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牡蛎抗氧化及降糖肽的结构特征及其体外模拟消化特性

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食品与发酵工业 2022年第21期48卷 196-203页

作者：张佩陈忠琴曹文红高加龙郑惠娜林海生章超桦秦小明广东海洋大学食品科技学院国家贝类加工技术研发分中心(湛江)广东省水产品加工与安全重点实验室广东省海洋食品工程技术研究中心广东省海洋生物制品工程实验室水产品深加工广东普通高等学校重点实验室广东湛江524088 广东海洋大学深圳研究院广东深圳518120 海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心(大连工业大学) 辽宁大连116034

表征了牡蛎抗氧化及降糖肽的结构特征,并探究了体外模拟胃肠消化对其抗氧化和降糖活性的影响,评估牡蛎肽在消化系统中的稳定性。以酶解法制备的牡蛎肽为原料,采用HPLC法分析其分子质量分布;利用氨基酸组成分析仪及高效液相串联质谱技术... 详细信息

表征了牡蛎抗氧化及降糖肽的结构特征,并探究了体外模拟胃肠消化对其抗氧化和降糖活性的影响,评估牡蛎肽在消化系统中的稳定性。以酶解法制备的牡蛎肽为原料,采用HPLC法分析其分子质量分布;利用氨基酸组成分析仪及高效液相串联质谱技术分析牡蛎抗氧化及降糖肽的结构特征;通过体外模拟消化模型研究胃肠消化前后牡蛎肽的短肽含量、氨基酸组成、抗氧化活性(DPPH自由基清除率)、降糖活性(α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制率)。结果表明,牡蛎肽分子质量主要分布在2 kDa以下,富含必需氨基酸(46.94%)和疏水性氨基酸(47.68%);其富含支链氨基酸和脯氨酸,且靠近肽链N端位置,是抗氧化及降糖肽的典型结构模式,且其疏水性氨基酸高达43.22%,与氨基酸组成分析结果一致。牡蛎肽的短肽和游离氨基酸含量经胃肠消化后显著增加,而DPPH自由基清除率、α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制率显著降低,说明胃肠消化可能会通过降解牡蛎肽影响其消化稳定性,进而显著降低其抗氧化和降糖活性。该研究结果为进一步开展牡蛎肽消化吸收及稳态化保护研究提供了科学依据。

关键词：牡蛎肽抗氧化活性降糖活性结构特征消化特性

肝脏疾病诊断中腺苷脱氨酶、前清蛋白、α-L-岩藻糖苷酶、胆碱脂酶和5′-NT价值的临床评价

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国际检验医学杂志 2013年第21期34卷 2832-2834页

作者：许永志陈彬林月云刘惠娜中国人民解放军第一七五医院厦门大学附属东南医院检验科福建漳州363000

目的了解腺苷脱氨酶(ADA)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、胆碱脂酶、前清蛋白和5′-核苷酸酶(5′-NT)在肝脏疾病诊断中的意义。方法选择332例肝脏疾病患者,其中,急性肝炎150例,重型肝炎25例,肝硬化40例,酒精性肝炎35例,慢性肝炎82例;选择同期9... 详细信息

目的了解腺苷脱氨酶(ADA)、α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、胆碱脂酶、前清蛋白和5′-核苷酸酶(5′-NT)在肝脏疾病诊断中的意义。方法选择332例肝脏疾病患者,其中,急性肝炎150例,重型肝炎25例,肝硬化40例,酒精性肝炎35例,慢性肝炎82例;选择同期90例健康体检者作为对照。采用Bayer ADVIA 2400全自动生化分析仪检测其血清ADA、AFU、前清蛋白、胆碱脂酶和5′-NT,绘制受试者工作特征曲线(ROC)并计算曲线下面积(AUC),评价5项指标在不同肝脏疾病中的诊断意义。结果重型肝炎、肝硬化患者血清ADA、AFU、5′-NT显著增高,前清蛋白、胆碱脂酶显著降低;ADA、AFU、5′-NT的异常值比例分别超过80%、65%、90%。急性肝炎、酒精性肝炎患者血清ADA、AFU、5′-NT轻度升高,前清蛋白、胆碱脂酶轻度下降;急性肝炎患者血清胆碱脂酶、5′-NT的异常值比例分别为80.0%、54.67%。血清前清蛋白、胆碱脂酶的AUC在重型肝炎患者中分别为0.022、0.000,在肝硬化组患者中分别为0.019、0.000;上述两组患者血清ADA、5′-NT的AUC均大于0.950,AFU的AU均大于0.800。在急性肝炎和酒精性肝炎组中,患者血清ADA、5′-NT的AUC均大于0.800,AFU的AUC分别为0.814、0.637。332例患者血清前清蛋白、胆碱脂酶的AUC分别为0.175、0.181,血清ADA、AFU、5′-NT的AUC分别为0.850、0.743、0.714。结论血清ADA、AFU、前清蛋白、胆碱脂酶和5′-NT检测对肝脏疾病的诊断具有重要价值。

