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石蒜碱调节AKT/mTOR信号通路对乳腺癌细胞曲妥珠单抗耐药的影响

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南开大学学报(自然科学版) 2024年第4期 79-85页

作者：杨芳沈国栋徐婷娟李瑞麟安徽医科大学第二附属医院妇产科安徽医科大学第二临床医学院中国科学技术大学附属第一医院&安徽省立医院老年医学科肿瘤免疫与营养治疗安徽省重点实验室安徽省老年医学研究所安徽医科大学第三附属医院药学部

石蒜碱具有显著的抗肿瘤活性,可增强顺铂对肝癌细胞敏感性及细胞毒性.本研究采用体外培养人乳腺癌细胞SKBR3,以5μg/mL的TZB连续给药诱导建立TZB耐药细胞SKBR3/TR,以CCK-8法筛选石蒜碱最佳作用浓度后检测其对SKBR3/TR细胞TZB耐药指数的... 详细信息

石蒜碱具有显著的抗肿瘤活性,可增强顺铂对肝癌细胞敏感性及细胞毒性.本研究采用体外培养人乳腺癌细胞SKBR3,以5μg/mL的TZB连续给药诱导建立TZB耐药细胞SKBR3/TR,以CCK-8法筛选石蒜碱最佳作用浓度后检测其对SKBR3/TR细胞TZB耐药指数的影响.构建SKBR3/TR移植瘤裸鼠模型,随机分为对照组、TZB组、TZB+石蒜碱组,药物干预后检测各组裸鼠肿瘤体积与质量.将体外培养的SKBR3/TR细胞随机分为对照组、TZB组、TZB+SC79组、TZB+石蒜碱组、TZB+石蒜碱+SC79(AKT激活剂)组,药物分组干预后以免疫印迹实验检测AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达;以流式细胞实验、CCK-8法、结晶紫染色分别检测各组细胞凋亡和增殖;以免疫印迹实验检测各组细胞增殖(PCNA)、凋亡(Bax、Cleaved Caspase-3、Bcl-2)及耐药P-糖蛋白(P-gp)相关蛋白表达.探讨石蒜碱调节AKT/mTOR信号通路对乳腺癌细胞曲妥珠单抗(TZB)耐药的影响.结果显示:石蒜碱可明显降低SKBR3/TR细胞TZB耐药指数,并增强TZB对SKBR3/TR移植瘤裸鼠肿瘤生长的抑制作用.与对照组、TZB组相比,TZB+石蒜碱组细胞的凋亡率、Bax与Cleaved Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR、细胞活力、集落形成率、PCNA与Bcl-2、P-gp蛋白表达降低(P<0.05);TZB+SC79组细胞各指标变化趋势与TZB+石蒜碱组相反(P<0.05).SC79可减弱石蒜碱对SKBR3/TR细胞的作用.上述结果表明,石蒜碱可抑制AKT/mTOR信号通路激活,从而减轻乳腺癌细胞的TZB耐药性.

关键词：石蒜碱 AKT/mTOR 乳腺癌曲妥珠单抗耐药

经椎板间入路单通道内镜与单侧双通道内镜治疗腰椎间盘突出症的临床比较

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实用医学杂志 2024年第11期40卷 1542-1548页

作者：韩国嵩马力祁家龙郑科董洲程永红张之栋合肥市第一人民医院脊柱外科合肥230061

目的比较经椎板间入路单通道内镜(uniportal interlaminar endoscopy,UIE)与单侧双通道内镜(unilateral biportal endoscopy,UBE)治疗腰椎间盘突出症的临床疗效和影像学结果。方法收集2021年3月至2022年10月在合肥市第一人民医院采用UIE... 详细信息

