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前增菌抗生素添加对产志贺毒素大肠埃希氏菌分离的影响

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中国食品卫生杂志 2022年第3期34卷 504-509页

作者：胡颖赵琳娜白莉崔生辉遵义医科大学公共卫生学院贵州遵义543006 中国食品药品检定研究院北京100025 国家食品安全风险评估中心国家卫生健康委员会食品安全风险评估重点实验室北京100025

目的研究产志贺毒素大肠埃希氏菌(STEC)国际标准检测方法中前增菌肉汤中抗生素种类和浓度对STEC分离的影响。方法利用STEC和其他非STEC菌株,对国际现行检测STEC标准方法推荐的在前增菌步骤使用3种抗生素的最低抑菌浓度(MICs)进行测定。... 详细信息

目的研究产志贺毒素大肠埃希氏菌(STEC)国际标准检测方法中前增菌肉汤中抗生素种类和浓度对STEC分离的影响。方法利用STEC和其他非STEC菌株,对国际现行检测STEC标准方法推荐的在前增菌步骤使用3种抗生素的最低抑菌浓度(MICs)进行测定。结果不同抗生素对STEC抑制存在差异性。在推荐浓度下,吖啶黄及头孢磺啶会抑制stx1a和stx2b亚型STEC的生长,新生霉素则会抑制stx1a、stx1c、stx1d、stx2b、stx2d、stx2e、stx2f、stx2g等亚型菌株的生长。此外,STEC与其他革兰氏阴性菌对吖啶黄、头孢磺啶、新生霉素的MICs无显著性差异(P菌对这3种抗生素的MIC值显著低于革兰氏阴性菌(P增菌方法的研发完善提供了有价值的证据。

关键词：产志贺毒素的大肠杆菌前增菌抗生素

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小肠结肠炎耶尔森菌前增菌方式的选择

食品科学 2011年第5期32卷 168-171页

作者：牛蕾祝长青周光宏徐幸莲李彬江芸南京农业大学国家肉品质量安全控制工程技术研究中心江苏南京210095 江苏出入境检验检疫局江苏南京200001

小肠结肠炎耶尔森菌作为一种食源性致病菌逐渐引起了关注。本实验利用胰蛋白胨培养基、改良磷酸盐缓冲液和氯苯酚-替卡西林-氯酸钾培养基对小肠结肠炎耶尔森菌前增菌,并采用实时荧光PCR方法对增菌效果进行检验。结果表明:在纯菌体系中... 详细信息

小肠结肠炎耶尔森菌作为一种食源性致病菌逐渐引起了关注。本实验利用胰蛋白胨培养基、改良磷酸盐缓冲液和氯苯酚-替卡西林-氯酸钾培养基对小肠结肠炎耶尔森菌前增菌,并采用实时荧光PCR方法对增菌效果进行检验。结果表明:在纯菌体系中胰蛋白胨培养基对小肠结肠炎耶尔森菌的增菌作用优于其他两种培养基,并且增菌24h后即可检测到该菌。在混菌体系中小肠结肠炎耶尔森菌经过改良磷酸盐缓冲液增菌后灵敏性最高,并且增菌时间可缩短至8h。因此在实际检测中可采用改良磷酸盐缓冲液对该菌进行增菌检测。

关键词：小肠结肠炎耶尔森菌前增菌实时荧光PCR 培养基食源性致病菌

前增菌培养方法对热损伤单核细胞增生李斯特菌复苏效果观察及应用研究

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中国卫生检验杂志 2008年第5期18卷 777-779,794页

作者：傅宜方梁春霞卢国钧易洪广州铁路疾病预防控制中心广州510010 广东省食品药品监督管理局广州510080

目的：观察前增菌培养方法对热损伤LM的复苏/恢复情况以及在市售熟肉制品LM污染调查检测中的运用效果,探索受损伤LM的增菌培养方法,提高食品LM检出率。方法：LM参考菌株经61℃5 min处理,制备热损伤菌液,采用Alanin Martin等推荐的LM前... 详细信息

