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大鼠脑内大分子物质的引流通路及方法学研究

神经解剖学杂志 2004年第6期20卷 618-624页

作者：李育娴陈连璧夏作理杨明峰王新成李修彬山东大学医学院生理学研究所济南250012 泰山医学院脑微循环研究所泰安271000 泰山医学院形态学实验室

为探讨脑内大分子物质的引流通路,本研究微量注射示踪剂墨汁到大鼠右侧尾壳核,Ⅰ组动物使用传统的脑内注射方法,Ⅱ组动物采取改良方法防止示踪剂从进针处进入蛛网膜下腔,术后1、3、7、14、21 d处死动物,分别用肉眼、光镜及电镜观察墨汁... 详细信息

为探讨脑内大分子物质的引流通路,本研究微量注射示踪剂墨汁到大鼠右侧尾壳核,Ⅰ组动物使用传统的脑内注射方法,Ⅱ组动物采取改良方法防止示踪剂从进针处进入蛛网膜下腔,术后1、3、7、14、21 d处死动物,分别用肉眼、光镜及电镜观察墨汁在脑内、蛛网膜下腔、颈总动脉及颈部淋巴结的分布。结果显示:墨汁在两组动物脑实质内的分布趋势相同,即在白质内沿神经纤维弥漫性分布,7 d后在灰质内选择性地沿血管周围间隙分布,部分碳颗粒被管周细胞和巨噬细胞吞噬;Ⅱ组动物中观察到墨汁从大脑顶部进入蛛网膜下腔后沿其中的血管周围间隙分布并引流到脑的底部和嗅球及筛板区域,在耳蜗、前庭蜗神经和视神经等的脑神经鞘以及颈总动脉壁和颈部淋巴结有碳颗粒沉积;Ⅰ组动物没有这种分布。以上结果表明,大鼠脑实质内的大分子物质在白质和灰质中的引流方式不同;进入脑脊液的大分子物质可由颈部淋巴系统引流;墨汁不是很好的研究脑实质内大分子物质引流的示踪剂。

关键词：大鼠脑大分子物质血管周围间隙淋巴系统蛛网膜下腔

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食品原料中水溶性和成膜性较好的大分子物质

食品科技 2006年第6期31卷 24-28页

作者：刘树兴陈金伟田斌陕西科技大学生命科学与工程学院咸阳712081

爽口片是近几年来才发展起来的一个非常环保方便的口香糖替代品。对于爽口片,水溶性和成膜性是其成膜材料的两个最重要的特点,针对这两个特点,对食品原料中水溶性和成膜性较好的大分子物质作了较为全面的阐述。

关键词：水溶性成膜性大分子物质爽口片

白细胞减少降低缺血-再灌注损伤时微血管内大分子物质清除率

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国际骨科学杂志 1991年第1期 55-56页

作者：何健安

缺血-再灌注损伤机理尚不清楚。在评价白细胞对缺血性损伤的作用时,微血管内大分子物质的清除率可作为微血管损伤的定量指数。本研究以大鼠提睾肌为实验模型,选用雄性大鼠,苯巴比妥钠麻醉后,按Boric方法游离提睾肌,备作活体显微镜检查... 详细信息

缺血-再灌注损伤机理尚不清楚。在评价白细胞对缺血性损伤的作用时,微血管内大分子物质的清除率可作为微血管损伤的定量指数。本研究以大鼠提睾肌为实验模型,选用雄性大鼠,苯巴比妥钠麻醉后,按Boric方法游离提睾肌,备作活体显微镜检查。手术准备完毕

关键词：清除率大分子物质白细胞减少再灌注损伤微血管

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疾病状态下血脑屏障对大分子物质的转运途径

中风与神经疾病杂志 2006年第1期23卷 119-121页

作者：郭芮兵朱武生刘新峰南京大学医学院临床学院南京军区南京总医院神经内科江苏南京210002

血脑屏障是一个弥散屏障,大多数化合物难以透过此屏障从血液流向大脑,它的血管内皮细胞与机体其它部位不同,是无窗孔的血管内皮细胞,细胞间有更广泛的紧密连接,其胞饮小泡转运活性弱。内皮细胞间的紧密连接限制亲水分子从胞间空隙穿过... 详细信息