目的比较经椎板间入路单通道内镜(uniportal interlaminar endoscopy,UIE)与单侧双通道内镜(unilateral biportal endoscopy,UBE)治疗腰椎间盘突出症的临床疗效和影像学结果。方法收集2021年3月至2022年10月在合肥市第一人民医院采用UIE和UBE手术治疗的50例腰椎间盘突出症患者资料,其中UIE组28例,UBE组22例。分析比较两组患者术中指标(手术时间、切口长度、术中出血量、手术并发症)、不同时间点临床疗效指标(术前、术后3 d、3个月、6个月、1年)腰痛及腿痛视觉模拟评分(VAS评分)及功能障碍指数ODI、影像学结果(术前、术后1年椎间盘高度、硬膜囊面积及腰椎前凸角度)。结果两组患者手术后都进行了随访,随访时间为12~18个月,平均约为15个月。UIE组和UBE中各发生1例发生硬脊膜损伤,无神经根损伤,术后随访无神经根症状,腰腿痛症状也得到缓解。在围手术期指标和临床指标的比较中发现:UIE组在手术切口长度、术中出血量和手术时间方面均显著小于UBE组,差异具有统计学意义(P临床疗效和影像学结果,UIE在手术切口、手术时间、术中出血量、短期内腰痛比较上更有优势,但UBE组减压更充分。

关键词：腰椎间盘突出症单通道内镜单侧双通道内镜

肝星状细胞特异性Grk2基因敲除小鼠模型的制备及鉴定

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中国药理学通报 2024年第1期40卷 189-194页

作者：王语涵许雅萍李南陈婷婷李玲高萍萍王华魏伟孙妩弋安徽医科大学临床药理研究所抗炎免疫药物教育部重点实验室安徽合肥230032 安徽医科大学第一附属医院肿瘤科安徽合肥230022

目的利用Cre-loxP基因敲除技术建立肝星状细胞特异性G蛋白偶联受体激酶2(G protein-coupled receptor kinase 2,GRK2)基因敲除小鼠模型,为研究GRK2在肝星状细胞中的生物学功能提供动物模型基础。方法将loxP标记的Grk2基因小鼠(Grk2^(fl/... 详细信息

目的利用Cre-loxP基因敲除技术建立肝星状细胞特异性G蛋白偶联受体激酶2(G protein-coupled receptor kinase 2,GRK2)基因敲除小鼠模型,为研究GRK2在肝星状细胞中的生物学功能提供动物模型基础。方法将loxP标记的Grk2基因小鼠(Grk2^(fl/fl))和Lrat-Cre工具鼠进行多次繁殖,建立肝星状细胞特异性Grk2基因敲除(Grk2^(ΔHSC))小鼠模型。观察和分析小鼠的生长繁殖情况;通过PCR反应鉴定flox和Cre基因型;免疫荧光双染检测肝星状细胞中GRK2表达;Western blot检测小鼠肝星状细胞及肺、脾、肾脏、心脏组织中GRK2蛋白表达;HE染色观察肝脏及肺、脾、心脏、肾脏组织学形态。结果成功鉴定Grk2^(ΔHSC)小鼠基因型;两组小鼠体质量、繁殖能力无明显差异;免疫荧光双染及Western blot结果表明,Grk2^(ΔHSC)小鼠的肝星状细胞中GRK2蛋白水平明显低于对照组小鼠,Grk2^(ΔHSC)小鼠肺、脾、肾脏和心脏组织中GRK2蛋白表达与对照组相比无明显变化;HE染色结果显示,Grk2^(ΔHSC)小鼠肝脏及主要组织结构与Grk2^(fl/fl)相比差异无显著性,可用于后续研究。结论本研究应用Cre-loxP技术成功构建了肝星状细胞特异性Grk2基因敲除小鼠,为进一步研究GRK2在肝脏中的作用提供了优良工具。

关键词： G蛋白偶联受体激酶2 Cre-loxP重组酶系统细胞特异性敲除肝星状细胞基因鉴定繁育

肝细胞特异性Sirt3基因敲除小鼠模型的构建

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安徽医科大学学报 2024年第3期59卷 384-390页

作者：许雅萍王语涵陈婷婷李南高萍萍李玲王华孙妩弋安徽医科大学临床药理研究所抗炎免疫药物教育部重点实验室合肥230032 安徽医科大学第一附属医院肿瘤科合肥230032

