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浓香型白酒窖池分层分位点池底窖泥pH值、主要有机酸与钙、镁离子之间的相关性分析

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食品科学 2020年第19期41卷 90-97页

作者：张会敏孟雅静王艳丽胡心行王银辉黄艳周庆伍李安军王录邢新会安徽省固态发酵工程技术研究中心安徽亳州236820 清华大学化工系北京100084

本实验通过测定浓香型白酒新老窖池分层池底窖泥的pH值,4种主要有机酸含量,钙、镁离子含量,离心上清液/过滤液的浊度,研究浓香型白酒窖池分层分位点池底窖泥pH值、主要有机酸与钙、镁离子之间的相关性。结果表明:老窖泥理化性质无水平... 详细信息

本实验通过测定浓香型白酒新老窖池分层池底窖泥的pH值,4种主要有机酸含量,钙、镁离子含量,离心上清液/过滤液的浊度,研究浓香型白酒窖池分层分位点池底窖泥pH值、主要有机酸与钙、镁离子之间的相关性。结果表明:老窖泥理化性质无水平方向上的变化,在垂直方向上,随窖泥深度增加,pH值(5.86~9.22)递增,乳酸含量(2380.07~19.48 mg/kg)、己酸含量(3134.59~1904.76 mg/kg)、丁酸含量(559.10~103.95 mg/kg)、乙酸含量(2737.79~536.48 mg/kg),钙离子含量(292.1~35.0 mg/kg)和镁离子含量(258.7~13.3 mg/kg)递减。新窖泥在中心点和四分之一点随深度增加,pH值(4.24~6.42)递增,乳酸含量(38146.5~6664.7 mg/kg)和镁离子含量(326.70~183.91 mg/kg)递减,钙离子含量(1448.6 mg/kg)无明显变化;在角点随深度增加,pH值(4.13~7.89)递增,乳酸含量(14461.0~81.1 mg/kg)、钙离子含量(878.3~362.8 mg/kg)和镁离子含量(197.1~106.3 mg/kg)递减;新窖泥己酸含量(6663.69 mg/kg)、丁酸含量(1403.47 mg/kg)和乙酸含量(1347.00 mg/kg)无明显变化。相关性分析结果表明,新老窖泥pH值与乳酸呈强相关性(-0.6862和-0.7893),说明乳酸对窖泥pH值有重要影响。新老窖泥乳酸与钙离子含量(0.4186和0.7176)、镁离子含量(0.7316和0.7385)呈强相关性,说明乳酸对钙、镁离子解离有重要影响。与新窖泥相比,老窖泥中乳酸含量与己酸含量(-0.1268和0.4660)、丁酸含量(-0.0925和0.5371)和乙酸含量(-0.0780和0.4433)的相关性更强,表明老窖泥中乳酸降解代谢比较旺盛。由新老窖泥离心上清液(48.63 NTU和62.16 NTU)和过滤液(14.21 NTU和24.12 NTU)的浊度差异可知,老窖泥中微纳米颗粒的数量更多。结论:减少乳酸有利于提高窖泥品质,窖泥中较多的微纳米颗粒有利于乳酸降解菌的代谢作用。

关键词：浓香型白酒分层池底窖泥 pH值主要有机酸钙离子相关关系浊度

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扭脱甲基杆菌AM1生物加工过程研究进展

生物加工过程 2017年第6期15卷 26-33页

作者：王山山崔兰玉薛正莲张翀邢新会安徽工程大学生物与化学工程学院安徽芜湖241000 清华大学化学工程系生物化工研究所工业生物催化教育部重点实验室北京100084 清华大学合成与系统生物学中心北京100084

甲醇作为重要的一碳化工原料,可由甲烷、合成气和CO_2等转化制得。扭脱甲基杆菌AM1是以甲醇作为唯一碳源和能源来进行生物发酵的微生物。由于原料来源广泛,发酵过程染菌的风险低,且能够利用合成培养基降低生产成本,同时产物后处理简单,... 详细信息