目的：观察前增菌培养方法对热损伤LM的复苏/恢复情况以及在市售熟肉制品LM污染调查检测中的运用效果,探索受损伤LM的增菌培养方法,提高食品LM检出率。方法：LM参考菌株经61℃5 min处理,制备热损伤菌液,采用Alanin Martin等推荐的LM前增菌液和LM国标方法LB1、EB增菌液对热损伤细菌进行复苏/恢复,记录、分析细菌增殖、恢复情况。将LM前增菌培养方法与国标法结合（改良法）,用于熟肉制品LM污染调查检测,并与单纯国标法检测结果进行比较,得出结论。结果：热损伤LM经前增菌液培养4-5 h后,基本完成复苏/恢复过程,并开始明显增殖,24 h培养后,菌数较直接使用LB1、EB增菌液培养的菌数增长明显（约增加10^2倍）;热损伤LM在LB1、EB增菌液培养早期,菌数一度减少,机理尚需进一步研究。前增菌培养方法与LM国标法结合（改良法）用于熟肉制品LM污染调查,较单纯使用国标法的检出率明显提高（χ^2=4.68,P〈0.05）。结论：热损伤LM在LB1、EB增菌液中复苏/恢复比较缓慢,AlaninMartin等提出的LM前增菌方法对热损伤LM有明显的复苏/恢复效果,建议对加工食品进行LM检测时,在现行LM国标检测方法的基础上,适当增加前增菌培养过程,以提高LM的检出率。

关键词：单核细胞增生李斯特菌前增菌复苏损伤

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单增李斯特菌污染调查及前增菌方法效果观察

单增李斯特菌污染调查及前增菌方法效果观察

酸性或碱性食品沙门氏菌检测前增菌简化实验研究

2012年铁路卫生防疫学术年会

作者：傅宜方梁春霞卢国钧广州铁路疾病预防控制中心

【目的】了解广州市市售熟肉制品LM污染状况,观察LM"前增菌法"的运用效果。【方法】随机分层采集广州市八城区24家单位（大中型超市、烧腊店、菜市场各8家）自制散装熟肉制品112份,分别采用LM国标法和"前增菌法"进行检验,同时运用了科... 详细信息

【目的】了解广州市市售熟肉制品LM污染状况,观察LM"前增菌法"的运用效果。【方法】随机分层采集广州市八城区24家单位（大中型超市、烧腊店、菜市场各8家）自制散装熟肉制品112份,分别采用LM国标法和"前增菌法"进行检验,同时运用了科玛嘉李斯特菌显色培养基、API Listeria生化试剂盒进行分离鉴定。【结果】熟肉制品LM污染率为8.04%（9/112）,其中,菜市场熟肉制品LM污染率为18.75%,显著高于超市（5%）和烧腊店（2.5%）的污染率（X2=6.96,P＜0.01）。"前增菌法"LM检出率为8.04%,显著高于国标法LM检出率（1.79%）（X2=4.68,P＜0.05）,而且"前增菌法"较国标法缩短了检验时间;API Listeria、李斯特菌显色培养基平板鉴定结果与国标法吻合。【结论】广州市市售熟肉制品有不同程度的LM污染。LM"前增菌法"检出率较高,而且材料廉价、操作简单,比较适合基层单位采用;与LM国标分离鉴定方法相比李斯特菌显色培养基平板、API生化试验准确性、时效性均较好。

关键词：单核细胞增生李斯特菌熟肉制品前增菌调查

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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中国食品工业 2013年第9期 50-51页

作者：康俊巍萨日那刘顺顺王丽英朱生伟蒙牛乳业(天津)有限公司

GB4789．4-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》方法中规定，待检样品需测定pH值，用1mol／mL无菌NaOH或HCl调pH值军6．8±0．2，但从前增菌液缓冲蛋白冻水（BPW）成分分析，发脱其中缓冲剂磷酸氯二钠和磷酸二氢钾正... 详细信息

GB4789．4-2010《食品安全国家标准食品微生物学检验沙门氏菌检验》方法中规定，待检样品需测定pH值，用1mol／mL无菌NaOH或HCl调pH值军6．8±0．2，但从前增菌液缓冲蛋白冻水（BPW）成分分析，发脱其中缓冲剂磷酸氯二钠和磷酸二氢钾正好构成了磷酸盐缓冲体系，可以自身通过调整电离方向达到电离平衡，从而维持了增菌液的pH值，这样低酸或低碱样品住加入BPW前就不用调pH值，实验论证了该理论成立的可能性，并说明了检测样品的pH值的范围及简化优点，致使低酸或低碱性性食品检测不需要调整pH值直接增菌检测沙门氏菌，简化了操作步骤，还避免调pH值引起的外界污染，达到操作简便、快捷的目的。

