溶酶体储存在大脑中。GUSB是一种在表达、序列、结构和功... 详细信息

β-葡萄糖醛酸酶(β-Glucuronidase, GUSB)是一种重要的溶酶体酶,参与含葡萄糖醛酸的糖胺聚糖的降解。GUSB缺乏导致粘多糖病VII型(mucopolysaccharidosis type VII, MPSVII),导致溶酶体储存在大脑中。GUSB是一种在表达、序列、结构和功能等方面得到广泛研究的蛋白质。本综述旨在总结β-葡萄糖醛酸苷酶结构、性质及其生物学功能研究进展。

关键词： β-葡萄糖醛酸酶结构基因突变功能

城市污水中芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的研究

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城市污水中芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的研究

作者：钟姝姝华南理工大学

学位级别：硕士

天然雌激素是一类生物活性极强的内分泌干扰化学物质,人类排泄的尿液和粪便是城市污水处理厂中天然雌激素的主要来源,因而实现污水处理工艺对天然雌激素的高效去除是有效保护自然环境的关键。前期研究已经表明,天然雌激素的生物降解性... 详细信息

天然雌激素是一类生物活性极强的内分泌干扰化学物质,人类排泄的尿液和粪便是城市污水处理厂中天然雌激素的主要来源,因而实现污水处理工艺对天然雌激素的高效去除是有效保护自然环境的关键。前期研究已经表明,天然雌激素的生物降解性能极好,而其结合体的脱结合体速度却很慢,且其脱结合体的速度与污水系统中的芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的活性密切相关。因而要实现污水处理厂对天然雌激素的高效且稳定去除,关键是要提高天然雌激素结合体的脱结合体速度,即提高城市污水处理厂中芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的活性。因此,研究城市污水系统中芳基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的浓度水平以及如何提高污水中相关酶活的方法具有重要的科学意义。本硕士论文的主要研究内容和重要结论如下:1)针对传统分光光度法测定酶活的不足,建立了一种基于高效液相色谱法测定芳基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶活性的方法。高效液相色谱法测得水解产物4-硝基苯酚(4-nitrophenol,p NP)、对硝基苯基-β-葡萄糖醛酸苷钠(p-nitrophenol glucuronide sodium,p NPG)和对硝基苯酚硫酸钾(p-nitrophenol sulfate potassium,p NPS)的最低检出限(limit of detection,LOD)分别为0.092、0.098和0.164μmol/L,而其相应最低定量限(limit of quantification,LOQ)分别为0.306、0.327和0.547μmol/L。将3种不同浓度10、20和40μmol/L的p NP、p NPS和p NPG加入到江水,污水和污泥中的回收率范围分别为71.0%～108.8%,77.2%～102.7%和76.1%～105.4%,相对标准偏差低于±10%,是一种灵敏度低,重复性好,检测方便的好方法。相对于传统经典的分光光度法间接测定底物水解产物不同,本分析方法直接测定酶的底物,这有效避免了酶活测定过程因底物水解产物发生生物降解而导致测定结果失真的问题。与此同时,本分析方法可实现同时测定环境样品中芳基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶。因此,可广泛应用于各种环境样品中芳基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的测定。2)在测定污水酶活时,惊讶发现强氧化剂HO、Na Cl O和PAA对芳香基硫酸酯酶和/或β-葡萄糖醛酸酶具有强烈的抑制作用,因而详细研究了它们的抑制特性和动力学。强氧化剂HO、Na Cl O和PAA对芳香基硫酸酯酶的半数抑制浓度(half inhibition concentration,IC)分别为142.90±9.00、91.83±10.01和43.46±2.92μmol/L。Na Cl O和PAA对β-葡萄糖醛酸酶的IC分别为704.90±41.4和23.26±0.82μmol/L,而HO在试验浓度1和10 mmol/L下对β-葡萄糖醛酸酶均无抑制。这三种强氧化剂对芳香基硫酸酯酶和/或β-葡萄糖醛酸酶的抑制和p H值密切相关。研究进一步发现Na Cl O对芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的抑制属于不可逆抑制,而HO和PAA的抑制属于可逆抑制。可逆抑制中,HO的抑制属于竞争性抑制,而PAA的抑制属于非竞争抑制。由于HO和Cl O可以在人体内产生,且文献报道的人体血浆中HO的浓度足以对上述两种酶产生抑制,从而可以打破人体激素的动态平衡,属于特殊的内分泌干扰化学物质。3)发现田螺消化道中存在丰富的芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶,每克废弃物中这两种酶的活性分别高达402.62±4.48和31.79±0.57 U。提取物中的这两种酶能够有效促进雌激素结合体的脱结合体,8 h内可将25μg/L的雌激素硫酸结合体完全水解,而25μg/L雌激素葡萄糖醛酸结合体可以在4 h内完全水解。本发现为城市污水处理厂添加外源廉价酶提供了重要基础。

