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盐渍凡纳滨对虾抗菌肽PV-M7对副溶血性弧菌的抑菌活性

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中国食品学报 2024年第5期24卷 182-189页

作者：戴静怡金日天林蓉翁武银邓尚贵杨燊集美大学海洋食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 大连工业大学海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心辽宁大连116034 浙江兴业集团浙江舟山316014

抗菌肽是食品工业的新型生物防腐剂,而盐渍发酵食品是抗菌肽的来源之一。采用超高效液相色谱-质谱联用技术从盐渍凡纳滨对虾中鉴定小分子多肽序列,利用生物信息学分析筛选潜在的抗菌肽。通过最低抑菌浓度、时间-杀灭曲线、细胞膜通透性... 详细信息

抗菌肽是食品工业的新型生物防腐剂,而盐渍发酵食品是抗菌肽的来源之一。采用超高效液相色谱-质谱联用技术从盐渍凡纳滨对虾中鉴定小分子多肽序列,利用生物信息学分析筛选潜在的抗菌肽。通过最低抑菌浓度、时间-杀灭曲线、细胞膜通透性和圆二色谱等试验评价抗菌肽对副溶血性弧菌的抑菌活性及机制。结果表明:盐渍凡纳滨对虾中一种新型抗菌肽(PV-M7)对副溶血性弧菌的最低抑菌质量浓度为15.6μg/mL,其在1 h内即可产生很好的抑菌作用。PV-M7作用于副溶血性弧菌后,可使细胞膜通透性增加,胞内大分子物质(核酸、蛋白质)泄露,同时,细胞膜表面模糊,细胞质密度减小。当PV-M7接触细胞膜时,它的二级结构由无规则卷曲转变成α-螺旋,这种结构转换是其发挥抑菌活性的关键作用机制。

关键词：凡纳滨对虾副溶血性弧菌抗菌肽结构转换抑菌机制

源自发酵凡纳滨对虾的抗菌肽BCE3对蜡样芽孢杆菌的抑菌机制及其在米饭中的应用

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微生物学报 2024年第8期64卷 2768-2783页

作者：陶玮红林蓉梁铎杨燊金日天集美大学海洋食品与生物工程学院福建厦门361021 集美大学福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 大连工业大学海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心辽宁大连116034

【目的】利用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)发酵凡纳滨对虾(Penaeus vannamei)加工废弃物,并从发酵液中鉴定出一种新型抗菌肽(命名为BCE3),探究其对蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)的抑菌作用和机制。【方法】通过超高效液相色谱-质... 详细信息

【目的】利用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)发酵凡纳滨对虾(Penaeus vannamei)加工废弃物,并从发酵液中鉴定出一种新型抗菌肽(命名为BCE3),探究其对蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)的抑菌作用和机制。【方法】通过超高效液相色谱-质谱联用技术(ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,UPLC-MS)对发酵液中的小分子多肽序列进行鉴定,并进一步通过生物信息学筛选潜在抗菌肽;通过微量稀释法和平板涂布法分析BCE3对蜡样芽孢杆菌的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)、最低杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)和时间-杀伤曲线(time-kill curve);通过碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)泄漏、碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色分析、核酸和蛋白质泄漏实验以及流式细胞术分析BCE3对细菌细胞壁和细胞膜的影响;通过DNA凝胶阻滞实验、与EB竞争性结合的荧光光谱实验以及分子对接模拟实验探究BCE3对细菌DNA的影响;通过菌落计数法探究BCE3在米饭中的抑菌作用。【结果】利用生物信息学筛选出潜在抗菌肽BCE3,其对蜡样芽孢杆菌的MIC和MBC分别为62.5μg/mL和125.0μg/mL,其可在3 h内使细菌数减少86.0%(62.5μg/mL),与乳酸链球菌素(nisin)相比具有更好的杀菌效果。BCE3破坏细菌细胞壁和细胞膜,导致细胞胞内核酸和蛋白质泄漏,并与细菌DNA结合并导致细菌死亡。另外,BCE3(125.0μg/mL)对米饭中蜡样芽孢杆菌的生长具有明显的抑制作用。【结论】BCE3能够改变蜡样芽孢杆菌细胞膜的通透性,同时与细菌的DNA结合导致细菌死亡。这些发现为BCE3应用于蜡样芽孢杆菌的防治提供了理论基础。