关键词：腺苷脱氨酶 α-L-岩藻糖苷酶胆碱酯酶前清蛋白 5'-核苷酸酶

糖基化对罗非鱼皮胶原蛋白肽热滞活性及结构特征的影响

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食品与发酵工业 2023年第1期49卷 176-184页

作者：曹琳欧阳及锦韩梅 Julieth Majura 陈忠琴曾少葵张静郑惠娜曹文红广东海洋大学食品科技学院国家贝类加工技术研发分中心(湛江)广东省水产品加工与安全重点实验室广东省海洋食品工程技术研究中心广东省海洋生物制品工程实验室水产品深加工广东普通高等学校重点实验室广东湛江524088 大连工业大学海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心辽宁大连116034

为提高罗非鱼皮胶原蛋白肽作为绿色抗冻剂的实用性,采用湿法糖基化反应对其热滞活性进行改良。以糖基化接枝度为指标,利用正交试验对糖基化反应进行工艺优化,并对糖基化前后胶原蛋白肽的热滞活性及结构特征进行比较分析。结果显示,罗非... 详细信息

为提高罗非鱼皮胶原蛋白肽作为绿色抗冻剂的实用性,采用湿法糖基化反应对其热滞活性进行改良。以糖基化接枝度为指标,利用正交试验对糖基化反应进行工艺优化,并对糖基化前后胶原蛋白肽的热滞活性及结构特征进行比较分析。结果显示,罗非鱼胶原蛋白肽葡萄糖糖基化最佳工艺为温度70℃、胶原蛋白肽质量浓度90 g/L、糖肽比4∶1、反应时间90 min,该条件下糖基化接枝度达(52.06±1.50)%;与胶原蛋白肽相比,糖基化产物的热滞活性上升了1.1℃,提高47.8%,冰晶含量降低29.94%,属于“极度活跃”抗冻肽;糖基化后胶原蛋白肽的质荷比由300~700变化为400~800,二级结构的大部分β-转角转变为β-折叠,且增加了羟基的含量。葡萄糖糖基化对罗非鱼皮胶原蛋白肽的热滞活性具有显著的增强作用,葡萄糖糖基化罗非鱼皮胶原蛋白肽具有开发成新型、高效绿色抗冻剂的潜力。

关键词：罗非鱼胶原蛋白肽热滞活性糖基化改良抗冻剂

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分子对接技术筛选菲律宾蛤仔抗炎肽

食品与发酵工业 2023年第13期49卷 144-151页

作者：姜玉林海生秦小明高加龙曹文红陈忠琴郑惠娜伍彬广东海洋大学食品科技学院广东湛江524088 广东省水产品加工与安全重点实验室广东普通高等学校水产品深加工重点实验室国家贝类加工技术研发分中心(湛江)南海生物资源开发与利用协同创新中心广东湛江524088

基于分子对接技术筛选菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)来源的具有抗炎作用的活性肽。采用三氯乙酸-丙酮沉淀法提取菲律宾蛤仔蛋白质,通过双向凝胶电泳(2-dimensional electro phoresis,2-DE)技术和液质联用(LC-MS/MS)技术分离和鉴... 详细信息

