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Wnt/β-catenin通路参与脂肪间充质干细胞对大鼠肾小球系膜细胞增殖的调控

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第11期32卷 1486-1490页

作者：李志张梦莹李雪琴陆进明徐亮皖南医学院弋矶山医院风湿免疫科安徽芜湖241001 皖南医学院弋矶山医院中心实验室安徽芜湖241001

目的探讨脂肪间充质干细胞(ADSC)经Wnt/β联蛋白(β-catenin)通路对肾小球系膜细胞增殖的影响。方法以大鼠ADSC的条件培养基作用于HBZY-1大鼠肾小球系膜细胞,通过流式细胞术分析细胞周期、RNA干扰、实时定量PCR和Western blot等技术分析... 详细信息

目的探讨脂肪间充质干细胞(ADSC)经Wnt/β联蛋白(β-catenin)通路对肾小球系膜细胞增殖的影响。方法以大鼠ADSC的条件培养基作用于HBZY-1大鼠肾小球系膜细胞,通过流式细胞术分析细胞周期、RNA干扰、实时定量PCR和Western blot等技术分析HBZY-1细胞增殖能力、Wnt信号通路中相关基因和蛋白表达水平的变化。结果在ADSC条件培养基作用下,HBZY-1细胞增殖受到明显抑制,dickkopf WNT信号通路抑制物1(DKK1)mRNA表达水平明显升高,而纤连蛋白(fibronectin)和转化生长因子β1(TGF-β1)的mRNA表达显著降低,同时系膜细胞的β-catenin和Bcl-2蛋白的表达受到明显抑制。ADSC中DKK1 mRNA表达水平显著高于HBZY-1细胞,利用小干涉RNA敲低ADSC的DKK1表达后,其β-catenin蛋白的表达水平显著升高。将干扰后的ADSC条件培养基作用于HBZY-1细胞,可重新增加HBZY-1细胞Wnt信号通路中β-catenin和Bcl-2的蛋白水平。结论 Wnt/β-catenin信号通路可能参与ADSC对HBZY-1肾小球系膜细胞增殖的调控。

关键词：脂肪间充质干细胞(ADSC) 系膜细胞 Wnt dickkopf WNT信号通路抑制物1(DKK1)

五步蛇毒蛋白C激活剂在脓毒症大鼠早期适应性免疫应答中的作用

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南方医科大学学报 2021年第4期41卷 514-520页

作者：孙瑶包鹏举张根葆王海华王国栋皖南医学院病理生理学教研室安徽芜湖241002 皖南医学院蛇毒蛇伤研究所安徽芜湖241002 皖南医学院麻醉学院安徽芜湖241002 皖南医学院生理学教研室安徽芜湖241002 皖南医学院药学院安徽芜湖241002

目的探讨五步蛇毒蛋白C激活剂(PCA)在脓毒症大鼠早期适应性免疫应答中的作用。方法采用SPF级SD大鼠78只,用随机数字表法分组:对照组(n=6,腹腔注射生理盐水);通过腹腔注射脂多糖(LPS 10 mg/kg)复制脓毒症大鼠模型,模型组以LPS注射后4、6... 详细信息

目的探讨五步蛇毒蛋白C激活剂(PCA)在脓毒症大鼠早期适应性免疫应答中的作用。方法采用SPF级SD大鼠78只,用随机数字表法分组:对照组(n=6,腹腔注射生理盐水);通过腹腔注射脂多糖(LPS 10 mg/kg)复制脓毒症大鼠模型,模型组以LPS注射后4、6、8、12、16、24 h时的标本采集时间分为6组,6只/组;余36只大鼠于LPS注射30 min后使用药物干预,分为1-磷酸鞘氨醇受体1(S1PR1)激动剂SEW2871干预组(0.5 mg/kg,腹腔注射)和PCA干预组(0.1 mg/kg,腹腔注射),各干预组以LPS注射后6、12、24 h时的标本采集时间分为3组,每组6只。采用ELISA法检测血浆IL-4、S1P、IL-12和IFN-γ水平,应用免疫荧光法检测肠系膜淋巴结S1PR1和CD103表达的变化。结果与对照组比较,脓毒症大鼠在注射LPS后的24 h内,血浆S1P、IL-12、IL-4和IFN-γ水平明显增高(P<0.05),LPS注射后6 h内IFN-γ/IL-4比值逐渐增高,之后逐渐降低;肠系膜淋巴结中S1PR1和CD103的表达明显增高(P<0.05)。SEW2871明显增加血浆S1P、IL-12和IFN-γ的浓度,降低血浆IL-4水平(P<0.05),且明显减少淋巴结中S1PR1和CD103的表达(P<0.05)。蛇毒PCA干预后,血浆IL-4水平明显增高,淋巴结S1PR1表达显著增多(P<0.05)。结论五步蛇毒PCA对维持脓毒症早期机体炎症和免疫反应的平衡具有调节作用,其机制可能与S1P-S1PR1通路有关。

