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基因分型技术对1例PNH患者抗-C同种抗体合并抗-f类同种自身抗体的辅助鉴定

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中国实验血液学杂志 2020年第5期28卷 1740-1745页

作者：孔永奎杨乾坤蔡晓红宋婕邵明王静王莉吕先萍郑州大学第一附属医院输血科河南郑州450052 上海交通大学医学院附属瑞金医院输血科上海200025

目的:通过基因分型对1例有输血史的PNH患者疑难抗体进行鉴定。方法:采用卡式凝胶法检测患者RH分型,谱细胞鉴定PNH患者抗体特异性。在血清学鉴定困难的情况下,利用基因分型的方法排除RH无关表型,利用不同的RH表型细胞分别吸收放散后进行... 详细信息

目的:通过基因分型对1例有输血史的PNH患者疑难抗体进行鉴定。方法:采用卡式凝胶法检测患者RH分型,谱细胞鉴定PNH患者抗体特异性。在血清学鉴定困难的情况下,利用基因分型的方法排除RH无关表型,利用不同的RH表型细胞分别吸收放散后进行抗体鉴定,不同的RH表型细胞组合排除其它无关抗体。结果:卡式凝胶法鉴定显示RH分型C抗原存在双群,其它抗原阳性,分别进行RHD合子型鉴定、RHD和RHCE基因测序分析。结果显示,RHD基因型为纯合子RHD/RHD,RHCE基因未发现c.122A>G突变,排除携带有Cw抗原;RHCE第1外显子48G,第5外显子存在676碱基G/C杂合,第2-4、6-10外显子没有发生突变,第4内含子发现一个新的突变IVS4+29A>C。因此可以判断出RH血型基因型为Dce/DcE,其表型应该为ccDEe。结合不同的RH表型细胞吸收放散实验最终确定患者血清中含有抗-C同种抗体合并罕见的抗-f类同种自身抗体,最后选择配血相合的AB型ccDEE的红细胞输注给患者,未出现输血不良反应。结论:基因分型可以辅助用于患者血清中疑难抗体的鉴定,从而减少患者输血风险。

关键词：抗体筛查基因分型基因测序 RHD基因 RHCE基因同种抗体自身抗体

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MNS血型系统同种抗体70例临床特征分析

中华医学杂志 2013年第8期93卷 592-593页

作者：吴擘颋姚顶根戎瑞明复旦大学附属中山医院输血科上海200032 上海市器官移植重点实验室

目的评价MNS血型系统同种抗体在我国医疗机构住院患者中的发生频率与临床意义。方法回顾性分析2009年8月至2012年7月复旦大学附属中山医院输血科检出的MNS血型系统同种抗体的特异性及临床特征。结果66042例住院患者中检出187例同种不规... 详细信息

目的评价MNS血型系统同种抗体在我国医疗机构住院患者中的发生频率与临床意义。方法回顾性分析2009年8月至2012年7月复旦大学附属中山医院输血科检出的MNS血型系统同种抗体的特异性及临床特征。结果66042例住院患者中检出187例同种不规则抗体（0．28％），其中MNS血型系统同种抗体70例（37．4％），按特异性依次为抗-M（34例，18．2％）、抗-Mia（34例，18．2％）、抗-S（2例，1．1％）。抗-Mia多见于有输血史者（16／34比5／34，P=0．004），并较易合并其他同种抗体。结论MNS血型系统同种抗体临床检出率仅次于Rh血型系统，其中抗-Mia是我国南方人群中莺要的输血相关抗体。

关键词：同种抗体 MNSs血型系统抗-Mia

重组表达糖蛋白GPIIIa片段偶联荧光微球分析人血小板抗原-1系统同种抗体

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中国实验血液学杂志 2015年第5期23卷 1386-1390页

作者：许先国刘瑛陈舒洪小珍陶苏丹马开荣蓝小飞何吉朱发明吕杭军浙江省血液中心输血研究所卫生部血液安全研究重点实验室浙江杭州310006

目的:应用偶联血小板GPIIIa重组表达片段的Luminex xMAP荧光微球,检测血小板抗HPA-1a和-1b抗体。方法:以倍比稀释成12个浓度(原液~1/2048)的抗HPA-1a WHO国际标准品,比较MAIPA和Luminex xMAP技术检测抗HPA-1a的灵敏度。以8份抗HPA-1a/b... 详细信息