甲醇作为重要的一碳化工原料,可由甲烷、合成气和CO_2等转化制得。扭脱甲基杆菌AM1是以甲醇作为唯一碳源和能源来进行生物发酵的微生物。由于原料来源广泛,发酵过程染菌的风险低,且能够利用合成培养基降低生产成本,同时产物后处理简单,扭脱甲基杆菌AM1被广泛利用在生物化工领域。目前,扭脱甲基杆菌AM1以甲醇作为碳源,已经成功实现了工业化生产单细胞蛋白。随着分子生物学技术的发展,扭脱甲基杆菌AM1以甲醇为底物有望合成更多高附加值的产品。本文中,笔者对扭脱甲基杆菌AM1生物加工过程进行综述,希望对甲醇基生物工业有所启发。

关键词：甲醇生物化工高附加值产品扭脱甲基杆菌AM1

ARTP生物育种技术与装备研发及其产业化发展

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生物产业技术 2017年第1期 37-45页

作者：吴亦楠邢新会张翀李和平王立言工业生物催化教育部重点实验室清华大学化工系生物化工研究所清华大学合成与系统生物学研究中心北京100084 清华大学无锡应用技术研究院生物育种中心无锡214072 清华大学工程物理系北京100084

安全高效的微生物诱变和高通量筛选技术与装备是生物技术科研及产业发展的核心,具有重要的研究价值和广泛的应用前景。笔者研究团队成功将基于大气压射频辉光放电的常压室温等离子体(ARTP)应用于生物诱变育种领域,对其与生物大分子、细... 详细信息

安全高效的微生物诱变和高通量筛选技术与装备是生物技术科研及产业发展的核心,具有重要的研究价值和广泛的应用前景。笔者研究团队成功将基于大气压射频辉光放电的常压室温等离子体(ARTP)应用于生物诱变育种领域,对其与生物大分子、细胞之间的作用机理进行了系统研究,并研发了具有自主知识产权的ARTP生物育种仪。因操作安全简便、突变快、突变率高、获得的突变体性状稳定等特点,ARTP育种仪已成功应用于百种以上微生物的诱变育种,在行业引起了广泛关注,并实现了的国际出口。综述了ARTP生物育种技术的原理、装备研发现状及其近年来的研究和应用进展,并对其今后的发展趋势进行了展望。

关键词： ARTP 筛选生物育种诱变

肝细胞癌组织中己糖激酶-2蛋白的表达及临床意义

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中华消化外科杂志 2017年第2期16卷 170-176页

作者：黄尧黄新辉黎蕴通邢晓华王英超曾永毅曾金华刘小龙刘景丰福建医科大学附属第一医院肝病中心肝外科福州350005 福建医科大学盂超肝胆医院肝胆外科福州350025 福建医科大学孟超肝胆医院福建省联合创新重点实验室

目的：探讨肝细胞癌（简称肝癌）组织和癌旁组织中己糖激酶2蛋白的表达及其与肝癌临床病理因素和患者预后的关系。方法：采用回顾性队列研究和病例对照研究方法。收集2010年8月至2013年1月福建医科大学附属第一医院收治的204例肝癌患者... 详细信息

