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Correlation Analysis of the Results of Double Fluorescence(AO/PI) Staining and Clinical Outcomes

Journal of Reproduction and Contraception 2012年第2期23卷 111-118页

作者： Yu-bao WANG Lei-wen ZHAO Zu-qiong XIANG Xiu-zhuang ZHOU you-lun gui Chang-hai HE Shanghai Institute of Planned Parenthood Research Shanghai 200032China Shanghai Renji Hospital Shanghai 200001China Zoneking Software Co. Ltd.Beijing 100190China

Objective To estimate the predictive value of double fluorescence [acridine orange （AO）/propidium iodide （PI）] staining results for fertilization rate and clinical outcomes and analyze the correlation between the results of AO/P1 staining and sperm apoptosis. Methods A prospective study was carried out, 235 infertile couples remedied using traditional in vitro fertilization （IVF） were included. Semen collected from 235 patients were stained by fluorescence dye, AO and PL at the same time the spermatozoa apoptosis rate was calculated by using flow cytometry to detect the rate of Annexin V＋/ PI- . The result of fluorescence was divided into 3 groups as green （G）, yellow （Y） and red （R） according to the color of fluorescence. The correlation between the percent of the 3 colors and clinical outcomes and spermatozoa apoptosis rate was evaluated. Results Significant negative correlation was observed between the percentage of Y and fertilization rate （r= -0.42, P=0.04）, no significant correlation was observed between the percentage of G, R and fertilization rate. The percentage of G, Y, R was not significantly different between pregnant patients and non-pregnant patients, respectiw,ly, while the percentage of Y was significant different between miscarriage patients and liveborn patients （r=0.6L P=0.01） and no significant difference exist in the percentage of G and R between liveborn patients and miscarriage patients. There was a significant positive correlation between the percentage of Y and the rate of Annexin V＋/ PI （r=0.53, P=0.04）, and no significant correlation was shown between the percentage of G, R and the rate of Annexin V＋/ PI-.Conclusion The percentage of yellow group of double fluorescence （AO/PI） staining will affect the fertilization rate and the miscarriage rate, and this group of spermatozoa may be connected with the spermatozoa apoptosis.

关键词： acridine orange (AO) propidium iodide (PI) spermatozoa in vitro fertilization (1VF)

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Effect of Spermatozoa Apoptosis on the Clinical Outcomes with Human in vitro Fertilization

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Journal of Reproduction and Contraception 2012年第1期23卷 41-50页

Objective To analyze the effect of spermatozoa apoptosis on the clinical outcomes during in vitro Fertilization （IVF-ET）. Methods A prospective analysis was carried out, 519 infertile couples were divided into 3 groups according to the clinical outcomes with IVF, including pregnancy and birth （liveborn group）, pregnancy but abortion （miscarriage group）, failure to pregnancy （failure group）. Spermatozoa collected from 519 male partners were processed through density gradient centrifugation （DGC） and swim-up and the apoptosis of the spermatozoa, in ejaculated/processed semen, were evaluated using flow cytometry by determining the levels of disruption of mitochondrial membrane potential （d-MMP） and activation of caspase-3（CP3）Results For ejaculated semen, apoptosis was significantly different among .4 groups individually, the result was as follows： liveborn group 〈 failure group 〈 miscarriage group （P〈0.05）. For processed semen, miscarriage had the highest apoptosis level （P〈0.05）, and there was no significant difference between liveborn group and failure group （P〉0.05）. Compared with the d-MMP, the activation of CP3, either in ejaculated or processed semen, showed more powerful predictive value for miscarriage other than liveborn and failure. The cutoff value of CP3 in ejaculated semen was 42.0%, with sensitivity： 0.931, specificity： *** The level of apoptosis of spermatozoa played a strongly impact on the clinical outcomes with IVF and the activation of CP3 in ejaculated semen possessed a high predictive value for miscarriage.

