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高温胁迫对刺参耐高温群体和普通群体主要免疫酶活力的影响

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中国水产科学 2016年第2期23卷 344-351页

作者：刘石林茹小尚徐勤增柏雨岑李静张立斌杨红生中国海洋大学水产学院中国科学院海洋研究所海洋生态与环境科学重点实验室山东东方海洋科技股份有限公司

以定向选育的刺参(Apostichopus japonicus)耐高温品系子三代(F3组)和未经选育的普通刺参(C组)1龄幼参[(13.6±1.8)g/头]为研究对象,在室内模拟池塘夏季高温环境,比较了两个群体在25℃、27℃、29℃、31℃、32℃和33℃6个温度梯度下体壁... 详细信息

以定向选育的刺参(Apostichopus japonicus)耐高温品系子三代(F3组)和未经选育的普通刺参(C组)1龄幼参[(13.6±1.8)g/头]为研究对象,在室内模拟池塘夏季高温环境,比较了两个群体在25℃、27℃、29℃、31℃、32℃和33℃6个温度梯度下体壁抗氧化酶(SOD、CAT和T-AOC)、水解酶(ACP和AKP)和溶菌酶(LSZ)活力的差异。结果表明,在抗氧化酶活力方面,F3和C组刺参SOD活力均随温度的升高呈先升高后降低的趋势,且当温度为31℃和32℃时F3组SOD活力显著高于C组(P选育的耐高温品系F3对高温的耐受能力获得了提高,实验结果为耐高温刺参良种选育提供了理论依据。

关键词：刺参耐高温品系抗氧化酶水解酶溶菌酶

刺参PDRG基因全长克隆及其夏眠期间在消化道中的表达特征

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海洋科学 2013年第12期37卷 1-9页

作者：王天明杨红生中国科学院海洋研究所海洋生态与环境科学重点实验室山东青岛266071 中国科学院研究生院北京100049

夏眠是刺参的重要生理特征;夏眠期间,刺参体重明显减轻,器官萎缩、退化,其中消化道退化明显。PDRG(p53 and DNA damage-regulated gene)是近年来研究发现与细胞凋亡具有密切联系的基因,其表达可促进细胞凋亡。本研究利用SMART RACE技术... 详细信息

夏眠是刺参的重要生理特征;夏眠期间,刺参体重明显减轻,器官萎缩、退化,其中消化道退化明显。PDRG(p53 and DNA damage-regulated gene)是近年来研究发现与细胞凋亡具有密切联系的基因,其表达可促进细胞凋亡。本研究利用SMART RACE技术克隆获得刺参PDRG基因的cDNA全长序列,并以此为基础,研究刺参夏眠期间PDRG基因表达与消化道退化的相关性。结果显示,刺参PDRG基因cDNA全长为1122bp,包含127bp的5’非翻译区(untranslated region,UTR),581bp的3’UTR和414bp的开放阅读框(open reading frame,ORF);ORF区编码137个氨基酸,推算的分子质量约为16.1kDu,理论等电点为7.83。研究通过25℃温度诱导刺参进入夏眠,利用实时定量PCR方法,定量检测刺参消化道PDRG基因表达,结果表明:夏眠期间刺参消化道PDRG基因mRNA表达水平与对照组相比出现显著上升,实验5d时显著上调至约2.49倍,10d时显著上调至约1.51倍,而在0、20、40 d时未检测出显著变化;与刺参消化道相对质量变化数据结合分析表明,刺参夏眠期间消化道的PDRG基因高表达与其萎缩、退化密切相关。本研究阐明刺参夏眠期间消化道组织退化过程中PDRG基因表达特征,证明刺参PDRG基因表达与消化道退化具有相关性,为进一步探讨PDRG基因在动物器官退化过程中的功能提供参考依据。

关键词：刺参(Apostichopus japonicas) PDRG 夏眠器官退化实时定量PCR

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温度对刺参繁殖期消化酶和代谢酶活力的影响

海洋科学 2015年第3期39卷 1-6页

作者：茹小尚高天翔刘石林宋盛亮杨红生中国海洋大学水产学院山东青岛266003 中国科学院海洋研究所海洋生态与环境科学重点实验室山东青岛266071 山东东方海洋科技股份有限公司山东烟台264003