关键词：凡纳滨对虾加工废弃物抗菌肽BCE3 蜡样芽孢杆菌抑菌机制

副干酪乳杆菌发酵液中抗菌肽的筛选及对副溶血性弧菌的抑菌作用

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中国食品学报 2024年第1期24卷 92-101页

作者：邢宇凡白淑锦金日天翁武银丁能水张志刚杨燊集美大学海洋食品与生物工程学院福建厦门361021 厦门银祥集团有限公司、肉食品安全生产技术国家重点实验室福建厦门361100 海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心、大连工业大学辽宁大连116034 福建傲农生物科技集团股份有限公司、福建省生猪营养与饲料重点实验室福建漳州363000

副溶血性弧菌是一种常见的食源性致病菌,严重威胁食品安全和人体健康。本研究利用超高效液相色谱-质谱联用技术鉴定副干酪乳杆菌发酵液中的多肽序列,并通过生物信息学筛选出可能的抗菌序列(RQQAENLAKFAKKG),命名为Yt9z。研究结果表明其... 详细信息

副溶血性弧菌是一种常见的食源性致病菌,严重威胁食品安全和人体健康。本研究利用超高效液相色谱-质谱联用技术鉴定副干酪乳杆菌发酵液中的多肽序列,并通过生物信息学筛选出可能的抗菌序列(RQQAENLAKFAKKG),命名为Yt9z。研究结果表明其对副溶血性弧菌的最低杀菌质量浓度(MBC)为125μg/mL,可在3 h内将细菌完全杀死。通过膜通透、透射电镜、DNA凝胶阻滞分析、圆二色谱等试验探究其抑菌机制,结果在不同溶液环境下,抗菌肽Yt9z能改变自身的二级结构,进而增加细菌细胞膜通透性,并穿透细胞膜与DNA结合使其死亡。这些发现为抗菌肽Yt9z应用于副溶血性弧菌污染提供了理论参考。

关键词：副溶血性弧菌副干酪乳杆菌抗菌肽细胞膜 DNA结合

一种源自人α-2-巨球蛋白的抗菌肽A2M3及其对金黄色葡萄球菌的抑菌机制

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微生物学报 2024年第3期64卷 938-952页

作者：范学楠林蓉金日天梁铎邱绪健杨燊集美大学海洋食品与生物工程学院福建厦门361021 集美大学福建省食品微生物与酶工程重点实验室福建厦门361021 大连工业大学海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心辽宁大连116034

【目的】在人的鼻腔中鉴定出一种源自α-2-巨球蛋白的抗菌肽(命名为A2M3),并探究其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑菌作用和机制。【方法】结合生物信息学技术对人类鼻液的质谱结果进行分析,并筛选潜在抗菌肽;通过微量稀... 详细信息

【目的】在人的鼻腔中鉴定出一种源自α-2-巨球蛋白的抗菌肽(命名为A2M3),并探究其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的抑菌作用和机制。【方法】结合生物信息学技术对人类鼻液的质谱结果进行分析,并筛选潜在抗菌肽;通过微量稀释法和平板涂布法分别分析A2M3对金黄色葡萄球菌最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)和时间杀伤曲线(time-kill curve);采用透射电镜、碘化丙锭(propidium iodide,PI)摄取实验、流式细胞术和核酸蛋白质泄露实验分析A2M3对金黄色葡萄球菌膜完整性、膜通透性的影响;通过凝胶阻滞实验和荧光光谱实验探究A2M3对金黄色葡萄球菌基因组DNA的影响。【结果】利用生物信息学技术筛选出源自α-2-巨球蛋白的潜在抗菌肽A2M3,其对金黄色葡萄球菌的MIC为125.0μg/mL,且能在3h内完全杀灭细菌。A2M3通过增加细胞膜的通透性,促使核酸和蛋白质泄漏,继而穿过细胞膜嵌入DNA的碱基对,影响细菌的基因功能,从而导致菌体死亡。【结论】A2M3对金黄色葡萄球菌的抑菌机制涉及多靶点协同作用,能够改变细菌细胞膜的通透性,影响细菌的基因功能。这一发现揭示了从人体体液中筛选和分离抗菌功能肽的潜在应用价值。

关键词：鼻液 α-2-巨球蛋白金黄色葡萄球菌抗菌肽抑菌机制

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鲤鱼脱腥技术及其鱼丸制备的研究

鲤鱼脱腥技术及其鱼丸制备的研究

作者：金日天沈阳农业大学

学位级别：硕士

鲤鱼是亚洲鲤鱼中主要品种之一,也是中国传统的淡水鱼养殖品种之一,具有很高的产量。鲤鱼是常见的优质蛋白质的来源之一,此外丰富的不饱和脂肪酸也能够提高人体的免疫力。目前,鲤鱼主要以鲜售为主,深加工程度低。鱼丸是我国最传统的、... 详细信息