关键词：天然雌激素芳香基硫酸酯酶 β-葡萄糖醛酸酶分析方法抑制剂

内源性β-葡萄糖醛酸酶表达在肝内胆管结石形成中的作用

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中华肝胆外科杂志 2017年第7期23卷 460-463页

作者：姚殿波邓天麟柯昌伟吴硕东中国医科大学附属盛京医院普通外科沈阳110004

目的探讨内源性β-葡萄糖醛酸酶表达调解机制，为控制肝内胆管结石形成、预防结石复发提供新思路。方法免疫组织化学染色方法检测肝内胆管结石标本中c—myc蛋白和内源性β-葡萄糖醛酸酶的表达情况；细胞培养人正常肝细胞系和肝内胆管上... 详细信息

目的探讨内源性β-葡萄糖醛酸酶表达调解机制，为控制肝内胆管结石形成、预防结石复发提供新思路。方法免疫组织化学染色方法检测肝内胆管结石标本中c—myc蛋白和内源性β-葡萄糖醛酸酶的表达情况；细胞培养人正常肝细胞系和肝内胆管上皮细胞系，免疫印迹（Western blot）检测脂多糖（LPS）刺激下c—myc蛋白和内源性β-葡萄糖醛酸酶的表达变化；利用siRNA验证c-myc在LPS刺激内源性β-葡萄糖醛酸酶表达增加中的作用。结果与正常肝组织相比，肝内胆管结石肝组织中内源性β-葡萄糖醛酸酶和c—myc表达均显著增加。LPS可诱导人正常肝细胞系和肝内胆管上皮细胞系细胞内源性β-葡萄糖醛酸酶和c—myc表达增加，具有剂量依赖性；而c—mycsiRNA转染可有效抑制LPS诱导的内源性β-葡萄糖醛酸酶表达增加。结论LPS可通过c—myc刺激内源性β-葡萄糖醛酸酶表达增加，促进肝内胆管结石的形成。

关键词：肝内胆管结石 β-葡萄糖醛酸酶 C-myc 脂多糖

色素类结石患者胆汁中大肠杆菌优势血清型的分析及各亚型产生的β-葡萄糖醛酸酶活性比较

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色素类结石患者胆汁中大肠杆菌优势血清型的分析及各亚型产生的β...

作者：王悦中国医科大学

学位级别：硕士

研究背景:胆石症是胆道系统最常见的疾病,也是世界范围内的常见病。根据结石所在位置,胆结石分为胆囊结石和胆管结石,胆管结石包括肝内胆管结石和肝外胆管结石;根据来源胆管结石又分为从胆囊掉入胆管的继发性胆管结石和原发性胆管结石;... 详细信息

