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流感假病毒感染动物模型的构建及其在疫苗保护效力评价中的应用

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流感假病毒感染动物模型的构建及其在疫苗保护效力评价中的应用

作者：王忆菲河北大学

学位级别：硕士

流行性感冒简称“流感”,由流感病毒引起,主要通过飞沫传播,发病率高,传染性强,容易在引起暴发流行,对人类健康构成严重威胁,造成很大的疾病负担。疫苗接种是预防和控制流感的有效方法。当前流感疫苗评价平台有基于体外的血凝抑制实验... 详细信息

流行性感冒简称“流感”,由流感病毒引起,主要通过飞沫传播,发病率高,传染性强,容易在引起暴发流行,对人类健康构成严重威胁,造成很大的疾病负担。疫苗接种是预防和控制流感的有效方法。当前流感疫苗评价平台有基于体外的血凝抑制实验和假病毒中和实验,也有基于体内的动物模型,其中流感感染动物模型最广泛应用于疫苗的研发及临床前评价,在疫苗的安全性和有效性评估中发挥着重要的作用。然而,由于这些动物模型需要用到流感活病毒株,容易对实验环境和操作人员产生一定的生物风险;许多流感活病毒的突变株不易获取,而且有些动物感染模型需要病毒进行传代适应,这些都在一定程度上限制了对流感疫苗的评价应用。假病毒技术的出现为解决上述问题提供了思路,假病毒仅单轮复制感染,更具安全性,可在BSL-2实验环境操作;含有报告基因,易于定量分析;更易获取突变株,只需活病毒蛋白结构序列就能获得病毒等,可替代活病毒进行感染实验。生物发光活体成像是近年来发展起来的另一项实用新技术,能够实时动态监测假病毒在动物体内的分布。为了更便捷有效的评价流感疫苗对流感疫苗株和突变株的保护效果,本课题尝试利用假病毒技术和生物发光活体成像技术,首次构建了基于季节性流感假病毒的可视化小鼠感染模型,并利用该模型评价了流感疫苗对季节性流感病毒株和突变株的保护效果,同时,在流感活病毒感染小鼠模型对新构建模型的评价效果进行了验证。本研究首先利用实验室前期构建好的VSV体系和HIV体系的流感假病毒感染小鼠,通过对流感假病毒包装系统、小鼠品系、周龄、感染方式、检测时间等的选择和优化,选择出动物模型构建的最佳方式,并在组织解剖中检测该模型的安全性。之后,对6～8周龄雌性BALB/c小鼠肌肉注射免疫两针四价流感疫苗,两针间隔14天,免疫完成后进行攻毒保护实验。利用构建的假病毒感染模型对流感疫苗的保护效果进行评价,并进一步进行了疫苗被动免疫的效果研究,以分析抗体水平与病毒保护的相关性;同时通过活病毒感染小鼠模型进行疫苗对疫苗株及突变株的保护效果研究。分析疫苗在真、假病毒动物感染模型中对流感疫苗株和突变株的有效性评价结果差异和一致性。研究显示HIV包装系统假病毒比VSV包装系统假病毒更具有稳定性,通过腹腔注射感染优于尾静脉注射,流感假病毒感染后,BALB/c小鼠的肺部发光值、发光的均一性和同质性的综合评分高于其他三种小鼠,感染后第五天生物发光值达到峰值,并确定了流感假病毒感染BALB/c小鼠的半数感染剂量(AID50)为1.2×10～5TCID50。因此,流感假病毒感染动物模型的最佳条件为:选用BALB/c小鼠和HIV包装系统的流感假病毒,通过腹腔注射感染,按照AID50=1.2×10～5TCID50计算攻毒剂量,在感染后第五天测定小鼠发光值。为评价该模型在疫苗保护效力评价中的实际应用,我们首先将2022年疫苗株季节性流感假病毒（H1N1-VI19、H3N2-DA06、BV21）同时感染免疫完成的BALB/c小鼠,在第五天进行活体成像,结果显示三组免疫组小鼠发光值强度均显著低于攻毒对照组,说明疫苗对流感病毒感染具有一定的保护效果。进一步对不同突变株的假病毒株的体内保护情况进行研究,采用2022年四价流感疫苗进行小鼠免疫,之后选择2022年H1N1疫苗株及其三种突变株（VI19、VI22、WI22和GD19）假病毒株去感染小鼠,结果显示,疫苗组小鼠的发光比病毒对照组弱,说明疫苗对流感突变株假病毒株的攻击具有保护效果,其中对本年疫苗株保护效果最好。为了研究不同疫苗对同一流感毒株的保护差异,设置三组实验组,分别为PBS+假病毒VI19组、2022疫苗+假病毒VI19组、2020疫苗+假病毒VI19组,对小鼠腹腔注射同等剂量的VI19流感假病毒,结果显示,2022年疫苗组和2020年疫苗组的发光均低于攻毒对照组,说明2022年疫苗和2020年疫苗对VI19均有保护效果,保护率分别为59%和49%,2022年疫苗的保护效果更好。同时利用流感活病毒VI19和VI22毒株对免疫完成后的小鼠攻毒,评价2022年流感疫苗的保护效果,结果同样显示疫苗对两种毒株均具有致死性保护,与对假病毒毒株的保护效果基本一致。我们还利用已建立的假病毒模型,对免疫血清进行了小鼠体内被动保护效果评价,结果表明该抗血清对假病毒感染小鼠具有保护作用,且保护效果与抗体滴度呈正相关（r=0.86）,表明该模型也可以用于流感被动免疫的效果评价。综上所述,本研究通过对流感假病毒体系、小鼠品系、注射方式、注射剂量、检测时间等方面进行优化,成功构建了可视化的季节性流感假病毒感染小鼠模型。该模型能够实时动态观察流感病毒进入小鼠感染分布情况;同时利用假病毒感染模型和目前应用的活病毒感染模型评价流感疫苗的保护效果,两种感染模型得出的结果趋于一致,表明该模型可以替代活

