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吉林农业大学学报 2011年第5期33卷 536-540,544页

作者：王新宇柳洪芳沈思捷韩铁军杨晓兵宋慧吉林农业大学生命科学学院长春130118 吉林农业大学食药用菌教育部工程研究中心长春130118 黑龙江省农垦科学院测试化验中心佳木斯154007 白求恩医科大学制药厂长春130012

采用热水浸提法提取小刺猴头液体深层发酵浸膏多糖,在液料比、提取时间和提取温度单因素试验的基础上,利用SAS 9.2(the SAS System for Windows 9.2)软件设计响应面,以多糖得率作为响应值,优化得最佳提取条件:液料比(mL/g)2.29∶1,提取... 详细信息

采用热水浸提法提取小刺猴头液体深层发酵浸膏多糖,在液料比、提取时间和提取温度单因素试验的基础上,利用SAS 9.2(the SAS System for Windows 9.2)软件设计响应面,以多糖得率作为响应值,优化得最佳提取条件:液料比(mL/g)2.29∶1,提取时间4.52 h,提取温度79.5℃,2次平行多糖得率12.28%。通过乙醇分级、脱蛋白、透析、过凝胶柱分离多糖,采用醋酸纤维素薄膜电泳、柱层析、紫外光谱及反复冻融鉴定为均一多糖。

关键词：小刺猴头液体深层发酵浸膏多糖热水浸提法响应面法醋酸纤维素薄膜电泳

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小刺猴头菌液体深层发酵浸膏多糖HFP及HFA的抗肿瘤活性

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中国生化药物杂志 2012年第1期33卷 20-22,26页

作者：苏玲李雨婷宋慧吕金超吉林农业大学生命科学学院吉林长春130118

目的对从小刺猴头菌液体深层发酵浸膏中提取的多糖HFP及HFA的抗肿瘤活性进行初步研究。方法 MTT法测定HFP和HFA对体外培养的人肝癌细胞SMMC7721、人肺腺癌细胞SPC-A-1和人胃癌细胞SGC7901的生长情况。预防性及治疗性给S180荷瘤小鼠灌服... 详细信息

目的对从小刺猴头菌液体深层发酵浸膏中提取的多糖HFP及HFA的抗肿瘤活性进行初步研究。方法 MTT法测定HFP和HFA对体外培养的人肝癌细胞SMMC7721、人肺腺癌细胞SPC-A-1和人胃癌细胞SGC7901的生长情况。预防性及治疗性给S180荷瘤小鼠灌服HFP和HFA,测定小鼠瘤重、体重、脾重及胸腺重,并计算抑瘤率、脾系数及胸腺系数。结果 HFP和HFA对体外培养的3种肿瘤细胞均表现出一定的抗肿瘤活性,但HFP的抑制作用好于HFA。HFP可抑制小鼠体内S180实体瘤的生长,且预防组的抑瘤率高于治疗组,HFP组的脾系数和胸腺系数明显高于CTX组。结论 HFP和HFA在体外及体内均具有一定的抗肿瘤活性,且HFP的作用好于HFA。

关键词：小刺猴头菌液体深层发酵浸膏多糖抗肿瘤活性

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小刺猴头菌液体深层发酵浸膏糖类物质药理学活性研究

小刺猴头菌液体深层发酵浸膏糖类物质药理学活性研究

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作者：苏玲吉林农业大学

学位级别：硕士

目的：本实验选取小刺猴头菌液体深层发酵浸膏为实验原料，经热水提取，乙醇沉淀得到小刺猴头菌大分子糖组分(HFP)及小分子糖组分(HFA)，并进行了抗肿瘤、升白、抗氧化及抑菌等药理学活性的初步研究，为更全面、更深入地认识和合理开发... 详细信息