研究背景:胆石症是胆道系统最常见的疾病,也是世界范围内的常见病。根据结石所在位置,胆结石分为胆囊结石和胆管结石,胆管结石包括肝内胆管结石和肝外胆管结石;根据来源胆管结石又分为从胆囊掉入胆管的继发性胆管结石和原发性胆管结石;根据结石的成分,胆结石可分为胆固醇类胆结石、色素类胆结石和少见成分结石,胆囊中多数为胆固醇类结石和混合成分结石,而肝内外胆管中多数是胆色素类结石。胆囊结石在西方和日本等发达地区十分普遍,大约有15%的美国人患有胆囊结石,每年进行超过70万例胆囊切除术,其中约有10-15%的病例伴有继发性胆总管结石。但在没有胆囊结石的情况下,西方很少有肝内外胆管结石的病例发生。在亚洲,与胆囊结石无关的原发性胆管结石则非常普遍,包括在台湾、香港地区及新加坡发现的肝内胆管结石。在中国,高达10-20%的成人患有胆结石,其中女性多于男性,随年龄的增长而增高。在胆石病的病例中,胆色素类结石患者约占30-40%,虽然所占比例低于胆固醇类结石,但我国人口基数大,所以每年仍至少有数以百万的胆色素结石患者。并且由于部分地区发展落后、卫生条件差、饮食习惯不佳等种种原因,患病人口仍呈增长趋势。胆固醇类结石的危险因素包括女性、年龄、肥胖、妊娠、营养过剩及代谢综合征等,导致胆汁中胆固醇过饱和从而形成胆固醇结石,故可通过改变生活方式形成固醇性胆结石一级预防的基础。胆结石发生的大部分遗传风险来自于肝胆固醇转运蛋白ABCG8中的常见突变,约占其总风险的25%。而胆色素类结石的形成机制尚不清楚,因此学界对胆色素类结石的形成机制、形成的危险因素应给予高度重视,更深入地研究胆色素类结石的形成机制是必要的。目的:对色素类结石患者的胆管胆汁中大肠杆菌的各个亚型产生的β-葡萄糖醛酸酶活性进行对比,进而探究导致色素类结石形成的大肠杆菌优势血清型。研究方法:对胆管色素类结石的患者70例,术中无菌条件下抽取胆管胆汁行细菌培养。采用玻片凝集法鉴定胆汁中分离培养出的大肠杆菌的O血清型,根据β-葡萄糖醛酸酶的活性与β-葡萄糖醛酸酶同底物PNPG(4-硝基苯-β-D-葡萄糖苷)反应的速率k呈正比,与反应体系的OD600值成反比,计算大肠杆菌各亚型产生的β-葡萄糖醛酸酶活性。结果:共获得胆管胆汁标本70例,61例细菌培养阳性,阳性率为87.14%。其中12例标本中分离出两种或两种以上细菌,共获得菌株73株。培养结果排名第一为大肠杆菌(34.25%),对培养出的25株大肠杆菌进行血清型鉴定,共获得的13种大肠杆菌血清型,位列前三位分别为O、O、O;而O血清型大肠杆菌其时间-吸光度值曲线斜率k值明显高于其它血清型,结合其OD600值,可得出其产生β-葡萄糖醛酸酶的活性较高。结论:色素类结石的患者胆管胆汁中最常见细菌为大肠杆菌,血清型以O、O、O为主,其中O血清型大肠杆菌产生β-葡萄糖醛酸酶的活性较高。

关键词：色素类结石大肠杆菌血清型 β-葡萄糖醛酸酶

芳香基硫酸酯酶/β-葡萄糖醛酸酶抑制剂的筛选及其在污水样品保存中的应用

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芳香基硫酸酯酶/β-葡萄糖醛酸酶抑制剂的筛选及其在污水样品保存...

作者：张俊华南理工大学

学位级别：硕士

城市生活污水中的雌激素结合态有硫酸盐和葡萄糖醛酸盐结合态两种形式,而硫酸盐和葡萄糖醛酸盐结合态可以分别被污水中的芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶降解。因此,在研究雌激素或者雌激素结合态时,必须保证结合态样品保存时不发生分... 详细信息

