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NPWT联合银离子敷料治疗老年男性糖尿病足趾骨髓炎术后组织缺损的临床疗效及对MMP2、TMP1、VEGF的影响

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分子诊断与治疗杂志 2024年第8期16卷 1582-1586页

作者：曹萍吴军阮琼芳周曼侯以琳武汉市第三医院内分泌科湖北武汉430060 武汉市第三医院烧伤科湖北武汉430060

目的分析NPWT联合银离子敷料治疗老年男性DFO术后缺损的临床疗效及对MMP2、TMP1、VEGF水平的影响。方法选取2021年5月至2022年7月武汉市第三医院内分泌科收治的30例老年男性DFO术后缺损患者,随机分为对照组15例(银离子敷料治疗)和联合... 详细信息

目的分析NPWT联合银离子敷料治疗老年男性DFO术后缺损的临床疗效及对MMP2、TMP1、VEGF水平的影响。方法选取2021年5月至2022年7月武汉市第三医院内分泌科收治的30例老年男性DFO术后缺损患者,随机分为对照组15例(银离子敷料治疗)和联合组15例(NPWT联合银离子敷料治疗)。比较两组治疗创面感染情况、CRP、创面容积变化、创面愈合率、创面愈合时间、截趾率和创面组织中MMP2、TMP1、VEGF水平变化,随访3~6月观察两组复发和截趾情况。结果治疗7天、14天,联合组创面感染率均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论应用NPWT联合银离子敷料治疗DFO临床疗效佳,可降低3个月后DFO复发率及截趾率,其分子机制可能与减少创面组织MMP2表达,增加TMP1、VEGF表达相关。

关键词：糖尿病足溃疡趾骨骨髓炎 NPWT治疗银离子敷料

橙色红曲菌ACS基因和GMC基因缺失菌株的构建及其功能分析

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橙色红曲菌ACS基因和GMC基因缺失菌株的构建及其功能分析

作者：阮琼芳南昌大学

学位级别：硕士

红曲菌是我国重要的微生物资源，能够产生多种具有生物活性的代谢产物，具有很高的商业价值。但是由于红曲菌产桔霉素问题的存在，对红曲的安全性提出了怀疑。本文采用分子生物学技术，初步研究了酰基辅酶A合成酶(Acyl-CoA synthetase... 详细信息

红曲菌是我国重要的微生物资源，能够产生多种具有生物活性的代谢产物，具有很高的商业价值。但是由于红曲菌产桔霉素问题的存在，对红曲的安全性提出了怀疑。本文采用分子生物学技术，初步研究了酰基辅酶A合成酶(Acyl-CoA synthetase，以下简称ACS)和GMC氧化还原酶(glucose-methanol-choline oxidoreductase，以下简称GMC)编码基因的生物学功能，为阐明桔霉素代谢途径提供理论依据。主要研究内容如下：1 Blast比对分析，预测ACS基因为酰基辅酶A合成酶的编码基因，GMC基因为芳香醇脱氢酶的编码基因，推测ACS和GMC基因可能参与桔霉素生物合成途径。2通过酶切、连接和转化等DNA重组技术，成功构建了置换型打靶载体pACS-HPH和pGMC-HPH，载体中含有潮霉素抗性标记。3采用原生质体PEG介导转化将置换型打靶载体pACS-HPH和pGMC-HPH分别转入橙色红曲菌。AS3．4384中，采用潮霉素抗性筛选和基因组DNA的PCR筛选，分别获得ACS-6和GMC-8红曲菌缺失菌株。4采用HPLC分别检测ACS-6和GMC-8缺失菌株中桔霉素和红曲色素两种次级代谢产物的含量，验证以上两个基因的生物学功能，提示ACS基因参与桔霉素和红曲色素代谢过程中聚酮链骨架及十酰辅酶A的合成，GMC基因参与桔霉素和红曲色素的PKS后修饰过程。

关键词：橙色红曲菌AS3.4384 基因敲除酰基辅酶A合成酶 GMC氧化还原酶

血管内皮生长因子在电烧伤大鼠血清及创面组织中的表达变化

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中华烧伤杂志 2012年第6期28卷 423-427页

作者：阮琼芳谢卫国温丰平武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院烧伤研究所 430060

目的观察电烧伤大鼠血清和创面组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达变化，探讨其在电烧伤病变中的作用机制。方法按随机数字表法将64只SD大鼠分为正常对照组（8只）和电烧伤组（56只）。于伤后6h和1、3、7、14、21、28d，每时相点处死... 详细信息