为探究刺参（Apostichopus japonicus）繁殖期消化、代谢生理特点,作者以刺参亲参（240 g±15 g）为实验材料,设置了5个温度水平（6、10、14、18、21℃）,研究了温度对刺参繁殖期内肠道消化酶和体壁肌肉代谢酶活力的影响。结果发现：温... 详细信息

为探究刺参（Apostichopus japonicus）繁殖期消化、代谢生理特点,作者以刺参亲参（240 g±15 g）为实验材料,设置了5个温度水平（6、10、14、18、21℃）,研究了温度对刺参繁殖期内肠道消化酶和体壁肌肉代谢酶活力的影响。结果发现：温度对亲参繁殖期消化酶、代谢酶活力受培育水温影响显著（P＜0.05）。其中,胰蛋白酶与淀粉酶活力随水温升高呈先升高后降低的趋势,在10℃时活力最高且达到峰值；脂肪酶活力随着养殖水温升高呈下降趋势,在6℃时活力最高。己糖激酶、丙酮酸激酶、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶活力随水温升高出现先增高后降低的趋势,在10℃时达到峰值；而琥珀酸脱氢酶活力随温度升高呈下降趋势。研究表明,10～14℃温度下,亲参消化酶与代谢酶活力均处于较高水平,是理想的亲参室内促熟温度参数。

关键词：刺参(Apostichopus japonicus) 亲参温度消化酶代谢酶

底部微孔增氧管布设距离和增氧时间对刺参养殖池塘溶氧的影响

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渔业现代化 2017年第6期44卷 13-18页

作者：李彬王印庚廖梅杰杜佗范瑞用中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室山东青岛266071 上海海洋大学水产与生命学院上海201306 青岛瑞滋海珍品发展有限公司山东青岛266409

为明确刺参养殖池塘中微孔增氧的效果以及增氧管的布设间距、增氧时间对水体溶氧的影响,研究测定了在夏季刺参养殖池塘一个增氧周期内(每天23:00—7:00增氧8 h,7 d一个周期)水体中溶氧(DO)、亚硝酸盐氮(NO_2^--N)、COD的变化。结果显示... 详细信息

为明确刺参养殖池塘中微孔增氧的效果以及增氧管的布设间距、增氧时间对水体溶氧的影响,研究测定了在夏季刺参养殖池塘一个增氧周期内(每天23:00—7:00增氧8 h,7 d一个周期)水体中溶氧(DO)、亚硝酸盐氮(NO_2^--N)、COD的变化。结果显示:连续充气增氧的8 h内DO持续增加,增氧2 h上升速率缓慢,增氧2~6 h上升速率迅速提高,增氧6~8 h上升速率下降,连续充气8 h能够显著改变夜间溶氧降低现象;增氧7 d时间内,NO_2^--N和COD持续下降,分别由0.025 mg/L下降到0.014 mg/L、18.46 mg/L下降到14.15 mg/L。对充氧管道不同距离处DO的测定结果表明,距离增氧管1~2 m处DO较高,3~4 m处缓慢下降,与1~2 m处差异不显著(P>0.05),DO保持在5.22 mg/L左右,距离5 m以上时DO下降速度较快,与1~2 m处差异显著(P<0.05)。研究表明:微孔增氧可以明显增加水体DO,减少COD、NO_2^--N;微孔增氧机充氧时间6~8 h效果较好;微孔增氧管之间的布设距离在6~8 m可以实现高效增氧。

关键词：刺参微孔增氧 DO COD NO2--N

刺参(Apostichopus japonicus)不同组织基因组甲基化状态MSAP分析

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海洋与湖沼 2013年第1期44卷 77-82页

作者：郭婷婷孙国华杨建敏赵强李雪燕上海海洋大学水产与生命学院上海201306 山东省海洋水产研究所烟台264006 烟台市水产研究所烟台264000

利用MSAP技术分析成体刺参的呼吸树、肠、肌肉和体壁等组织的基因组DNA甲基化水平,获得了四个组织基因组甲基化率。甲基化水平由高到低依次是呼吸树、体壁、肌肉和肠,分别是35.77%、33.51%、32.72%和28.0%,其中全甲基化位点各占19.46%、... 详细信息

