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Immunogenicity Evaluation of a SARS-CoV-2 BA.2 subunit Vaccine Formulated with CpG 1826 plus alum Dual Adjuvant

Biomedical and Environmental Sciences 2024年第12期37卷 1409-1420页

作者： Yuhan Yan qiudong su Yao Yi Liping Shen Shengli Bi National Institute for Viral Disease Control and Prevention Chinese Center for Disease Control and PreventionBeijing 102206China

Objective The present study aimed to evaluate the immunogenicity of BA.2 variant receptor binding domain(RBD)recombinant protein formulated with CpG 1826 plus alum dual *** The BA.2 variant RBD(residues 308-548)fusing TT-P2 epitope was obtained from prokaryotic expression system,purification technology and dialysis renaturation,which was designated as Sot *** soluble Sot protein formulated with CpG 1826 plus alum dual adjuvant was designated as Sot/CA subunit vaccine and then the BALB/c mice were intramuscularly administrated with two doses of the Sot/CA subunit vaccine at 14-day interval(day 0 and 14).On day 28,the number of effector T lymphocytes secreting IFN-γand IL-4 in mice spleen were determined by enzyme-linked immunospot(ELISpot)*** serum IgG,IgG1 and IgG2a antibodies were examined by enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA).In addition,the level of neutralizing antibodies(NAbs)induced by Sot/CA subunit vaccine was also evaluated by the microneutralization *** The high-purity soluble Sot protein with antigenicity was successfully obtained by the prokaryotic expression,protein purification and dialysis *** Sot/CA subunit vaccine induced a high level of IgG antibodies and NAbs,which were of cross-neutralizing activity against SARS-CoV-2 BA.2 and XBB.1.5 ***,Sot/CA subunit vaccine also induced a high level of effector T lymphocytes secreting IFN-γ(635.00±17.62)and IL-4(279.20±13.10),*** with a decreased IgG1/IgG2a ratio in the serum,which indicating Sot/CA subunit vaccine induced a Th1-type predominant immune *** The Sot protein formulated with CpG 1826 plus alum dual adjuvant showed that the excellent cellular and humoral immunogenicity,which provided a scientific basis for the development of BA.2 variant subunit vaccines and references for the adjuvant application of subunit vaccines.

关键词： SARS-CoV-2 RBD subunit vaccine Adjuvant Immunogenicity

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Genomic surveillance for SARS-CoV-2 Variants: Dominance of XBB Replacement — China, January–June 2023

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China CDC weekly 2024年第15期6卷 324-331页

作者： Yenan Feng qiudong su Lili Li Xiaozhou He Peihua Niu Xiaojuan Guo Xiang Zhao Jing Tang Zhiyuan Jia Ji Wang Changcheng Wu Baicheng Xia Zhixiao Chen Yuchao Wu Jing Yang Songqi Chen Cao Chen Shiwen Wang Xiaoping Dong National Key Laboratory of Intelligent Tracking and Forecasting for Infectious Diseases National Institute for Viral Disease Control and PreventionChinese Center for Disease Control and PreventionBeijingChina NHC Key Laboratory of Medical Virology and Viral Diseases National Institute for Viral Disease Control and PreventionChinese Center for Disease Control and PreventionBeijingChina

Introduction:In the first half of 2023,a global shift was observed towards the predominance of XBB *** faced a significant epidemic between late 2022 and early 2023 due to Omicron subvariants BA.5.2 and *** study aims to depict the evolving variant distribution among provincial-level administrative divisions(PLADs)in China and explore the factors driving the predominance of XBB ***:Sequences from local and imported coronavirus disease 2019(COVID-19)cases recorded between January 1 and June 30,2023,were *** study analyzed the changing distribution of viral variants and assessed how the prior dominance of specific variants,XBB subvariants,and imported cases influenced the prevalence of the XBB replacement ***:A total of 56,486 sequences were obtained from local cases,and 8,669 sequences were from imported *** in April,there was a shift in the prevalence of XBB from imported to local cases,with varying dominance among *** PLADs previously high in BF.7,the rise of XBB was delayed.A positive correlation was found between XBB proportions in imported cases from January to March and local cases in *** distribution pattern of XBB subvariants differed between local and imported cases within the same *** significant differences were noted in the replacement rates of XBB ***:The timing of XBB dominance differed among various PLADs in China in the first half of 2023,correlating closely with the prevalence of XBB variants among imported cases.

