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苹果多酚的提取工艺优化

食品工业 2024年第7期45卷 37-43页

作者：郭世纪刘政王会锦州医科大学食品与健康学院锦州121001

为探究超声波辅助复合酶法提取苹果多酚的最佳工艺,使用苹果渣为原材料,采用Plackett-Burman结合Box-Behnken响应面法,探究液料比、乙醇体积分数、果胶酶与纤维素酶质量比、复合酶添加量、酶解时间、超声时间、超声功率7个因素对苹果多... 详细信息

为探究超声波辅助复合酶法提取苹果多酚的最佳工艺,使用苹果渣为原材料,采用Plackett-Burman结合Box-Behnken响应面法,探究液料比、乙醇体积分数、果胶酶与纤维素酶质量比、复合酶添加量、酶解时间、超声时间、超声功率7个因素对苹果多酚提取率的影响。结果表明,苹果多酚最佳提取条件为液料比25︰1 (mL/g)、果胶酶与纤维素酶质量比1︰3、酶添加量2.4%、超声功率90 W、乙醇体积分数75%、酶解时间81 min、超声时间27min。在此提取条件下,苹果多酚预测值为2.161 mg/g,试验最终得率为2.210 mg/g。试验结果可为苹果渣的有效利用和苹果多酚的高效提取、进一步研究及应用提供试验依据。

关键词：苹果渣苹果多酚果胶酶纤维素酶超声波

苹果多酚延长胡麻油贮藏期和维持较好品质的研究

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农产品加工 2024年第15期 12-14页

作者：李新明李群山西农业大学功能食品研究院山西太原030000

对苹果多酚对胡麻油贮藏效果及胡麻油的体外抗菌活性进行研究。将胡麻油分别贮藏在10,4,0℃下,同时,各温度另设一多酚处理组,每组7瓶,油样品均贮藏于冷库,每隔3个月随机取出3份样品,测其酸值、过氧化值,并分析胡麻油的抗菌性。结果表明... 详细信息

对苹果多酚对胡麻油贮藏效果及胡麻油的体外抗菌活性进行研究。将胡麻油分别贮藏在10,4,0℃下,同时,各温度另设一多酚处理组,每组7瓶,油样品均贮藏于冷库,每隔3个月随机取出3份样品,测其酸值、过氧化值,并分析胡麻油的抗菌性。结果表明,在贮藏期间(10,4,0℃),各组胡麻油的酸值和过氧化值均随时间延长而增加,相比各对照组,各多酚处理组胡麻油的酸值和过氧化值在各测试时间点均较低;体外抗菌试验中,各组胡麻油均显示了一定的抗菌活性,贮温越低,胡麻油的抗菌活性越强,且多酚处理各组胡麻油的抗菌活性均较各自对照组强。研究表明,苹果多酚能够有效延长胡麻油的贮藏期,维持胡麻油的品质。

关键词：苹果多酚胡麻油酸值过氧化值抗菌活性

基于海藻酸钠复合苹果多酚的化学光热抗菌敷料的制备及抗菌效果观察

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广东医科大学学报 2024年第1期42卷 17-24页

作者：赵圣兰陈嘉许月莹柳忠佳郭宁冯肖亚山东省立第三医院山东济南250031 广东医科大学药学院广东东莞523808 惠州市中心人民医院药学部广东惠州516000

目的制备一种新型的化学/光热联合治疗细菌感染的非抗生素伤口抗菌敷料。方法以Fe^(3+)、海藻酸钠(SA)和苹果多酚(APP)3种天然物质为原料,通过冷冻干燥原位非共价交联构建海绵状骨架制备一种海藻酸钠复合苹果多酚的光热抗菌敷料SA/APP/F... 详细信息

目的制备一种新型的化学/光热联合治疗细菌感染的非抗生素伤口抗菌敷料。方法以Fe^(3+)、海藻酸钠(SA)和苹果多酚(APP)3种天然物质为原料,通过冷冻干燥原位非共价交联构建海绵状骨架制备一种海藻酸钠复合苹果多酚的光热抗菌敷料SA/APP/Fe^(3+)(SAF)。以体内外试验验证其生物安全性、止血能力及杀菌能力。结果在近红外辐射下,SAF抗菌敷料能杀死近80%金黄色葡萄球菌和85%大肠杆菌。SAF抗菌敷料的细胞存活率高于95%,溶血率为6.75%;与纱布相比,SAF抗菌敷料的失血量减少了26%,止血时间减少了76%。结论制备的抗菌敷料具有较强的抗菌效果,且生物安全性高、止血能力强。