利用MSAP技术分析成体刺参的呼吸树、肠、肌肉和体壁等组织的基因组DNA甲基化水平,获得了四个组织基因组甲基化率。甲基化水平由高到低依次是呼吸树、体壁、肌肉和肠,分别是35.77%、33.51%、32.72%和28.0%,其中全甲基化位点各占19.46%、18.39%、19.18%和15.97%。统计学分析结果显示肠组织的甲基化水平与其它组织的差异显著(P0.05),但呼吸树与肌肉的半甲基化水平差异显著(P刺参基因足非编码区或新功能基因序列。

关键词：刺参基因组甲基化 MSAP

原料灭菌处理对刺参饲料发酵效果的影响及发酵饲料在幼参保苗期的规模化应用效果评价

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饲料工业 2017年第16期38卷 30-36页

作者：姜燕廖梅杰王印庚李彬张正荣小军邹安革中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室山东青岛266071 蓬莱市安源水产有限公司山东烟台265600

为研究消毒灭菌处理对刺参(Apostichopus japonicus)饲料发酵效果的影响及评价发酵饲料在幼参保苗期的应用效果,本研究首先采用65℃湿热灭菌30 min的方式对饲料原料进行灭菌处理,以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为发酵菌种进行发... 详细信息

为研究消毒灭菌处理对刺参(Apostichopus japonicus)饲料发酵效果的影响及评价发酵饲料在幼参保苗期的应用效果,本研究首先采用65℃湿热灭菌30 min的方式对饲料原料进行灭菌处理,以酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为发酵菌种进行发酵。分别测定灭菌后发酵饲料(A)、灭菌后未发酵饲料(B)、未灭菌发酵饲料(C)和未灭菌未发酵饲料(D)4个不同处理组制备的刺参饲料的发酵菌比例、干物质回收率、粗蛋白含量、感官分值等指标,确定发酵饲料的制备工艺;在此基础上,开展了规模化养殖过程中发酵饲料对幼参生长和生理的影响研究。结果显示,饲料原料是否进行灭菌处理对发酵饲料中发酵菌比例、干物质回收率、粗蛋白含量、感官分值等无显著影响(P>0.05),但发酵处理对饲料的干物质回收率、粗蛋白含量、感官分值影响显著(P刺参发酵饲料的制备工艺为原材料不需要灭菌处理。分别投喂发酵饲料和未发酵饲料的刺参生长及生理检测结果表明,发酵饲料组的稚参增重率[(26.14±0.18)%]和特定生长率[(2.11±0.04)%/d]均显著高于投喂未发酵饲料的[分别为(25.40±0.18)%和(2.03±0.04)%/d](P刺参的健康、快速生长。相关研究结果将为刺参健康养殖及发酵饲料的规模化生产与应用提供理论支持。

关键词：刺参消毒灭菌发酵饲料应用

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刺参高温定向选育群体子一代耐温性状的分析

海洋科学 2014年第9期38卷 1-6页

作者：赵欢刘石林杨红生赵鹤凌林承刚大连海洋大学辽宁省海洋生物资源恢复与生境修复重点实验室辽宁大连116023 中国科学院海洋研究所海洋生态与环境科学重点实验室山东青岛266071 中国科学院成都生物研究所四川成都610041

在室内控温条件下测定了定向选育获得的刺参(Apostichopus japonicus)耐高温群体子一代高温胁迫下的存活率及热休克蛋白(Hsp90和Hsp26)基因表达特征,从生理及分子水平分析了刺参耐高温群体子一代对高温胁迫的响应特征,确定高温耐受性的... 详细信息

在室内控温条件下测定了定向选育获得的刺参(Apostichopus japonicus)耐高温群体子一代高温胁迫下的存活率及热休克蛋白(Hsp90和Hsp26)基因表达特征,从生理及分子水平分析了刺参耐高温群体子一代对高温胁迫的响应特征,确定高温耐受性的可遗传性。结果表明:与野生刺参群体子一代相比,定向选育刺参群体子一代在高温胁迫下表现出较高的存活率,32℃高温刺激下定向选育群体和野生群体稚参的存活率分别为80%和56.67%。高温胁迫下两个群体子一代的热休克蛋白90及26基因表达特征也存在差异,定向选育刺参群体子一代在高温刺激条件下热休克蛋白基因表达水平低于野生群体,且表达出现滞后现象。结果表明定向选育刺参群体子一代对高温具有一定的耐受能力,一定程度上验证了高温耐受性的可遗传性,该实验所获得的结果可以为后续刺参良种培育提供一定的理论依据和技术支撑。