基于分子对接技术筛选菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)来源的具有抗炎作用的活性肽。采用三氯乙酸-丙酮沉淀法提取菲律宾蛤仔蛋白质,通过双向凝胶电泳(2-dimensional electro phoresis,2-DE)技术和液质联用(LC-MS/MS)技术分离和鉴定其蛋白质,借助BIOPEP-UWM在线工具对主要蛋白进行虚拟酶解,使用PeptideRanker和ToxinPred等程序对肽段进行评分和理化性质分析;利用Discovery studio 2019和AutoDock Vina软件进行分子对接筛选潜在抗炎肽片段,探讨人工合成抗炎肽对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症的改善作用。结果表明,原肌球蛋白和组蛋白为肌肉组织的主要蛋白质。选用原肌球蛋白作为底物,通过虚拟酶解和分子对接筛选出8种潜在的新颖活性肽。其中DQTF与TLR2和TLR4分别存在7个氨基酸残基和8个氨基酸残基结合位点,而GYTR与TLR2分子中的10个氨基酸残基和TLR4分子中的7个氨基酸残基紧密结合(结合能均低于-5 kcal/mol),表明其是潜在的抗炎肽。活性验证结果表明,2条合成寡肽均能显著增强RAW264.7细胞活力(P<0.001),并显著降低细胞产NO能力(P<0.05),表现出良好的抗炎活性。综上,基于虚拟酶解和分子对接方法可用于筛选菲律宾蛤仔来源的抗炎肽。

关键词：菲律宾蛤仔原肌球蛋白虚拟酶解分子对接 RAW264.7细胞抗炎寡肽

基于牡蛎肽构建油包水型乳液体系及其稳定性研究

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食品与发酵工业 2022年第10期48卷 156-163页

作者：杨文郑惠娜任鼎鼎李晋祯曹文红林海生秦小明章超桦广东海洋大学食品科技学院广东湛江524088 广东海洋大学深圳研究院广东深圳518108 国家贝类加工技术研发分中心(湛江) 广东省水产品加工与安全重点实验室广东省海洋生物制品工程实验室广东湛江524088 海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心(大连工业大学) 辽宁大连116034

为了拓宽牡蛎肽粉在食品领域的应用范围,对牡蛎肽基料的粉体学性质进行测定,进一步以牡蛎肽溶液为水相,大豆油为油相,聚甘油蓖麻醇酸酯为乳化剂,用剪切法制备油包水型乳液。采用电子鼻分析技术,流变仪和低场核磁成像技术对乳液的理化性... 详细信息

为了拓宽牡蛎肽粉在食品领域的应用范围,对牡蛎肽基料的粉体学性质进行测定,进一步以牡蛎肽溶液为水相,大豆油为油相,聚甘油蓖麻醇酸酯为乳化剂,用剪切法制备油包水型乳液。采用电子鼻分析技术,流变仪和低场核磁成像技术对乳液的理化性质进行表征,探究乳液在对抗不同温度、离心力、热处理、反复冻融等环境条件下的稳定性。结果显示,牡蛎肽基料的休止角为(22.29±0.49)°,滑动角为(29.19±0.46)°,堆积密度为(0.4697±0.0076)g/mL,振实密度为(0.5857±0.0069)g/mL,平衡吸湿率为37.89%。牡蛎肽基料具有较好流动性,吸湿能力较强。流变测定结果表明,构建的乳液为假塑性流体,核磁成像的伪彩色图像表明乳液油水相分布均匀。电子鼻测定结果表明,牡蛎肽的腥味物质主要来源于无机硫化物,构建的乳液体系对牡蛎肽溶液的腥味具有明显掩蔽效果。乳液在不同环境条件下均表现出较好的稳定性。

关键词：牡蛎肽吸湿性油包水乳液稳定性

葛根蛋白组分提取、抗氧化活性及功能特性研究

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食品与发酵工业 2023年第5期49卷 164-171页