目的:应用偶联血小板GPIIIa重组表达片段的Luminex xMAP荧光微球,检测血小板抗HPA-1a和-1b抗体。方法:以倍比稀释成12个浓度(原液~1/2048)的抗HPA-1a WHO国际标准品,比较MAIPA和Luminex xMAP技术检测抗HPA-1a的灵敏度。以8份抗HPA-1a/b阴、阳性对照,36份WHO血小板抗体质控盲样,评估流式荧光微球技术检测抗HPA-1a和-1b的特异性。结果:MAIPA检测抗HPA-1a的灵敏度为滴度1/64(抗体浓度1.56 IU/ml),流式荧光微球检测的灵敏度远高于滴度1/2048(抗体浓度0.049 IU/ml)。微球分析法能特异性鉴别抗HPA-1a和-1b阴、阳性对照。36份盲样中,有1份样本,在高浓度对偶抗体的影响下,产生抗HPA-1b假阳性结果。其余样本的微球分析结果与预期结果相符,能准确检出抗HPA-1a和-1b抗体,而且与HLA和ABO抗体以及其它的血小板抗体(包括抗HPA-3b、-5b、-15b、-GPIb/IX和非HPA-1特异性的抗-GPIIb/IIIa)未发生交叉反应。结论:基于重组偶联血小板GPIIIa的流式荧光微球技术可灵敏、特异性检测血小板HPA-1系统抗体,适合于临床免疫性血小板减少症患者的抗体特异性鉴定。

关键词：人类血小板抗原同种抗体 GPIIIa片段 MAIPA 荧光微球技术

血友病A患者血浆抗因子Ⅷ同种抗体的检测及其与因子ⅧC区的关系

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中国实验血液学杂志 2013年第5期21卷 1211-1214页

作者：张露璐余自强万楚成张威章正华阮长耿湖北医药学院附属太和医院血液内科湖北十堰442000 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室江苏苏州215006

本研究应用快速而敏感的ELISA法检测血友病A患者血浆抗因子Ⅷ同种抗体,并探讨其与因子ⅧC区的关系。收集140例血友病A患者样本,其中重型(FⅧ∶C5%)22例;患者均已经过因子Ⅷ替代治疗。正常对照样本80例。以本室制备的抗因子Ⅷ单克隆抗体... 详细信息

本研究应用快速而敏感的ELISA法检测血友病A患者血浆抗因子Ⅷ同种抗体,并探讨其与因子ⅧC区的关系。收集140例血友病A患者样本,其中重型(FⅧ∶C5%)22例;患者均已经过因子Ⅷ替代治疗。正常对照样本80例。以本室制备的抗因子Ⅷ单克隆抗体包被酶标板,封闭后加入重组人凝血因子Ⅷ,洗涤后加入待测稀释血浆,再次洗涤后加入HRP标记的羊抗人IgG,OPD显色,记录A490,以正常人血浆为对照,样本A490大于正常人对照3 SD定义为因子Ⅷ抗体阳性。以抗His抗体包被酶标板,封闭后加入本室制备的rFⅧ-C1C2区蛋白,洗涤后加入待测稀释血浆,再次洗涤后加入HRP标记的羊抗人IgG,OPD显色,记录A490,以正常人血浆为对照,样本A490大于正常人对照3 SD定义阳性。结果表明,通过ELISA法检测,56例(40%)血友病A患者血浆抗因子Ⅷ同种抗体阳性,其中46例(82.1%)因子Ⅷ同种抗体阳性的血浆样本中存在与因子ⅧC1C2结合的同种抗体。结论:因子ⅧC功能区是中国血友病A患者因子Ⅷ同种抗体的主要结合部位之一。