鲤鱼是亚洲鲤鱼中主要品种之一,也是中国传统的淡水鱼养殖品种之一,具有很高的产量。鲤鱼是常见的优质蛋白质的来源之一,此外丰富的不饱和脂肪酸也能够提高人体的免疫力。目前,鲤鱼主要以鲜售为主,深加工程度低。鱼丸是我国最传统的、最具代表性的鱼糜制品之一,将鲤鱼制成鱼丸成为充分开发利用我国丰富的鲤鱼资源,避免鲤鱼资源的浪费,促进淡水鱼产业发展的一条有效途径。但是,由于鲤鱼体内的土腥味变成了主要的问题,严重制约着工业化的发展。本课题以鲤鱼为原材料,对鲤鱼体内土腥味物质及其脱除方法进行了分析,并对脱腥后的鲤鱼鱼丸制备的工艺进行了研究。旨在研究出一种有利于生产高品质淡水鱼鱼丸的工艺,特别在将淡水鱼制备成高品质鱼糜制品方面提供了理论依据和技术支持。本论文研究主要包括以下4个部分:1.使用HS-SPME-GC-MS技术结合OAV值鉴定鲤鱼肉中标志性土腥味物质。在鲤鱼肉中共鉴定出32种挥发性物质,其中辛醛、(E)-2-辛烯醛、壬醛、1-辛烯-3-醇、己醇、辛醇和萘被认为是鲤鱼肉中的土腥味的标志性物质,定量结果分别为234.00±37.14 ng/g、122.14±11.23 ng/g、42.75±9.16 ng/g、38.56±10.04ng/g、370.20±51.06 ng/g、18.10±8.53 ng/g和102.19±8.55 ng/g。2.确定了NaCl、β-CD、苹果酸和山楂提取物四种脱腥剂的最佳处理条件。均采用浸泡脱腥方式,料液比为1:3。NaCl的最佳脱腥条件为:NaCl用量1.5%、脱腥时间20 min、脱腥温度40℃;β-CD的最佳脱腥条件为:β-CD用量0.4%、脱腥时间30 min、脱腥温度30℃;苹果酸的最佳脱腥条件为:苹果酸用量3.0%、脱腥温度30℃、脱腥时间20 min;山楂提取物的最佳脱腥条件为:山楂提取物用量4.0%、脱腥温度20℃、脱腥时间20 min。采用电子鼻和GC-MS相结合的方法来评价各种脱腥剂的脱腥效果。结果表明苹果酸和山楂提取物能够有效脱除标志性的腥味物质,脱除率分别为84.51±7.23%和77.18±5.28%。NaCl和β-CD的脱除率分别为56.78±8.37%和53.64±8.07%3.研究脱腥处理对鱼糜品质的影响。使用低场核磁共振测定鱼糜中水分的变化,色差计测定脱腥处理对鱼糜颜色的影响,使用质构仪测定脱腥处理对鱼糜凝胶强度的影响。经过四种脱腥处理后鱼糜凝胶持水性均下降,其中苹果酸处理后的鱼糜持水性下降最显著。对于鱼糜凝胶强度,山楂提取物和NaCl处理后的样品显著提高,分别为1465.67±1.52 g·mm和1444.37±0.28 g·mm,苹果酸处理后的样品凝胶强度最低,为156.50±0.26 g·mm。对于凝胶的白度值,NaCl和山楂提取物处理后的鱼糜白度下降,分别为65.74±0.14和65.0±0.40。结果表明山楂提取物在有效脱除腥味物质的同时,还能够显著增强鱼糜的凝胶强度,对鱼糜中水分和白度的影响较小。4.选择山楂提取物脱腥处理后的鱼肉作为原料,研究鱼丸的最佳配料添加量。以保水性和质构特性为指标的试验结果表明,当大豆分离蛋白添加量为6%、可得然胶添加量为0.4%、玉米淀粉添加量为15%时,鱼丸的保水性和品质提高显著。6%的大豆分离蛋白提高鱼丸保水性和弹性分别为45.05±3.19%和29.99±4.43%,0.4%的可得然胶提高鱼丸保水性和弹性分别为63.96±9.23%和29.25±2.65%,15%的玉米淀粉提高鱼丸的保水性和弹性分别为69.37±8.07%和40.32±8.93%。然后使用响应面法优化添加物的添加量,以鱼丸弹性、白度、感官评定加权计算得分作为响应值。最后优化的添加量为:玉米淀粉添加量15.2%,可得然胶添加量0.4%,大豆分离蛋白添加量6.5%,加权得分为19.3。