关键词：海藻酸钠苹果多酚抗菌敷料

苹果多酚通过调控Keap1/Nrf2通路减轻脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤

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中国病理生理杂志 2022年第10期38卷 1840-1847页

作者：汤建华詹旭莉冯平张志华河北北方学院附属第一医院药学部河北张家口050051 河北北方学院附属第一医院呼吸科河北张家口050051

目的:探讨苹果多酚(AP)调控Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)/核转录因子E2相关因子2(Nrf2)通路对脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肺损伤(ALI)的影响。方法:按照随机数字表法将SD大鼠分为对照(control)组、模型(model)组、低剂量(25 mg/kg)AP... 详细信息

目的:探讨苹果多酚(AP)调控Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)/核转录因子E2相关因子2(Nrf2)通路对脂多糖(LPS)诱导大鼠急性肺损伤(ALI)的影响。方法:按照随机数字表法将SD大鼠分为对照(control)组、模型(model)组、低剂量(25 mg/kg)AP组(AP-L组)、高剂量(100 mg/kg)AP组(AP-H组)、地塞米松(DEX)组和AP-H+ML385(Nrf2抑制剂)组,每组12只。各组大鼠根据分组给药,每天腹腔注射给药1次,持续给药14天,control组、model组大鼠腹腔注射等量的生理盐水。末次给药1 h后,除control组外,其它组大鼠均向气管内注射LPS以构建ALI模型,control组大鼠的气管内注射等体积的生理盐水,造模24 h后,收集大鼠肺泡灌洗液、血清及双侧肺组织用于实验。检测肺泡灌洗液中细胞总数、中性粒细胞数;ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平;HE染色观察大鼠肺组织病理损伤情况;检测大鼠肺组织湿重/干重比;试剂盒检测大鼠肺组织中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量;DCFH-DA荧光探针检测大鼠肺组织中活性氧(ROS)水平;RT-qPCR检测肺组织中Keap1、Nrf2和血红素氧合酶1(HO-1)mRNA的表达;Western blot检测肺组织中Keap1、Nrf2和HO-1蛋白的表达。结果:与control组比较,model组大鼠肺泡灌洗液中细胞总数、中性粒细胞数、TNF-α、IL-6、病理评分、肺湿/干重比、MDA含量、ROS水平升高,SOD、GSH-Px活性、Keap1mRNA、Nrf2 mRNA、HO-1 mRNA、Keap1、HO-1蛋白及核Nrf2蛋白表达降低(P<0.05);与model组比较,AP-L组、APH组、DEX组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);ML385减弱了高剂量AP对ALI大鼠的保护作用。结论:AP可能通过激活Keap1/Nrf2信号通路对LPS诱导的大鼠ALI发挥保护作用。

关键词：苹果多酚急性肺损伤氧化应激 Keap1/Nrf2信号通路

苹果多酚通过调节内质网应激改善高脂饮食小鼠肝脂肪变性的研究

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苹果多酚通过调节内质网应激改善高脂饮食小鼠肝脂肪变性的研究

作者：严贝青岛大学

学位级别：硕士

目的:探讨苹果多酚对高脂饮食诱导小鼠肝脂肪变性的改善效果作用及其可能的作用机制。方法:1.动物分组及干预方法:将32只C57BL/6J小鼠适应性喂养1周后,随机分为对照组(CON,8只)、模型组(HFD,8只)、洛伐他汀组(LOV,8只)和苹果多酚组(APE,... 详细信息

