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粗毛栓菌和蜡状芽孢杆菌及其共固定菌对Pb^(2+)的吸附

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应用生态学报 2012年第8期23卷 2212-2218页

作者：杨洲平陈平王振宇胡容靖德军黄乾明四川农业大学生命科学与理学院四川雅安625014 中国科学院沈阳应用生态研究所沈阳110016

将粗毛栓菌菌丝球与蜡状芽孢杆菌共固定为共固定菌.以粗毛栓菌菌丝球、蜡状芽孢杆菌和共固定菌为研究对象,测定不同吸附时间、初始pH、吸附剂浓度和Pb2+浓度对3种生物吸附剂吸附Pb2+的影响,并将3种生物吸附剂吸附Pb2+前后的红外吸收光... 详细信息

将粗毛栓菌菌丝球与蜡状芽孢杆菌共固定为共固定菌.以粗毛栓菌菌丝球、蜡状芽孢杆菌和共固定菌为研究对象,测定不同吸附时间、初始pH、吸附剂浓度和Pb2+浓度对3种生物吸附剂吸附Pb2+的影响,并将3种生物吸附剂吸附Pb2+前后的红外吸收光谱进行分析比较.结果表明:在吸附剂浓度为2g.L-1、pH为5.0、Pb2+浓度为50mg.L-1条件下对Pb2+吸附1h效果良好,其吸附率分别为71.7%、91.0%和96.9%.生物吸附剂红外光谱主要由蛋白质、碳水化合物和含硫、磷酸基团的吸收带组成,表明对Pb2+吸附起主要作用的官能团是羟基、羧基、磷酸基和含硫基团.

关键词：粗毛栓菌蜡状芽孢杆菌共固定生物吸附剂铅红外光谱

用cDNA微阵列技术快速筛选粗毛栓菌的表达基因(英文)

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生物化学与生物物理进展 2004年第4期31卷 356-360页

作者：孙迅江明锋李校张义正四川大学生命科学学院四川省分子生物学和生物技术重点实验室成都610064

利用cDNA微阵列技术快速筛选具有较强降解木质纤维素能力的白腐真菌粗毛栓菌 (Trametesgallica)的表达基因 .利用木质素生物降解模式菌株黄孢原毛平革菌 (Phanerochaetechrysosporium)的cDNA制备研究所用微阵列 .在含有2 5 96个cDNA片... 详细信息

利用cDNA微阵列技术快速筛选具有较强降解木质纤维素能力的白腐真菌粗毛栓菌 (Trametesgallica)的表达基因 .利用木质素生物降解模式菌株黄孢原毛平革菌 (Phanerochaetechrysosporium)的cDNA制备研究所用微阵列 .在含有2 5 96个cDNA片段的芯片上共检测到 172个阳性克隆 ,其中有 16 5个克隆的荧光信号比值 (Cy 5 /Cy 3)在 0 5和 2 0之间 ,占所检测阳性克隆数的 95 9% .对应于在限氮条件下生长 5天和 12天的粗毛栓菌培养物 ,分别有 3个和 4个时序特异性差异表达基因 .随机挑取 12 2个克隆进行测序和序列比对 ,发现所测序列中有 118个能够很好地定位于黄孢原毛平革菌的基因组上 .结果显示 ,粗毛栓菌与黄孢原毛平革菌在表达序列上存在较大差异 ,表明这两种真菌之间存在着较远的亲缘关系 .通过同源性比对分析 ,发现 2个令人感兴趣的克隆 ,一个对应于黄孢原毛平革菌过氧化物酶基因lpoB的部分片段 ,另一个为编码一种热激蛋白的基因 .

关键词： cDNA微阵列粗毛栓菌黄孢原毛平革菌同源性分析克隆

粗毛栓菌cDNA文库的构建和漆酶基因的表达分析

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中国生物化学与分子生物学报 2009年第6期25卷 528-533页

作者：张希根何川张义正四川大学生命科学学院四川省分子生物学与生物技术重点实验室成都610064

粗毛栓菌(Trametesgallica)能够分泌多种胞外氧化酶并且快速降解木质纤维素.为了快速高效分离鉴定粗毛栓菌木质纤维素降解酶相关基因,用Trizol试剂提取不同培养条件下粗毛栓菌总RNA,用CreatorTM SMARTTM cDNA Library Construction Kit... 详细信息

粗毛栓菌(Trametesgallica)能够分泌多种胞外氧化酶并且快速降解木质纤维素.为了快速高效分离鉴定粗毛栓菌木质纤维素降解酶相关基因,用Trizol试剂提取不同培养条件下粗毛栓菌总RNA,用CreatorTM SMARTTM cDNA Library Construction Kit和Advantage 2PCR Kit成功构建了该菌全长cDNA文库.原始文库滴度为1.5×105cfu,重组率达99%,插入片段在0.7～2.0kb之间,平均大小约1kb.随机取16个重组子进行测序,全长cDNA序列完整性率为85.7%;并筛选到1个漆酶基因,编码区长1551bp,预测的蛋白质由517个氨基酸残基组成,分子量为55.41kD,等电点为4.76.用半定量RT-PCR法分析了该漆酶基因在不同培养条件下的表达水平.结果显示,高浓度的碳源,氮源,Cu2+均能诱导此基因的表达,该结果为漆酶基因的表达调控机制的深入研究奠定了基础.