目的运用Cre-loxP技术构建肝细胞特异性沉默信息调节因子3(silence information regulator 3,Sirt3)基因敲除(Sirt3^(Δhep))小鼠,为研究肝细胞Sirt3基因在疾病中的生物学功能提供重要动物模型。方法将loxP标记的Sirt3 ^(flox/flox)小鼠... 详细信息

目的运用Cre-loxP技术构建肝细胞特异性沉默信息调节因子3(silence information regulator 3,Sirt3)基因敲除(Sirt3^(Δhep))小鼠,为研究肝细胞Sirt3基因在疾病中的生物学功能提供重要动物模型。方法将loxP标记的Sirt3 ^(flox/flox)小鼠与Alb-Cre纯合子(Alb-Cre^(+/+))小鼠进行交配,F1代Sirt3^(flox/-)/Alb-Cre^(+/-)小鼠再与Sirt3^(flox/flox)小鼠进行交配并鉴定,F2代基因型为Sirt3 ^(flox/flox)/Alb-Cre^(+/-)的小鼠即为本实验所构建的Sirt3^(Δhep)小鼠,Sirt3 ^(flox/flox)/Alb-Cre^(-/-)小鼠即为对照小鼠Sirt3 ^(flox/flox)小鼠。提取鼠尾DNA,通过PCR鉴定子代小鼠的基因型;免疫荧光双染观察Sirt3在小鼠肝细胞中的表达;提取Sirt3^(Δhep)小鼠原代肝细胞及心脏、脾脏、肾脏、肺组织蛋白,Western blot法验证Sirt3在小鼠肝细胞及其他组织中的表达水平;HE染色观察小鼠肝脏及心脏、脾脏、肺等组织结构。结果成功鉴定出Sirt3^(Δhep)小鼠;免疫荧光及Western blot结果显示,小鼠肝细胞中Sirt3蛋白表达水平低于对照组小鼠(P0.05);HE染色结果显示Sirt3^(Δhep)小鼠肝脏、心脏、脾脏、肺、肾脏的组织学特征与对照组小鼠相比无明显变化。结论成功构建肝细胞特异性Sirt3基因敲除小鼠,为进一步研究肝细胞Sirt3基因在相关疾病中的调控作用机制奠定了基础。

关键词：肝细胞 Sirt3 基因敲除 Sirt3^(Δhep)小鼠 Cre-loxP 基因型鉴定

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三级综合性医院牵头的紧密型城市医联体“6541”工作模式建立与实践

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江苏卫生事业管理 2023年第12期34卷 1618-1622页

作者：朱以敏潘爱红胡景春牛磊合肥市第一人民医院、安徽医科大学第三附属医院事业发展处安徽合肥230001 合肥市第一人民医院、安徽医科大学第三附属医院护理部安徽合肥230001 合肥市庐阳区杏林街道和大杨镇社区卫生服务中心安徽合肥230031

紧密型医联体是以医联体内人、财、物统一管理的模式,促使医联体成为目标一致的共同体。本研究通过三级综合性医院牵头构建并实践紧密型城市医联体“6541”工作模式,即六统一:行政管理、人员管理、财务账户管理、药品耗材管理、质量安... 详细信息

紧密型医联体是以医联体内人、财、物统一管理的模式,促使医联体成为目标一致的共同体。本研究通过三级综合性医院牵头构建并实践紧密型城市医联体“6541”工作模式,即六统一:行政管理、人员管理、财务账户管理、药品耗材管理、质量安全管理和绩效考核管理统一;五畅通:业务流、病人流、资源流、数据流和现金流畅通;四特色:五派出、五延伸、居民医保基金打包付费改革和五方满意;一体化:共建一体化医防融合服务体系,以资源整合促进优质服务,提升基层服务能力,促进服务同质,实现“责任、服务、资源、管理、利益和发展”一体化的可复制、可推广的紧密型城市医联体工作模式。

关键词：紧密型医联体城市医院工作模式