目的:探讨苹果多酚对高脂饮食诱导小鼠肝脂肪变性的改善效果作用及其可能的作用机制。方法:1.动物分组及干预方法:将32只C57BL/6J小鼠适应性喂养1周后,随机分为对照组(CON,8只)、模型组(HFD,8只)、洛伐他汀组(LOV,8只)和苹果多酚组(APE,8只);分别给予正常饲料(D12450J)+生理盐水(0.2m L/20g)灌胃、高脂饲料(D12492)+生理盐水(0.2m L/20g)灌胃、高脂饲料+洛伐他汀水溶液(5mg/kg)灌胃和高脂饲料+苹果多酚水溶液(800 mg/kg)灌胃。干预8周后,经眼眶静脉取血,留取肝脏和附睾脂肪组织用于后续指标的检测。2.体重变化监测:每周测定小鼠体重。3.血生化指标检测:利用全自动生化分析仪检测小鼠血清中甘油三酯(Triacylglycerol,TG)、总胆固醇(Total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白-胆固醇(High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(Low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、丙氨酸转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(Glutamic oxalacetic transaminase,AST)。4.肝脏组织和脂肪组织病理学观察:利用苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin staining,HE)染色,观察肝脏组织和附睾脂肪组织病理学变化。5.肝脏脂质水平、氧化应激和炎症指标检测:利用酶联免疫吸附实验(Enzymelinked immunosorbent assay,Elisa)检测肝脏中游离脂肪酸(Free fatty acid,FFA)、TG、TC、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-PX)、超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(Tumour necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-18(Interleukin-18,IL-18)和白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)的水平。6.肝脏组织内质网应激及脂质合成相关蛋白表达水平检测:利用蛋白免疫印迹实验(Western blot,WB)检测各组小鼠肝脏内质网应激标志蛋白包括葡萄糖调节蛋白78(Glucose-regulated protein 78,GRP78)、肌醇需求酶1α(Inositol-requiring kinase 1α,IRE1α)、磷酸化IRE1α(Phosphorylation of IRE1α,p-IRE1α)、蛋白酶R样ER激酶(Protein kinase RNA-like ER kinase,PERK)、磷酸化PERK(Phosphorylation of PERK,p-PERK)、激活转录因子6(Activating transcription factor 6,ATF6)及其下游X盒结合蛋白1(X box-binding protein-1,XBP1)、真核起始因子2α(Eukaryotic initiation factor 2α,e IF2α)、磷酸化e IF2α(Phosphorylation of e IF2α,p-e IF2α)、C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP),以及脂质合成相关蛋白包括固醇调节元件结合蛋白-1c(Sterol regulatory element-binding protein-1c,SREBP-1C)、乙酰辅酶A羧化酶1(Acetyl-Co A carboxylase-1,ACC1)、脂肪酸合成酶(Fatty acid synthase,FAS)和过氧化物酶体增殖子活化受体(Peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPAR-γ)的蛋白表达水平。7.脂肪组织内质网应激相关蛋白和脂肪分解相关蛋白表达水平的检测:利用WB检测各组小鼠附睾脂肪组织内质网应激标志蛋白GRP78、IRE1α、p-IRE1α、XBP1、PERK、p-PERK、e IF2α、p-e IF2α、ATF6和脂肪分解蛋白脂肪甘油三酯脂肪酶(adipose triglyceride lipase,ATGL)和激素敏感脂肪酶(hormone-sensitive lipase,HSL)的蛋白表达水平结果:1.干预的8周内,HFD组小鼠体重从第2周起明

关键词：苹果多酚内质网应激脂质合成脂质分解肝脂肪变性

苹果多酚缓解1型糖尿病和糖尿病肾病的效果及机制研究

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苹果多酚缓解1型糖尿病和糖尿病肾病的效果及机制研究

作者：谭钰暨南大学

学位级别：硕士

目的苹果多酚(apple polyphenol,AP)具有强抗氧化、抗过敏、抗炎等作用。近年报导显示,AP呈现改善糖尿病小鼠胰岛素抵抗等效果。本研究主要探究AP对1型糖尿病小鼠的糖尿病典型病症、糖脂代谢、肠道菌群结构及肠道微生物代谢产物短链脂肪... 详细信息