目的：探讨肝细胞癌（简称肝癌）组织和癌旁组织中己糖激酶2蛋白的表达及其与肝癌临床病理因素和患者预后的关系。方法：采用回顾性队列研究和病例对照研究方法。收集2010年8月至2013年1月福建医科大学附属第一医院收治的204例肝癌患者的临床病理资料。采用Western blot检测肝癌组织和癌旁组织中己糖激酶2蛋白的表达。观察指标：（1）己糖激酶2蛋白在肝癌组织和癌旁组织中的表达情况。（2）肝癌组织中己糖激酶2蛋白表达与患者临床病理因素的关系。（3）肝癌根治性切除术后复发和转移的危险因素分析。（4）己糖激酶2蛋白表达与肝癌患者预后的关系。采用门诊和电话方式进行随访。患者术后1年内，每2个月行两种影像学检查、实验室检查、全身骨发射型计算机断层扫描检查。术后1年每3个月复查以上项目。对怀疑肝内外复发、转移患者经CT增强扫描、超声造影检查进一步明确诊断。影像学检查发现肿瘤复发和（或）转移确定肿瘤复发、转移时间。随访时间截至2015年12月31日。偏态分布的计量资料采用M（范围）表示，组间比较采用秩和检验。己糖激酶2蛋白表达与临床病理因素的关系采用χ^2检验。采用COX回归模型进行单因素和多因素分析。采用KaplanMeier法绘制生存曲线和计算生存率，Logrank检验进行生存分析。结果：（1）己糖激酶2蛋白在肝癌组织和癌旁组织中的表达情况：Western blot检测结果显示：204例患者肝癌组织中己糖激酶2蛋白的相对表达量为4.51（1.48～11.58），癌旁组织中的相对表达量为0.28（0.18～0.49），两者比较，差异有统计学意义（Z=-6.816，P〈0.05）。己糖激酶2在肝癌组织中相对表达量的中位数为4.51，故将己糖激酶2蛋白相对表达量≤4.51定义为低表达，〉4.51定义为高表达。（2）肝癌组织中己糖激酶2蛋白表达与患者临床病理因素的关系：发现方式为无症状健康体检发现和有临床症状肝癌组织中己糖激酶2蛋白高表达分别为49例和 53例，肿瘤直径为≤2 cm、〉2 cm且≤5 cm、〉5 cm且≤10 cm、〉10 cm分别为1、14、52、35例，肿瘤数目为 1个、≥2个分别为91例和11例，有、无镜下脉管癌栓分别为56例和46例，上述指标比较，差异均有统计学意义（χ^2=5.090，47.087，5.082，3.842，P〈0.05）。（3）肝癌根治性切除术后复发和转移的危险因素分析：单因素分析结果显示：发现方式、肿瘤直径、肿瘤包膜、肿瘤病理学分化程度、镜下脉管癌栓、术后TBil峰值、己糖激酶2蛋白表达是影响肝癌根治性切除术后2年肿瘤复发转移率的危险因素（HR=1.663，3.159，1.516，0.426，2.705，1.419，2.786，95%可信区间：0.119～2.472，2.105～4.740，0.989～2.322，0.260～0.698，1.851～3.952，0.951～2.117，1.819～4.269，P〈0.05）。多因素分析结果显示：发现方式为有临床症状、镜下有脉管癌栓、己糖激酶2蛋白高表达是影响肝癌根治性切除术后2年肿瘤复发转移的独立危险因素（HR=2.702，2.117，6.908，95%可信区间：1.417～5.151，1.386～3.233，3.920～12.174，P〈0.05）。（4）己糖激酶2蛋白表达与肝癌患者预后的关系：204例肝癌患者术后均获得随访，随访时间为23～64个月，中位随访时间为45个月。己糖激酶2蛋白低表达和高表达肝癌患者，肝癌根治性切除术后1、3、5年生存率分别为88.0%、71.9%、52.6%和79.6%、50.2%、30.3%，两者生存情况比较，差异有统计学意义（χ^2=13.841，P〈0.05）。结论：己糖激酶2蛋白在肝癌组织中表达升高，可作为预测肝癌根治性切除术后肿瘤复发转移有效的分子标志物。

关键词：癌,肝细胞肝切除术复发转移己糖激酶.2

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抗缺氧高能野战食品研究进展

高原医学杂志 2010年第3期20卷 1-6页

作者：郝利民吴天一贾士儒曹小红王硕邢新会总后勤部军需装备研究所北京100010 青海高原医学科学研究院西宁810012 天津科技大学天津300222 清华大学北京100084

高原缺氧引起人体能量代谢受阻,影响高原官兵的军事作业能力,进而影响高原部队的战斗力和生存力。本研究旨在采用发酵工程技术、酶工程技术和泡腾技术,全新研发抗缺氧食品、高能耐力饮料和多维电解质泡腾饮片三种新型军用功能食品,以提... 详细信息