关键词：季节性流感病毒假病毒动物模型疫苗保护效力评价

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遗嘱设立居住权研究

遗嘱设立居住权研究

作者：李春菲吉林大学

学位级别：硕士

《民法典》确立居住权制度拉开了建筑物用益物权的序幕,形成了崭新的用益物权体系,对于构建多方位居住权益保护体系意义重大,对现实存在的居住权益起到重要确认和维护作用。然而《民法典》中关于居住权的条文仅有六条,诸多规则缺失,还... 详细信息

《民法典》确立居住权制度拉开了建筑物用益物权的序幕,形成了崭新的用益物权体系,对于构建多方位居住权益保护体系意义重大,对现实存在的居住权益起到重要确认和维护作用。然而《民法典》中关于居住权的条文仅有六条,诸多规则缺失,还有待进一步完善,尤其是以遗嘱设立居住权,其规则的适用含糊不明。研究遗嘱设立居住权问题,应当首先明确遗嘱设立居住权的性质,由此明晰遗嘱设立居住权的要件,确定遗嘱设立居住权的法律适用。遗嘱设立居住权相较于合同设立居住权,两者的设立行为性质不同、设立主体类型不同、设立目的相异、房屋所有权变动与否不同,遗嘱和合同之间的区别是上述差异的根源。设立居住权不是处分遗产,遗嘱设立居住权是发挥遗嘱安排个人事务的功能,遗嘱继承方式设立居住权的说法显然局限于遗嘱处分遗产功能,忽略了遗嘱事务安排的功能,遗赠方式设立居住权的说法也是重蹈覆辙。遗嘱设立居住权区别于合同设立居住权,独立于遗嘱继承、遗赠。从性质上说,遗嘱设立居住权是发挥遗嘱安排事务功能的单方设权行为,表现为以遗嘱安排事务的新形态,是以单方民事法律行为安排事务新方式。关于遗嘱设立居住权的形式,可以参照适用《民法典》继承编关于遗嘱形式的规定。设立居住权的遗嘱形式不限于书面遗嘱形式,口头遗嘱因满足遗嘱人危急需要,亦可以用于设立居住权。遗嘱实质要件涉及遗嘱效力,遗嘱人应当具有遗嘱设立居住权的能力,设立居住权的遗嘱应当符合法律规定且不能与必留份制度相冲突;通过共同遗嘱设立居住权的,设立居住权需为夫妻双方合意,且居住权设立对象必须为夫妻共有房屋。因《民法典》未明确遗嘱设立居住权的生效模式,根据遗嘱这一单方民事法律行为的特点,遗嘱设立居住权可以参照适用《民法典》第230条规定,自遗嘱继承开始时生效。遗嘱设立居住权登记后,可以对抗善意第三人。由于登记义务人缺位,因此应由遗产管理人承担登记义务,房屋继承人承担协助登记义务,由此可以切实地督促完成居住权登记,保障居住权人权益。居住权设立前,遗嘱人享有处分房屋的自由,由此,居住权设立后,同一房屋之上不同权利之间可能存在冲突。居住权设立后,继承人处分房屋行为隐含导致权利冲突的可能。按照冲突内容,可以将遗嘱设立居住权面临的权利冲突分为两种类型:一是权利并存问题;二是权利冲突时的实现位序问题。居住权与所有权的冲突,可以通过继承人购买房屋、完成居住权登记予以化解。居住权与担保物权因类型不同而存在不同情形,居住权与转移所有权型担保物权,可以参考居住权与所有权之间的冲突化解方案。居住权与非转移所有权型担保物权在担保物权实现时,存在权利冲突,“带居”的担保物权实现方式能够同时满足担保物权人和居住权人的权益需求,化解冲突,实现物尽其用。