关键词：血友病A 因子Ⅷ 同种抗体

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原发性高血压和同种抗体关系的研究

中华内科杂志 1992年第1期31卷 21-23页

作者：崔华邝耀中甘肃省人民医院心内科 730000 甘肃省人民医院心内科 730000 兰州医学院第二附属医院

采用间接荧光免疫法研究了100例接受治疗的有或无阳性家族史的原发性高血压（EHT）病人及有阳性家族史的血压正常者30例，测定血中四种同种抗体的阳性率。结果表明，已接受治疗的EHT病人血中四种同种抗体的阳性率显著高于正常人，与性... 详细信息

采用间接荧光免疫法研究了100例接受治疗的有或无阳性家族史的原发性高血压（EHT）病人及有阳性家族史的血压正常者30例，测定血中四种同种抗体的阳性率。结果表明，已接受治疗的EHT病人血中四种同种抗体的阳性率显著高于正常人，与性别、平均血压、临床分期无关，并有明显的遗传因素作用。同种抗体的出现可能先于部分EHT病人的血压升高，显示了自身免疫缺陷可能是EHT的发病因素之一。

关键词：高血压同种抗体荧光免疫测定

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微柱凝胶技术筛检免疫性同种抗体

临床检验杂志 2005年第4期23卷 287-288页

作者：赵莉徐州市第一人民医院输血科江苏徐州221002

我院自引进微柱凝胶技术(CAT)对有输血、妊娠史的高危受血者进行免疫性同种抗体筛查，共筛查并确认出免疫性同种抗体阳性25例，对25例阳性血清标本应用聚凝胺法(polybrene)和试管法(TCT)作对比试验，测定-20℃保存6份阳性血清灵敏度。... 详细信息

我院自引进微柱凝胶技术(CAT)对有输血、妊娠史的高危受血者进行免疫性同种抗体筛查，共筛查并确认出免疫性同种抗体阳性25例，对25例阳性血清标本应用聚凝胺法(polybrene)和试管法(TCT)作对比试验，测定-20℃保存6份阳性血清灵敏度。结果现报告如下：

关键词：微柱凝胶技术免疫性同种抗体筛检 -20℃保存抗体筛查抗体阳性对比试验聚凝胺法血清标本阳性血清受血者妊娠史试管法灵敏度

血小板单克隆抗体SZ—21与PLA^1同种抗体的结合竞争及其意义

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中华血液学杂志 1993年第3期14卷 130-132页

作者：奚晓东赵益明江苏省血液研究所苏州医学院血栓与止血研究室 215007 常州市红十字中心血站

血小板膜糖蛋白（GP）IIIa单克隆抗体SZ-21的完整IgG和Fab片段可抑制PLA 1同种抗体和PLA 1阳性血小板的结合且与剂量相关并在13mg/L浓度时趋于饱和。另外，血小板的SZ-21结合能力于PLA 1抗体存在时降低。在免疫印迹法中... 详细信息

血小板膜糖蛋白（GP）IIIa单克隆抗体SZ-21的完整IgG和Fab片段可抑制PLA 1同种抗体和PLA 1阳性血小板的结合且与剂量相关并在13mg/L浓度时趋于饱和。另外，血小板的SZ-21结合能力于PLA 1抗体存在时降低。在免疫印迹法中，PLA 1或PLA 2纯合子的GPIIIa都含有SZ-21识别的抗原决定簇。SZ-21不影响Yuk b同种抗体与其在GPIIIa上的靶抗原的相互作用。以上结果表明，单克隆抗体SZ-21在GPIIIa分子中的杭原决定簇非常接近PLA 1抗原决定簇但两者并不相同，而血清中PLA 1同种抗体的存在与其同SZ-21的结合竞争作用是相一致的。

关键词：结合竞争性同种抗体血小板

血友病A患者血浆FⅧ同种抗体ELISA检测方法的建立及其临床应用

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中华检验医学杂志 2010年第10期33卷 967-971页

作者：张露璐余自强张威赵益明白霞阮长耿苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所卫生部血栓与止血重点实验室 215006

目的建立血友病A患者血浆FⅧ同种抗体的ELISA检测方法,以评估经替代治疗的血友病A患者血浆FⅧ同种抗体的发生率.方法选取血友病A患者140例,其中重型84例,中型34例,轻型22例,所有患者均已经过FⅧ替代治疗;同时选取健康对照者80名.以本室... 详细信息