高原缺氧引起人体能量代谢受阻,影响高原官兵的军事作业能力,进而影响高原部队的战斗力和生存力。本研究旨在采用发酵工程技术、酶工程技术和泡腾技术,全新研发抗缺氧食品、高能耐力饮料和多维电解质泡腾饮片三种新型军用功能食品,以提高官兵在高原缺氧环境下的有氧代谢能力。多项动物和人体实验研究表明,在高原缺氧环境下,食用上述三种功能食品可以显著提高人体的有氧代谢能力。

关键词：高原缺氧抗缺氧食品有氧代谢

ARTP诱变技术在食品和饲料加工生物催化剂改造中的应用进展

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生物产业技术 2019年第3期 13-24页

作者：张雪吴亦楠马飞王立言张翀李和平邢新会北京市食品营养与人类健康高精尖创新中心中国农业大学北京100083 工业生物催化教育部重点实验室清华大学化工系生物化工研究所清华大学合成与系统生物学研究中心北京100084 清华大学无锡应用技术研究院生物育种中心无锡214072 清华大学工程物理系北京100084

食品和饲料的生物催化转化和发酵技术成为保障餐桌安全及绿色发展的重要领域,其用酶量在工业酶制剂市场中占比最大,且增长最快。性能优良的酶制剂能显著缩短发酵周期,降低生产成本,提高目标产物的转化率,进而提高市场竞争力。食品和饲... 详细信息

食品和饲料的生物催化转化和发酵技术成为保障餐桌安全及绿色发展的重要领域,其用酶量在工业酶制剂市场中占比最大,且增长最快。性能优良的酶制剂能显著缩短发酵周期,降低生产成本,提高目标产物的转化率,进而提高市场竞争力。食品和饲料加工产业除了应用分离提取的酶制剂外,很多发酵过程仍以微生物为细胞工厂进行多种酶催化转化。该发酵过程通常涉及复杂的代谢网络和调控机制,且很多体系不能采用基因工程技术,因此理性基因工程改造通常难以满足应用需求。诱变育种仍然是食品和饲料加工用酶及微生物菌株改造的主要手段,需要与时俱进不断发展新技术。近年发展起来的常压室温等离子体(ARTP)诱变育种技术因其具有操作简单、安全、环境友好、突变率高、突变库容大等特点,在食品和饲料加工微生物育种中得到了广泛应用,取得了良好的成效。重点介绍近年ARTP在食品与饲料加工酶制剂及发酵微生物改造中的相关应用进展。

关键词：常压室温等离子体(ARTP) 酶制剂食品和饲料加工微生物发酵诱变育种

磷酸水解酶对大肠杆菌工程菌合成番茄红素的影响

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安徽工程大学学报 2018年第4期33卷 1-5,42页

作者：刘洋洋王天民郭佳慧张翀薛正莲邢新会安徽工程大学生物与化学工程学院安徽芜湖241000 清华大学化学工程系生物化工研究所北京100084 清华大学合成与系统生物学中心北京100084

实验以大肠杆菌DH1为宿主菌,在已有生产番茄红素大肠杆菌工程初始菌株lyc001的基础上,增加合成番茄红素途径中的关键基因crtEIB拷贝数;表征结果表明,相较于初始菌lyc001,番茄红素产量提高了34%,并将此菌命名为lyc011.利用CRISPR干扰(CRI... 详细信息

实验以大肠杆菌DH1为宿主菌,在已有生产番茄红素大肠杆菌工程初始菌株lyc001的基础上,增加合成番茄红素途径中的关键基因crtEIB拷贝数;表征结果表明,相较于初始菌lyc001,番茄红素产量提高了34%,并将此菌命名为lyc011.利用CRISPR干扰(CRISPR interference,CRISPRi)原理以及Golden-Gate组装方法成功构建了可以靶向得到的57个磷酸水解酶基因的双single guide RNA (sgRNA)的质粒.将dCas9质粒和sgRNA表达质粒导入lyc011菌株中,通过下调这57个磷酸水解酶基因表达量,最终通过发酵表征成功筛选到了15个对番茄红素产量提高具有正向调节结果的磷酸水解酶基因,分别为:yjjG,aphA,nagD,yqaB,yidA,pphA,bacA,glpQ,pgpB,spoT,cpdB,nudJ,dgt,phoQ.

