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有机磷农药三唑磷人工抗原合成及鉴定

安徽农业科学 2011年第32期39卷 19843-19844页

作者：黄魁英雷红涛孙远明华南农业大学食品学院广东省食品质量安全重点实验室广东广州510642 广东省广州市微生物研究所广东广州510663

[目的]合成并鉴定有机磷农药三唑磷人工抗原。[方法]采用活泼酯法将三唑磷半抗原(TZPM-Hap)与牛血清蛋白(BSA)和卵血清蛋白(OVA)偶联,制备出免疫抗原(TZPM-A-BSA)和包被抗原(TZPM-A-OVA),并通过紫外扫描和动物免疫试验对其进行了鉴定。... 详细信息

[目的]合成并鉴定有机磷农药三唑磷人工抗原。[方法]采用活泼酯法将三唑磷半抗原(TZPM-Hap)与牛血清蛋白(BSA)和卵血清蛋白(OVA)偶联,制备出免疫抗原(TZPM-A-BSA)和包被抗原(TZPM-A-OVA),并通过紫外扫描和动物免疫试验对其进行了鉴定。[结果]紫外扫描和动物免疫试验结果表明人工抗原合成成功。[结论]为制备单抗及开发快速、简便的三唑磷ELISA试剂盒奠定了基础。

关键词：三唑磷活泼酯法人工抗原

耐高温β-甘露聚糖酶毕赤酵母菌M27-8发酵条件优化

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中国饲料 2017年第19期 13-16,20页

作者：熊进黄魁英夏枫耿陈舒洁胡海艳广州市微生物研究所广东广州510663

为获得产β-甘露聚糖酶发酵最佳条件,本研究以克隆筛选获得的产耐高温β-甘露聚糖酶的毕赤酵母菌M27-8菌株为研究对象,对不同氮源含量、葡萄糖含量、p H、发酵时间、接种量、温度和转速进行优化。结果表明:最佳产酶条件为6%玉米浆、3%... 详细信息

为获得产β-甘露聚糖酶发酵最佳条件,本研究以克隆筛选获得的产耐高温β-甘露聚糖酶的毕赤酵母菌M27-8菌株为研究对象,对不同氮源含量、葡萄糖含量、p H、发酵时间、接种量、温度和转速进行优化。结果表明:最佳产酶条件为6%玉米浆、3%葡萄糖、p H 5.5、发酵60 h、2%接种量、28℃、225 r/min,最大酶活达到452.7 U/m L,是优化前酶活138 U/m L的3.3倍。综上,此发酵培养基可用较廉价的玉米浆取代YPD培养基,从而节省成本,为工业生产奠定基础。

关键词： β-甘露聚糖酶毕赤酵母发酵条件优化

碳源与罗伊氏乳杆菌LYS-1发酵上清液抑菌效果的关系

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现代食品科技 2020年第4期36卷 119-125页

作者：吴惠贞夏枫耿陈中黄魁英林伟锋华南理工大学食品科学与工程学院广东广州510640 广州市微生物研究所广东广州510663

本研究考察了碳源对罗伊氏乳杆菌LYS-1发酵特性和发酵上清液抑菌效果的影响,以此探讨碳源与LYS-1代谢产生抑菌物质的关系。LYS-1接种于不同碳源配方的培养基中,测定发酵过程中酸度、活菌数的变化以及发酵上清液的抑菌效果。结果显示,LY... 详细信息

本研究考察了碳源对罗伊氏乳杆菌LYS-1发酵特性和发酵上清液抑菌效果的影响,以此探讨碳源与LYS-1代谢产生抑菌物质的关系。LYS-1接种于不同碳源配方的培养基中,测定发酵过程中酸度、活菌数的变化以及发酵上清液的抑菌效果。结果显示,LYS-1以蔗糖、麦芽糖和葡萄糖为碳源时抑菌圈直径依次为9.84 mm、8.55 mm和7.65 mm,以果糖、乳糖和甘油为碳源时则无抑菌圈。活菌数≥1.00×10^9CFU/mL时抑菌圈才会出现,且活菌数的增加有利于抑菌圈直径的增大。葡萄糖和蔗糖复配具有较优的抑菌效果,且蔗糖添加量在5%~10%范围内增加可以提高抑菌效果。以葡萄糖和果糖等当量替换蔗糖具有同等的抑菌效果,碳源为1.00%葡萄糖+10.00%蔗糖或6.26%葡萄糖+5.26%果糖时发酵上清液的抑菌效果最强。碳源影响LYS-1代谢产生抑菌物质,葡萄糖和果糖是影响发酵上清液抑菌效果的关键性因素。

