极耐热性β-葡萄糖醛酸酶的高效表达和酶学性质及其应用

作     者：王卓 裴建军 李华钟 邵蔚蓝 Zhuo Wang;Jianjun Pei;Huazhong Li;Weilan Shao

作者机构：江南大学生物工程学院无锡214122 

出 版 物：《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期：2008年第24卷第8期

页      面：1407-1412页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 07[理学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 071007[理学-遗传学] 0836[工学-生物工程] 

基　　金：国家“973”计划(No.2004CB719600)资助~~ 

主　　题：β-葡萄糖醛酸酶 甘草酸 甘草次酸 

摘      要：从海栖热袍菌克隆出编码热稳定性β-葡萄糖醛酸酶基因,以热激载体pHsh为表达质粒,在大肠杆菌中得到高效表达。基因表达产物通过一步热处理后,酶纯度达电泳均一。纯化重组酶酶学性质研究表明,β-葡萄糖醛酸酶的最适反应温度为80oC,最适反应pH为5.0,pH5.8～8.2之间酶的稳定性较好,80oC的半衰期为2h,SDS-PAGE结果显示分子量为65.9kD,与理论推算值相吻合。以对硝基苯-β-葡萄糖醛酸苷(pNPG)为底物时,其动力学参数Km值0.18mmol/L,Vmax值为312u/mg。初步的应用分析表明,该重组酶能催化甘草酸转化为甘草次酸。