关键词：大肠杆菌DH1 番茄红素磷酸水解酶基因 CRISPRi Golden Gate

浓香型白酒新老窖池分层池底窖泥钙含量差异及其影响因素

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中国酿造 2020年第10期39卷 37-42页

作者：张会敏孟雅静王艳丽陈泳兴李安军梁金辉周庆伍王录张严邢新会安徽省固态发酵工程技术研究中心安徽亳州236820 清华大学化学工程系北京100084

该研究分析了浓香型白酒新、老窖池分层池底窖泥中钙离子、相对钙含量分别与pH值、乳酸之间的皮尔森相关性和线性回归关系。通过统计分析发现:与新窖泥相比,老窖泥中钙离子和相对钙含量与pH值的相关性(-0.808 1,0.750 2)以及与乳酸的相... 详细信息

该研究分析了浓香型白酒新、老窖池分层池底窖泥中钙离子、相对钙含量分别与pH值、乳酸之间的皮尔森相关性和线性回归关系。通过统计分析发现:与新窖泥相比,老窖泥中钙离子和相对钙含量与pH值的相关性(-0.808 1,0.750 2)以及与乳酸的相关性(0.717 6,-0.637 9)较强,线性回归拟合度较高;受表层0~3 cm新窖泥钙盐过度解离的影响,新窖泥中相应的相关性较弱。结果表明,p H值和乳酸含量差异对新、老窖泥钙离子和相对钙含量差异有较大影响。推测新、老窖泥表层0~3 cm钙离子和相对钙含量的显著差异与两者乳酸含量差异引起的钙盐解离差异有直接关系,与其菌群乳酸降解差异有间接关系。该研究为"退化"和"钙化"窖泥的形成提供了新的理论依据。

关键词：浓香型白酒分层池底窖泥钙含量回归分析

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停滞棒杆菌遗传改造工具和启动子文库构建

生物加工过程 2024年第2期22卷 147-155页

作者：叶光正余心宇林钰宽蔡友华邢新会陈武薛正莲张翀安徽工程大学生物与食品工程学院安徽芜湖241000 清华大学化工系生物化工研究所清华大学合成与系统生物学研究中心工业生物催化教育部重点实验室北京100084 广东肇庆星湖生物科技股份有限公司广东肇庆526060 清华大学深圳国际研究生院生物医药与健康工程研究院广东深圳518055 安徽省工业微生物分子育种工程实验室安徽芜湖241000

停滞棒杆菌是用于5′-肌苷酸生产的重要微生物底盘。为利用代谢工程技术来创建和优化高效细胞工厂,在停滞棒杆菌中构建遗传改造工具和启动子文库十分必要。本研究使用pCG1复制子构建了大肠杆菌-停滞棒杆菌穿梭载体,建立停滞棒杆菌外源DN... 详细信息

停滞棒杆菌是用于5′-肌苷酸生产的重要微生物底盘。为利用代谢工程技术来创建和优化高效细胞工厂,在停滞棒杆菌中构建遗传改造工具和启动子文库十分必要。本研究使用pCG1复制子构建了大肠杆菌-停滞棒杆菌穿梭载体,建立停滞棒杆菌外源DNA转化方法、基于自杀质粒同源重组的基因敲除方法,最终形成了停滞棒杆菌异源基因稳定表达系统;停滞棒杆菌游离质粒的电转化效率达到(2.3±0.3)×10^(3)cfu/μg;构建停滞棒杆菌的合成启动子文库,筛选得到24个强度差异达30倍的启动子元件,用于停滞棒杆菌中的基因精细表达调控。

关键词：停滞棒杆菌转化效率穿梭质粒启动子基因敲除