肾缺血对缺氧诱导microRNAs及VEGF-NOTCH信号分子的影响

作     者：刘芬 吴珏 娄远蕾 阮琼芳 李勇 崔苏萍 汪泱 LIU Fen

作者机构：南昌大学第一附属医院重症医学科南昌330006 南昌大学泌尿外科研究所 南昌大学第一附属医院肿瘤科 

出 版 物：《中华急诊医学杂志》 (Chinese Journal of Emergency Medicine)

年 卷 期：2011年第20卷第4期

页      面：380-384页

学科分类：1002[医学-临床医学] 1011[医学-护理学（可授医学、理学学位）] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30960385) 国家自然科学基金资助项目(81060059)作者单位:(刘芬) 吴珏、娄远蕾、阮琼芳、崔苏萍、汪泱 (李勇)通信作者:汪泱,Email:wangy63cn@sina.eom 

主　　题：微小RNA 血管新生 肾 缺血 VEGF Notch基因 

摘      要：目的 观察肾缺血性损伤后,缺氧诱导microRNAs及VEGF-NOTCH信号分子的表达变化,探讨肾缺血损伤后血管新生的可能调控途径.方法 选择雄性Balb/c小鼠20只,采用夹闭双侧肾蒂方法制备急性缺血肾损伤模型,假手术组设为对照组.通过观察缺血恢复后24 h小鼠肾功能及肾组织病理学改变确定模型成功.实时定量RT-PCR检测缺血恢复后4 h,24 h时缺氧诱导miRNA-210,miRNA-92a,VEGF,Flk-1及Notch1 mRNA表达水平;Western-blot检测缺血恢复后24 h,72 h时Flk-1蛋白的变化;免疫组织化学染色检测CD31表达,判断缺血组织微血管内皮细胞增生状况.结果 肾缺血恢复24 h小鼠肌酐、尿素氮明显升高（P0.05）,光镜下观察大量小管上皮细胞肿胀、空泡变性坏死,肾小管管腔扩张,见上皮细胞碎片和管型,表明成功建立肾缺血损伤模型.肾缺血恢复4 h,24 h后,与正常组比较,肾组织miRNA-210上调倍数分别为（2.02±0.29）,（5.58±0.16）;miRNA-92a的表达上调倍数分别为（3.23±0.74）,（1.53±0.33）,P0.05;VEGF,Flk-1及Notch1 mRNA表达水平均升高（P0.05）.缺血恢复后24 h,72 h时,Flk-1蛋白水平显著升高（P0.05）,肾组织微血管密度明显增加.结论 肾缺血性损伤后可出现代偿性血管新生,且缺氧诱导miRNA如miRNA-92a,miRNA-210表达上调,与血管新生相关的信号分子VEGF及Notch1表达均升高,提示miRNA/VEGF-Notch1可能是肾缺血性损伤后血管新生的主要调控通路,从而为探讨缺血性损伤后血管新生的机制提供了依据.