关键词：刺参(Apostichopus japonicus) 定向选育存活率热休克蛋白耐温性

刺参(Apostichopus japonicus)高温胁迫应答基因应激表达特性的分析

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海洋与湖沼 2013年第1期44卷 182-188页

作者：孙国华吉成龙杨建敏王卫军任利华山东省海洋水产研究所烟台264006 中国科学院烟台海岸带研究所烟台264001

采用实时荧光定量PCR技术对刺参高温胁迫抑制性消减cDNA文库中2个上调表达差异基因hsp70和l(2)efl,2个下调表达差异基因pcsk9和myp,在不同温度、不同胁迫时间以及不同组织中的应激表达特性进行了分析。在15—30℃范围内,温度越高hsp70和... 详细信息

采用实时荧光定量PCR技术对刺参高温胁迫抑制性消减cDNA文库中2个上调表达差异基因hsp70和l(2)efl,2个下调表达差异基因pcsk9和myp,在不同温度、不同胁迫时间以及不同组织中的应激表达特性进行了分析。在15—30℃范围内,温度越高hsp70和l(2)efl基因相对表达量越多;而pcsk9、myp基因随着温度升高其表达量下降。在30℃高温胁迫0—3h时间内,hsp70表达量的变化最为显著,表现为先升后降再升;l(2)efl在1h后开始明显的上调表达,在2.5h之后呈下降趋势;pcsk9和myp基因表现为表达下调,表达量最小值分别在3h和2h。常温下hsp70、l(2)efl和pcsk9均在体壁中的表达量最高,在呼吸树中表达量最少,myp在消化道中表达量最高,在纵肌中表达量最少;高温胁迫后hsp70、l(2)efl均在呼吸树中上调表达量变化最显著;pcsk9和myp分别在呼吸树和纵肌中下调表达量变化最显著。这4种基因通过表达产物量的变化或作为功能蛋白直接参与代谢调节,或作为调节蛋白调控胁迫功能蛋白的表达及活性来提高刺参对高温胁迫的耐受能力。

关键词：刺参高温胁迫热休克蛋白70 类致死必需蛋白前蛋白转化酶枯草溶菌素9 主要卵黄蛋白

刺参苗期附着基更换频率对刺参生长及其养殖系统菌群结构的影响

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中国水产科学 2016年第2期23卷 359-369页

作者：王印庚张文泽廖梅杰李彬荣小军张正李华范瑞用宁鲁光中国水产科学研究院黄海水产研究所青岛海洋科学与技术国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室大连海洋大学水产与生命学院青岛瑞滋海珍品发展有限公司东营海跃水产科技有限公司

为了探究刺参(Apoasichopus japonicus)保苗阶段(7–9月)最佳的附着基更换频率(changing frequency,CF),本实验在夏季保苗期设置5个附着基更换频率组,即CF10、CF20、CF30、CF40和CF50。采用实验生态学的方法,并结合传统细菌培养法和16S ... 详细信息

为了探究刺参(Apoasichopus japonicus)保苗阶段(7–9月)最佳的附着基更换频率(changing frequency,CF),本实验在夏季保苗期设置5个附着基更换频率组,即CF10、CF20、CF30、CF40和CF50。采用实验生态学的方法,并结合传统细菌培养法和16S r DNA细菌鉴定技术对上述不同实验组进行检测。结果表明:CF20组刺参整池增重和个体增重幅度最大,CF30次之,CF50组由于死亡率高,整池重量为负增长。CF20组的特定生长率和存活率分别为(5.986±0.135)%/d和(95.231±0.265)/%,且显著高于其他各组(P刺参条件致病菌,且一直存在于养殖系统中并逐步占据绝对优势。这与CF50组在实验进行到43 d时开始出现化皮,50 d时开始出现死亡现象有一定的关系。同时,附着基长时间未更换,会滋生大量玻璃海鞘、日本毛壶、内刺盘管虫等敌害生物,争夺栖息空间和食物,导致刺参苗种生长减慢。综上,由实验结果显示,在7–9月高温季节每20 d更换一次附着基最佳。考虑到生产成本,附着基更换频率一般为2030 d为宜。本研究结果为刺参苗种培育工艺的优化及刺参健康养殖提供了理论依据和参考。

关键词：刺参育苗工艺附着基更换频率生长菌群结构弧菌