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中国实验血液学杂志 2005年第3期13卷 434-439页

作者：邓晶金洁浙江大学医学院附属第一医院血液科浙江省血液病研究所杭州310003

为了探讨雷公藤内酯醇(triptolide)诱导骨髓增生异常综合征(MDS)细胞系MUTZ1细胞凋亡及其作用机制,将triptolide与MUTZ1细胞共育,采用MTT法观察细胞生长,DNA片段化分析和AnnexinVFITc/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡,RTPcR及Westernblo... 详细信息

为了探讨雷公藤内酯醇(triptolide)诱导骨髓增生异常综合征(MDS)细胞系MUTZ1细胞凋亡及其作用机制,将triptolide与MUTZ1细胞共育,采用MTT法观察细胞生长,DNA片段化分析和AnnexinVFITc/PI双染色流式细胞仪检测细胞凋亡,RTPcR及Westernblot方法检测基因和蛋白质水平。结果表明:triptolide对MUTZ1细胞具有明显的生长抑制作用,呈量效与时效关系,24小时半数抑制率(Ic50)为55.06ng/ml;triptolide能诱导MUTZ1细胞DNA断裂产生DNAladder,且能诱导MUTZ1细胞磷脂酰丝氨酸转位,其发生率随药物浓度增加而增加;triptolide作用于MUTZ1细胞12小时导致caspase3激活,PARP酶解及cIAP2mRNA表达水平下调,凋亡率与caspase3原酶及cIAP2表达量呈负相关(r=-0.907,P=0.000;r=-0.919,P=0.000)。结论:triptolide能通过诱导凋亡抑制MUTZ1细胞的生长,triptolide诱导MUTZ1细胞凋亡是通过caspase3激活及PARP酶解所介导的,且caspase3的激活可能与凋亡蛋白抑制因子cIAP2的下调有关。

关键词：雷公藤内酯醇骨髓增生异常综合征细胞凋亡 caspase-3 PARP,c-IAP2

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三氧化二砷诱导MUTZ-1细胞凋亡的端粒酶调控研究

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中国实验血液学杂志 2005年第4期13卷 615-619页

作者：佟红艳金洁徐伟来钱文斌林茂芳浙江大学医学院附属第一医院血液科杭州310003

为了研究三氧化二砷(As2O3)诱导人类骨髓增生异常综合征难治性贫血伴原始细胞过多型(MDS-RAEB)细胞株MUTZ-1细胞凋亡的端粒酶调控机制,采用端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附试验(TRAP-ELISA)检测端粒酶活性;RT-PcR法检测端粒酶逆转录酶(hT... 详细信息

为了研究三氧化二砷(As2O3)诱导人类骨髓增生异常综合征难治性贫血伴原始细胞过多型(MDS-RAEB)细胞株MUTZ-1细胞凋亡的端粒酶调控机制,采用端粒重复序列扩增-酶联免疫吸附试验(TRAP-ELISA)检测端粒酶活性;RT-PcR法检测端粒酶逆转录酶(hTERT)、TRF1(TTAGGGrepeatbindingfactor1)、TRF2(TTAGGGrepeatbindingfactor2)、bcl-2、bax等基因mRNA水平的表达;磷脂酰丝氨酸(PS)转位等方法检测细胞凋亡。结果表明:1-8μmol/LAs2O3诱导MUTZ-1细胞凋亡呈时间、浓度依赖关系。在该浓度范围内,As2O3可下调细胞端粒酶活性,且端粒酶活性下调与凋亡细胞阳性率呈明显负相关(r=-0.938,P=0.018)。MUTZ-1细胞经As2O3作用后,hTERT基因mRNA表达下调,并与端粒酶活性变化呈正相关(r=0.783,P=0.022),但As2O3对TRF1及TRF2基因mRNA表达没有明显影响。MUTZ-1细胞端粒酶活性受抑制同时,伴有bcl-2mRNA表达下调及bcl-2/bax比值下降。结论:As2O3可能通过抑制细胞端粒酶活性及hTERT表达,诱导MUTZ-1细胞凋亡。As2O3抑制MUTZ-1细胞端粒酶活性可能是诱导该凋亡机制之一。

关键词： As2O3 MUTZ-1细胞细胞凋亡端粒酶骨髓增生异常综合征-难治性贫血

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雷公藤内酯醇下调凋亡抑制蛋白、活化半胱天冬酶诱导骨髓增生异常综合征细胞株细胞凋亡的研究

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实用肿瘤杂志 2006年第5期21卷 408-411页

作者：邓晶金洁浙江大学医学院附属第一医院肿瘤内科浙江杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院血液科浙江杭州310003

目的探讨雷公藤内酯醇诱导骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1细胞凋亡与半胱天冬酶(caspase)激活及凋亡抑制蛋白(IAP s)表达的关系。方法不同浓度雷公藤内酯醇作用于MUTZ-1细胞12小时,采用A nnex-in V/P I双标流式细胞仪检测凋亡的细胞量... 详细信息

目的探讨雷公藤内酯醇诱导骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1细胞凋亡与半胱天冬酶(caspase)激活及凋亡抑制蛋白(IAP s)表达的关系。方法不同浓度雷公藤内酯醇作用于MUTZ-1细胞12小时,采用A nnex-in V/P I双标流式细胞仪检测凋亡的细胞量。W estern b lot检测MUTZ-1细胞caspase-3、caspase-8、caspase-9及X I-AP、c-IAP 1、c-IAP 2的蛋白表达水平。结果0、20、40、60 ng/m l雷公藤内酯醇作用MUTZ-1细胞12小时,凋亡细胞百分比(%)分别为2.66±0.31、9.87±0.99、30.28±4.35、51.89±5.38。凋亡率与药物浓度呈正相关(r=0.980,P=0.020)。凋亡关键酶caspase-3、caspase-8、caspase-9被激活,且cleaved caspase-3、cleaved caspase-9、procaspase-8的表达水平与凋亡率相关(r1=0.957,P 1=0.043;r2=0.994,P 2=0.006;r3=-0.994,P 3=0.006)。随着药物浓度的增加,c-IAP 1、c-IAP 2蛋白表达量呈逐渐下降趋势,c-IAP 1、c-IAP 2蛋白表达与凋亡率之间呈负相关(r1=-0.961,P 1=0.039;r2=-0.963,P 2=0.037)。结论雷公藤内酯醇通过激活caspase诱导骨髓增生异常综合征细胞株MUTZ-1细胞发生凋亡,内源性及外源性途径皆参与其中。下调凋亡抑制蛋白IAP s的表达可能是雷公藤内酯醇诱导细胞凋亡的机制之一。

关键词：骨髓发育不良综合征雷公藤内酯醇凋亡半胱天冬酶肿瘤细胞培养的

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