关键词：脓毒症适应性免疫应答 1-磷酸鞘氨醇 1-磷酸鞘氨醇受体1 五步蛇毒蛋白C激活剂

电针结合天麻素对局灶性脑缺血大鼠神经功能、额叶皮质勿动蛋白A及其受体表达的影响

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针刺研究 2016年第1期41卷 65-69页

作者：吴锋李怀斌赵健缪化春黄锐丁见熊克仁皖南医学院解剖学教研室芜湖241002

目的:观察电针结合天麻素对局灶性脑缺血大鼠神经功能及缺血灶周围区额叶皮质勿动蛋白A(Nogo-A)及受体(NgR)表达的影响,探讨针药结合治疗脑缺血的部分神经再生机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组、天麻素组和电针+天麻素... 详细信息

目的:观察电针结合天麻素对局灶性脑缺血大鼠神经功能及缺血灶周围区额叶皮质勿动蛋白A(Nogo-A)及受体(NgR)表达的影响,探讨针药结合治疗脑缺血的部分神经再生机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组、天麻素组和电针+天麻素组,每组10只。采用线栓法复制局灶性脑缺血大鼠模型。电针组电针左侧"曲池"穴和"合谷"穴,刺激30min,每天1次,共治疗14d;天麻素组按10mg/kg剂量腹腔注射天麻素注射液,每天1次,共治疗14d;电针+天麻素组给予电针与天麻素治疗,每天1次,共治疗14d。观察大鼠治疗后神经功能恢复情况,免疫组织化学方法检测缺血灶周围区额叶皮质Nogo-A及NgR蛋白的表达。结果:电针组、天麻素组和电针+天麻素组神经功能评分低于模型组(P<0.05),电针+天麻素组神经功能评分低于电针组、天麻素组(P<0.05)。模型组Nogo-A及NgR的表达较正常组明显增强(P<0.05),电针组、天麻素组和电针+天麻素组Nogo-A及NgR的表达较模型组明显减弱(P<0.05),电针+天麻素组Nogo-A及NgR的表达较电针组或天麻素组明显减弱(P<0.05)。结论:电针与天麻素结合可下调缺血灶周围区额叶皮质Nogo-A及NgR的表达,改善神经功能,其作用优于单独电针或天麻素治疗。

关键词：局灶性脑缺血电针天麻素脑神经功能勿动蛋白勿动蛋白受体

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胶束毛细管电泳法检测IL-12的含量

南方医科大学学报 2020年第9期40卷 1301-1306页

作者：包鹏举孙瑶王海华金孝岠张根葆皖南医学院麻醉学院安徽芜湖241002 皖南医学院生理学教研室安徽芜湖241002 皖南医学院病理生理学教研室安徽芜湖241002 皖南医学院蛇毒研究所安徽芜湖241002

目的建立胶束毛细管电泳法鉴定白介素-12(IL-12)、检测其含量并分析IL-12去折叠的过程。方法以50μm i.d.×48.5 cm未涂层毛细管为色谱分离柱,分析影响IL-12分离效果的因素并建立IL-12标准曲线;将IL-12与抗IL-12抗体混匀液在38℃水浴槽... 详细信息

目的建立胶束毛细管电泳法鉴定白介素-12(IL-12)、检测其含量并分析IL-12去折叠的过程。方法以50μm i.d.×48.5 cm未涂层毛细管为色谱分离柱,分析影响IL-12分离效果的因素并建立IL-12标准曲线;将IL-12与抗IL-12抗体混匀液在38℃水浴槽中孵育,40 min后在相同条件下进行毛细管电泳,将其与IL-12、抗IL-12抗体的电泳结果比较以鉴定IL-12;将IL-12与DTT在60℃水浴槽中孵育不同时间,并研究IL-12在不同状态下的电泳结果分析IL-12去折叠的过程。结果建立了以含30 mmol/L十二烷基硫酸钠(SDS)的硼酸盐(pH=9.3,80 mmol/L)为缓冲液的胶束毛细管电泳在线扫集法;IL-12的峰面积与质量浓度具有良好的线性关系,线性相关系数为0.9991,线性范围为2~120 ng/L;随着IL-12与DTT孵育时间的延长,IL-12的二硫键逐渐被打开,图谱中可显示蛋白峰随之发生的变化。结论毛细管电泳法操作简单、灵敏度高,这为今后在肿瘤等疾病中快速检测IL-12的含量以及分析其含量变化的原因提供理论依据。

