检索结果-南通市图书馆

作者：郝雨蒙山西省中医药研究院

学位级别：硕士

目的:观察蛇床子催眠活性组分(HCC)、异虎耳草素(IS)对体外培养的原代海马神经元(PHN)细胞凋亡、释放神经递质含量的影响,以及对神经递质相关受体基因、生物钟基因表达的影响,探讨HCC、IS催眠作用机制。方法:***细胞培养与鉴定:体外培... 详细信息

目的:观察蛇床子催眠活性组分(HCC)、异虎耳草素(IS)对体外培养的原代海马神经元(PHN)细胞凋亡、释放神经递质含量的影响,以及对神经递质相关受体基因、生物钟基因表达的影响,探讨HCC、IS催眠作用机制。方法:***细胞培养与鉴定:体外培养SD乳鼠PHN细胞,倒置显微镜观察细胞生长状态,CCK-8法检测细胞活性,作出细胞生长曲线,在细胞生长状态最佳时,神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组化法鉴定纯度。***、IS最佳给药浓度筛选:按1:10、1:2剂量距设置,采用CCK-8法二级检测24 h、48 h PHN细胞存活率。3.细胞分组与给药:在上述筛选浓度中取存活率显著高于空白对照组的浓度用于实验,将PHN细胞随机分为为空白对照、地西泮阳性对照(25μg·mL)、HCC低(25μg·mL)、中(50μg·mL)、高(100μg·mL)、IS低(5μg·mL)、中(10μg·mL)、高(20μg·mL)剂量共8组,给药后置37℃、5%CO培养箱中24 h、48 h。4.指标检测:分别于给药24 h、48 h后采用流式细胞术(FCM)分析PHN细胞早期凋亡率;酶联免疫吸附法(ELISA)检测PHN细胞上清液γ-氨基丁酸(GABA)、5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NA)等神经递质含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测给药24 h后PHN细胞GABA、5-HT相关受体基因及生物钟基因Clock、Bmal1、Cry1、Per1、Per2 mRNA表达量。结果:***细胞培养与鉴定:体外原代培养第7天海马神经元细胞生长状态良好、活性较高,鉴定纯度>90%。***、IS对海马神经元细胞作用24 h、48 h细胞存活率最佳给药浓度:24h、48h后细胞存活率25μg·mL、50μg·mL、100μg·mL11 HCC显著高于空白对照组,200μg·mL11 HCC组显著低于空白对照组;24 h 10μg·mL、20μg·mL11 IS显著高于空白对照组,40μg·mL11 IS显著低于空白对照组,48h 5μg·mL、10μg·mL、20μg·mL11 IS显著高于空白对照组,40μg·mL11 IS显著低于空白对照组。因此HCC在25μg·mL00μg·mL、IS在5μg·mL0μg·mL细胞存活率最佳,确定HCC低、中、高浓度为25μg·mL、50μg·mL、100μg·mL、IS低、中、高浓度为5μg·mL、10μg·mL、20μg·mL作为本实验浓度梯度。***、IS对PHN细胞早期凋亡率的影响:HCC、IS作用PHN细胞24h后,地西泮阳性对照、HCC中、低、IS高、中剂量组显著低于空白对照组;HCC、IS作用PHN细胞48 h后,地西泮阳性对照、HCC中、IS高剂量组细胞的凋亡率显著低于空白对照组,HCC高剂量组细胞凋亡率显著高于空白对照组。***、IS对PHN细胞释放神经递质的影响:HCC、IS作用PHN细胞24 h后,GABA含量地西泮阳性对照、HCC高、中、IS高剂量组显著高于空白对照组,5-HT含量HCC高、中剂量组显著高于空白对照组,NA含量各组变化不明显;HCC、IS作用PHN细胞48 h后,GABA含量地西泮阳性对照、HCC高、中、IS高、中剂量组显著高于空白对照组;5-HT含量HCC各剂量组均显著高于空白对照组;NA含量地西泮阳性对照、HCC各剂量组、IS高剂量组均显著高于空白对照组。***、IS对PHN细胞GABA、5-HT相关受体基因表达的影响:HCC、IS作用PHN细胞24 h后,Gabra1、Gabbr1、5-HT1A(A))、5-HT1A(B))、5-HT、5-HTD mRNA表达量地西泮阳性对照、HCC高、中剂量组均显著高于空白对照组,5-HT1A(C))mRNA表达量地西泮阳性对照、HCC各剂量组均显著高于空白对照组,Gabra5 mRNA表达地西泮阳性对照、HCC高、IS高剂量组均显著高于空白对照组,Gabrb2 mRNA表达HCC高剂量组显著低于空白对照组、HCC低剂量组显著高于空白对照组;Gabra1、5-HT1A(A))、5-HT1A(B))、5-HT、5-HTD mRNA表达量IS高、中剂量组均高于空白对照组,Gabbr1、5-HT1A(C))mRNA表达量地西泮阳性对照组、IS各剂量组均显著高于空白对照组。***、IS对PHN细胞生物钟基因表达的影响:Bmal1 mRNA表达量地西泮阳性对照、HCC高剂量组显著低于空白对照组,Clock mRNA表达量IS高剂量组显著低于空白对照组,Cry1、Per1、Per2 mRNA表达量地西泮阳性对照、HCC中、高剂量组、IS中、高剂量组均显著高于空白对照组。结论:HCC、IS降低体外培养的PH