关键词：罗伊氏乳杆菌发酵上清液碳源抑菌效果

甲硫氨酸γ-裂解酶基因在大肠杆菌中的高效表达和活性

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微生物学通报 2019年第12期46卷 3225-3232页

作者：胡海艳杜少平夏枫耿黄魁英周世宁广州市微生物研究所广东广州510663 中山大学生命科学学院生物防治重点实验室广东广州510275

【背景】为了开发海洋蕴藏的新型微生物资源,本研究团队采用不依赖培养的宏基因组技术,构建了深海宏基因组文库,并对其中的重要基因进行后续研究。【目的】使用来自深海宏基因组文库中的甲硫氨酸γ-裂解酶基因(mgl)在大肠杆菌中高效表... 详细信息

【背景】为了开发海洋蕴藏的新型微生物资源,本研究团队采用不依赖培养的宏基因组技术,构建了深海宏基因组文库,并对其中的重要基因进行后续研究。【目的】使用来自深海宏基因组文库中的甲硫氨酸γ-裂解酶基因(mgl)在大肠杆菌中高效表达并对其活性进行检测。【方法】将mgl基因克隆到表达载体pET-28a(+)并转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,并对表达条件进行优化,获得甲硫氨酸γ-裂解酶(Methionine-lyase,r MGL)的大量表达。亲和层析纯化重组蛋白后对酶的活性进行研究。【结果】亲和纯化后获得大量表达蛋白r MGL,大小与预测的46 kD相符合,并具有很高的裂解L-甲硫氨酸的活性。rMGL能催化L-甲硫氨酸和DL-同型半胱氨酸的裂解,但几乎不作用于L-半胱氨酸和L-胱氨酸,其中对DL-同型半胱氨酸的催化效率比对L-甲硫氨酸的催化效率高,相对活性约为对L-甲硫氨酸催化效率的1.4倍。【结论】来自深海宏基因组文库中的mgl基因能够利用p ET-28a(+)/BL21(DE3)高效表达rMGL。

关键词：宏基因组文库 Idiomarina 甲硫氨酸γ-裂解酶诱导表达重组蛋白纯化

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诱变育种方法在霉菌中的应用

食品研究与开发 2017年第9期38卷 -页

作者：熊进黄魁英曹丁甘祥武陈琼广州市微生物研究所广东广州510663

介绍诱变育种方法在霉菌中的研究进展以及物理诱变、化学诱变、物理化学复合诱变的应用效果。研究表明,物理诱变方法比化学诱变方法应用广泛;利用物理诱变,适当结合化学诱变也取得不错效果。

关键词：诱变方法霉菌物理诱变化学诱变

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响应面法优化甲硫氨酸γ-裂解酶发酵培养基

食品工业科技 2018年第5期39卷 113-118页

作者：甘祥武胡海艳黄魁英陈舒洁李学优广州市微生物研究所广东广州510663

目的:为获得低成本高酶活的工业化培养基,对甲硫氨酸γ-裂解酶(MGL)发酵生产培养基进行优化。方法:通过碳、氮源的筛选确定对酶活具有明显影响的因子,通过Plackett-Burman设计确定主要影响因子:甘油、安琪酵母粉、智龙酵母粉;采用最陡... 详细信息

目的:为获得低成本高酶活的工业化培养基,对甲硫氨酸γ-裂解酶(MGL)发酵生产培养基进行优化。方法:通过碳、氮源的筛选确定对酶活具有明显影响的因子,通过Plackett-Burman设计确定主要影响因子:甘油、安琪酵母粉、智龙酵母粉;采用最陡爬坡实验及Box-Behnken响应面设计确定了三个主要影响因子的最适条件,当甘油浓度为1.40%,安琪酵母粉为0.80%,智龙酵母粉为0.96%时,甲硫氨酸裂解酶酶活达到最高值为11.30 U/mL。结果:经过发酵验证,MGL酶活为(11.06±0.15)U/mL,较LB培养基1.65 U/mL提高了5.69倍,显示出了良好的优化效果。结论:经优化后最终培养基组成为:甘油1.40%、安琪酵母粉0.80%、智龙酵母粉0.96%、乳糖1.20%、安琪蛋白胨1.80%、NaCl 0.90%、K_2HPO_4 1.80%、MgSO_4 0.20%。

关键词：甲硫氨酸γ-裂解酶 Plackett-Burman设计 Box-Behnken设计培养基优化

乳酸乳球工程菌表达L-苯丙氨酸解氨酶的工艺优化

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安徽农业科学 2014年第24期42卷 8092-8094,8098页