关键词： sperm apoptosis caspase-3 mitochondrial membrane potential miscarriage

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黄体酮阴道环在家兔的药代动力学研究

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生殖与避孕 2006年第4期26卷 204-208页

作者：孔雅慧桂幼伦何桂林贺昌海复旦大学医学院上海200032 上海市计划生育科学研究所上海200032

目的:提供研制可供哺乳期妇女避孕的黄体酮阴道环的药理学依据。方法:将18只去卵巢后2周的新西兰雌兔随机分为3组:阴道环低剂量组(175mg,A组)、高剂量组(350mg,B组)及肌注组(C组),分别在放置阴道环及肌注黄体酮前后不同时点取静脉血,用... 详细信息

目的:提供研制可供哺乳期妇女避孕的黄体酮阴道环的药理学依据。方法:将18只去卵巢后2周的新西兰雌兔随机分为3组:阴道环低剂量组(175mg,A组)、高剂量组(350mg,B组)及肌注组(C组),分别在放置阴道环及肌注黄体酮前后不同时点取静脉血,用磁性分离酶联免疫法测定兔血清中黄体酮的浓度,用PK-Graph程序计算药代动力学参数。结果:黄体酮阴道环和黄体酮注射剂在兔体内的药代动力学符合二室开放模型。主要药代动力学参数分别是A组:Tmax:2.23±1.3h,Cmax:47.64±23.58ng/ml,T1/2:818.08±511.77h,AUC:16115.11±8398.88ng·ml·h-1;B组:Tmax:2.03±1.33h,Cmax:74.04±24.57ng/ml,T1/2:730.31±306.49h,AUC:28751.95±7151.95ml·h-1;C组:Tmax:1.54±0.77h,Cmax:138.88±60.96ng/ml,T1/2:2.55±0.89h。其中A组的AUC(56d)明显低于B组,二者有显著性差异(P<0.05);A组和B组的Cmax均低于C组,差异显著(P<0.05);A组和B组的T1/2均明显高于C组(P<0.01),但A、B组间无差异。结论:与传统的黄体酮注射剂相比,黄体酮阴道环的药代动力学参数呈现明显的长效缓释特征。应可成为安全长效且使用方便的哺乳期避孕药具。

关键词：阴道环黄体酮药代动力学哺乳期避孕

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国产天然孕酮阴道环的抗生育作用药效学和动物体内血药浓度变化研究

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生殖与避孕 2011年第8期31卷 509-513页

作者：桂幼伦郭湘洁谢淑武邵海浩曹霖朱焰上海市计划生育科学研究所国家人口计生委计划生育药具重点实验室生殖药理组上海200032

目的:研究和观察天然孕酮阴道环的长效避孕效果,及其在山羊体内的血药浓度和持续释放时间。方法:①将24只具有生育能力的新西兰雌兔随机分为4组,分别阴道置入空白环、天然孕酮阴道环低剂量(210 mg/环)、中剂量(420 mg/环)和高剂量(840 ... 详细信息

目的:研究和观察天然孕酮阴道环的长效避孕效果,及其在山羊体内的血药浓度和持续释放时间。方法:①将24只具有生育能力的新西兰雌兔随机分为4组,分别阴道置入空白环、天然孕酮阴道环低剂量(210 mg/环)、中剂量(420 mg/环)和高剂量(840 mg/环)。手术15 d后进行交配,观察天然孕酮阴道环对家兔的长效避孕效果。②将12只去卵巢山羊随机分为2组,分别给予国产和智利产天然孕酮阴道环,并于置入阴道环前、后不同时间点颈静脉采血,用磁性分离酶联免疫法测定血清中天然孕酮的浓度。结果:①阴道环对动物的一般状况均无明显影响,高剂量组和中剂量组避孕效果较好,能维持3个月,而低剂量组避孕效果较差。②国产和智利产阴道环血药浓度除20 d、27 d、90 d外无显著性差异(P>0.05)。结论:天然孕酮阴道环高、中剂量组均有长效避孕作用;与智利孕酮阴道环相比,国产天然孕酮阴道环放置在山羊阴道后的血药浓度变化无明显差异,其维持释放剂量和时间相当。

关键词：阴道环天然孕酮药效学血药浓度兔山羊

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新型左炔诺孕酮/炔雌醇复方避孕贴剂的家兔药代动力学研究

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生殖与避孕 2012年第12期32卷 805-813页

作者：谢淑武郭湘洁李钊吴树明杨明京夏敏桂幼伦曹霖朱焰上海市计划生育科学研究所生殖药理研究组国家人口与计划生育委员会计划生育药具重点实验室上海200032 润和生物医药科技(汕头)有限公司汕头515063

目的:探讨新型左炔诺孕酮(levonorgestrel,LNG)和炔雌醇(ethynylestradiol,EE)在家兔体内的药物动力学特征,评价多次给药后是否出现药物蓄积情况。方法:家兔在单次和多次给药及停止给药后不同时间点耳缘静脉采血,选择放射免疫分析(radio... 详细信息