目的观察电烧伤大鼠血清和创面组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达变化，探讨其在电烧伤病变中的作用机制。方法按随机数字表法将64只SD大鼠分为正常对照组（8只）和电烧伤组（56只）。于伤后6h和1、3、7、14、21、28d，每时相点处死8只电烧伤组大鼠，留取创面肌肉组织和血消样本。HE染色观察创面组织病理学改变，双抗体夹心ELISA法检测血清VEGF含量，蛋白质印迹法检测创面VEGF蛋白的表达量，免疫组织化学法检测创面VEGF的表达定位，计算微血管密度（MVD）值。对MVD值与VEGF表达强度行相关性分析。取未经任何处理的正常对照组大鼠腿部腹侧肌肉组织及血清进行上述指标检测。对数据进行单因素方差分析与Spearman等级相关分析，两两比较LSD—t检验。结果（1）电烧伤组大鼠伤后6h及1d，创面组织肌纤维断裂，大量炎性细胞浸润，组织水肿明显；伤后3d有新生血管生成；7d时肉芽组织及新生血管数量明显增多，（2）电烧伤组大鼠伤后6h及1、14d，血清VEGF含量分别为（43±11）、（44±11）、（74±27）pg／ml，明显高于正常对照组的（15±9）pg／ml。（t值为4．001～5．724，P值均小于0．01）。（3）与正常对照组肌肉组织VECF蛋白表达量（0．21±0．09）比较，电烧伤组各时相点大鼠创面组织VEGF蛋白表达量均升高，伤后7d达峰值，为0．63±0．13（t=4．965，P〈0．05）。（4）电烧伤组早期炎性细胞VEGF表达强阳性，后期以新生血管内皮细胞阳性表达为主。（5）电烧伤组伤后3、7、14、21、28d，创面组织MVD值和VEGF表达强度呈显著正相关（rs=0．834，P〈0．01）。结论电烧伤后不同阶段，VEGF征大鼠创面组织及血清中的表达各不相同，其改变与伤后体液渗出及创面愈合过程密切相关。

关键词：烧伤电血管内皮生长因子类毛细血管通透性

肾缺血对缺氧诱导microRNAs及VEGF-NOTCH信号分子的影响

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中华急诊医学杂志 2011年第4期20卷 380-384页

作者：刘芬吴珏娄远蕾阮琼芳李勇崔苏萍汪泱南昌大学第一附属医院重症医学科南昌330006 南昌大学泌尿外科研究所南昌大学第一附属医院肿瘤科

目的观察肾缺血性损伤后,缺氧诱导microRNAs及VEGF-NOTCH信号分子的表达变化,探讨肾缺血损伤后血管新生的可能调控途径.方法选择雄性Balb/c小鼠20只,采用夹闭双侧肾蒂方法制备急性缺血肾损伤模型,假手术组设为对照组.通过观察缺血恢复... 详细信息

目的观察肾缺血性损伤后,缺氧诱导microRNAs及VEGF-NOTCH信号分子的表达变化,探讨肾缺血损伤后血管新生的可能调控途径.方法选择雄性Balb/c小鼠20只,采用夹闭双侧肾蒂方法制备急性缺血肾损伤模型,假手术组设为对照组.通过观察缺血恢复后24 h小鼠肾功能及肾组织病理学改变确定模型成功.实时定量RT-PCR检测缺血恢复后4 h,24 h时缺氧诱导miRNA-210,miRNA-92a,VEGF,Flk-1及Notch1 mRNA表达水平;Western-blot检测缺血恢复后24 h,72 h时Flk-1蛋白的变化;免疫组织化学染色检测CD31表达,判断缺血组织微血管内皮细胞增生状况.结果肾缺血恢复24 h小鼠肌酐、尿素氮明显升高（P＜0.05）,光镜下观察大量小管上皮细胞肿胀、空泡变性坏死,肾小管管腔扩张,见上皮细胞碎片和管型,表明成功建立肾缺血损伤模型.肾缺血恢复4 h,24 h后,与正常组比较,肾组织miRNA-210上调倍数分别为（2.02±0.29）,（5.58±0.16）;miRNA-92a的表达上调倍数分别为（3.23±0.74）,（1.53±0.33）,P＜0.05;VEGF,Flk-1及Notch1 mRNA表达水平均升高（P＜0.05）.缺血恢复后24 h,72 h时,Flk-1蛋白水平显著升高（P＜0.05）,肾组织微血管密度明显增加.结论肾缺血性损伤后可出现代偿性血管新生,且缺氧诱导miRNA如miRNA-92a,miRNA-210表达上调,与血管新生相关的信号分子VEGF及Notch1表达均升高,提示miRNA/VEGF-Notch1可能是肾缺血性损伤后血管新生的主要调控通路,从而为探讨缺血性损伤后血管新生的机制提供了依据.