血脑屏障是一个弥散屏障,大多数化合物难以透过此屏障从血液流向大脑,它的血管内皮细胞与机体其它部位不同,是无窗孔的血管内皮细胞,细胞间有更广泛的紧密连接,其胞饮小泡转运活性弱。内皮细胞间的紧密连接限制亲水分子从胞间空隙穿过血脑屏障流入。然而,小的脂溶性分子如O2和CO2却能顺着浓度梯度自由穿过内皮细胞膜。较大分子量的营养物质包括葡萄糖和氨基酸通过载体转运入脑,而包括胰岛素、肝素和转铁蛋白在内的大分子的摄取通过受体介导的入胞作用调节。[第一段]

关键词：大分子物质血脑屏障转运途径疾病状态血管内皮细胞紧密连接转运活性胞饮小泡

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辛硫磷对扁藻三种大分子物质合成动态的影响

海洋通报 1999年第1期18卷 93-96页

作者：唐学玺李岿然李永祺青岛海洋大学海洋生命学院青岛266003

本文报道有机磷农药——辛硫磷对扁藻的蛋白质与核酸合成动态的影响.结果表明,低浓度的辛硫磷(0.6mg/L)在抑制藻细胞生长的同时,核酸与蛋白质的合成速度也相应地降低,这说明藻细胞的生长状况与其三种大分子物质——蛋白质、DNA和RNA的... 详细信息

本文报道有机磷农药——辛硫磷对扁藻的蛋白质与核酸合成动态的影响.结果表明,低浓度的辛硫磷(0.6mg/L)在抑制藻细胞生长的同时,核酸与蛋白质的合成速度也相应地降低,这说明藻细胞的生长状况与其三种大分子物质——蛋白质、DNA和RNA的合成速度有关.

关键词：辛硫磷蛋白质核酸扁藻大分子物质

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大分子物质对中药注射剂外观颜色的影响

中医药导报 2018年第23期24卷 43-48页

作者：李月段金连白雯殷华段为钢云南中医学院分子生物学实验室云南昆明650500

目的:探究大分子物质对中药注射剂外观颜色的影响。方法:取清开灵、双黄连、丹参和灯盏细辛4种中药注射液,用3、10、30 k超滤管截留制备去大分子注射液和富含大分子注射液,用Tecan酶标仪扫描紫外-可见吸收曲线,分析曲线下面积的变化;用H... 详细信息

目的:探究大分子物质对中药注射剂外观颜色的影响。方法:取清开灵、双黄连、丹参和灯盏细辛4种中药注射液,用3、10、30 k超滤管截留制备去大分子注射液和富含大分子注射液,用Tecan酶标仪扫描紫外-可见吸收曲线,分析曲线下面积的变化;用HPLC法检测并分析10 k去大分子液的指纹图谱变化,用冷冻干燥法检测固体物含量。然后用10 k分子筛过滤4种注射液,反复洗涤截留液获得大分子物质。最后用焦性没食子酸和鞣酸模拟中药注射剂变色过程。结果:4种注射液用不同超滤管超滤后,去大分子液的颜色明显变浅,吸收曲线下面积变小,且截留分子量越小,去大分子液的吸收曲线下面积也越小;富含大分子部分的颜色则明显变深,曲线下面积增大;10 k去大分子液的指纹图谱与原液相似,指纹图谱总峰面积变化较小,固体物含量波动在5%以内;焦性没食子酸和鞣酸溶液变色后去除大分子物质,颜色也明显变浅。结论:大分子物质是中药注射剂有色物质的重要来源,去除大分子物质可改善中药注射液外观质量。

关键词：中药注射剂颜色性状大分子物质吸收光谱曲线下面积指纹图谱

蛛网膜下腔出血大鼠脑内大分子物质淋巴引流途径的研究和吡多醇的影响

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蛛网膜下腔出血大鼠脑内大分子物质淋巴引流途径的研究和吡多醇的...