目的苹果多酚(apple polyphenol,AP)具有强抗氧化、抗过敏、抗炎等作用。近年报导显示,AP呈现改善糖尿病小鼠胰岛素抵抗等效果。本研究主要探究AP对1型糖尿病小鼠的糖尿病典型病症、糖脂代谢、肠道菌群结构及肠道微生物代谢产物短链脂肪酸(SCFAs)、以及糖尿病肾病的影响,并阐述其潜在的作用机制。方法液相色谱质谱仪(liquid chromatograph-mass spectrometer,LC-MS)法鉴定苹果多酚的成分,以明确其主要化学成分和各成分的相对百分比。动物实验分组:42只雄性C57BL/6 J小鼠,取6只作为健康对照组,另36只小鼠通过腹腔注射130 mg/kg链脲佐菌素(STZ)建立1型糖尿病小鼠模型,小鼠空腹血糖大于11.1 mmol/L即判定为造模成功。随后根据血糖平均值进行分组,分组为模型组(Model)、低剂量苹果多酚组(L-AP,100 mg/kg)、中剂量苹果多酚组(M-AP,200mg/kg)、高剂量苹果多酚组(H-AP,400 mg/kg)。动物实验过程:所有小鼠均喂以基础饲料,给药采用灌胃干预的方式,每天灌胃一次,连续干预14天。期间每日记录小鼠的饮水量、排尿量、摄食量以及体重,每周测量一次空腹血糖(FBG)。在动物实验结束的前一天,收集小鼠新鲜粪便,用于检测肠道菌群以及SCFAs水平。动物实验结束时,收集小鼠眼框静脉血液、摘取肝脏和肾脏。后续分别进行血清生化检测(BUN、ALT、AST、TG);组织病理学染色(HE染色观察小鼠肝脏和肾脏的炎症浸润、PAS染色观察小鼠肝脏糖原积累、Masson染色观察小鼠肾脏胶原沉积、免疫组化检测小鼠肾脏胶原蛋白的表达);荧光定量PCR检测肝脏中ACE2、GDF15、G6pc、GPAT基因的相对表达;Western blot检测肝脏AMPK信号通路和肾素-血管紧张素系统(RAS系统)、肾脏胶原蛋白以及纤维化因子蛋白的表达。结合AP的主要成分和蛋白水平的结果,采用分子对接技术进一步探讨苹果多酚的核心成分与RAS系统中部分蛋白的相互作用关系。结果(1)采用LC-MS法分析AP的成分,结果显示AP中主要含有咖啡酰奎宁酸(831、833、834的异构体)、原花青素B2 M-H、槲皮素-3-O-半乳糖苷、槲皮素-3-O-鼠李糖苷、根皮素,占比分别为14.63%、7.79%、5.92%、5.83%、5.83%。(2)动物实验显示,M-AP、H-AP组可显著降低1型糖尿病小鼠的饮水量、排尿量、摄食量、FBG和血清中甘油三酯(TG)含量,HE染色和PAS染色结果显示AP能改善肝脏脂肪变性、减少脂肪空泡的形成及糖原积累。在肝脏转录水平,H-AP上调ACE2的表达,降低G6pc的表达。在肝脏蛋白水平,H-AP能激活肝脏AMPK信号通路,包括上调p-AMPKα(Thr172)以及脂肪氧化相关蛋白PPAR-α、PPAR-γ和CPT-1α的表达;同时上调RAS系统中抑制食欲关键蛋白血管紧张素转化酶2(ACE2)及脑啡肽酶(NEP)的表达。AP的核心成分(Top 5)与RAS系统的分子对接结果显示,槲皮素-3-O-鼠李糖苷与NEP、槲皮素-3-O-半乳糖苷与ACE2具有较高的亲和力。此外,高通量测序分析发现高剂量苹果多酚可调节糖尿病小鼠肠道菌群的结构,增加益生菌Akkermansia和Odoribacter的相对丰度,并降低糖尿病小鼠粪便SCFAs水平。(3)H-AP可改善糖尿病小鼠肾脏中胶原蛋白的沉积,机制包括抑制Collagen III、TGF-β1、p-ERK(Thr202/Tyr204)蛋白的表达。此外,H-AP可显著抑制肾脏中NLRP3和TXNIP蛋白的表达,提示AP可预防因高血糖导致的肾脏氧化应激与炎症反。结论AP可以缓解STZ致1型糖尿病小鼠的高血糖、多饮、多食、多尿的典型病症。机制涉及激活肝脏AMPK信号通路,上调RAS系统中ACE2和NEP蛋白表达水平,以及增加肠道内益生菌的丰度。同时AP有效预防糖尿病肾病,机制涉及下调肾脏TXNIP、NLRP3和Collagen III、TGF-β1、p-ERK(Thr202/Tyr204)蛋白的表达。

