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猪甲型流感病毒效价稳定性的初步研究

湖北畜牧兽医 1992年第2期13卷 7-8页

作者：陈绳亮赵林中国科学院武汉病毒研究所

动物病毒通常采用冷冻干燥法,病料低温保存法,液氮保存法以及低温冰箱直接保存病毒液等方法保存毒种。对于猪流感病毒,鸭流感病毒、鸡新城疫病毒一般取鸡胚接种,收集尿囊液,然后经冷冻干燥或低温(-20℃)冰箱直接保存病毒液,其病毒效价... 详细信息

动物病毒通常采用冷冻干燥法,病料低温保存法,液氮保存法以及低温冰箱直接保存病毒液等方法保存毒种。对于猪流感病毒,鸭流感病毒、鸡新城疫病毒一般取鸡胚接种,收集尿囊液,然后经冷冻干燥或低温(-20℃)冰箱直接保存病毒液,其病毒效价在两年内比较稳定。随着这些病毒的深入研究和资源开发利用,需在4℃左右保存一段较长时间,国内外这方面工作报道较少。本文主要以核糖核酸酶(RNase)作为保护剂。

关键词：猪流感病毒甲型效价稳定性

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兔出血症病毒两种提纯方法的比较研究

湖北农业科学 1992年第8期31卷 36-37页

作者：陈绳亮赵林中国科学院武汉病毒研究所

兔出血症(Rabbit Hemorrhagic Disease—RHD)是1984年在江苏无锡首次发现的兔烈性传染病,此病传染性强,严重威胁养兔业的发展。几年来,我国许多学者对该病的病毒(RHDV)进行了比较系统的研究。我们于1985年在武汉第二制药厂动物房死亡家... 详细信息

兔出血症(Rabbit Hemorrhagic Disease—RHD)是1984年在江苏无锡首次发现的兔烈性传染病,此病传染性强,严重威胁养兔业的发展。几年来,我国许多学者对该病的病毒(RHDV)进行了比较系统的研究。我们于1985年在武汉第二制药厂动物房死亡家兔中分离到RHDV武汉株,并开展了该毒株形态结构、某些理化特性以及防治等方面的研究,发现RHDV提纯工作难度较大。由于难以得到纯度较高的病毒制剂,所以对病毒多肽与核酸性质的认识有不同见解。

关键词：兔出血症病毒提纯

IBDVvp2基因高变区序列测定与进化分析

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中国病毒学 2004年第6期19卷 620-623页

作者：闫笑李天宪范兆军寇铮陈绳亮中国科学院武汉病毒研究所湖北武汉430071

本实验采用来源于江苏地区的六株不同鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)毒株,应用 RT-PCR 法对 vp2 基因高变区进行了扩增,构建重组质粒 pMD18T- vp2,测序。与有代表性的 IBDV 毒株 VP2 基因高变区序列进行... 详细信息

本实验采用来源于江苏地区的六株不同鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)毒株,应用 RT-PCR 法对 vp2 基因高变区进行了扩增,构建重组质粒 pMD18T- vp2,测序。与有代表性的 IBDV 毒株 VP2 基因高变区序列进行比较分析,以 ClustalX 软件进行序列比对,得到基因序列及氨基酸序列同源性,IBDVY3、P2G、P8G、SZ、Y5 和 W04(6 株)IBDV 与 D6984(荷兰)的同源性达到 99.0%以上,与其它一些超强毒株(very virulent IBDV,vvIBDV)的同源性也达到了 97.8%以上,并在关键氨基酸位点符合 vvIBDV 特征,采用Phylip3.5 软件分析作出进化树,其结果从分子水平说明六个毒株均为 vvIBDV,与欧洲和日本的超强毒株有较近的亲缘关系,而与美洲株的较远,从而为 IBDV 分子流行病学研究和疫苗的研制提供了科学依据。

关键词：鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV) vp2基因高变区超强毒株

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2002年余姚市榨菜病毒病危害严重

植物保护 2002年第6期28卷 57-58页

作者：熊克娟张森土朱佳甫冯新军陈绳亮李天宪中国科学院武汉病毒研究所 430071 浙江省余姚市科委浙江省余姚县植保站 315400

浙江余姚市种植榨菜已有数十年的历史，种植面积6700hm~2以上，年产鲜菜头近5亿kg，加工企业百余家，年产值达10亿元。榨菜的生产及加工已成为当地农业生产发展的主要经济支柱产业。

关键词： 2002年余姚市榨菜病毒病危害

BC_(369)抗乙型肝炎病毒作用机理初步探讨

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临床肝胆病杂志 1998年第3期14卷 165-166页

作者：张炳团周汝麟陈绳亮湖北省襄樊中心医院中科院武汉病毒研究所武汉同济医科大学

采用主要成分抗病毒蛋白仙霉素（ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，ＢＣ３６９），对乙型肝炎病毒（乙肝病毒）转染细胞２２１５株核酸和乙肝病人血清中的核酸多聚酶的体外抑制实验；其抑制率分别为５４．８８％（Ｐ＜０．０１）和４９．０９％... 详细信息

采用主要成分抗病毒蛋白仙霉素（ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ，ＢＣ３６９），对乙型肝炎病毒（乙肝病毒）转染细胞２２１５株核酸和乙肝病人血清中的核酸多聚酶的体外抑制实验；其抑制率分别为５４．８８％（Ｐ＜０．０１）和４９．０９％（Ｐ＜０．０１）；