目的:探讨新型左炔诺孕酮(levonorgestrel,LNG)和炔雌醇(ethynylestradiol,EE)在家兔体内的药物动力学特征,评价多次给药后是否出现药物蓄积情况。方法:家兔在单次和多次给药及停止给药后不同时间点耳缘静脉采血,选择放射免疫分析(radioimmunoassay,RIA)法测定各时间点各组家兔雌/孕激素的血药浓度,使用药物动力学软件计算各药物动力学参数并对其进行统计分析。结果:单次给药后受试贴剂低(10cm2)、中(20 cm2)和高剂量(40 cm2)组血清LNG峰浓度(Cmax)分别为1.04±0.12 ng/ml、2.42±0.60 ng/ml和4.90±1.39 ng/ml,3组间有显著差异(P0.05)。EE血药浓度-时间曲线下面积(AUC)分别为4.70±1.34 ***/ml、6.59±***/ml和16.59±2.33 ***/ml,中、高剂量组之间有显著差异(P0.05)。中剂量组血清EE浓度与Evra避孕贴剂的相比显著降低(P<0.05)。多次给药后LNG/EE避孕贴剂10 cm2组和20 cm2组在重复给药10次的过程中未出现LNG和EE血药浓度蓄积现象,Evra贴剂组在重复给药4次的过程中未出现LNG和EE血药浓度蓄积现象。结论:中剂量的LNG/EE避孕贴剂具有良好的避孕效果,同时其副作用可能小于Evra。

关键词：左炔诺孕酮(LNG) 炔雌醇(EE) 放射免疫分析方法(RIA) 药代动力学透皮贴剂

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左炔诺孕酮口崩片的人体药代动力学及相对生物利用度研究

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生殖与避孕 2012年第2期32卷 92-98页

作者：郭湘洁李钊桂幼伦朱忠义赵宪平李雪宁曹霖朱焰．上海市计划生育科学研究所生殖药理组国家人口计生委计划生育药具重点实验室上海200032 上海信谊康捷药业有限公司上海201419 上海复旦大学附属中山医院药物临床试验机构上海200032

目的:比较左炔诺孕酮口崩片和市售口服片的人体药代动力学及相对生物利用度。方法:20名健康女性志愿者随机双交叉单剂量服用左炔诺孕酮口崩片和市售口服片,剂量均为0.75 mg,分别于服药前和服药后72 h内不同时间点抽取静脉血,清洗期为2周... 详细信息

目的:比较左炔诺孕酮口崩片和市售口服片的人体药代动力学及相对生物利用度。方法:20名健康女性志愿者随机双交叉单剂量服用左炔诺孕酮口崩片和市售口服片,剂量均为0.75 mg,分别于服药前和服药后72 h内不同时间点抽取静脉血,清洗期为2周,以放射免疫分析(radioimmuno-assay,RIA)法测定血清中左炔诺孕酮的浓度,并利用SAS软件计算口崩片与市售口服片的药代动力学和相对生物利用度。结果:采用RIA测定左炔诺孕酮的最低检测限为10 pg/ml,低、中、高(300 pg/ml、2 000 pg/ml、6 000 pg/ml)3种浓度左炔诺孕酮标准质控血清的日内精密度分别为12.4%、9.3%、3.1%(n=5),日间精密度分别为4.3%、11.7%、5.7%(n=5)。口崩片和市售口服片的主要药代动力学参数分别为:tmax1.6±0.2 h、tmax1.7±0.3 h;Cmax6.2±0.8 ng/ml、Cmax6.5±1.0 ng/ml;AUC0～72 h 85.5±24.4 ***/ml、AUC0～72 h 90.8±27.1 ***/ml;AUC0-inf96.8±27.9 ***/ml、AUC0-inf 101.2±30.8 ***/ml;t1/2 25.3±3.5 h、t1/224.2±3.1 h。口崩片的AUC0～72 h、AUC0-inf和Cmax的90%置信区间分别为市售口服片相应参数的87.72%～101.87%、89.01%～103.73%和89.80%～101.75%。口崩片tmax与市售口服片相比无显著差异(P>0.05)。口崩片的相对生物利用度为96.1±18.3%。结论:建立的分析方法准确灵敏,可用于左炔诺孕酮血药浓度的测定;左炔诺孕酮口崩片与市售口服片的生物利用度无显著性差异,2种制剂具有生物等效性。