关键词：苹果多酚 1型糖尿病脂肪酸氧化肠道微生物糖尿病肾病

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苹果多酚对肥胖小鼠骨质流失的预防效果研究

苹果多酚对肥胖小鼠骨质流失的预防效果研究

作者：孟祥源青岛大学

学位级别：硕士

背景及目的:骨质疏松症是一种以骨量减少和骨微结构恶化为特征的疾病,是世界范围内中老年人群的主要健康问题之一。与此同时,肥胖对机体骨骼代谢平衡具有一定的影响,肥胖人群是骨质流失的潜在高危人群,但基于国内人群的相关性研究报道... 详细信息

背景及目的:骨质疏松症是一种以骨量减少和骨微结构恶化为特征的疾病,是世界范围内中老年人群的主要健康问题之一。与此同时,肥胖对机体骨骼代谢平衡具有一定的影响,肥胖人群是骨质流失的潜在高危人群,但基于国内人群的相关性研究报道较少。现阶段药物治疗和生活方式干预是防治骨质流失的主要方法,但鉴于药物治疗的副作用及生活方式干预依从性差等原因,营养补充成为延缓和预防骨质流失的重要策略,因此开发寻找能够预防肥胖所致骨丢失的营养物质,对预防肥胖老年人群骨质流失,提高生活质量具有重要意义。苹果是一种常见的水果,其富含的植物化学物(如多酚)对人群健康及疾病防治具有一定效果。苹果多酚对降低肥胖机体体重、体质具有显著效果,但对肥胖机体骨代谢平衡的作用尚不完全明确。评价苹果多酚对肥胖机体骨代谢平衡的影响,探究其潜在机制,将为开拓骨质疏松防治干预手段提供新途径。方法:第一部分:体质、体脂与老年人骨骼健康状况的相关性研究。采用整群随机抽样的方法,针对青岛胶州市里岔镇11个自然村中60岁以上老年人开展横断面研究。通过面对面的问卷调查、标准化的体格检查、实验室检测获取研究对象的一般人口学特征、体格信息、疾病或健康状况。使用超声骨密度仪测量研究对象的跟骨处骨密度值。使用Cochran-Armitage趋势性检验分析骨密度(Bone Mineral Density,BMD)随肥胖指标的变化趋势。运用线性回归模型探讨不同肥胖指标水平与骨密度的关联。使用二元logistic回归模型分析不同肥胖指标水平与骨质疏松症的关联。第二部分:苹果多酚对肥胖诱导的骨质流失的预防效果及机制探讨。使用40只雄性8周龄C57BL/6J小鼠,通过喂养高脂饲料建立肥胖小鼠模型,同时通过灌胃途径开展苹果多酚干预实验。具体分组如下(每组10只):对照组(CON),肥胖模型组(HFD),白藜芦醇组(阳性对照,RES),苹果多酚组(APP)。CON组和HFD组灌胃生理盐水。RES组灌胃100mg/kg/天的白藜芦醇生理盐水混悬液。APP组灌胃800mg/kg/天的苹果多酚生理盐水混悬液。干预时间为8周,期间进行体重、摄食量记录。牺牲小鼠后,收集附睾脂肪,股骨和血液并分离血清。通过计算体重、体脂,检测血清血脂代谢指标来确定肥胖模型是否成功建立。使用Micro-CT观察并分析股骨松质骨和皮质骨的三维结构和骨微结构参数。使用三点弯曲试验和有限元法检测小鼠股骨的刚度和强度,评价其生物力学性能的变化。使用酶联免疫吸附测定法、Western Blot、免疫组化染色法和马弗炉高温煅烧,分别检测骨吸收、骨生成和骨骼矿化相关标志物的水平。结果:(1)本横断面研究共纳入782名研究对象,其中男性352人,女性430人。线性相关分析显示,BMD值与身体质量指数(Body Mass Index,BMI,r=-0.091,P=0.011),体脂率(Body Fat Percentage,BFP,r=-0.250,P<0.001),内脏脂肪面积(Visceral Fat Area,VFA,r=-0.104,P=0.004)和腰身比(Waist Height Ratio,WHt R(r=-0.164,P<0.001)均有显著负相关关系。多元线性回归分析结果显示,BFP(b=-0.003,t=-4.301,P<0.001)和WHt R(b=-0.578,t=-3.605,P<0.001)是BMD值的负预测因子。趋势性检验结果显示,在总人群中,BMI与BMD值呈倒U型关系;随着BFP(P<0.001)、VFA(P<0.001)和WHt R(P<0.001)的增加,BMD值有显著下降的趋势。在男性人群中,随着BMI(P=0.014)、BFP(P=0.004)、VFA(P=0.013)、腰围(Waist Circumference,WC,P=0.007)和WHt R(P=0.044)的增加,BMD值有显著下降的趋势。在女性群体中,BMI和BFP与BMD值呈倒U型关系;而随着VFA、WC、WHt R和腰臀比(Waist Hip Rate,WHR)的增加,BMD值得线性变化并不显著。二元Logistic回归分析显示,在男性人群中,控制一些混杂因素后,BFP最高分位相比于最低分位发生骨质疏松症的概率增加3.827倍(P<0.05)。(2)经过8周高脂饲料喂养,HFD组小鼠体重、体重增长率和体脂肪含量显著高于CON组(P<0.05);血清甘油三酯(Triglyceride,TG)、总胆固醇(Total Cholesterol,TC)和低密度脂蛋白胆固醇水平(Low Density Lipoprotein-Cholesterin,LDL-C)显著高于CON组(P<0.05);HOMA-IR显著高于CON组(P<0.01)。提示肥胖模型成功建立。AP