关键词：沙门氏菌缓冲蛋白胨冻水 pH值前增菌

EMA-RTQ-PCR快速检测沙门菌活细胞方法的应用

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现代预防医学 2016年第3期43卷 520-523页

作者：余秋阳欧阳效鹏尚静晔刘祥余倩四川大学华西公共卫生学院(华西第四医院) 苏州工业园区疾病防治中心四川省疾病预防控制中心天津市产品质量监督检测技术研究院

目的检测EMA-RTQ-PCR快速鉴别沙门菌死活细胞方法的应用效果,评价该方法的实际应用价值。方法利用EMA-RTQ-PCR以及国标GB4789.4-2010对人工模拟样品及实际样品分别进行检测。结果对于人工模拟死菌样品,EMA-RTQ-PCR与国标法检测结果一致... 详细信息

目的检测EMA-RTQ-PCR快速鉴别沙门菌死活细胞方法的应用效果,评价该方法的实际应用价值。方法利用EMA-RTQ-PCR以及国标GB4789.4-2010对人工模拟样品及实际样品分别进行检测。结果对于人工模拟死菌样品,EMA-RTQ-PCR与国标法检测结果一致,均为阴性;对于人工模拟死活菌混合样品,EMA-RTQ-PCR直接检测结果与国标法存在差异,EMA-RTQ-PCR为阴性,国标法为阳性;人工模拟死活菌混合样品增菌后用EMA-RTQ-PCR进行检测,结果与国标法一致,均为阳性;增菌后的实际样品用EMA-RTQ-PCR进行检测的结果与国标检测结果一致,均为阴性。结论通过对样品进行前增菌,可以保证检验结果的准确可靠。该方法能够快速、灵敏、准确的检测沙门菌活细胞,具有很好的应用价值。

关键词：叠氮溴化乙锭(EMA) 实时荧光聚合酶链反应(RTQ-PCR) 沙门菌活细胞前增菌

小肠结肠炎耶尔森菌（Yersinia enterocolitica）快速检测体系的建立及应用

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小肠结肠炎耶尔森菌（Yersinia enterocolitica）快速检测体系的...

作者：牛蕾南京农业大学

学位级别：硕士

小肠结肠炎耶尔森菌是一种人畜共患病病原菌,主要寄生于健康猪的咽喉部位,可以通过食品等途径传染给人,导致食物中毒,对人类造成很大的威胁。本论文先通过普通PCR方法的建立确定特异性较高的引物,再通过对小肠结肠炎耶尔森菌前增菌液的... 详细信息