作者：贾莉泰山医学院

学位级别：硕士

研究背景: 近年来,随着对脑动脉瘤闭塞手术治疗的广泛开展,蛛网膜下腔出血(SAH)后再出血的发生率已经明显降低,然而SAH的高病死率和高致残率并没有得到总体改善。研究发现,继发性脑缺血是造成SAH患者不良预后的主要并发症。因此,深入理... 详细信息

研究背景: 近年来,随着对脑动脉瘤闭塞手术治疗的广泛开展,蛛网膜下腔出血(SAH)后再出血的发生率已经明显降低,然而SAH的高病死率和高致残率并没有得到总体改善。研究发现,继发性脑缺血是造成SAH患者不良预后的主要并发症。因此,深入理解继发性脑缺血的机制并寻求有效的防治措施是改善SAH总体预后的关键性环节。SAH后发生的脑部主要动脉血管的痉挛即脑血管痉挛(CVS)并不能完全解释继发性脑缺血及其所致的神经功能损害和残障。SAH时颅内压急剧升高、微循环异常等均是不可忽略的重要因素。当继发性脑缺血发生后,血脑屏障受损、细胞损伤等多种因素可导致脑组织中大量蛋白及其它大分子物质蓄积而进一步加重脑损伤。在脑内大分子物质的清除机制中,淋巴引流途径长期被忽视,亟待深入研究。已有研究发现,脑缺血发生后,缺氧可刺激脑内血管内皮生长因子(VEGF)和血小板内皮细胞粘附因子-1 (PECAM-1)的表达升高,代偿性的引起脑内新生血管密度增加。临床研究和动物实验均发现,大剂量吡多醇对淋巴滞留性脑水肿有治疗作用,然而其作用机制尚不明了。研究目的: 1.探讨SAH后大鼠脑实质大分子物质的淋巴引流途径变化,以及吡多醇对该途径的影响。 2.探讨SAH对大鼠脑脊液(CSF)大分子物质淋巴引流途径的影响,以及吡多醇的作用。 3.从脑血管新生的角度,探讨脑淋巴引流途径阻断(CLB)对大鼠SAH后继发性脑缺血损伤的影响,以及吡多醇对CLB后SAH大鼠继发性脑缺血损伤的作用。研究方法: 1.实验选用健康成年雄性Wistar大鼠,采用枕大池内新鲜自体动脉血二次注入法建立大鼠SAH模型,用颈淋巴管结扎和颈淋巴结摘除法制作大鼠CLB模型,将动物分为生理盐水组、对照组、SAH组、SAH+CLB组和吡多醇组。应用改良的脑实质微量注射技术和荧光蛋白示踪技术,将伊文思兰标记的白蛋白(EBA)注入大鼠左侧尾壳核。于注射后0.5、1、2、3、5d处死动物,分别用肉眼和荧光显微镜观察并比较各实验组不同时间点EBA在脑实质、蛛网膜下腔(SAS)、嗅球、颈总动脉壁、颈部淋巴结和腹主动脉旁淋巴结等部位的分布。生理盐水组尾壳核注射同剂量的生理盐水代替EBA,用于观察上述组织有无自发荧光现象。 2.采用颈淋巴管结扎和颈淋巴结摘除法制作大鼠CLB模型,用枕大池内新鲜自体动脉血二次注入法建立大鼠SAH模型,将动物分为对照组(又分为非CLB组和CLB组)、SAH组(又分为SAH非CLB组和SAH+CLB组)和吡多醇组。将100μg 125I标记的人血清白蛋白(125I-HSA, CSF示踪剂)注入大鼠左侧脑室,在24h内连续取动脉血样,并检测血浆中CSF示踪剂的浓度,绘制浓度-时间曲线,计算出CSF示踪剂转运至血浆的相对量[浓度-时间曲线下面积(AUC)]和转运速率[转运速率常数(Ka)]等药代动力学参数,推算并比较各组大鼠CSF示踪剂经淋巴引流途径清除的AUC和Ka。 3.采用枕大池内新鲜自体动脉血二次注入法建立大鼠SAH模型,用颈淋巴管结扎和颈淋巴结摘除法制作大鼠CLB模型,将动物分为对照组、SAH组、SAH+CLB组和吡多醇组。观察各组动物SAH术后行为变化;各组于诱导SAH后3d处死动物(对照组直接处死),取脑组织标本,制备新鲜脑组织冠状冰冻切片,用荧光免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)和血小板内皮细胞粘附因子-1(PECAM-1)在脑内的表达,并在荧光显微镜下计数脑内新生血管密度。研究结果: 1.对照组于左侧尾壳核注射EBA后1d、SAH组于3d、SAH+CLB组于5d、吡多醇组于3d时,脑冠状切片上可见荧光最强的部位为左侧脑尾壳核,荧光信号可沿左侧胼胝体呈弥漫性分布,并不同程度到达对侧。双侧脑室脉络丛及室管膜周围可见荧光信号,以左侧较强。左侧尾壳核、大脑皮层和SAS内的血管周围有强荧光聚集。大脑及嗅球表面的SAS内也可见荧光信号。双侧颈总动脉壁的内膜、中膜和外膜内均有较强荧光分布,红色荧光可显示出中膜层波浪形的弹性膜,且在外膜中也可见到较密集的红色荧光颗粒。双侧颈部淋巴结和腹主动脉旁淋巴结内可见红色点状荧光信号,主要沿淋巴窦分布,且颈部淋巴结内荧光信号明显强于同时间点腹主动脉旁淋巴结内荧光信号。与对照组相比,SAH后脑内EBA引流至嗅球、颈部淋巴结和腹主动脉旁淋巴结的量均减少且速度减慢。与SAH+CLB组相比,应用吡多醇后脑内EBA引流至嗅球及腹主动脉旁淋巴结的量明显增多且速度加快。 2.对照组大鼠CSF示踪剂经淋巴引流途径清除的AUC和Ka分别占CSF示踪剂经蛛网膜绒毛和淋巴引流两条途径清除的AUC和Ka的71.53%和58.18%;SAH组大鼠CSF示踪剂经淋巴引流途径清除的AUC和Ka分别占CSF示踪剂经蛛网膜绒毛和淋巴引流两条途径清除的AUC和Ka的59.97%和46.1