作者：董红影王英博庞会娜肖凤琴张红印范琳韩荣欣严铭铭邵帅长春中医药大学吉林省中药保健食品科技创新中心吉林长春130117

以葛根为原料,提取葛根蛋白组分,对其进行体外抗氧化活性研究,采用SDS-PAGE和傅里叶红外光谱(Fourier infrared spectroscopy,FT-IR)对葛根蛋白组分进行亚基、结构分析,对谷蛋白进行功能特性研究。结果表明,谷蛋白的DPPH自由基、ABTS阳... 详细信息

以葛根为原料,提取葛根蛋白组分,对其进行体外抗氧化活性研究,采用SDS-PAGE和傅里叶红外光谱(Fourier infrared spectroscopy,FT-IR)对葛根蛋白组分进行亚基、结构分析,对谷蛋白进行功能特性研究。结果表明,谷蛋白的DPPH自由基、ABTS阳离子自由基及·OH清除率均可达90%以上,其IC50值分别为0.118、0.089、0.217 mg/mL,还原能力也较高,为1.33;亚基分析结果显示,葛根醇溶蛋白无条带,葛根清蛋白在10~55 kDa均有分布,葛根球蛋白主要分布于10~25 kDa,葛根谷蛋白主要分布于33~25 kDa;氨基酸分析结果显示,4种葛根分级蛋白的氨基酸含量不同,其中葛根谷蛋白的氨基酸含量最高。FT-IR显示蛋白组分均有典型的蛋白吸收峰。谷蛋白的功能特性研究表明,pH值、温度及离子强度对葛根谷蛋白的持水(油)性、乳化及乳化稳定性、起泡及起泡稳定性有明显影响。

关键词：葛根蛋白 Osborne分级提取亚基分析氨基酸分析抗氧化活性

香港牡蛎酶解产物对雷公藤甲素诱导雄性小鼠生精障碍的影响

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大连海洋大学学报 2022年第6期37卷 941-948页

作者：张锴佳张雪妍秦小明林海生高加龙郑惠娜曹文红广东海洋大学食品科技学院广东湛江524088 广东省水产品加工与安全重点实验室广东普通高等学校水产品深加工重点实验室国家贝类加工技术研发分中心(湛江)南海生物资源开发与利用协同创新中心广东湛江524088

为探讨香港牡蛎Crassostrea hongkongensis酶解产物(oyster enzymatic hydrolysate, OEH)对雄性生精障碍的保护作用,采用雷公藤甲素(triptolide, TP)连续腹腔注射ICR雄性小鼠21 d,构建生精障碍动物模型,同时按低、中、高剂量(250、500、... 详细信息

为探讨香港牡蛎Crassostrea hongkongensis酶解产物(oyster enzymatic hydrolysate, OEH)对雄性生精障碍的保护作用,采用雷公藤甲素(triptolide, TP)连续腹腔注射ICR雄性小鼠21 d,构建生精障碍动物模型,同时按低、中、高剂量(250、500、1 000 mg/kg)灌胃OEH,通过测定ICR雄性小鼠精子参数、脏器系数、血清激素水平和睾丸组织酶活性等指标,以及HE染色观察睾丸组织结构,探究OEH对生精障碍雄性小鼠的作用。结果表明:中、高剂量OEH能提高小鼠睾丸脏器系数;HE染色结果显示,低、中、高剂量OEH均可减少精管内空泡化现象,并改善生精细胞形态,使精管内生精细胞数量恢复至与空白组相近;与模型组相比,中、高剂量OEH能极显著提高小鼠精子数量和精子活动率(P<0.01),各OEH剂量均能极显著降低精子畸形率(P<0.01);生化指标分析显示,OEH能极显著提高睾丸组织中乳酸脱氢酶(LDH)活性(P<0.01),且具有剂量依赖性,OEH也能缓解睾丸组织的氧化应激,极显著提高睾丸组织中过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性(P<0.01),极显著降低丙二醛(MDA)含量(P<0.01);相较于模型组,OEH能极显著提高小鼠血清睾酮(T)水平,降低黄体生成素(LH)和促卵泡激素(FSH)水平(P<0.01),使激素水平恢复至与空白组相近。研究表明,OEH能够有效改善TP诱导的雄性小鼠生精障碍,对雄性生殖损伤具有潜在的保护作用。