城市生活污水中的雌激素结合态有硫酸盐和葡萄糖醛酸盐结合态两种形式,而硫酸盐和葡萄糖醛酸盐结合态可以分别被污水中的芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶降解。因此,在研究雌激素或者雌激素结合态时,必须保证结合态样品保存时不发生分解。本研究是通过抑制污水中芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的活性来阻止结合态的分解,从而保证结合态样品的完整性。本研究首先选取了几种常见的抑制剂、高p H和低p H对芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶进行酶学抑制实验,结果发现两种酶对1m M Hg Cl、1m M EDTA和9.5%甲醇有很强的抵抗能力,不能阻止结合态的分解。低p H(p H=1)虽然可以完全抑制两种酶的活性,但是研究发现硫酸盐结合态在低p H下会进行分解。高p H(p H=11)既可以完全抑制芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的活性,也不会对两种结合态的样品产生分解作用。最后,用破碎后的污泥样品进行验证,结果表明污泥中的结合态在p H=11的条件下未发生降解作用。因此,通过将污水样品p H调节到11是一种有效保存样品中雌激素硫酸盐和葡萄糖醛酸盐结合态的方法。本研究还对不同浓度Hg Cl下芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的活性进行实验,通过剂量-反应曲线,可以发现浓度为2 g/L的Hg Cl对两种酶均有良好的抑制作用。再取活性污泥进行稀释并向其中加入一定浓度的雌激素硫酸盐结合态和葡萄糖醛酸盐结合态,分别在室温、4℃、p H=1、p H=11、2 g/L Hg Cl几种条件下进行保存,最终结果显示只有在污泥中加入浓度为2 g/L Hg Cl条件下,雌激素结合态才未发生分解。因此,向污水中加入浓度为2 g/L Hg Cl是也一种有效保存样品中雌激素硫酸盐和葡萄糖醛酸盐结合态的方法。芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶是人体中广泛存在的两种水解酶,与人体健康紧密相关。研究发现,乳腺癌、卵巢癌、肝癌等疾病患者体内芳香基硫酸酯酶和β-葡萄糖醛酸酶的活性明显高于正常人体内。因此,医学上把抑制患者体内这两种酶活性作为治疗此类癌症的一种手段。本实验研究了不同浓度的亚硫酸钠、过氧化氢、十二烷基硫酸钠、次氯酸钠对两种酶活性的影响。亚硫酸钠、过氧化氢、十二烷基硫酸钠、次氯酸钠对芳香基硫酸酯酶有很好的抑制作用,半抑制浓度IC分别为31.51、145.2、181.17、82.66μmol/L;次氯酸钠对β-葡萄糖醛酸酶的半抑制浓度IC为784.4μmol/L;十二烷基硫酸钠对β-葡萄糖醛酸酶有抑制但是抑制效果有限,最大抑制程度约为38%;亚硫酸钠、过氧化氢对β-葡萄糖醛酸酶没有明显抑制效果。

关键词：结合态芳香基硫酸酯酶 β-葡萄糖醛酸酶样品保存抑制

极耐热性β-葡萄糖醛酸酶的高效表达和酶学性质及其应用

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生物工程学报 2008年第8期24卷 1407-1412页

作者：王卓裴建军李华钟邵蔚蓝江南大学生物工程学院无锡214122

从海栖热袍菌克隆出编码热稳定性β-葡萄糖醛酸酶基因,以热激载体pHsh为表达质粒,在大肠杆菌中得到高效表达。基因表达产物通过一步热处理后,酶纯度达电泳均一。纯化重组酶酶学性质研究表明,β-葡萄糖醛酸酶的最适反应温度为80oC,最适反... 详细信息

从海栖热袍菌克隆出编码热稳定性β-葡萄糖醛酸酶基因,以热激载体pHsh为表达质粒,在大肠杆菌中得到高效表达。基因表达产物通过一步热处理后,酶纯度达电泳均一。纯化重组酶酶学性质研究表明,β-葡萄糖醛酸酶的最适反应温度为80oC,最适反应pH为5.0,pH5.8～8.2之间酶的稳定性较好,80oC的半衰期为2h,SDS-PAGE结果显示分子量为65.9kD,与理论推算值相吻合。以对硝基苯-β-葡萄糖醛酸苷(pNPG)为底物时,其动力学参数Km值0.18mmol/L,Vmax值为312u/mg。初步的应用分析表明,该重组酶能催化甘草酸转化为甘草次酸。

关键词： β-葡萄糖醛酸酶甘草酸甘草次酸

肠道菌β-葡萄糖醛酸酶及羧酸酯酶2黄酮类抑制剂的筛选及构效关系研究

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肠道菌β-葡萄糖醛酸酶及羧酸酯酶2黄酮类抑制剂的筛选及构效关系...