关键词：左炔诺孕酮口崩片放射免疫分析方法药动学生物利用度生物等效性

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Effect of combined use of Chinese-made implants and testosterone undecanoate on pituary-gonadal axis in Chinese men

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Asian Journal of Andrology 2001年第2期 158-158页

作者： Chang-Hai HE Cui-Hong LIN W. J. Bremner you-lun gui La-Mei LI Er-Sheng GAO Shanghai Institute of Planned Parenthood Research,Shanghai 200032,China Fudan University Medical College,Shanghai 200032,China Dept.of Medicine,Washington University,USA

Aim: To study the effect of the title drugs on the serum FSH, LH andtestosterone (T) levels in Chinese men in a contraceptive trial. Methods:Sixteen male volunteers were administered Chinese-made implant (tworods, each containing 75 mg of levonorgestrel, LNG) plus testosterone un-decanoate (TU) (250 mg, i.m. monthly for3 months). FSH, LH and Tlevels were determined with RIA. Results: The serum FSH and LH lev-els declined after the insertion of implants. They declined further after the1st TU injection and one week later, both FSH and LH levels reached thelowest levels, after which, they rose slightly. The profiles of serum LH andFSH levels after the 2nd and 3rd TU injection were similar to that followingthe 1st TU injection. After insertion of the implants, the serum T levels alsodeclined. However, after the 1st dose of TU, the T levels increased, oneweek later they reached the peak level, and then declined again. The pro-files of serum T levels after the 2nd and 3rd TU injection were also similarto that

关键词： levonorgestrel implant testosterone undecanoate male contraception

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双酚A对大鼠雌性子代卵巢发育和血管内皮生长因子蛋白表达的影响

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生殖与避孕 2012年第5期32卷 293-300页

作者：周娴颖郝树芳谢淑武桂幼伦郭湘洁周洁芸李钊朱焰复旦大学上海200032 上海市计划生育科学研究所国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室上海200032 暨南大学广州510632

目的：探讨大鼠妊娠期接触双酚A（BPA）对雌性子代卵巢发育和血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达的影响。方法：实验组于SD母鼠妊娠第7-20日分别灌胃给予0．005mg／kg、0．05mg／kg、0．5mg／kg、2．5mg／kgBPA，阴性对照组给予0．5mg／k... 详细信息

目的：探讨大鼠妊娠期接触双酚A（BPA）对雌性子代卵巢发育和血管内皮生长因子（VEGF）蛋白表达的影响。方法：实验组于SD母鼠妊娠第7-20日分别灌胃给予0．005mg／kg、0．05mg／kg、0．5mg／kg、2．5mg／kgBPA，阴性对照组给予0．5mg／kg溶剂，阳性对照组给予0．05mg／kg己烯雌酚，每组8-10只。观察雌性仔鼠的阴道开口时间，分别于出生后30d、60d（分别相当于人青春期前和成年期）处死仔鼠，称重卵巢，光学显微镜观察卵巢组织学变化，ELISA检测血清雌、孕激素水平，Westernblotting检测卵巢VEGF蛋白的表达。结果：BPA0．05mg／kg、O．5mg／kg、2．5mg／kg组仔鼠阴道开口时间明显缩短，2．5mg／kg组青春期前仔剐P巢脏器系数明显升高，BPA0．05mg／kg、0．5mg／kg、2．5mg／kg组卵巢出现多囊样病变，BPAO．5mg／kg、2．5mg／kg组青春期前仔鼠血清雌、孕激素水平明显升高，BPA2．5mg／kg可导致青春期前仔鼠卵巢VEGF蛋白表达明显升高。结论：母体妊娠期接触BPA可导致青春期前雌性仔鼠卵巢出现多囊样病变．但对成年雌性仔鼠卵巢无明显影响．

关键词：双酚A(BPA) 雌性仔鼠卵巢血管内皮生长因子(VEGF) 青春期前

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坤泰胶囊对大鼠实验性子宫异位内膜生长及其妊娠结局的影响

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生殖与避孕 2015年第8期35卷 517-524页

作者：钟瑞华周娴颖谢淑武李国停马阿影李钊桂幼伦朱健平朱焰广东医学院药学院东莞523808 国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室上海市计划生育科学研究所生殖药理研究组上海200032 复旦大学上海200032

目的:研究坤泰胶囊(KTC)对SD大鼠实验性子宫异位内膜生长及其妊娠结局的影响。方法:手术法建立SD大鼠子宫内膜异位症(EMs)模型。将造模成功的SD大鼠分为模型对照组、阳性对照组(每只给予醋酸亮丙瑞林0.1 mg皮下注射,共1次),KTC低剂量组... 详细信息