关键词：肥胖骨质流失苹果多酚

苹果多酚通过激活AMPK/SIRT1信号通路对LPS诱导的肺上皮细胞自噬反应的影响

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现代肿瘤医学 2022年第17期30卷 3102-3106页

作者：汤建华姜爱雯冯平刘克勤张志华北方学院附属第一医院药学部河北张家口075000 北方学院附属第一医院呼吸内科河北张家口075000

目的:探讨苹果多酚通过调节腺苷酸活化蛋白激酶/沉默信息调节因子1(AMP-activated protein kinase/Sirtuin1,AMPK/SIRT1)信号通路对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人肺泡上皮细胞(A549)自噬反应的影响。方法:使用不同浓度的苹果... 详细信息

目的:探讨苹果多酚通过调节腺苷酸活化蛋白激酶/沉默信息调节因子1(AMP-activated protein kinase/Sirtuin1,AMPK/SIRT1)信号通路对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的人肺泡上皮细胞(A549)自噬反应的影响。方法:使用不同浓度的苹果多酚提取物(apple polyphenol extract,APE)预处理A549细胞2 h后,LPS诱导A549细胞培养24 h,MTT法检测增殖活性,筛选APE最佳预处理浓度;将A549细胞分为对照组、LPS组(3 mg/L LPS)、LPS+APE组(3 mg/L LPS+20μg/mL APE)、APE+Compound C组(3 mg/L LPS+20μg/mL APE+50μmol/L Compound C),免疫荧光染色观察A549细胞自噬;流式细胞术检测A549细胞凋亡;Western blot法检测细胞中自噬相关蛋白及AMPK/SIRT1通路相关蛋白表达水平。结果:与对照组比较,经LPS诱导的A549细胞增殖活性、自噬水平、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、SIRT1、p-ULK1/ULK1、p-AMPK/AMPK蛋白表达降低,p62蛋白表达及细胞凋亡率升高(P苹果多酚通过激活AMPK/SIRT1信号通路提高LPS诱导的肺上皮细胞自噬,降低细胞凋亡。

关键词：苹果多酚脂多糖人肺泡上皮细胞腺苷酸活化蛋白激酶/沉默信息调节因子1信号通路自噬

苹果多酚和苹果多糖对高尿酸血症的改善作用及机制研究

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苹果多酚和苹果多糖对高尿酸血症的改善作用及机制研究

作者：王砚青岛大学

学位级别：硕士

背景:高尿酸血症(Hyperuricemia,HUA)是以血清尿酸浓度(Serum uric acid,SUA)升高为特征的一种常见的代谢紊乱性疾病。近年来,随着发病率的持续升高,高尿酸血症目前已被确定为仅次于高血压、高血糖和高脂血症的第四大代谢性疾病。几个... 详细信息