作者：翁仔淼大连医科大学

学位级别：硕士

伊立替康在临床上广泛用于治疗结肠癌、胃癌、非小细胞肺癌等多种癌症。伊立替康在治疗过程中引起的迟发型腹泻、恶心、呕吐等胃肠道毒性严重影响了其治疗效果,限制了其临床应用。伊立替康的毒性与其体内代谢过程密切相关,代谢产物SN38... 详细信息

伊立替康在临床上广泛用于治疗结肠癌、胃癌、非小细胞肺癌等多种癌症。伊立替康在治疗过程中引起的迟发型腹泻、恶心、呕吐等胃肠道毒性严重影响了其治疗效果,限制了其临床应用。伊立替康的毒性与其体内代谢过程密切相关,代谢产物SN38在肠道内过量蓄积是引起肠道毒性的主要原因,而肠道内高表达的羧酸酯酶2和肠道菌产生的β-葡萄糖醛酸酶是肠道中参与伊立替康转化生成SN-38的两个重要代谢酶,其活性对SN38的肠道浓度有起决定性作用。因此,肠道菌β-葡萄糖醛酸酶和肠道羧酸酯酶2是导致伊立替康迟发型腹泻的两个重要靶点,筛选两者的抑制剂具有重要的临床应用意义。目的:本研究拟从黄酮类化合物中高通量筛选肠道菌β-葡萄糖醛酸酶和人肠道羧酸酯酶2的强效抑制剂并探究其构效关系,以期应用于减缓伊立替康引发的迟发性腹泻。方法:1)分别建立以对硝基苯酚-β-D-葡萄糖醛酸（p NPG）为底物的β-葡萄糖醛酸酶及荧光素二乙酸酯（FD）为底物的h CE2酶活性检测体系,考察多种黄酮化合物对酶的抑制能力,分析构-效关系;并对其中有强抑制作用的化合物进行抑制动力学表征,获得抑制常数及抑制类型。2)构建小分子抑制剂与靶酶对接模型,从理论上解释黄酮类化合物与靶酶的结合机制,为抑制剂结构优化和改造提供支持。结果:1)野黄芩素和木犀草素是β-葡萄糖醛酸酶介导PNPG水解反应的竞争性抑制剂,IC50值分别是5.76μM,8.68μM,Ki分别是2.51μM和2.89μM,分子对接显示,野黄芩素和木犀草素能与β-葡萄糖醛酸酶活性中心紧密结合,与空腔中Ser360和Leu361通过氢键连接。2)5,6-二羟基黄酮对人羧酸酯酶2具有强效的抑制作用,IC50值为3.50μM,Ki值是4.28μM。5,6-二羟基黄酮能紧密结合到羧酸酯酶2的非活性中心部位,是羧酸酯酶2介导FD水解反应的非竞争性抑制剂。3)构-效关系表明,疏水性黄酮类苷元对肠道菌β-葡萄糖醛酸酶和羧酸酯酶2抑制活性均比黄酮苷强。结论:从黄酮类天然产物中发现具有β-葡萄糖醛酸酶和羧酸酯酶2的强效抑制剂,为开发减缓伊立替康迟发型腹泻辅助用药提供了理论支撑。

关键词：伊立替康 β-葡萄糖醛酸酶人羧酸酯酶2 抑制剂构-效关系

原发性胆管色素结石患者胆汁中大肠杆菌优势血清型的分析及各亚型产生的β-葡萄糖醛酸酶活性比较

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现代生物医学进展 2021年第16期21卷 3049-3053,3078页

作者：王悦吴硕东韩金岩吴晓东张震中国医科大学附属盛京医院普通外科辽宁沈阳110004

目的:对原发性胆管色素结石患者的胆管胆汁中大肠杆菌的各个亚型产生的β-葡萄糖醛酸酶活性进行对比,进而探究导致色素结石形成的大肠杆菌优势血清型。方法:选取原发性胆管色素结石患者70例,术中无菌条件下抽取胆管胆汁行细菌培养,进行... 详细信息