关键词： BC369 抗病毒药乙型肝炎病毒抑制作用

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植物病毒及其危害

生物学通报 2003年第4期38卷 12-13页

作者：熊克娟陈绳亮范兆军李天宪武汉病毒研究所湖北武汉430071

病毒是至今人们所知的在自然界最小的生物之一 ,其形态大小要借助电镜放大到几万甚至几十万倍才能观察得到。它具有严格的寄生性。必须在宿主细胞内才能生长繁殖。植物病毒作为重要的病原物 ,可通过多途径传播 ,在全世界范围内引起农作... 详细信息

病毒是至今人们所知的在自然界最小的生物之一 ,其形态大小要借助电镜放大到几万甚至几十万倍才能观察得到。它具有严格的寄生性。必须在宿主细胞内才能生长繁殖。植物病毒作为重要的病原物 ,可通过多途径传播 ,在全世界范围内引起农作物严重的病害。目前多采用综合措施防治以减轻病害 ,尚未有彻底的根治方法。

关键词：植物病毒危害寄生性传播途径农作物防治

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人巨细胞病毒PP71基因序列分析与表达

中国病毒学 2002年第2期17卷 189-191页

作者：张裕平陈绳亮陈立群李天宪中国科学院武汉病毒研究所湖北武汉430071

PP71 gene of the Human cytomegalor virur(HCMV AD-169) strain was amplified by *** digestion by BamH I and Hind Ⅲ, the fragment was cloned into the high level expression vector *** plasmid pET28a-PP71 was transformed into *** BL21(DE3) and lnduced by IPTG,high level protein was produced,and the target protein was 40% of all *** recovery rate was high and up to 92.4% of the target protein before *** provides scientific basis on research of HCMV pathogenesis and diagnosis.

关键词：人巨细胞病毒 PP71基因序列分析表达

鹦鹉幼雏病毒结构蛋白VP1基因的克隆及原核表达

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华中农业大学学报 2004年第6期23卷 593-596页

作者：寇铮陈绳亮钟靖李天宪喻子牛华中农业大学农业微生物国家重点实验室中国科学院武汉病毒研究所武汉430071 中国科学院武汉病毒研究所

采用湖北省云梦县患鹦鹉幼雏病死亡的虎皮鹦鹉体内分离得到的鹦鹉幼雏病毒 (budgerigarfledglingdiseasevirus,BFDV) ,应用PCR方法获得BFDV主要结构蛋白基因 (VP1) ,克隆到 pMD18 T载体 ,构建重组质粒 pMD18T VP1并进行测序 ,结果显示 ... 详细信息

采用湖北省云梦县患鹦鹉幼雏病死亡的虎皮鹦鹉体内分离得到的鹦鹉幼雏病毒 (budgerigarfledglingdiseasevirus,BFDV) ,应用PCR方法获得BFDV主要结构蛋白基因 (VP1) ,克隆到 pMD18 T载体 ,构建重组质粒 pMD18T VP1并进行测序 ,结果显示 ,结构蛋白基因 (VP1)与BFDV欧美分离株的同源性为 96 %～ 99% ,表明VP1是BFDV保守基因 ;将VP1亚克隆到原核表达载体pET32 (+)b ,构建重组质粒 pET32 (+)b VP1,转化菌株BL2 1(DE3) ,诱导表达 ,经SDS PAGE和Western blot分析 ,克隆在his tag下游的结构蛋白基因获得了高效融合表达 ,表达的融合蛋白分子量约为 5 5kD。为建立快速、灵敏的鹦鹉幼雏病毒血清学检测方法以及研制基因工程疫苗提供了科学依据。

关键词：鹦鹉幼雏病病毒(BFDV) 结构蛋白(VP1) 克隆与原核表达

溶组织内阿米巴半胱氨酸蛋白酶的纯化及其活性的初步研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2001年第3期19卷 163-165页

作者：严哲陈绳亮毛孙忠温州医学院生物化学教研室温州325003 中国科学院武汉病毒研究所武汉430071

目的　探索溶组织内阿米巴通过基底膜进入固有膜的机制 ,了解其半胱氨酸蛋白酶 (cysteine pro-teinase,CP)与胞外基质的相互作用。　方法　阿米巴裂解液通过 laminin- Sepharose亲和层析和分离纯化 ,经分子量测定、测序及抑制剂实验 ,... 详细信息

目的　探索溶组织内阿米巴通过基底膜进入固有膜的机制 ,了解其半胱氨酸蛋白酶 (cysteine pro-teinase,CP)与胞外基质的相互作用。　方法　阿米巴裂解液通过 laminin- Sepharose亲和层析和分离纯化 ,经分子量测定、测序及抑制剂实验 ,证明为 CP,以凝胶电泳测定其水解活性。　结果　纯化的 CP与 laminin有较强亲和力 ,其分子量为 2 7k Da,被 EC- 6 4所抑制 ,并具水解活性。　结论　溶组织内阿米巴半胱氨酸蛋白酶与胞外基质lam inin特异性结合 ,起水解作用 ,可能是入侵肠粘膜细胞基底膜的关键。

关键词：溶组织内阿米巴半胱氨酸蛋白酶水解活性