目的:研究坤泰胶囊(KTC)对SD大鼠实验性子宫异位内膜生长及其妊娠结局的影响。方法:手术法建立SD大鼠子宫内膜异位症(EMs)模型。将造模成功的SD大鼠分为模型对照组、阳性对照组(每只给予醋酸亮丙瑞林0.1 mg皮下注射,共1次),KTC低剂量组(每只按0.24 g/kg体质量灌胃,qd×21 d)、KTC高剂量组(每只按0.60 g/kg体质量灌胃,qd×21 d),每组14只。给药21 d后,每组解剖8只,比较给药前、后异位内膜体积变化;Western blotting法测定异位内膜caspase-8、caspase-3和caspase-9蛋白表达。每组剩余6只与雄鼠交配,妊娠12 d后,解剖观察受孕情况,并对胎盘、胎仔称量。动情周期正常的SD大鼠14只作为空白对照。结果:与模型对照组相比,KTC低、高剂量组体质量无统计学差异(P>0.05);KTC低、高剂量组异位内膜抑制率分别为(40.25±35.18)%和(65.52±15.82)%;KTC低、高剂量组异位内膜中caspase-8、caspase-9和活化caspase-3明显升高(P<0.05);KTC低剂量组的大鼠胎仔数量呈增加趋势。结论:KTC通过升高caspase-8、caspase-9和活化caspase-3蛋白含量,促进异位内膜的凋亡;KTC低剂量组EMs大鼠受孕率呈现出升高的趋势。

关键词：坤泰胶囊(KTC) 子宫内膜异位症(EMs) SD大鼠 caspase 妊娠率

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粉煤灰资源利用:无机矿物改良剂对CFA源蛋白石/沙粒团聚体形成的影响

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Journal of Central South University 2024年第4期31卷 1248-1264页

作者：李为轮王一霖朱锋周秋生刘桂华彭志宏齐天贵申雷霆李小斌 School of Metallurgy and Environment Central South UniversityChangsha 410083China

粉煤灰碱法提铝的副产物-蛋白石(SiO_(2)·nH_(2)O,非晶质二氧化硅)具有很强的吸附性,是土壤中的次生/黏土矿物。将蛋白石与沙粒复配形成团聚体应用于沙漠化土壤修复,是一种前景广阔的大规模生态化处置方式。然而,由于无机矿物质的缺乏... 详细信息

粉煤灰碱法提铝的副产物-蛋白石(SiO_(2)·nH_(2)O,非晶质二氧化硅)具有很强的吸附性,是土壤中的次生/黏土矿物。将蛋白石与沙粒复配形成团聚体应用于沙漠化土壤修复,是一种前景广阔的大规模生态化处置方式。然而,由于无机矿物质的缺乏,该团聚体与自然土壤团聚体仍有差距。本文通过短期土培实验,研究了石灰石(CaCO_(3))、脱硫石膏(CaSO_(4)·2H_(2)O)、磷酸钙(Ca_(3)(PO_(4))_(2))、赤铁矿(Fe_(2)O_(3))、三水铝石(Al(OH)_(3))等无机矿物改良剂对团聚体形成、稳定以及孔隙特征的影响,并阐述了其内在的吸附机理。结果表明,五种改良剂中,只有石膏可有效降低团聚体的pH,且石膏对提升团聚体的保水效果最为显著,但石膏会增大电导率。改良剂均能促进团聚体的形成,提高机械稳定性,石膏、CaCO_(3)、Fe_(2)O_(3)有利于提高团聚体的水稳性。XRD/SEM/FT-IR/XPS等分析表明,无机矿物与沙子/蛋白石发生吸附作用,团聚体表面形成了有利于团聚体生成的无机矿物界面层。与CK相比,改良后的大团聚体(>0.25 mm)以孔径15 nm介孔的数量。总之,作为土壤“骨架”的无机矿物有效改善了蛋白石/沙粒团聚体的物理结构,加速了团聚体的形成。因此,脱硫石膏优化了大聚集体的形成和稳定性。经脱硫石膏改良的团聚体可作为类土壤基质,加速退化的沙漠化土壤的生态重建。

关键词：无机矿物改良剂蛋白石/沙粒团聚体脱硫石膏团聚体稳定性孔隙特征沙漠化土壤修复

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