关键词：胶束毛细管电泳白介素-12 二硫键

白杨素对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠右心室NOX4及NF-κB表达的影响

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药学学报 2015年第9期50卷 1128-1134页

作者：李先伟过波沈媛媛杨解人皖南医学院药理学教研室安徽芜湖241002

观察白杨素(chrysin,5,7-二羟基黄酮)对野百合碱(monocrotaline,MCT)诱导的肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)大鼠右心室重构的影响及其机制。Sprague-Dawley大鼠适应性喂养1周,随机分为正常对照组、MCT组、MCT+chrysin(50 mg·kg-1·d-1)及MCT+chrysin(100 mg·kg-1·d-1)剂量组。MCT(60 mg·kg-1)皮下注射诱导PAH大鼠模型。连续给药4周后,右颈外静脉插管测定大鼠右心室收缩压(RVSP)、平均肺动脉压(m PAP)。分离大鼠右心室(RV)、左心室+室间隔(LV+S)并称重,剥离大鼠胫骨并测量其长度,计算RV/(LV+S)及RV/胫骨长度的比值。HE染色观察右心室病理学变化,Masson染色观察右心室胶原沉积的变化。比色法测定右心室总抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量。q PCR、Western blot和(或)免疫组化检测右心室collagen I、collagen III、NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)、核转录因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)m RNA和蛋白表达。结果发现,白杨素连续给药4周后能明显降低MCT诱导的PAH大鼠RVSP及m PAP,减轻RV/(LV+S)及RV/胫骨长度的比值,改善右心室病理变化,降低右心室胶原的沉积及collagen I、collagen III的表达,提高右心室T-AOC水平,降低NOX4的表达及MDA含量,抑制NF-κB的表达。结果表明,白杨素能缓解MCT诱导的PAH大鼠右心室重构,其机制可能与其抑制NOX4介导的氧化应激损伤,进而抑制NF-κB所介导的胶原沉积有关。

关键词：白杨素肺动脉高压右心室重构 NADPH氧化酶4 核转录因子κB

不同时间点应用甲氨蝶呤对大鼠脊髓损伤后神经细胞凋亡的影响

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中国修复重建外科杂志 2016年第4期30卷 466-472页

作者：方超徐祝军杨民谢加兵李全辉皖南医学院弋矶山医院创伤骨科安徽芜湖241000

目的探讨不同时间点应用低剂量甲氨蝶呤（methotrexate,MTX）对大鼠脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）后神经细胞凋亡的作用,探讨其潜在的神经保护机制与合适的给药时机。方法取成年雄性SD大鼠120只,体质量247-286 g,随机分为4组（n=3... 详细信息

目的探讨不同时间点应用低剂量甲氨蝶呤（methotrexate,MTX）对大鼠脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）后神经细胞凋亡的作用,探讨其潜在的神经保护机制与合适的给药时机。方法取成年雄性SD大鼠120只,体质量247-286 g,随机分为4组（n=30）,分别为假手术组（A组）、对照组（B组）、MTX治疗组（C组）和MTX预防组（D组）。A组仅行椎板切除,B、C、D组采用改良Allen法制备SCI模型;C组于术后1、6、12、18、24 h,D组于术前30 min及术后6、12、18、24 h,经尾静脉注射MTX（0.5 mg/kg）;A、B组于术后1、6、12、18、24 h注射等量生理盐水。术后观察大鼠一般情况,于1、3、7、14、21 d采用BBB评分进行神经功能评估;取材行组织学观察脊髓形态学变化,免疫组织化学染色观察半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3（Caspase-3）表达,TUNEL标记观察细胞凋亡水平。结果 B、C、D组实验过程中共死亡10只大鼠,最终各组纳入25只大鼠进行观察。各时间点A组BBB评分均高于B、C、D组（P〈0.05）,从3 d开始C、D组评分明显高于B组（P〈0.05）;D组从3 d开始均高于C组,除21 d（P〉0.05）外,其余各时间点比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。组织学观察示,A组术后各时间点脊髓组织为正常结构;D组SCI程度轻于B、C组,C组轻于B组;从14 d开始,B、C、D组病变范围基本固定。各时间点B、C、D组Caspase-3及TUNEL阳性细胞数均显著多于A组,B组多于C、D组,比较差异有统计学意义（P〈0.05）;C组Caspase-3阳性细胞数均多于D组,其中3、7、14 d比较差异有统计学意义（P〈0.05）,而TUNEL阳性细胞数仅3、7 d显著多于D组（P〈0.05）。术后1、3、7、14、21 d,B、C、D组组内Caspase-3、TUNEL阳性细胞数均成正相关（P〈0.05）。结论低剂量MTX能够通过抑制神经细胞凋亡有效阻止SCI的继发性损伤;预防性应用MTX效果优于单纯治疗性应用。