关键词：粗毛栓菌 cDNA文库漆酶基因表达反转录PCR分析

粗毛栓菌菌丝球非灭菌条件下对12种染料的脱色研究

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菌物学报 2012年第6期31卷 878-889页

作者：程子彰杨洲平胡容靖德军陈华萍四川农业大学生命科学与理学院四川雅安625014

以新型白腐真菌——粗毛栓菌Trametes gallica为材料,研究了优化后的该菌菌丝球在非灭菌条件下对直接染料、中性染料、三苯甲烷类染料以及蒽醌类染料共12种染料的脱色能力、脱色机制,以及pH、温度、染料初始浓度等参数对该菌菌丝球脱色... 详细信息

以新型白腐真菌——粗毛栓菌Trametes gallica为材料,研究了优化后的该菌菌丝球在非灭菌条件下对直接染料、中性染料、三苯甲烷类染料以及蒽醌类染料共12种染料的脱色能力、脱色机制,以及pH、温度、染料初始浓度等参数对该菌菌丝球脱色效果的影响。结果表明,优化条件下制备的粗毛栓菌菌丝球脱色活力良好,4℃下保存20d后仍保持有原脱色活力的95%;活菌丝球比死菌丝球对染料具有更强的耐受性和更好的脱色效果;非灭菌条件下活菌丝球对12种染料的适宜脱色条件为pH3.0–5.0、25℃、染料浓度为50mg/L、处理36–60h,该条件下粗毛栓菌菌丝球在60h内脱色率均在55%以上,其中粗毛栓菌菌丝球对亚甲基蓝脱色率最高可达到96.40%。紫外可见光谱分析和显微观察结果表明,48h内粗毛栓菌菌丝球在非灭菌条件下对12种染料的脱色是由吸附引起,无二次污染物的产生。粗毛栓菌的这些优良特性显示了其在工业染料废水处理中的广阔应用前景。

关键词：白腐真菌粗毛栓菌菌丝球染料废水生物脱色

粗毛栓菌(Trametes hirsuta)D2固态发酵山核桃蒲壳产漆酶的营养条件研究

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微生物学通报 2014年第10期41卷 1955-1960页

作者：杨柳吕丹丹邓杰勇曹焕英叶明合肥工业大学生物与食品工程学院安徽合肥230009

【目的】为提高漆酶产量,降低生产成本,以山核桃蒲壳作为基质,对粗毛栓菌D2固态发酵产漆酶的营养条件进行研究。【方法】对不同碳源、氮源、碳氮比、蒲壳含量对漆酶产量的影响进行分析。【结果】山核桃蒲壳是粗毛栓菌生长的良好载体,能... 详细信息

【目的】为提高漆酶产量,降低生产成本,以山核桃蒲壳作为基质,对粗毛栓菌D2固态发酵产漆酶的营养条件进行研究。【方法】对不同碳源、氮源、碳氮比、蒲壳含量对漆酶产量的影响进行分析。【结果】山核桃蒲壳是粗毛栓菌生长的良好载体,能够促进漆酶的合成。粗毛栓菌D2漆酶固态发酵培养基干物质组成为:山核桃蒲壳40%(质量比),玉米粉24%(质量比),菜籽饼粉36%(质量比)。发酵6 d时,漆酶活性为126.8 U/g干基。【结论】粗毛栓菌固态发酵山核桃蒲壳产漆酶具有效率高,生产成本低的优点,具有潜在的工业化应用前景。

关键词：粗毛栓菌固态发酵漆酶山核桃蒲壳

粗毛栓菌漆酶基因的克隆、序列分析及荧光定量PCR分析

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四川大学学报（自然科学版） 2014年第4期51卷 835-841页

作者：陈月红曹庆华邵欢欢张昆谭雪梅张义正四川大学生命科学学院、四川省分子生物学和生物技术重点实验室成都610064

本研究通过提取不同培养条件下的粗毛栓菌总RNA,利用RT-PCR的方法克隆到1个新的漆酶基因,命名为Tglac3,编码区长1,560bp,预测编码519个氨基酸残基,其分子量为56.6kDa,理论等电点为5.77.用荧光定量RT-PCR法分析了该漆酶基因在不同培养条... 详细信息

本研究通过提取不同培养条件下的粗毛栓菌总RNA,利用RT-PCR的方法克隆到1个新的漆酶基因,命名为Tglac3,编码区长1,560bp,预测编码519个氨基酸残基,其分子量为56.6kDa,理论等电点为5.77.用荧光定量RT-PCR法分析了该漆酶基因在不同培养条件下的表达水平,结果显示,高浓度的碳源和氮源均能诱导Tglac3基因的表达.