关键词： dominance imported distribution

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Genomic surveillance for SARS-CoV-2—China,September 26,2022 to January 29,2023

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China CDC weekly 2023年第7期5卷 143-151页

作者： Shiwen Wang Peihua Niu qiudong su Xiaozhou He Jing Tang Ji Wang Yenan Feng Cao Chen Xiang Zhao Zhixiao Chen Wenling Wang Zeyuan Yin Yuchao Wu Changcheng Wu Lili Li Aili Cui Yan Zhang Caiyun Long Xiaoyu Yang Zhongxian Zhang Hong Bo Wenbo Xu SARS-CoV-Genome Working Group National Institute for Viral Disease Control and Prevention Chinese Center for Disease Control and PreventionBeijingChina National Health Commission Key Laboratory for Medical Virology and Viral Diseases BeijingChina 不详

Introduction:The severe acute respiratory syndrome coronavirus 2(SARS-CoV-2)has generated 2,431 variants over the course of its global transmission over the past 3 *** better evaluate the genomic variation of SARS-CoV-2 before and after the optimization of coronavirus disease 2019(COVID-19)prevention and control strategies,we analyzed the genetic evolution branch composition and genomic variation of SARS-CoV-2 in both domestic and imported cases in China(the data from Hong Kong and Macao Special Administrative Regions and Taiwan,China were not included)from September 26,2022 to January 29,***:Analysis of the number of genome sequences,sampling time,dynamic changes of evolutionary branches,origin,and clinical typing of SARS-CoV-2 variants submitted by 31 provincial-level administrative divisions(PLADs)and Xinjiang Production and Construction Corps(XPCC)was conducted to assess the accuracy and timeliness of SARS-CoV-2 variant ***:From September 26,2022 to January 29,2023,20,013 valid genome sequences of domestic cases were reported in China,with 72 evolutionary ***,1,978 valid genome sequences of imported cases were reported,with 169 evolutionary *** prevalence of the Omicron variants of SARS-CoV-2 in both domestic and imported cases was consistent with that of international epidemic ***:This study provides an overview of the prevalence of Omicron variants of SARS-CoV-2 in *** optimizing COVID-19 prevention and control strategies,no novel Omicron variants of SARSCoV-2 with altered biological characteristics or public health significance have been identified since December 1,2022.

关键词： prevention imported Taiwan

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Serological Investigation of Laboratory-Confirmed and suspected Ebola Virus Disease Patients During the Late Phase of the Ebola Outbreak in Sierra Leone

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Virologica Sinica 2018年第4期33卷 323-334页

作者： Yang Liu YuLan sun Wei Wu AQian Li XianDa Yang Shuo Zhang Chuan Li qiudong su ShaoJian Cai DaPeng sun HaiYang Hu Zhe Zhang XiuXu Yang Idrissa Kamara Sheku Koroma Gerald Bangura Alie Tia Abdul Kamara Matt Lebby Brima Kargbo Jiandong Li Shiwen Wang XiaoPing Dong YueLong Shu WenBo Xu George F. Gao GuiZhen Wu DeXin Li William J. Liu MiFang Liang Key Laboratory of Medical Virology and Viral Diseases Ministry of Health National Institute for Viral Disease Control and Prevention (IVDC) Chinese Center for Disease Control and Prevention (China CDC) Beijing 102206 China Beijing Center for Disease Control and Prevention (Beijing CDC China) Beijing 100013 China Jilin Provincial Center for Disease Control and Prevention (Jilin CDC China) Jilin 130021 China Fujian Provincial Center for Disease Control and Prevention (Fujian CDC China) Fuzhou 350001 China Shandong Provincial Center for Disease Control and Prevention (Shandong CDC China) Jinan 250014 China Jiangsu Provincial Center for Disease Control and Prevention (Jiangsu CDC China) Nanjing 210009 China Beijing Institute of Biotechnology Beijing 100071 China Sierra Leone-China Friendship Biological Safety Laboratory (SLE-CHN Bio-safety Lab) Freetown 999127 Sierra Leone The Ministry of Health and Sanitation (MoHS SL) Freetown 999127 Sierra Leone CAS Key Laboratory of Pathogenic Microbiology and Immunology Institute of Microbiology Chinese Academy of Sciences Beijing 100101 China

This study aimed to investigate the serological characteristics of Ebola virus(EBOV) infection during the late phase of the Ebola outbreak in Sierra Leone. In total, 877 blood samples from 694 suspected Ebola virus disease(EVD) cases assessed from March to December 2015, were analyzed via real-time reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR) for viral RNA and enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA) and Luminex to detect antibodies against EBOV. Viral load and EBOV-specific IgM/IgG titers displayed a declining trend during March to December 2015. Viral RNA load decreased rapidly at earlier stages after disease onset, while EBOV-specific IgM and IgG still persisted in 58.1%(18/31) and 93.5%(29/31) of the confirmed EVD patients and in 3.8%(25/663) and 17.8%(118/663) of the RNA-negative suspected patients in the later phase, respectively. Dynamic analysis of longitudinally collected samples from eight EVD patients revealed typically reversed trends of declining viral load and increasing IgM and/or IgG titers in response to the EBOV *** present results indicate that certain populations of Sierra Leone developed immunity to an EBOV infection in the late phase of the outbreak, providing novel insights into the risk assessment of EBOV infections among human populations.