小肠结肠炎耶尔森菌是一种人畜共患病病原菌,主要寄生于健康猪的咽喉部位,可以通过食品等途径传染给人,导致食物中毒,对人类造成很大的威胁。本论文先通过普通PCR方法的建立确定特异性较高的引物,再通过对小肠结肠炎耶尔森菌前增菌液的选择确定样品中本菌的增菌方法,最后再利用内部扩增质控技术通过一系列试验建立小肠结肠炎耶尔森菌实时荧光PCR检测体系,为鲜肉中小肠结肠炎耶尔森菌快速检测提供有效的技术手段和方法。本文分三部分进行研究阐述。1.小肠结肠炎耶尔森菌普通PCR反应的建立本试验根据小肠结肠炎耶尔森菌的ail基因进行三对普通PCR反应引物的选择、特异性、灵敏性,以及反应的退火温度试验。同时将毒力基因ail与16s rDNA组合进行双重PCR反应。最后通过实时荧光PCR反应进行进一步验证。试验结果表明ail1引物特异性较高,灵敏性好,是本菌进行PCR扩增的适宜引物。2.小肠结肠炎耶尔森菌前增菌方式的选择小肠结肠炎耶尔森菌作为一种食源性致病菌逐渐引起了关注。本实验利用胰蛋白胨培养基、改良磷酸盐缓冲液和氯苯酚-替卡西林-氯酸钾培养基分别对小肠结肠炎耶尔森菌前增菌,并采用实时荧光PCR方法对增菌效果进行检验。结果表明：在纯菌体系中胰蛋白胨培养基对小肠结肠炎耶尔森菌的增菌作用优于其他两种培养基,并且增菌24h后即可检测到该菌。在混菌体系中小肠结肠炎耶尔森菌经过改良磷酸盐缓冲液增菌后灵敏性最高,并且增菌时间可缩短至8h。因此在实际检测中可采用改良磷酸盐缓冲液对本菌进行增菌检测。3.小肠结肠炎耶尔森菌实时荧光PCR方法的建立本试验利用小肠结肠炎耶尔森菌的毒力基因ail作为目的基因进行小肠结肠炎耶尔森菌实时荧光PCR反应,并且以大米的gos基因作为内部扩增质控基因进行小肠结肠炎耶尔森菌的双重实时荧光PCR方法的建立。利用建立的双重实时荧光PCR方法对从屠宰场取样的32份下颚淋巴结和38份舌头及扁桃体进行检测。试验结果表明,单重和双重实时荧光PCR方法特异性均较高,检测限分别为10pg/μL和100pg/μL。在实际样品检测时传统生化培养鉴定方法检出率为5.71%,单重和双重实时荧光PCR方法检出率分别为44.29%和8.57%。双重实时荧光PCR方法中各样品的内控基因均有扩增曲线产生,这说明该反应中无抑制PCR物质存在。所有传统方法检出样品均被实时荧光PCR方法检出,这说明本方法检出时间快且检出率高。综上所述,本文选择出一对特异性较高的小肠结肠炎耶尔森菌引物,通过试验结果证明PSB为检测实际样品时增菌效果较好的培养基,最后成功地建立了结合内部扩增质控系统的小肠结肠炎耶尔森菌实时荧光PCR反应体系。

关键词：小肠结肠炎耶尔森菌实时荧光PCR 前增菌引物

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国内常规沙门氏菌检验方法的研究进展

山东肉类科技 1995年第1期1卷 19-21页

作者：房俊頔邓善英青岛动植物检疫局青岛266002

沙门氏菌检验方法的探讨,早在1884年,Gaffgy培养伤寒杆菌成功,从而证实了Eberth 1880年的发现即已开始。由于其样品来源极为繁杂,尽管各国学者对其进行了长期研究,仍存在不少问题。将国内各家言论进行一次综合,对现行各种检验方法作出... 详细信息

沙门氏菌检验方法的探讨,早在1884年,Gaffgy培养伤寒杆菌成功,从而证实了Eberth 1880年的发现即已开始。由于其样品来源极为繁杂,尽管各国学者对其进行了长期研究,仍存在不少问题。将国内各家言论进行一次综合,对现行各种检验方法作出相应评价,似颇有必要。 1。

关键词：沙门氏菌检验方法前增菌研究进展防病学培养基增菌液阳性检出率增菌法抑菌剂

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饲料中沙门氏菌的检验方法

饲料博览 2002年第3期14卷 25-28页

作者：饶正华国家饲料质量监督检验中心北京100081

在人类发生的各种细菌性食物中毒中,以沙门氏菌食物中毒的发病率为最高,因此准确地检测饲料中沙门氏菌,不仅是发展畜牧业的需要,而且是减少人类沙门氏菌食物中毒的重要环节,对于防止畜禽和人类沙门氏菌污染具有十分重要的意义.现行国内... 详细信息

在人类发生的各种细菌性食物中毒中,以沙门氏菌食物中毒的发病率为最高,因此准确地检测饲料中沙门氏菌,不仅是发展畜牧业的需要,而且是减少人类沙门氏菌食物中毒的重要环节,对于防止畜禽和人类沙门氏菌污染具有十分重要的意义.现行国内、国际标准BS EN 12824:1998、ISO6579:1993、ISO 6785:2001、GB 13091-91以及GB 4789.4-94对沙门氏菌检验方法基本一致,都要经过五个步骤:①前增菌;②选择性增菌;③选择性平板分离;④生化鉴定;⑤血清学鉴定.现分述如下:

关键词：饲料沙门氏菌检验方法畜牧业前增菌平板分离生化鉴定血清学鉴定