关键词：粗毛栓菌漆酶基因克隆荧光定量PCR

粗毛栓菌(Trametes gallic)基因启动子的分离与鉴定

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四川大学学报（自然科学版） 2002年第2期39卷 340-344页

作者：胡敏珊张义正曾凡亚四川大学生命科学学院成都610064

粗毛栓菌 (Trametesgallic)总DNA经Sau3AI酶切后插入到启动子探针型载体pSUPV8的BamHI位点 ,在含氨苄青霉素与潮霉素双抗平板上筛选到 8个潮霉素抗性(Hygr)重组子 (命名为 pTP1～ 8) ,其插入片段大小为 0 .5～ 1.7kb ,抗性水平为 0 .15... 详细信息

粗毛栓菌 (Trametesgallic)总DNA经Sau3AI酶切后插入到启动子探针型载体pSUPV8的BamHI位点 ,在含氨苄青霉素与潮霉素双抗平板上筛选到 8个潮霉素抗性(Hygr)重组子 (命名为 pTP1～ 8) ,其插入片段大小为 0 .5～ 1.7kb ,抗性水平为 0 .15× 10 - 3 ～0 .35× 10 - 3 g/mL .对 pTP6进行酶切分析表明 ,插入片段中含有KpnI ,XbaI和SacI位点各一个 ,用限制酶SacI和XbaI去掉其 5’端 0 .7kb和 1.2kb片段后 ,其潮霉素抗性由 0 .2 5×10 - 3 g/mL均降为 0 .15× 10 - 3 g/mL .将TP5片段与粗毛栓菌总DNA进行Southern杂交 ,结果证明 ,TP5片段来源于粗毛栓菌总DNA .对片段TP5的 3’端进行序列分析。

关键词：粗毛栓菌基因启动子 Hyg^r基因启动子探针型载体基因分基基因表达潮霉素抗性序列分析

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粗毛栓菌漆酶的分离纯化及部分性质研究

武汉大学学报（理学版） 2002年第2期48卷 209-212页

作者：朱陶赵永芳武汉大学生命科学学院湖北武汉430072

将一株自筛的粗毛栓菌（Trametes gallic Fr）接种在含有麦草粉的培养基中可获得较高产量的漆酶,此酶可以吸附到DEAE-纤维素上而被直接从发酵液中分离出来.采用DEAE-纤维素柱层析,用含有0.1-0.9mol/L NaCl的磷酸缓冲液（pH4.5）进行梯... 详细信息

将一株自筛的粗毛栓菌（Trametes gallic Fr）接种在含有麦草粉的培养基中可获得较高产量的漆酶,此酶可以吸附到DEAE-纤维素上而被直接从发酵液中分离出来.采用DEAE-纤维素柱层析,用含有0.1-0.9mol/L NaCl的磷酸缓冲液（pH4.5）进行梯度洗脱,可以获得较为纯化的漆酶,经研究,该菌株所产漆酶,以邻联甲苯胺为底物,最适pH值为4.0,最适反应温度40℃,Km为0.105 mmol/L.

关键词：分离纯化漆酶粗毛栓菌最适温度最适pH值白腐真菌 DEAE-纤维素柱层析酶活力

侧耳菌与粗毛栓菌在麦草培养基中产生木质纤维素降解酶的研究

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生物工程学报 2001年第5期17卷 575-578页

作者：谢君孙迅任路张义正四川大学生命科学学院分子生物学实验室成都610064

Pleurotus sp2 and Trametes gallica were selected in this assay because of their high activities of lignocellulolytic enzymes and the enzyme peaks appeared at the early stage of liquid state *** state fermentation was also investigated for their abilities and behaviors of enzyme\|*** capabilities and characteristics of the two strains in degrading biomass were *** \Pleurotus sp2\ was incubated in wheat straw powder containing the liquid medium of low\|nitrogen,no\|carbon and high inorganic salt,the activities of MnP and Lac reached the peaks on the tenth day,but the activities of hemicellulases reached the peak on the 40th day.\Pleurotus sp2\ caused 17.6 of biomass *** \*** was incubated in wheat straw powder containing the liquid medium of hlig\|nitrogen,or low\|nitrogen,no\|carbon and high inorganic salt,the activities of MnP reached the peaks on the tenth day,the lac and hemicelluloses on the 40th day,and the lignin peroxidases reached the peaks on the 50th day,and it caused more than 64% of biomass *** them the hemicellulose was degraded by 71.96%,and the cellulose 66.21%. ***% was very capable of degrading lignin of wheat straw and caused 34.37 loss during 20 days,46.71 loss during 30 days and 70.14% loss during 60 *** was interesting that \*** \degraded lignin preferentially with respect to cellulose,which was very beneficial to biopulping of paper industry.

关键词：侧耳菌粗毛栓菌木质纤维素降解酶生物质降解麦草培养基