目的建立血友病A患者血浆FⅧ同种抗体的ELISA检测方法,以评估经替代治疗的血友病A患者血浆FⅧ同种抗体的发生率.方法选取血友病A患者140例,其中重型84例,中型34例,轻型22例,所有患者均已经过FⅧ替代治疗;同时选取健康对照者80名.以本室制备的FⅧ单克隆抗体包被酶标板,封闭后加入重组人FⅧ,洗涤后加入待测稀释血浆,再次洗涤后加入辣根过氧化物酶标记的羊抗人IgG,邻苯二胺显色,记录490 nm处的吸光度（A490）值.所有患者血浆样本同时采用改良的Nijmegen方法检测抑制物活性.结果通过ELISA法检测,血友病A患者产生血浆FⅧ同种抗体阳性率为40.0%（56/140）,重型、中轻型患者产生抗体的阳性率分别为47.6%（40/84）、28.5%（16/56）,两组患者产生同种抗体的阳性率差异有统计学意义（x2=5.079,P＜0.05）;采用改良的Nijmegen方法检测,血友病A患者产生FⅧ抑制物阳性率为24.3%（34/140）,重型、中轻型患者产生抑制物的阳性率分别为33.3%（28/84）、10.7%（6/56）,两组患者产生抑制物的阳性率差异有统计学意义（x2=9.349,P＜0.05）.其中,25例通过ELISA法检测出同种抗体阳性的患者未被检出抑制物活性.ELISA法与改良的Nijmegen法检出的阳性率分别为40.0%（56/140）、24.3%（34/140）,差异有统计学意义（x2=15.75,P＜0.01）,具有相关性（rn=0.59,P＜0.01）;且两种方法检出结果存在一致性（Kappa=0.55,P＜0.01）.结论 ELISA法能够提高FⅧ同种抗体的检出率,血友病A患者经替代治疗后,血浆FⅧ同种抗体发生率并不低,重型患者产生抗体的阳性率高于中轻型患者.

关键词：血友病A 因子Ⅷ 同种抗体酶联免疫吸附测定

抗-C、e同种抗体合并抗-e类同种自身抗体的鉴定及交叉配血

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中国输血杂志 2017年第7期30卷 843-846页

作者：周建华施旭斌孙泉湖州市中心血站浙江湖州313000

目的通过对1例同时产生了类同种自身抗体和同种抗体患者的抗体分析及鉴定,了解Rh血型系统中同种抗体、简单特异性自身抗体和类同种自身抗体的血清学特征,从血清学上对三者进行区分,以便采取更适合的红细胞成分输血策略。方法采用筛选细... 详细信息

目的通过对1例同时产生了类同种自身抗体和同种抗体患者的抗体分析及鉴定,了解Rh血型系统中同种抗体、简单特异性自身抗体和类同种自身抗体的血清学特征,从血清学上对三者进行区分,以便采取更适合的红细胞成分输血策略。方法采用筛选细胞和谱细胞、以不同方法对患者血清进行抗体筛查及鉴定。采用患者Rh抗体类似特异性对应抗原阴性的O型RhccDEE的献血者细胞、添加低离子液(LISS)的吸收方法,对患者吸收后的血清、红细胞放散液进行抗体鉴定。对以往相关文献进行回顾。结果患者Rh分型ccDEE,直抗阳性。血清抗体鉴定为IgM类的抗-C、抗-e和IgG类的抗-e(不排除抗-Ce可能性)。吸收后血清抗体鉴定为IgM类的抗-C、抗-e(不排除抗-Ce可能性)和IgG类的抗-e。放散液抗体鉴定为IgG类的抗-e。结论对患者红细胞Rh表型、直接抗球蛋白试验,以及分别对患者血清、吸收后血清及放散液抗体特异性进行综合分析,可区分出同种抗体或类同种抗体。而采用添加低离子液(LISS)的方法可更好的吸收低亲和力抗体。

关键词：同种抗体类同种抗体低亲和力抗体简单特异性