关键词：蛛网膜下腔出血脑实质脑脊液大分子物质淋巴引流途径脑淋巴引流阻断继发性脑缺血血管新生吡多醇大鼠

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中药注射剂大分子物质及细胞毒性检查

中药注射剂大分子物质及细胞毒性检查

作者：刘清成云南中医学院

学位级别：硕士

目的:以四种中药注射剂(清开灵、双黄连、丹参、灯盏细辛)为研究对象,建立检查其中多糖、树脂等大分子物质的方法,同时检查注射剂中蛋白质、鞣质等大分子物质,并检查其细胞毒性,证实中药注射剂通过分子筛处理后能有效减少大分子物质含量... 详细信息

目的:以四种中药注射剂(清开灵、双黄连、丹参、灯盏细辛)为研究对象,建立检查其中多糖、树脂等大分子物质的方法,同时检查注射剂中蛋白质、鞣质等大分子物质,并检查其细胞毒性,证实中药注射剂通过分子筛处理后能有效减少大分子物质含量,减少细胞毒性。方法:(1)利用多糖等物质能与苯胺蓝结合使其发生特异性褪色反应的原理,用比色法来检查中药注射剂中多糖。(2)参照《中华人民共和国药典》中树脂检查方法,并加以优化,运用不同孔径分子筛,将中药注射剂分离成富含大分子组和去大分子组,然后使用富含大分子液进行树脂检查。(3)课题组前期建立的蛋白质和鞣质检查方法检查注射液中大分子物质,并用经分子筛处理后的注射液验证。(4)用CCK-8法检查经分子筛处理后的注射液对细胞的毒性并与原液和富含大分子液对比。结果:(1)苯胺蓝褪色法不能准确测量出中药注射剂中多糖物质含量,但是能间接地反映出多糖和蛋白质物质的多少,这可以为中药注射剂安全性提高提供一定参考,经分子筛去大分子后,这些大分子物质明显减少。(2)对《中华人民共和国药典》中树脂检查方法进行优化后,建立了富集法检查中药注射剂中树脂的方法,用此方法在中药注射液中检查到微量树脂的存在,经分子筛去大分子后,这些树脂物质明显减少。(3)用经不同孔径分子筛处理后的注射液的滤液,验证了中药注射剂经分子筛去大分子物质后,蛋白质、缩合鞣质的量明显减少。(4)富含大分子的注射液对细胞的毒性比去大分子和原液的高,证明去大分子注射液的细胞毒性改善。结论:中药注射剂经分子筛处理后,大分子杂质明显减少,细胞毒性降低,表明去大分子中药注射剂安全性得到提高。