目的:对原发性胆管色素结石患者的胆管胆汁中大肠杆菌的各个亚型产生的β-葡萄糖醛酸酶活性进行对比,进而探究导致色素结石形成的大肠杆菌优势血清型。方法:选取原发性胆管色素结石患者70例,术中无菌条件下抽取胆管胆汁行细菌培养,进行菌种鉴定及药敏试验。采用玻片凝集法鉴定胆汁中培养出的大肠杆菌的血清型,根据β-葡萄糖醛酸酶的活性与β-葡萄糖醛酸酶同底物4-硝基苯-β-D-葡萄糖苷(PNPG)反应的速率k呈正比,与反应体系的OD600值成反比,计算大肠杆菌各亚型产生的β-葡萄糖醛酸酶活性。结果:共获得胆管胆汁标本70例,61例细菌培养阳性,阳性率为87.14%。共获得菌株73株,培养结果排名第1为大肠杆菌(34.25%),药敏试验敏感度前5位的药物分别为阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦、培南类、替加环素、头孢哌酮/舒巴坦,耐药率前5位的药物分别是四环素、左氧氟沙星、氨苄西林、氯霉素、复方新诺明。对培养出的25株大肠杆菌进行血清型鉴定,共获得13种大肠杆菌血清型,位列前3位分别为O30、O24、O79,而O24血清型大肠杆菌其时间-吸光度值曲线斜率k值明显高于其它血清型,结合其OD600值,可得出其产生β-葡萄糖醛酸酶的活性较高。结论:原发性胆管色素结石的患者胆管胆汁中最常见细菌为大肠杆菌,血清型以O30、O24、O79为主,其中O24型血清型大肠杆菌产生β-葡萄糖醛酸酶的活性较高。

关键词：原发性胆管色素结石大肠杆菌药敏试验血清型 β-葡萄糖醛酸酶

姜黄素能够抑制脂多糖诱导的内源性β-葡萄糖醛酸酶的表达上调

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中国普外基础与临床杂志 2019年第8期26卷 917-922页

作者：王洋姚殿波吴硕东沈阳迪安医学检验所有限公司病理科沈阳110041 中国医科大学附属盛京医院普通外科沈阳110004

目的探索姜黄素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导后肝内胆管上皮细胞中内源性β-葡萄糖醛酸酶(β-glucoronidase,β-GD)和c-myc表达的影响。方法(1)取对数生长期的HIBEpiC细胞进行分组:空白对照组(0 h组)及7个不同刺激时点组,调整... 详细信息

目的探索姜黄素对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导后肝内胆管上皮细胞中内源性β-葡萄糖醛酸酶(β-glucoronidase,β-GD)和c-myc表达的影响。方法(1)取对数生长期的HIBEpiC细胞进行分组:空白对照组(0 h组)及7个不同刺激时点组,调整细胞密度为1×10^4个/mL,5个不同刺激时点组在培养基中加入100μg/mL LPS分别刺激1、3、6、18及24 h,另外取2份培养基,在LPS刺激24 h后更换为无LPS培养基,分别继续培养18 h和24 h。(2)取对数生长期的HIBEpiC细胞进行分组:空白对照组、LPS组、LPS+低浓度姜黄素组、LPS+中浓度姜黄素组及LPS+高浓度姜黄素组,调整细胞密度为1×10^4个/mL。除空白对照组细胞不加入任何试剂、LPS组仅加入100μg/mL LPS外,其余3组在培养基中加入100μg/mL LPS的同时,分别给予20、40和80μmol/L姜黄素干预。采用Western blot法检测细胞中c-myc和内源性β-GD的表达水平。结果(1)人正常肝内胆管细胞中的内源性β-GD和c-myc的表达水平随着LPS作用时间的延长呈增加趋势,各时点组的β-GD和c-myc的表达水平与0 h组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。(2)空白对照组、LPS组、LPS+低浓度姜黄素组、LPS+中浓度姜黄素组及LPS+高浓度姜黄素组间两两比较,c-myc和β-GD的表达水平的差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论姜黄素可抑制LPS诱导的内源性β-GD表达的上调,而且其抑制机制可能与抑制c-myc的表达有关。

关键词：胆管色素结石姜黄素脂多糖 β-葡萄糖醛酸酶 c-myc蛋白