目的：本实验选取小刺猴头菌液体深层发酵浸膏为实验原料，经热水提取，乙醇沉淀得到小刺猴头菌大分子糖组分(HFP)及小分子糖组分(HFA)，并进行了抗肿瘤、升白、抗氧化及抑菌等药理学活性的初步研究，为更全面、更深入地认识和合理开发小刺猴头菌这一我省特色珍稀药用真菌资源奠定基础。方法：1．体外抗肿瘤试验：采用体外细胞培养的方法，通过MTT法观察不同浓度的HFP和HFA对人肝癌细胞SMMC7721、人肺腺癌细胞SPC-a-1、人胃癌细胞SGC7901等三种肿瘤细胞株增殖活性的影响，以分析HFP和HFA的抗肿瘤活性。 2．体内抗肿瘤试验：通过建立小鼠移植性S180实体瘤模型，观察HFP的抑瘤率以及对体重变化情况、脾系数和胸腺系数的影响。 ***和HFA的抗氧化活性的研究：采用铁氰化钾一三氯乙酸法测定总还原力，邻苯三酚法测定超氧阴离子自由基清除率，Fe／HO法测定羟基自由基清除率。观察HFP和HFA的总还原能力、清除超氧阴离子自由基和羟基自由基的能力。 4．通过建立小鼠白细胞减少模型，观察HFP对由CTX所致白细胞减少的小鼠的外周血白细胞数、骨髓有核细胞数以及小鼠脾系数和胸腺系数的影响。 5．通过对腹泻小鼠致病菌的分离，观察HFP对体外生长的肠道菌生长活性的影响。结果：1．体外抗肿瘤实验：HFP和HFA对体外培养的人肝癌细胞SMMC7721、人肺腺癌细胞SPC-a-1和人胃癌细胞SGC7901均表现出一定的抗肿瘤活性，但其抑制活性受细胞种类、给药剂量、作用时间等因素影响。二者对人肺腺癌细胞SPC-a-1的最大抑制率高于人胃癌细胞SGC7901和人肝癌细胞SMMC7721;对于同一种肿瘤细胞;高给药剂量的抑瘤作用优于低给药剂量;长时间给药略优于短时间给药。 2．体内抗肿瘤实验：HFP可抑制小鼠体内S180实体瘤的生长，且预防组的抑瘤率高于治疗组，高剂量组的抑瘤效果好于低剂量组。并且HFP组的脾系数和胸腺系数明显高于CTX组。 3．抗氧化实验：HFP和HFA均有一定的体外抗氧化活性，且相同浓度下，HFP的抗氧化作用优于HFA。 ***对CTX所致的白细胞减少有拮抗作用，同时可缓解CTX造成的骨髓有核细胞数下降，及脾和胸腺受到的抑制。但HFP单独使用的效果不如多种不同来源的多糖(强力康颗粒)共同作用。 5．比浊法的结果证实：HFP可抑制大肠杆菌体外生长，进一步对其MIC的测定结果为40mg／ml。以上实验结果表明：小刺猴头菌液体深层发酵浸膏具有广泛的药理学活性，其有效成分为糖类物质，并且大分子糖组分表现出的生物学活性好与小分子糖组分。

关键词：小刺猴头菌液体深层发酵浸膏药理活性

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小刺猴头液体深层发酵浸膏多糖的生物活性研究

小刺猴头液体深层发酵浸膏多糖的生物活性研究

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作者：王雪吉林农业大学

学位级别：硕士

小刺猴头菌[H. caput-medusae (Bun.:Fr) Pers]是一种营养十分丰富的食药用真菌,它含有大量的蛋白质、粗脂肪、灰分、人体必需的矿质元素、糖类物质、有机酸、生物碱、甾类物质以及各种氨基酸。作为长白山自然保护区特有的菌物资源,小... 详细信息