关键词：中药注射剂分子筛大分子物质检查方法细胞毒性

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微粒化大分子物质对冻干草莓质地形成的影响

微粒化大分子物质对冻干草莓质地形成的影响

作者：郭嘉江苏大学

学位级别：硕士

质地是果蔬干制品重要的品质评价指标,也是影响消费者感官感受的重要因素。质地形成受到干燥过程和物料本身组织结构的影响,而改变果蔬组织细胞基质成分是调控果蔬干制品质地的有效方式,目前已有许多研究运用小分子糖改变细胞基质构成... 详细信息

质地是果蔬干制品重要的品质评价指标,也是影响消费者感官感受的重要因素。质地形成受到干燥过程和物料本身组织结构的影响,而改变果蔬组织细胞基质成分是调控果蔬干制品质地的有效方式,目前已有许多研究运用小分子糖改变细胞基质构成用来改善果蔬干制品质地品质,但大分子基质在此方面应用较少。本文选取四种果蔬细胞中的大分子物质:阿拉伯木聚糖(AX)、蛋白质(WP)、淀粉(PS)及果胶(PE),利用高压微射流(dynamic high pressure microfluidization,DHPM)将其微粒化,对比微粒化前后各大分子物质的基本性质及结构变化,并将大分子物质微粒通过真空浸渍添加至冻干草莓片中,分析干燥过程中草莓片微观结构、水分迁移、质地特性等变化规律,探明不同大分子物质对冻干草莓片质地形成的影响机制及影响因素。主要内容如下:(1)利用DHPM对四种大分子物质进行均质处理,通过对处理前后的大分子物质的粒径、扫描电镜(SEM)、X-射线衍射(XRD)、紫外吸收光谱、傅里叶红外光谱(FT-IR)以及表观粘度测定,研究DHPM对大分子物质基本性质和结构的影响,结果发现:DHPM处理后AX、WP、PS、PE粒径均减小,平均粒径分别减小了79%、31%、68%、63%,大分子颗粒表面在剪切力作用下受到了不同程度的剪切和破碎,AX和PS的表观粘度增加,WP和PE则减少;FT-IR和XRD结果发现剪切处理使部分吸收峰发生红移,AX、PS、PE在O-H氢键缔合伸缩振动特征吸收峰峰宽增加,WP二级结构α-螺旋消失,β-折叠含量减少,并破坏了WP、PS、PE的原有晶体结构,结晶度下降;(2)真空浸渍大分子物质微粒于冻干草莓片中,分析再次冷冻干燥前(BD)、中(DD)、后(AD)样品的微观结构、水分迁移以及力学特性的变化规律,结果表明:添加的大分子物质微粒促使草莓片细胞壁增厚,细胞发生不同程度的收缩或膨胀;随着冷冻干燥过程的进行,细胞面积和直径逐渐变大,变异系数和分形维数也呈现增加趋势,且AX组细胞破碎较严重,PE组细胞完整度高、细胞壁最厚;大分子物质微粒使冻干过程中草莓片水分散失减缓,且弹性模量、硬度、总功增大,弹性减小,整个干燥过程中草莓片质地的形成主要发生在干燥后期;(3)研究添加大分子物质微粒后,草莓脆片的大分子物质干基增加量、微观结构、孔隙度以及质地特性变化差异,结果发现:大分子物质在草莓脆片中的干基增加量为AX>WP>PE>PS(P大分子物质微粒多聚集在细胞间隙,促使细胞结构更致密,细胞均匀度下降,PE组草莓细胞壁最厚,表现出整齐的框架结构;添加大分子物质微粒使草莓片破裂距离基本呈显著下降趋势(P大分子微粒能够提高草莓脆片的质地品质,其中添加PE组质地品质最好,PC得分和综合得分均最高;通过各组得分和各指标载荷对比分析发现,AX与样品孔隙大小相关,WP与样品硬度相关,PS与样品孔隙数量相关,PE与样品的孔隙规则度及脆性相关。

关键词：草莓高压微射流大分子物质微观结构质地