关键词：牡蛎酶解产物生精障碍雷公藤甲素

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普通烟草NAC转录因子家族抗逆基因筛选与表达分析

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中国烟草学报 2022年第2期28卷 111-121页

作者：余世洲杨志晓余婧宋时浩张孝廉赵会纳张长云林英超雷波贵州省烟草科学研究院烟草行业分子遗传重点实验室贵阳市观山湖区550081 青岛颐中科技有限公司青岛市266011

【背景和目的】NAC(NAM/ATAF/CUS2)家族是植物特有且最大的转录因子家族之一,广泛参与植物的生长发育调控和逆境胁迫应答。为筛选烟草抗逆NAC目标基因。【方法】以公开的普通烟草品种K326的注释蛋白序列为参考,与拟南芥NAC蛋白序列同源... 详细信息

【背景和目的】NAC(NAM/ATAF/CUS2)家族是植物特有且最大的转录因子家族之一,广泛参与植物的生长发育调控和逆境胁迫应答。为筛选烟草抗逆NAC目标基因。【方法】以公开的普通烟草品种K326的注释蛋白序列为参考,与拟南芥NAC蛋白序列同源比对,结合功能域分析,进行普通烟草的NAC转录因子鉴定,并利用生物信息学软件分析各烟草NAC转录因子的理化性质及系统进化关系。使用普通烟草TobEA表达谱数据对烟草NAC家族成员组织表达模式进行分析,通过qRT-PCR检测候选抗逆基因所在亚组At NAC3和ATAF各成员在干旱、冷害、盐、ABA处理下的基因表达情况。【结果】从普通烟草中共鉴定出190个Ntab NAC蛋白,平均氨基酸长度为347,除Ntab NAC190外,其余蛋白为亲水性蛋白,大多数定位在细胞核。根据系统进化分析,将拟南芥和烟草NAC家族基因划分为18个亚组,各亚组基因在不同组织中显示表达特异性。At NAC3和ATAF亚组的9个烟草NAC基因,在受到干旱、冷害、盐和ABA处理后基因表达量上调,且NtabNAC004、NtabNAC087和NtabNAC175表达量变化最为明显。【结论】NtabNAC004、NtabNAC087和NtabNAC175参与了烟草植株的逆境胁迫调控,研究结果有助于烟草抗逆调控网络解析和后续抗逆育种。

关键词：普通烟草 NAC基因家族转录因子系统发育表达模式非生物胁迫

牡蛎肉酶解工艺优化及其产物的分子质量分布研究

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食品科技 2019年第7期44卷 185-190页

作者：曹文红章超桦秦小明林海生郑惠娜高加龙广东海洋大学深圳研究院深圳518108 广东海洋大学食品科技学院湛江524088

牡蛎是具有较高营养价值、味道鲜美的一种海洋贝类。文章以香港牡蛎为研究对象,旨在利用生物酶法酶解牡蛎肉蛋白,获得酶解工艺参数,获得酶解产物的分子质量分布数据,为其进一步的加工利用提供基础数据。以水解度为指标,从动物蛋白酶、... 详细信息

牡蛎是具有较高营养价值、味道鲜美的一种海洋贝类。文章以香港牡蛎为研究对象,旨在利用生物酶法酶解牡蛎肉蛋白,获得酶解工艺参数,获得酶解产物的分子质量分布数据,为其进一步的加工利用提供基础数据。以水解度为指标,从动物蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶中进行最佳酶解用酶的筛选,通过酶解时间、温度、pH、加酶量的单因素实验,进一步通过正交实验确定牡蛎酶解的最佳工艺参数。结果表明:风味蛋白酶对牡蛎酶解的效果较好;酶解的最优条件为:酶解时间5h、温度55℃、pH6.5、加酶量5000U/g原料,在此酶解条件下,水解度达27.27%;将优化工艺条件下制备的酶解产物采用高效体积排阻色谱法(HPSEC)进行分子质量分布分析,酶解产物中Mr<10000u占比达到78.48%,而Mr<1000u所占比例43.13%。牡蛎肉的风味蛋白酶酶解产物中小分子物质所占比例较高。

关键词：牡蛎酶解正交实验水解度分子质量分布