关键词：蛇床子异虎耳草素原代海马神经元细胞神经递质生物钟基因神经递质受体基因

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奶牛乳腺上皮细胞培养及干细胞鉴定

奶牛乳腺上皮细胞培养及干细胞鉴定

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作者：郝雨蒙东北农业大学

学位级别：硕士

奶牛乳腺上皮细胞(dairy cow mammary epithelial cells,DCMECs)作为常用的体外实验工具,为奶牛乳腺发育、泌乳调控及乳腺生物反应器等方面的研究提供细胞模型。目前,DCMECs永生化细胞系的建立尚未成熟,需要在体外诱导并模拟生理条件,... 详细信息

奶牛乳腺上皮细胞(dairy cow mammary epithelial cells,DCMECs)作为常用的体外实验工具,为奶牛乳腺发育、泌乳调控及乳腺生物反应器等方面的研究提供细胞模型。目前,DCMECs永生化细胞系的建立尚未成熟,需要在体外诱导并模拟生理条件,通过原代培养来获得具有泌乳功能的分泌性乳腺上皮细胞或构建三维立体的腺泡模型。乳腺是出生后发育的器官,青春期首次快速发育及妊娠期再次发育都与乳腺干细胞(mammary stem cells,MaSCs)活跃的自我更新及分化密切相关。研究表明乳腺中存在一定比例的干细胞,但区分鉴定这些多潜能干细胞的特异性分子标志仍不十分明确。一些激素及生长因子类物质在体内能够促进乳腺发育、调控泌乳,在体外能够促进乳腺上皮细胞增殖,影响细胞黏附、迁移、伸展和分化,并且涉及到对MaSCs的调控。激素和生长因子如何影响MaSCs扩增、分化并维持其多能性,以及调控乳腺上皮细胞生长、分化参与体外立体腺泡构建的机制值得深入研究。本研究以原代培养的DCMECs为实验模型,探讨短期内获得大量DCMECs的方法,筛选乳腺上皮干细胞新型分子标志,鉴定奶牛乳腺上皮干细胞,观察黄苷及IGF-Ⅰ对乳腺上皮细胞及乳腺上皮干细胞的影响。实验中采用胶原酶消化法体外培养DCMECs,通过绘制细胞生长曲线、核型分析、Western Blotting检测酪蛋白、荧光定量PCR检测泌乳相关基因等实验技术与方法评估原代(或传代)细胞的生长活性与泌乳潜能;利用激光共聚焦显微技术进行免疫荧光观察与分析,根据乳腺上皮干细胞分子标志表达、Brd U标记滞留的特点以及细胞分裂方式鉴定原代乳腺上皮细胞体外培养体系中的乳腺上皮干细胞。结果表明:(1)主要成分为胶原酶Ⅳ、透明质酸酶、DNA酶Ⅰ的消化液混合物在3h内高效率消化组织块,得到的原代及传代细胞是具有60条染色体,呈现典型上皮细胞形态,CK18表达阳性,生长活力旺盛,能够合成分泌β-casein的正常DCMECs,可作为后期实验材料。(2)在体外培养过程中,通过实时荧光定量PCR方法检测分析P0、P3、P6、P9细胞中催乳素、生长激素和胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)及其受体基因的表达变化,经过比较分析发现原代与传代后细胞在激素、生长因子及其受体mRNA水平上差异极显著降低(P0.05),PRL/P RLR、GH/GHR、I GF-I/I GF-IR m RNA的相对表达量在P0-P3细胞中有升高趋势而在P6-P9细胞中有下降趋势,提示黄苷及IGF-Ⅰ对上皮细胞及干细胞的增殖有一定的促进作用,并对早期乳腺上皮细胞泌乳基因表达呈正调控。

关键词：奶牛乳腺上皮细胞干/祖细胞标记滞留泌乳

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基于最大输出功率的本安LC-Buck变换器优化设计

基于最大输出功率的本安LC-Buck变换器优化设计

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作者：郝雨蒙西安科技大学

学位级别：硕士

随着应用于爆炸性开采环境的监控、通信电气设备日趋增多,对矿用本质安全开关电源的输出功率提出了更高的要求,为此,本文提出了一种输出附加LC滤波的大功率本安Buck变换器(以下简称LC-Buck),仅使用较小的电感和电容值便能实现本质安全,... 详细信息