作者：黄乐天黄魁英郑克平潘亮君广州市微生物研究所广东广州510000 广州市华元生物科技有限公司广东广州510000 广州市华琪生物有限公司广东广州510000

[目的]提高乳酸乳球工程菌表达L-苯丙氨酸解氨酶的水平。[方法]对培养基种类、接种量、培养温度、诱导剂浓度、磷酸甘油二钠浓度等因素进行了优化。[结果]使用DifcoTMM17 Broth培养基培养乳酸乳球菌时,L-苯丙氨酸解氨酶表达活性最高;磷... 详细信息

[目的]提高乳酸乳球工程菌表达L-苯丙氨酸解氨酶的水平。[方法]对培养基种类、接种量、培养温度、诱导剂浓度、磷酸甘油二钠浓度等因素进行了优化。[结果]使用DifcoTMM17 Broth培养基培养乳酸乳球菌时,L-苯丙氨酸解氨酶表达活性最高;磷酸甘油二钠对L-苯丙氨酸解氨酶表达活性有较大影响,可提高活性93.8%。通过正交试验,得到PAL最佳表达条件为接种量2.0%,培养温度30℃,磷酸甘油二钠浓度2.0%,诱导剂浓度10.0μg/L。PAL表达酶活可达3.05 IU/ml。[结论]在发酵扩大培养中优化了L-苯丙氨酸解氨酶在乳酸乳球菌中的表达条件,为今后生产及应用提供参考。

关键词：乳酸乳球菌 L-苯丙氨酸解氨酶工艺优化

产抗菌肽芽孢杆菌的制剂制备及其对仔猪生产性能的影响

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中国饲料 2018年第5期 20-24页

作者：曹丁黄乐天李学优黄魁英张宜靖夏枫耿广州市微生物研究所广东广州510663

本试验以产抗菌肽的枯草芽孢杆菌GL08为出发菌株,通过单因素和正交试验确定最佳的喷雾干燥工艺参数。并将制备的抗菌肽制剂作为饲料添加剂,验证其对仔猪生产性能的影响。优化后的喷雾干燥工艺为出风温度75℃,进风温度135℃,保护剂辅美... 详细信息

本试验以产抗菌肽的枯草芽孢杆菌GL08为出发菌株,通过单因素和正交试验确定最佳的喷雾干燥工艺参数。并将制备的抗菌肽制剂作为饲料添加剂,验证其对仔猪生产性能的影响。优化后的喷雾干燥工艺为出风温度75℃,进风温度135℃,保护剂辅美粉浓度20%。在此工艺条件下,抗菌肽得率为91.6%,含水量为3.94%,符合抗菌肽制剂质量要求。此工艺生产成本低,效率高,适合工业大规模生产。制得的抗菌肽制剂作为饲料添加剂使仔猪的料肉比提高25%,残次率降低63%,成活率提高8.3%,无腹泻发生,提高了仔猪的生产性能和健康水平。

关键词：抗菌肽芽孢杆菌制剂制备仔猪生产性能

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微囊化蜡样芽孢杆菌的喷雾干燥工艺优化

安徽农业科学 2014年第20期42卷 6546-6548页

作者：黄乐天曹丁黄魁英郑克平潘亮君广东省广州市微生物研究所广东广州510000 广东省广州市华元生物科技有限公司广东广州510000 广东省广州市华琪生物有限公司广东广州510000

[目的]提高蜡样芽孢杆菌在压力喷雾干燥过程中的存活率,优化喷雾干燥工艺。[方法]以微囊化的蜡样芽孢杆菌为材料,考察进风温度、进料流量、料液比、喷枪孔径等对喷雾细胞存活数的影响。[结果]当进风温度为140℃,进料流量为1.5 t/h,料液... 详细信息

[目的]提高蜡样芽孢杆菌在压力喷雾干燥过程中的存活率,优化喷雾干燥工艺。[方法]以微囊化的蜡样芽孢杆菌为材料,考察进风温度、进料流量、料液比、喷枪孔径等对喷雾细胞存活数的影响。[结果]当进风温度为140℃,进料流量为1.5 t/h,料液比为1∶5,喷枪孔径为2.5 mm时,蜡样芽孢杆菌的存活率最高,达81%。[结论]该研究确定了蜡样芽孢杆菌的最佳喷雾干燥工艺条件。

关键词：蜡样芽孢杆菌压力喷雾干燥工艺优化