关键词： Ebola virus (EBOV) Late phase Serologic investigation IgM IgG

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戊型肝炎病毒诊断抗原的克隆表达及抗原性初步鉴定

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中华流行病学杂志 2015年第3期36卷 275-279页

作者：万李苏秋东伊瑶毕胜利管茶香中南大学湘雅医学院生理学系长沙410000 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所

目的克隆、表达与纯化硫氧还原蛋白-戊型肝炎病毒（HEV）诊断抗原（命名为N5）,并对其抗原性和血清学检测效果初步评价。方法根据GenBank上HEV-ORF2以及ORF3羧基端的基因序列,按照大肠埃希菌密码子偏好表进行密码子优化,全基因合成后... 详细信息

目的克隆、表达与纯化硫氧还原蛋白-戊型肝炎病毒（HEV）诊断抗原（命名为N5）,并对其抗原性和血清学检测效果初步评价。方法根据GenBank上HEV-ORF2以及ORF3羧基端的基因序列,按照大肠埃希菌密码子偏好表进行密码子优化,全基因合成后插入M48原核表达载体中,在大肠埃希菌中表达融合硫氧还蛋白的融合蛋白N5。并利用亲和层析技术对融合蛋白进行纯化,用Western blot技术评价其抗原性,并利用实验室和临床检测确定的HEV感染阴、阳性血清评价其血清学检测效果。结果成功构建表达N5诊断抗原的重组质粒;高水平表达并纯化获取纯度高、浓度大的可溶性诊断抗原;Western blot结果显示融合蛋白N5可与HEV IgM抗体阳性血清特异性结合,具有良好的抗原性;以融合蛋白N5作为捕获抗原,建立间接ELISA,对病原检测和临床诊断确诊的40份戊型肝炎病例血清和40份健康人血清进行检测,其灵敏度和特异度分别为95%（38/40）和90%（36/40）。结论成功构建了可表达融合硫氧还蛋白的HEV诊断抗原的重组质粒,并获得表达量高、抗原性强的可溶性融合蛋白N5,可应用于HEV血清学诊断,且有良好的应用前景。

关键词：戊型肝炎病毒融合蛋白N5 基因克隆血清学检测

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1例HDV抗体IgM阳性HBVS抗原阴性的肝炎患者分子诊断分析

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中华实验和临床病毒学杂志 2016年第3期30卷 303-306页

作者：卢学新伊瑶苏秋东毕胜利中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

目的为了进一步对临床中可能出现HDV抗体IgM阳性，常规HBV五项检测阴性的特殊患者进行诊断，从而对HDV的感染进行准确的判定。方法设计HBV和HDV的特异引物，通过提取血清中病毒的核酸，扩增出病毒的基因组序列，使用BLAST在Genebank中... 详细信息

目的为了进一步对临床中可能出现HDV抗体IgM阳性，常规HBV五项检测阴性的特殊患者进行诊断，从而对HDV的感染进行准确的判定。方法设计HBV和HDV的特异引物，通过提取血清中病毒的核酸，扩增出病毒的基因组序列，使用BLAST在Genebank中进行比对。结果本实验在这例血清中扩增到了HDV和HBV的基因序列，通过BLAST后发现扩增序列与HBV和HDV基因序列存在较高的一致性。结论在临床诊断中，HDV感染者会出现血清中HDV抗体IgM阳性HBVS抗原阴性的特殊情况，应当引起临床的重视。

关键词： HDV 共感染丁肝抗体分子诊断

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EV71中和表位嵌合病毒样颗粒的表达纯化

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中华实验和临床病毒学杂志 2018年第2期32卷 199-202页

作者：梁璞伊瑶苏秋东毕胜利中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

目的通过原核系统表达纯化嵌合肠道病毒71型（EV71）中和表位SP70的病毒样颗粒（VLPs），作为备选的EV71基因重组亚单位疫苗。方法将SP70插入乙肝病毒核心抗原（HBeAg）截短序列的主要免疫显性区域，合成融合蛋白基因后连接表达质粒转... 详细信息