关键词：微小RNA 血管新生肾缺血 VEGF Notch基因

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入门必读：Windows 98中文版

一例外胚层发育不良/皮肤脆性综合征新生儿的组织病理学及基因诊断

丛书名：最新入门必读丛书

1998年

作者：（美）（A.拉思伯恩）Andy Rathbone 阮琼芳等译

来源：畅想之星图书光盘版（南... 评论

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中华烧伤杂志 2020年第6期36卷 500-502页

作者：阮琼芳夏琛谢卫国武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院烧伤研究所 430060 武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院病理科 430060

2015年8月6日,武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院烧伤科收治1例出生6 h的外胚层发育不良/皮肤脆性综合征男性患儿。取患儿前躯破溃处皮肤组织,采用苏木精-伊红染色观察皮肤组织病理学改变,结果显示患儿表皮肌细胞层轻度松解,表皮下方有... 详细信息

2015年8月6日,武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院烧伤科收治1例出生6 h的外胚层发育不良/皮肤脆性综合征男性患儿。取患儿前躯破溃处皮肤组织,采用苏木精-伊红染色观察皮肤组织病理学改变,结果显示患儿表皮肌细胞层轻度松解,表皮下方有大疱,真皮乳头层消失,真皮层内少量炎性细胞浸润;采用免疫组织化学染色检测患儿皮肤组织中斑菲素蛋白1(PKP1)的表达情况,结果显示PKP1表达完全缺失;靶向测序鉴定PKP1基因突变位点显示,在PKP1基因上有1个内含子纯合突变PKP1:c.203-1G>A。患儿经过35 d的治疗,全身大部分创面已经愈合,可见多处散在残余创面,不断有新的水疱及皮肤破损出现。

关键词：婴儿,新生诊断外胚层发育不良/皮肤脆性综合征斑菲素蛋白1

电烧伤和热力烧伤患者血清微小RNA表达谱分析

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中华烧伤杂志 2017年第1期33卷 37-42页

作者：阮琼芳蒋梅君叶子青赵超莉谢卫国武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院烧伤研究所 430060

目的探讨电烧伤患者、热力烧伤患者和健康人血清中微小RNA的差异表达及其意义。方法选择笔者单位2015年6—8月收治的符合入选标准的电烧伤患者、热力烧伤患者各3例，另选择3名健康成年志愿者，取全血分离血清并分为电烧伤组、热力烧伤... 详细信息

目的探讨电烧伤患者、热力烧伤患者和健康人血清中微小RNA的差异表达及其意义。方法选择笔者单位2015年6—8月收治的符合入选标准的电烧伤患者、热力烧伤患者各3例，另选择3名健康成年志愿者，取全血分离血清并分为电烧伤组、热力烧伤组、正常对照组。Trizol法提取血清总RNA，利用微小RNA芯片技术筛选3组间差异表达（差异表达比值大于或等于2.000、小于或等于0.500）的微小RNA，对差异表达的微小RNA进行聚类和韦恩图分析，对差异表达明显的微小RNA（差异表达比值大于或等于5.000、小于或等于0.500）行京都基因和基因组百科全书（KEGG）信号通路功能富集分析。结果3组血清间差异表达微小RNA共220个。电烧伤组和热力烧伤组血清微小RNA表达谱与正常对照组不同。与正常对照组比较，电烧伤组血清有59个差异表达改变倍数大于2.000倍的微小RNA，其中50个表达上调，9个表达下调；热力烧伤组血清有40个差异表达改变倍数大于2.000倍的微小RNA，其中21个表达上调，19个表达下调。与热力烧伤组比较，电烧伤组血清有167个差异表达改变倍数大于2.000倍的微小RNA。与正常对照组比较，热力烧伤组血清特异表达微小RNA 17个，电烧伤组血清特异表达微小RNA 26个。KEGG信号通路功能富集分析显示，与正常对照组比较，电烧伤组血清差异表达明显的微小RNA参与胰岛素分泌信号通路、致心律失常型右心室心肌病信号通路、肥厚型心肌病信号通路、谷氨酸能突触信号通路、钙离子信号通路、环磷酸腺苷信号通路、甘油磷酸酯代谢途径、嘧啶代谢途径、血清素激活突触信号通路等；热力烧伤组血清差异表达明显的微小RNA参与肿瘤转录失调信号通路、肿瘤蛋白聚糖和肿瘤相关微小RNA信号通路、长时程增强效应信号通路、柠檬酸循环信号通路、TNF信号通路、黏着斑信号通路、内吞作用信号通路、胰岛素分泌信号通路、p53信号通路、雌激素信号通路等。结论电烧伤和热力烧伤血清的微小RNA表达谱与健康人血清的不同，其差异表达的微小RNA的靶基因富集的信号通路与电烧伤和热力烧伤伤后病理变化和临床表现相关。