关键词：脊髓损伤甲氨蝶呤低剂量预防凋亡大鼠

葛根素对人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的作用

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中国应用生理学杂志 2017年第5期33卷 466-469,I0002页

作者：金鑫孙盼盼洪云虞乐李曙皖南医学院药理学教研室皖南医学院护理学教研室皖南医学院弋矶山医院超声医学科皖南医学院病理生理学教研室芜湖241000

目的:观察葛根素对人非小细胞肺癌A549细胞生长的抑制作用及其机制。方法:体外培养人非小细胞肺癌细胞(A549),不同浓度(60μg/ml,120μg/ml,240μg/ml)葛根素处理24 h后;采用CCK-8法观察葛根素对细胞的增值抑制作用;吖啶橙(AO)/溴化乙锭... 详细信息

目的:观察葛根素对人非小细胞肺癌A549细胞生长的抑制作用及其机制。方法:体外培养人非小细胞肺癌细胞(A549),不同浓度(60μg/ml,120μg/ml,240μg/ml)葛根素处理24 h后;采用CCK-8法观察葛根素对细胞的增值抑制作用;吖啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)双染法及AnnexinⅤ-PI双染流式细胞术检测药物作用前后A549细胞的形态学变化及凋亡状况;Western blot法检测Apelin/APJ蛋白水平的变化。结果:CCK-8法检测结果说明葛根素能抑制A549细胞的增值,具有浓度和时间依赖关系;流式细胞术进一步证实葛根素具有诱导细胞凋亡的作用,与A549细胞组比较,葛根素各处理组Apelin/APJ蛋白水平均有不同程度下调。结论:葛根素可能通过调节Apelin/APJ蛋白的表达诱导A549细胞凋亡。

关键词：葛根素 A549 Apelin/APJ 凋亡

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深在性囊性胃炎1例报告

中国微创外科杂志 2019年第9期19卷 859-861页

作者：孔琦王道明胡凯峰夏亚斌朱家胜卢林明皖南医学院附属弋矶山医院胃肠一科芜湖244000 皖南医学院附属弋矶山医院病理科芜湖244000

深在性囊性胃炎(gastritis cystica profunda,GCP)又称为弥漫性囊性腺体畸形,临床上极为罕见。我科2015年7月收治1例,现将诊治过程报道如下。1临床资料男,64岁。

关键词：囊性胃炎临床资料弥漫性 GCP

超声下坐骨神经阻滞在老年股骨粗隆间骨折术中的应用

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影像科学与光化学 2022年第2期40卷 232-236页

作者：凌祥伟朱金萍李江悦张静芬皖南医学院第二附属医院安徽芜湖241001

本文探讨了超声引导下坐骨神经阻滞不同入路方式在老年股骨粗隆间骨折手术中的应用效果差异。选取经骨科手术治疗的80例老年股骨粗隆骨折手术患者进行临床研究,分为A组和B组,各40例患者。两组均采用全麻+超声引导下坐骨神经阻滞的麻醉方... 详细信息

本文探讨了超声引导下坐骨神经阻滞不同入路方式在老年股骨粗隆间骨折手术中的应用效果差异。选取经骨科手术治疗的80例老年股骨粗隆骨折手术患者进行临床研究,分为A组和B组,各40例患者。两组均采用全麻+超声引导下坐骨神经阻滞的麻醉方式,A组神经阻滞入路采用腘窝上外侧入路,B组采用大转子下外侧入路。结果显示:A组患者的操作完成时间、穿刺次数、进针深度均低于B组(P<0.05);A组患者的神经阻滞持续时间长于B组(P<0.05);A组在术后24 h的静息状态下VAS评分低于B组(P<0.05),A组在术后12 h、术后24 h的咳嗽状态下VAS评分低于B组(P<0.05)。可见全麻+超声引导下坐骨神经阻滞的麻醉中采用腘窝上外侧入路较大转子下外侧入路具有进针深度更浅、穿刺次数更少、操作时间更短,术后患者的疼痛程度更轻的优势。

关键词：超声引导坐骨神经阻滞入路老年股骨粗隆骨折