关键词：居住权遗嘱生效模式权利冲突

海外学习者中文线上学习的阻碍因素及应对策略研究

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海外学习者中文线上学习的阻碍因素及应对策略研究

作者：王钰菲山东财经大学

学位级别：硕士

随着互联网的普及和中文学习需求的增长,海外学习者对中文学习的便捷性和学习资源的丰富性提出了更高的要求。线上中文学习平台的出现,为全球中文学习者获取资源、学习中文提供了更为宽松、便捷的途径。特别是在全球交流日益频繁的今天... 详细信息

随着互联网的普及和中文学习需求的增长,海外学习者对中文学习的便捷性和学习资源的丰富性提出了更高的要求。线上中文学习平台的出现,为全球中文学习者获取资源、学习中文提供了更为宽松、便捷的途径。特别是在全球交流日益频繁的今天,中文学习的需求不再传统地局限于本国学生,而是涵盖了更广泛的海外学习者群体。他们可能出于日常生活需要、工作需要,也可能出于对中国文化的兴趣而选择学习中文。由于能够提供灵活方便的学习方式,为学习者创造一个只要能上网就能随时随地学习的环境,线上中文学习已成为这一群体的主要学习方式之一。因此,这一平台的广泛使用也使得线上中文学习逐渐成为全球教育领域的热门话题,引起了学术界和教育机构的广泛关注。然而,任何事物都具有两面性。尽管线上中文学习平台为学习者提供了便利的学习条件和丰富的学习资源,但也给学习者带来了一定的阻碍,例如线上学习要求学习者具备较好的自主学习能力等。为了研究海外学习者线上中文平台学习的阻碍因素种类,为学习者提供应对这些阻碍的有效策略,本文利用开放式问卷调查,结合LDA主题模型分析与人工编码的文本分析技术,对所研究的问题进行详尽的调查和分析。根据调查结果,研究者将线上中文平台学习的阻碍因素划分为四种类型,包括“缺少互动和及时反馈”“学习兴趣差,注意力分散”“难以规划学习时间”及“其他”,问卷中与之对应的四类学习策略分别为“加强沟通,寻求帮助”“提高学习效率和专注力”“制定学习计划”及“养成良好学习习惯。”另外,本文还根据调查结果中发生频率较高的线上学习的阻碍因素,结合“自主学习理论”“共同体理论”及“社会存在感理论”为线上中文平台课程的参与者,即海外学习者、教师和教育机构等提出应对阻碍的策略建议。在提高自主学习能力方面,本文建议学习者在线上中文课程开始前,结合个人需求和目标制定个性化的学习计划,并在课后做到及时复习。在加强互动交流方面,学习者应当积极参与学习共同体的构建,学会利用平台提供的实时互动工具,通过线上讨论的形式解决学习中的问题和困难。此外,对于社会存在感,学习者应当合理利用。在积极参与学习共同体、加强互动交流的过程中,除了要构建起师生、生生间的紧密联结,帮助学习者解决学习难题外,还可以主动向他人分享自己的学习经验,共享学习资源,通过互动的方式提高自身存在感,改善中文线上学习效果。综上所述,本研究通过系统地分析海外学习者在线上中文学习中遇到的阻碍因素和有效学习策略,为中文教育的线上转型提供了宝贵的实证支持。此外,还为使用线上中文平台进行教学的机构和教师提供了教学方法的改进建议,也为这一领域未来的研究提供了新的方向。

关键词：海外学习者线上学习阻碍因素应对策略

SIM1基因变异致早发性肥胖1例及文献复习

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中华实用儿科临床杂志 2024年第4期39卷 303-306页

作者：王峤覃菲巩纯秀首都医科大学附属北京儿童医院内分泌遗传代谢科北京100045 首都医科大学儿科医学院北京100069

对2022年2月就诊于首都医科大学附属北京儿童医院的1例SIM1基因变异致肥胖的患儿临床资料进行回顾性分析。患儿,女,5岁4个月,临床主要表现为早发性肥胖,29月龄时已达同龄女童肥胖标准,伴重度阻塞性睡眠呼吸暂停综合征。患儿及其母亲存在... 详细信息