目的通过原核系统表达纯化嵌合肠道病毒71型（EV71）中和表位SP70的病毒样颗粒（VLPs），作为备选的EV71基因重组亚单位疫苗。方法将SP70插入乙肝病毒核心抗原（HBeAg）截短序列的主要免疫显性区域，合成融合蛋白基因后连接表达质粒转化人大肠埃希菌诱导表达，经DEAE离子交换层析、CsC1垫层离心以及密度梯度离心后得到纯化的重组VLPs，并通过WesternBlot和ELISA实验鉴定其抗原性。结果成功构建重组质粒pHBc-SP70，在大肠埃希菌中经IPTG低温诱导后高效表达，可溶性目的蛋白经离子交换层析、CsCl垫层离心和密度梯度离心三步纯化后纯度可达90％以上；纯化的融合蛋白可自发折叠组装为病毒样空心颗粒，与抗SP70单克隆抗体和抗HBe单克隆抗体均可特异性结合。结论在原核系统中成功高效表达和纯化了表面展示EV71中和表位的嵌合HBe-SP70VLPs，并证实其具有良好的抗原性，为该EV71基因重组疫苗的免疫效果评价奠定了基础。

关键词：肠道病毒71型病毒样颗粒乙肝病毒核心抗原 SP70 蛋白纯化

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新型冠状病毒BA.2亚单位疫苗的原核表达和免疫效果评价

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中华实验和临床病毒学杂志 2024年第1期38卷 7-14页

作者：闫宇涵苏秋东伊瑶沈立萍毕胜利中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

目的利用原核表达系统制备针对新型冠状病毒BA.2变异株亚单位疫苗并评价其免疫原性。方法利用分子克隆技术同时构建BA.2变异株RBD以及RBD与TT-P2表位串联的重组质粒, 通过蛋白纯化技术获得重组蛋白So和Sot。蛋白So/Sot作为免疫原与Al(OH... 详细信息

目的利用原核表达系统制备针对新型冠状病毒BA.2变异株亚单位疫苗并评价其免疫原性。方法利用分子克隆技术同时构建BA.2变异株RBD以及RBD与TT-P2表位串联的重组质粒, 通过蛋白纯化技术获得重组蛋白So和Sot。蛋白So/Sot作为免疫原与Al(OH)_(3)佐剂混匀后对小鼠进行肌肉注射免疫以评价细胞和体液免疫效果。结果原核系统成功表达目的蛋白且透析复性后获得高纯度可溶性蛋白。Sot组分泌IFN-γ和IL-4的抗原特异性T淋巴细胞数(213.7±0.6和311.7±1.5)均显著高于So组(94.3±16.8和185.7±4.2)(P<0.001)。Sot组诱导小鼠产生的血清抗体水平高于So组, 针对BA.2毒株的中和抗体几何平均滴度(geometric mean titer, GMT)分别为588和337(P<0.05)。Sot蛋白能诱导产生Th1/Th2混合型免疫应答但以Th2型为主。结论原核系统表达的蛋白亚单位疫苗具有良好的细胞和体液免疫原性, 为新冠病毒Omicron变异株蛋白亚单位疫苗的研发提供了有力的理论依据。

关键词：新型冠状病毒受体结合域亚单位疫苗原核表达免疫原性

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RGD修饰的低分子量鱼精蛋白/CpG ODN复合物的制备及抗肿瘤活性

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医学研究杂志 2023年第1期52卷 130-135页

作者：刘佳佳苏秋东伊瑶毕胜利中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所北京102206

目的利用RGD修饰的低分子量鱼精蛋白(low molecular weight protamine,LMWP)包裹CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide,CpG ODN)制备复合物,评价其对CpG ODN抗肿瘤活性的影响。方法基于静电引力将RGD-LMWP与CpG ODN以不同质量比共孵育制备复合物,并利用凝胶阻滞实验分析RGD-LMWP对CpG的缩合能力;使用zeta电位/粒度仪对RGD-LMWP/CpG复合物的粒径和zeta电位进行表征;采用体外细胞实验评价RGD-LMWP/CpG复合物对肿瘤细胞的摄取效率和细胞毒性。结果采用共孵育法成功制备了RGD-LMWP/CpG复合物。当RGD-LMWP与CpG的质量比为3∶1时,RGD-LMWP能完全压缩CpG。此时,复合物的平均粒径和zeta电位分别为119.7±1.2nm和47.9±0.5mV。体外细胞实验表明,与游离CpG比较,RGD-LMWP/CpG(3∶1)复合物能显著提高人子宫颈癌细胞株(HeLa)细胞对CpG的摄取效率,抑制HeLa细胞的增殖。结论RGD-LMWP与CpG结合形成的复合物可以有效地将CpG递送至肿瘤细胞内并诱导肿瘤细胞凋亡,是一种具有研究前景的抗肿瘤给药方案。

关键词：低分子量鱼精蛋白 RGD CpG寡聚脱氧核苷酸抗肿瘤活性

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聚焦法测量梯度透镜剖面折射率分布的讨论

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光学机械 1988年第2期 7-12页

作者：彭汉俊朱秋东苏大图北京工业学院

聚焦法能较好地用梯度透镜剖面折射率分布的测量中是一种装置简单测量迅速的测试方沾。

关键词：折射率分布折射率差透镜

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