关键词：鲤鱼脱腥山楂提取物凝胶强度鱼丸

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分化抑制蛋白类家族与肿瘤关系研究的进展

中国肿瘤临床 2004年第3期31卷 176-178页

作者：金日天刘玉琴高进中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京市100005

肿瘤的基本生物学特点可概括为细胞无限增殖、分化程度的低下及侵袭转移能力等.这些生物学特性与生物体发育过程中胚胎期幼稚细胞的生物学特征有诸多相似,但对其分子生物学水平的机制了解甚少[1].

关键词：分化抑制蛋白细胞周期研究进展

酒糟大黄鱼抗菌肽FAH34的抑菌活性及热稳定性

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中国食品学报 2023年第12期23卷 247-254页

作者：李若冰刘嘉鑫金日天翁武银张志刚杨燊集美大学海洋食品与生物工程学院福建厦门361021 厦门银祥集团有限公司肉食品安全生产技术国家重点实验室福建厦门361100 大连工业大学海洋食品精深加工关键技术省部共建协同创新中心辽宁大连116034

副溶血性弧菌为常见的食源性致病菌,是影响海洋食品安全性的主要危害因子。本研究从酒糟大黄鱼中鉴定一种抗菌肽FAH34(氨基酸序列为KTISFILK),研究其对副溶血性弧菌的抑菌活性及热稳定性。结果表明,肽FAH34对副溶血性弧菌的最低抑菌浓度... 详细信息

副溶血性弧菌为常见的食源性致病菌,是影响海洋食品安全性的主要危害因子。本研究从酒糟大黄鱼中鉴定一种抗菌肽FAH34(氨基酸序列为KTISFILK),研究其对副溶血性弧菌的抑菌活性及热稳定性。结果表明,肽FAH34对副溶血性弧菌的最低抑菌浓度(MIC)值为7.80μg/mL,在FAH34作用3 h后,细菌数从5.06 lg(CFU/mL)降至0 lg(CFU/mL),显示出很强的抑菌活性。透射电镜观察发现,肽FAH34是通过破坏细菌细胞膜结构,使胞内物质外渗,从而达到杀菌的效果。经80℃、30 min及121℃、15 min处理后,肽FAH34仍能保持原有的抑菌活性,对人体LO2细胞活力(>90%)无显著影响。FAH34应用在鱼肉及腌制液中,可将其中副溶血性弧菌数量控制在0~0.40 lg(CFU/mL)范围。结论:FAH34是一种对溶血性弧菌具有热稳定性的新型抗菌肽,可作为生物防腐剂应用于水产腌制食品中。

关键词：大黄鱼热稳定性抗菌肽副溶血性弧菌抑菌机制

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液压起重臂主臂变幅机构的优化设计

林业机械 1986年第3期 25-27页

作者：金日天林业部哈尔滨林机所

液压起重臂主臂变幅机构设计,是总体设计中的难题。用图解法描述,有时需要绘出几十张方案图,才能找到一个比较合理的参数。至于能否找到最佳参数、此

关键词：油缸推力液压缸外力变幅机构独立变量主臂增广目标函数优化设计

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国产高把油锯的整机振动传递路线

林业科学 2011年第1期47卷 118-123页

作者：胡万明金日天齐英杰徐杨东北林业大学哈尔滨150040 国家林业局哈尔滨林业机械研究所哈尔滨150086

研究高把油锯振动传递路线,并与和其类似的前苏联产"Дружба"型和"Урал-2"型油锯(锯把)进行比较,从而得出油锯振动是随机振动,其影响因素很多,要从振源上解决振动问题,必须考虑采用其他类型的发动机;油锯振动能量的分布复杂,... 详细信息

研究高把油锯振动传递路线,并与和其类似的前苏联产"Дружба"型和"Урал-2"型油锯(锯把)进行比较,从而得出油锯振动是随机振动,其影响因素很多,要从振源上解决振动问题,必须考虑采用其他类型的发动机;油锯振动能量的分布复杂,通过振动传递路线测试和分析可以找出相对合理的锯把安装位置;锯把本身的振动值特性是影响手感振动的重要因素之一,国产油锯的锯把具有机械放大特性,而国外样机具有机械衰减特性。

关键词：油锯振动的危害性振动传递路线振动能量的分布锯把的传递特性