对2022年2月就诊于首都医科大学附属北京儿童医院的1例SIM1基因变异致肥胖的患儿临床资料进行回顾性分析。患儿,女,5岁4个月,临床主要表现为早发性肥胖,29月龄时已达同龄女童肥胖标准,伴重度阻塞性睡眠呼吸暂停综合征。患儿及其母亲存在SIM1基因杂合变异。文献复习全球范围不同家系的SIM1基因变异导致肥胖患者共42例,本病以早发性肥胖为主要特征,近1/3还伴有肥胖外临床表现,包括智力运动发育迟缓、认知行为问题、轻度外观畸形以及神经内分泌异常。目前共报道了58种SIM1基因变异与肥胖相关,大多集中于C-末端结构域。p.T46R及p.D707H等位基因频率达9.5%,考虑为热点变异。提示对于早发性肥胖患者,应注意完善SIM1基因分析。

关键词：儿童 SIM1基因单基因肥胖早发性肥胖阻塞性睡眠呼吸暂停综合征

维普期刊数据库

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萤石网络分拆上市案例研究

萤石网络分拆上市案例研究

作者：谢晓菲中国财政科学研究院

学位级别：硕士

2019年随着关于科创板设立和试点注册制、以及境内分拆上市的相关制度文件的发布,资本市场改革步伐加快,为众多公司提供了分拆上市的新机遇,进一步丰富了我国的资本市场,为经济发展注入了新的活力。本文选取了科创板智能家居分拆上市第... 详细信息

2019年随着关于科创板设立和试点注册制、以及境内分拆上市的相关制度文件的发布,资本市场改革步伐加快,为众多公司提供了分拆上市的新机遇,进一步丰富了我国的资本市场,为经济发展注入了新的活力。本文选取了科创板智能家居分拆上市第一股——萤石网络作为研究对象,以信息不对称、融资策略、管理层激励和核心化战略为理论基础对萤石网络分拆上市的动因、过程和效果进行分析,有助于完善分拆上市的相关研究。研究境内上市公司分拆所属子公司至境内上市的案例有助于对境内分拆上市这一热点话题进行实例追踪,能够在实际中把握各市场主体对该政策的反应,深入了解从政策颁布到实例实践这一过程,也希望能够给想要在境内分拆上市的上市公司更多的实际案例进行参考。最后,本文就分拆上市的相关研究结果进行了进一步的总结,分拆上市有其明显的优势,可以增加融资机会、拓宽融资渠道,提高经营效率等。另外,总结出三条经验启示,分别为把握市场机会推动公司发展战略、利用分拆上市强化创新资源管理和重视公司长期发展打造品牌效应。

关键词：分拆上市萤石网络分拆动因价值创造

宝钢股份发行低碳转型公司债券动因与效益分析

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宝钢股份发行低碳转型公司债券动因与效益分析

作者：王娅菲广州大学

学位级别：硕士

改革开放以来,我国经济实现了迅猛的发展,但这一过程也打破了经济与环境之间的平衡,使得绿色转型变得尤为紧迫。面对高碳行业排放污染严重的问题,在“双碳”目标的指引下,企业迫切需要转变传统的生产模式,朝着绿色、可持续的发展方向迈... 详细信息

改革开放以来,我国经济实现了迅猛的发展,但这一过程也打破了经济与环境之间的平衡,使得绿色转型变得尤为紧迫。面对高碳行业排放污染严重的问题,在“双碳”目标的指引下,企业迫切需要转变传统的生产模式,朝着绿色、可持续的发展方向迈进。高碳产业作为国民经济的重要组成部分,其绿色低碳转型尤为关键,为了满足高碳企业在低碳转型发展过程中的融资需求,低碳转型公司债券应运而生。本文综合运用文献分析、理论分析和案例分析的研究方法,梳理了低碳转型公司债券的理论与发行情况,以宝钢股份为案例,概述债券发行的具体情况,分析发行动因和发行过程中的潜在风险及风险防范情况,此外,从市场反应、财务状况、环境影响以及社会效益四个维度,详细剖析了宝钢股份发行低碳转型公司债券的融资效果。通过分析发现宝钢股份发行低碳转型公司债券的动因有:响应国家政策、满足企业融资需求和提升企业社会声誉。通过效益分析得出结论如下:第一,宝钢股份通过发行低碳转型公司债券进行融资,这一举措有效促进了公司股票在短期内呈现正向的市场反应;第二,低碳转型公司债券的发行不仅显著降低了公司的融资成本,还进一步增强了公司偿债能力和盈利能力,财务效果显著;第三,从长期来看,低碳转型公司债券的发行带来了显著的环境效益,有效推动了宝钢股份的低碳转型;同时树立绿色企业形象,提升企业社会声誉,也能够带动更多企业加入低碳转型公司债券融资行列中,推动我国低碳转型公司债券市场的发展。最后,对于宝钢股份低碳转型公司债券融资过程中存在的问题提出针对性建议。这篇文章为低碳转型公司债券融资效果评估提供了更多的内容,填补了关于低碳转型公司债券融资案例研究的空白,并为其他希望通过低碳转型公司债券融资的公司提供了宝贵的参考经验。