关键词：烧伤,电基因表达谱热力烧伤微小RNA

大面积烧伤患者发生早期心肌损伤的危险因素及早期心肌损伤对预后的影响

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中华烧伤与创面修复杂志 2023年第5期39卷 417-423页

作者：陈诺席毛毛阮琼芳褚志刚张伟张锦丽谢卫国武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院烧伤研究所武汉430060 武汉大学第二临床学院武汉430060

目的探讨大面积烧伤患者发生早期心肌损伤的危险因素及早期心肌损伤对预后的影响。方法采用回顾性病例系列研究方法。2018年1月—2022年8月,武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院收治361例符合入选标准的大面积烧伤患者,其中男231例、女130... 详细信息

目的探讨大面积烧伤患者发生早期心肌损伤的危险因素及早期心肌损伤对预后的影响。方法采用回顾性病例系列研究方法。2018年1月—2022年8月,武汉大学同仁医院暨武汉市第三医院收治361例符合入选标准的大面积烧伤患者,其中男231例、女130例,年龄50(36,58)岁,烧伤总面积45%(35%,60%)体表总面积。根据伤后72 h内心肌型肌酸激酶同工酶(CK-MB)最高值,将患者分为早期心肌损伤组(CK-MB≥75 U/L,182例)和非早期心肌损伤组(CK-MB0.05)。早期心肌损伤组患者伤后72 h内CK-MB、肌酸激酶、乳酸脱氢酶、α-羟丁酸脱氢酶、白细胞计数、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶、钾、血红蛋白均明显高于非早期心肌损伤组(Z值分别为15.40、6.26、7.59、7.02、2.64、4.53、4.07、6.32、4.12,t=2.34,P0.05)。烧伤总面积、伤后入院时间、伤后72 h内NLR和ALT均为大面积烧伤患者发生早期心肌损伤的独立危险因素(比值比分别为1.03、1.07、1.04、1.02,95%置信区间分别为1.02~1.05、1.00~1.11、1.02~1.07、1.00~1.03,P<0.05)。早期心肌损伤组患者病死率为8.8%(16/182),明显高于非早期心肌损伤组的2.8%(5/179),χ^(2)=5.93,P<0.05。早期心肌损伤、年龄、入院时合并休克、入院时合并吸入性损伤均为大面积烧伤患者死亡的独立危险因素(比值比分别为3.60、1.04、6.53、3.14,95%置信区间分别为1.17~11.05、1.01~1.07、1.39~30.68、1.15~8.56,P<0.05)。结论烧伤总面积、伤后入院时间、伤后72 h内NLR和ALT均为大面积烧伤患者发生早期心肌损伤的独立危险因素。伴早期心肌损伤的大面积烧伤患者病死率更高,早期心肌损伤是其死亡的独立危险因素。

关键词：烧伤危险因素预后心肌损伤

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小鼠肾缺血性损伤微小RNA表达谱的变化

中华实验外科杂志 2011年第12期28卷 2077-2079页

作者：刘芬阮琼芳吴珏娄远蕾崔苏萍汪泱南昌大学第一附属医院泌尿外科研究所 330006

目的建立缺血肾组织微小RNA（miRNA）差异表达谱。方法夹闭小鼠双侧肾蒂45min制备急性肾缺血模型，随机分为假手术、缺血恢复4、24h组。通过观察血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）及肾病理改变判断模型成功。采用AgilentmiRNA基因芯片技... 详细信息

目的建立缺血肾组织微小RNA（miRNA）差异表达谱。方法夹闭小鼠双侧肾蒂45min制备急性肾缺血模型，随机分为假手术、缺血恢复4、24h组。通过观察血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）及肾病理改变判断模型成功。采用AgilentmiRNA基因芯片技术构建缺血肾组织miRNA表达谱，实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）验证miRNA-210、miRNA-92a表达变化。结果miRNA表达谱出现明显改变，76个miRNAs出现两倍以上的表达变化，其中40个miRNAs下调，36个miRNAs上调。肾缺血恢复4、24h后，miRNA-210表达分别上调（2．02±0．29）、（5．58±0．16）倍；miR-92a分别上调（3．23±0．74）、（1．53±0．33）倍（P〈0．05），与miRNA微阵列结果一致。结论肾缺血损伤后，miRNA表达谱发生改变，提示miRNA可能参与缺血性肾损伤病理生理过程的调控。

关键词：肾缺血表达谱 miRNA芯片