背景:高尿酸血症(Hyperuricemia,HUA)是以血清尿酸浓度(Serum uric acid,SUA)升高为特征的一种常见的代谢紊乱性疾病。近年来,随着发病率的持续升高,高尿酸血症目前已被确定为仅次于高血压、高血糖和高脂血症的第四大代谢性疾病。几个世纪以来,饮食一直被认为与高尿酸血症密切相关,水果富含矿物质、维生素、膳食纤维、多酚和多糖,可以为预防非传染性疾病提供各种所需的营养物质,然而其与高尿酸血症的关系目前尚不清楚。目的:以青岛大学本科生为研究对象,开展大型横断面研究,旨在探究日常不同种类水果的摄入与高尿酸血症风险之间的关系,并通过动物实验阐明该水果所含主要功能成分多酚和多糖是否能降低高尿酸小鼠血清尿酸浓度及其机制。方法:1.横断面研究:(1)采用横断面研究设计,在2018年8月至2019年10月期间,对青岛大学本科生开展健康检查计划,共有16,211名本科生参加了本项目。所有志愿者均给予书面知情同意。(2)通过半定量食物频率问卷收集志愿者基本信息及水果摄入情况。(3)体格检查包括身高、体重、血压等基本指标,计算身体质量指数。采集志愿者空腹静脉血5 m L,检测血清尿酸、甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇等。(4)分析水果摄入量与高尿酸血症风险之间的关系。2.动物实验:(1)小鼠分组及造模干预:适应性喂养结束后,将135只小鼠随机分为9组(n=15),分别为对照组、模型组、别嘌呤醇组(API组,5 mg/kg)、白藜芦醇组(Res组,100 mg/kg)、低剂量苹果多酚组(LAP组,50 mg/kg)、高剂量苹果多酚组(HAP组,100 mg/kg)、菊粉组(Inu组,1000 mg/kg)、低剂量苹果多糖组(LAC组,500 mg/kg)、高剂量苹果多糖组(HAC组,1000 mg/kg)。对照组饲喂标准饲料,其余各组饲喂高酵母饲料。除对照组外,各组小鼠均连续3周灌胃给予氧嗪酸钾(PO,250 mg/kg)、腺嘌呤(100 mg/kg)、酵母(1 g/kg)来诱导高尿酸血症。造模给药1小时后按剂量进行干预物灌胃,所有造模试剂和干预物均分别溶于0.5%CMC-Na溶液中。同时,对照组小鼠灌胃给予等体积的0.5%CMC-Na溶液。造模干预连续三周后处死小鼠。(2)基础指标监测:每周记录小鼠体重、摄食量、饮水量。(3)使用Elisa试剂盒测定血清尿酸(UA)、肌酐(SCR)、尿素氮(BUN)浓度,以及血清和肝脏黄嘌呤氧化酶(XOD)活性。(4)通过免疫印迹实验(Western blot)检测各组小鼠肝脏中XOD蛋白的表达量,肾脏尿酸转运体1(URAT1)、葡萄糖转运体9(Glut9)和ATP结合盒转运体G2(ABCG2)的蛋白表达水平。(5)通过HE染色,在光学显微镜下观察小鼠肝肾组织病理学改变。(6)通过逆转录聚合酶链反应实验(RT-PCR)检测肝脏中XOD的m RNA表达水平以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-1)等炎症因子的m RNA表达水平;检测小鼠肾脏中URAT1、Glut9、ABCG2 m RNA的表达水平以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-1)等炎症因子的m RNA表达水平。(7)进行血清代谢组实验,通过超高效液相色谱/高分辨率质谱分析(UHPLC-Q-TOF)技术分析AP、AC干预后小鼠血清代谢差异物。结果1.横断面研究:(1)男性志愿者的高尿酸血症患病率显著高于女性志愿者(P苹果的摄入量与高尿酸血症之间仍呈显著负相关(OR=0.86;95%CI:0.73-0.99,P=0.028)。2.动物实验:(1)干预3周内,模型组小鼠体重均显著低于对照组(P<0.05)。与其他组相比,LAP组和HAP组小鼠在干预期间体重显著低(P<0.05)。干预第1、2周,模型组小鼠摄食量低于对照组,LAP组和HAP组小鼠摄食量显著低于其他各组(P<0.05)。在干预第三周,LAP组和HAP组小鼠的摄食量显著低于对照组和API组,LAC组和HAC组显著低于模型组(P<0.05)。(2)造模前各组小鼠血清尿酸浓度无显著性差异,干预一周后与对照组相比,模型组和干预组血清尿酸浓度显著升高(P<0.05),除API组外各干预组血清尿酸浓度和模型组间均无显

关键词：高尿酸血症尿酸苹果多酚苹果多糖黄嘌呤氧化酶