小刺猴头菌[H. caput-medusae (Bun.:Fr) Pers]是一种营养十分丰富的食药用真菌,它含有大量的蛋白质、粗脂肪、灰分、人体必需的矿质元素、糖类物质、有机酸、生物碱、甾类物质以及各种氨基酸。作为长白山自然保护区特有的菌物资源,小刺猴头菌具有良好的药理学作用,但是主要研究集中在抗胃溃疡、治疗胃病方面,对于其多糖物质的活性研究则报道较少。本研究旨在探索小刺猴头菌中多糖的生物活性,为小刺猴头菌多糖的开发应用提供实验依据和理论基础。本研究采用水提醇沉法,从小刺猴头液体深层发酵浸膏中得到三种不同乙醇浓度提取出的多糖组分HP1, HP2, HP3。利用MTT法检测三种组分对人宫颈癌Hela细胞活性的影响,最终选取对肿瘤细胞作用最明显的HP2组分。检测其糖含量并利用火焰原子吸收方法对矿质元素含量进行测定。接着对其各方面活性进行研究：1、抗肿瘤活性：采用MTT检测、明胶酶谱检测以及细胞周期的检测,研究HP2组分对人宫颈癌Hela细胞的活性、明胶酶的分泌及细胞周期的影响。2、药物佐剂：将HP2组分与5-氟尿嘧啶联合使用,经MTT方法和流式细胞术检测其对肿瘤细胞活性和周期的影响,探讨HP2组分作为5-氟尿嘧啶药物佐剂的可行性。3、提高免疫力：采用环磷酰胺腹腔注射小鼠,建立小鼠免疫力低下模型后,给予HP2多糖,应用淋巴细胞转化及碳廓清实验研究HP2对免疫力低下小鼠的恢复作用。4、抗氧化活性：建立体外过氧化氢损伤的PK细胞模型,给予HP2多糖,检测其对PK细胞的保护作用。建立小鼠体内免疫力下降模型,检测HP2多糖作用后小鼠肝脏和血清中超氧化物歧化酶SOD和丙二醛MDA水平的变化。实验结果：1、HP2(60%乙醇终浓度提取出的小刺猴头多糖)对肿瘤细胞抑制能力最好,定性为多糖组分,总糖含量为83%,矿质元素含量分别为Cu 0.01%, Pb 0%, Zn0.07%, Fe 1.99%, Ca 10.21%, Mg 0.44%。2、HP2对人宫颈癌Hela细胞的生长具有抑制作用,并且其抑制效果呈现剂量依赖性;能够下调Hela细胞中MMP2含量,对MMP9的作用不明显;HP2能够将Hela细胞阻滞在Go/G1期,作用效果与药物浓度高低呈正比。3、HP2与5-氟尿嘧啶(5-Fu)联合使用对Hela细胞有明显的抑制作用;联合用药比单独使用5-Fu抑制率更显著,提示HP2促进了5-Fu的抑制作用。4、HP2可以增强环磷酰胺致免疫力下降小鼠的淋巴细胞转换效率;提高免疫力下降小鼠碳廓清和吞噬指数;能够使小鼠胸腺和脾脏指数增加,肝脏和肾脏指数下降。5、HP2对H202导致的PK细胞损伤具有修复作用,其作用效果与多糖含量成正比;HP2作用下小鼠MDA水平下降,SOD水平上升。综上所述,小刺猴头菌液体深层发酵浸膏多糖具有良好的生物学活性,有进一步研究的空间和价值。

关键词：小刺猴头液体深层发酵浸膏生物活性多糖

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小刺猴头多糖联合5-氟尿嘧啶对Hela细胞的抑制作用

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中国生化药物杂志 2012年第5期33卷 625-628页

作者：王雪宋慧刘小腊苏玲姚旭吉林农业大学生命科学学院吉林长春130118 大连珍奥药业有限公司辽宁大连116620 食药用菌教育部工程研究中心吉林长春130118

目的研究体外单独应用小刺猴头菌多糖及联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用。方法水提醇沉法得到小刺猴头液体深层发酵浸膏多个糖组分,经MTT筛选获得小刺猴头菌多糖最优组分Hep2。设置空白、Hep2、Hep2+5-Fu、5-Fu组进... 详细信息

目的研究体外单独应用小刺猴头菌多糖及联合5-氟尿嘧啶(5-Fu)对宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用。方法水提醇沉法得到小刺猴头液体深层发酵浸膏多个糖组分,经MTT筛选获得小刺猴头菌多糖最优组分Hep2。设置空白、Hep2、Hep2+5-Fu、5-Fu组进行MTT实验及细胞周期检测。结果 Hep2单独给药及联合给药都能抑制Hela细胞增殖;Hep2组出现G1期阻滞现象;联合给药组发生了S期和G2/M期阻滞。结论 Hep2可以明显抑制Hela细胞的增殖,并且与5-Fu联合使用对Hela细胞产生协同抑制作用。

关键词：小刺猴头多糖液体深层发酵浸膏 5-氟尿嘧啶细胞周期

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