关键词：转型金融低碳转型公司债券融资动因融资效益

血流限制训练对排球专选班学生下肢力量影响的实验研究

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血流限制训练对排球专选班学生下肢力量影响的实验研究

作者：黄涵菲河北科技师范学院

学位级别：硕士

研究目的:血流限制训练作为一种新兴的运动训练方法,通过减少肌肉的血液供应来增强其力量素质,从而达到以较小的训练强度刺激肌肉生长、改善肌肉功能的效果。鉴于下肢力量对排球运动训练的重要性,本研究对比了血流限制结合抗阻训练与常... 详细信息

研究目的:血流限制训练作为一种新兴的运动训练方法,通过减少肌肉的血液供应来增强其力量素质,从而达到以较小的训练强度刺激肌肉生长、改善肌肉功能的效果。鉴于下肢力量对排球运动训练的重要性,本研究对比了血流限制结合抗阻训练与常规抗阻训练对排球专业学生下肢力量的影响,旨在探究BFR结合抗阻训练提升力量的潜力,并考虑将BFRT应用于排球专项力量训练的可能性。研究方法:采用文献资料法、实验法、数理统计法。通过查阅国内外有关血流限制方面的资料为本文提供理论支撑。本研究选取了20名排球专选班的学生作为受试者,将其随机分为两组,其中10名进行常规力量训练,另外10名进行血流限制抗阻训练。以30%1RM负荷进行杠铃负重半蹲训练,研究为期6周。在训练前,我们对所有受试者的半蹲1RM(最大力量)、20s连续摸高(力量耐力)、助跑摸高(爆发力)、半米字移动(快速力量)进行了测量,训练期间,两组均执行一样的下肢练习,差异在于BFRT组在进行训练时使用了特制的束带以限制腿部血流。训练后,我们再次对两组受试者进行测量,最后通过Excel和SPSS进行实验前后以及组间数据统计与整理,并进行分析。研究结果:(1)干预后BFR组和常规组半蹲1RM、20s连续摸高、助跑摸高、半米字移动均有不同程度的提升。(2)干预后将LI-BFRT和LI-RT进行组内对比,其中LI-BFRT成显著性差异(P0.05)。(3)干预后将LI-BFRT和LI-RT进行组间对比,各项检验指标均呈显著性差异(P<0.05)。研究结论:(1)6周血流限制训练可以有效提高下肢力量耐力。(2)6周血流限制训练可以有效提高下肢爆发力。(3)6周血流限制训练可以有效提高下肢最大力量。(4)6周血流限制训练可以有效提高下肢快速力量。

关键词：血流限制训练排球下肢力量

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基于过程模型优化的化肥监管系统研发

基于过程模型优化的化肥监管系统研发

作者：刘洁菲山东农业大学

学位级别：硕士

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线条艺术在广彩创作中的表现与应用研究

线条艺术在广彩创作中的表现与应用研究

作者：蒋丽菲广州大学

学位级别：硕士

广彩艺术自创烧以来历时三百余年,以自己独特的艺术形式、华丽的装饰风格成为瓷界的后起之秀。然而,随着市场需求以及时代风尚的瞬息万变,广彩艺术也需要在不断地变革求新之中保证自身的活化发展,从而适应现代人们的审美需求。本文以广... 详细信息

广彩艺术自创烧以来历时三百余年,以自己独特的艺术形式、华丽的装饰风格成为瓷界的后起之秀。然而,随着市场需求以及时代风尚的瞬息万变,广彩艺术也需要在不断地变革求新之中保证自身的活化发展,从而适应现代人们的审美需求。本文以广彩艺术的风格和特色作为创作基础,以线条形式作为主要的创作语言,结合当下的生活方式与审美情趣进行研究和实践,探索线条元素在广彩艺术中的创新应用,同时在完成毕业创作《穗·月》系列广彩织金瓷板画的过程中,深入思考如何更好地开发现代广彩作品的创新形式与改革路径,拨开广彩艺术形式的创作新思路,为研究非遗活化传承与广彩艺术之间的发展前景提供参考。

关键词：广彩线条艺术装饰风格