随着应用于爆炸性开采环境的监控、通信电气设备日趋增多,对矿用本质安全开关电源的输出功率提出了更高的要求,为此,本文提出了一种输出附加LC滤波的大功率本安Buck变换器(以下简称LC-Buck),仅使用较小的电感和电容值便能实现本质安全,并提出一种基于最大输出功率的元件参数优化设计方法,对于研制大功率本安电源具有重要指导意义。本文通过深入研究LC-Buck变换器电路结构、工作原理、能量传输过程,得到其各工作模式下输出纹波电压及峰值电感电流表达式;为使得变换器电流应力低、输出纹波电压小且电感电流不出现倒灌,确定出最佳工作模式,并分析该模式下输出纹波电压及峰值电感电流与输入电压、负载电阻等参数间的变化关系;根据变换器不同开关状态及分断位置,探究了其最危险分断放电工况,并针对最危险工况,研究了变换器的分断放电特性;分析了变换器分断放电能量,并结合能量等效原理及简单电感电路临界点燃曲线,得出LC-Buck变换器的非爆炸性内部本安判据,基于此判据推导得出满足本安性能要求的最大电感;以电气性能指标最佳为依据,推导出最小电感和两级滤波储能元件最佳比例系数;分析指出,同时满足电气性能指标及本安要求的电感取值范围随负载取值的减小而变小,因此,定义电感最大值与最小值相等时所对应的负载电阻为其最小负载电阻,据此得出了 LC-Buck变换器最大输出功率表达式;分析了现有变换器元件参数设计方法存在的问题,提出了基于最大输出功率和最佳工作模式的本安LC-Buck变换器优化设计方法,并给出不同条件下的参数设计流程。根据所得出的优化设计方法,研制了本安LC-Buck变换器试验样机,测试了其电气性能,并在IEC安全火花试验平台上进行爆炸性试验,结果验证了理论分析的正确性及优化设计方法的可行性。

关键词： LC-Buck变换器 LC滤波最大功率本质安全

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基于最大功率的本安Buck变换器设计方法

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电工技术学报 2021年第3期36卷 542-551页

作者：刘树林郝雨蒙李艳游梦然西安科技大学电气与控制工程学院西安710054

针对现有本质安全Buck变换器设计方法复杂繁琐的问题,该文对变换器本安特性及其与电感和负载的关系进行分析,指出同时满足电气性能指标及本安性能要求的电感取值范围随着负载电阻的降低而缩小,并定义电感的最大值与最小值相等时对应的... 详细信息

针对现有本质安全Buck变换器设计方法复杂繁琐的问题,该文对变换器本安特性及其与电感和负载的关系进行分析,指出同时满足电气性能指标及本安性能要求的电感取值范围随着负载电阻的降低而缩小,并定义电感的最大值与最小值相等时对应的负载电阻为最小负载电阻,推导出最小负载电阻解析表达式,并据此得出变换器的最大本安输出功率。分析得出最大功率与输入、输出电压及开关频率的四维关系图,据此提出了针对不同的电气性能指标要求及设计目标的三种便捷设计方法,同时也实现了在不同给定条件下得到最大输出功率。利用本安性能评价系统与火花实验平台对设计实例进行了仿真和实验验证,证明了理论分析和所提出设计方法的可行性。

关键词：本质安全 Buck变换器最大输出功率设计方法

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奶牛乳腺上皮细胞培养体系中疑似干/祖细胞的鉴定

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中国畜牧兽医 2016年第8期43卷 2095-2103页

作者：郝雨蒙赵锋张娜陈丹李庆章东北农业大学乳品科学教育部重点实验室哈尔滨150030

为了揭示奶牛乳腺干细胞在体外泌乳调控中的潜在作用,本研究根据成体干细胞具有BrdU标记滞留的特点检测了奶牛乳腺上皮细胞(DCMECs)中疑似乳腺干/祖细胞,同时分析了两种新发现的乳腺干细胞分子标志(FNDC3B和PROCR)的表达定位,验证了它... 详细信息

为了揭示奶牛乳腺干细胞在体外泌乳调控中的潜在作用,本研究根据成体干细胞具有BrdU标记滞留的特点检测了奶牛乳腺上皮细胞(DCMECs)中疑似乳腺干/祖细胞,同时分析了两种新发现的乳腺干细胞分子标志(FNDC3B和PROCR)的表达定位,验证了它们指示DCMECs的可行性。通过实时荧光定量PCR方法检测分析DCMECs体外培养过程中催乳素、生长激素、胰岛素样生长因子Ⅰ及其受体的基因表达变化。结果显示,连续培养25d后BrdU标记滞留细胞比例接近0.4%,极少数细胞呈FNDC3B或PROCR阳性,可以观察到不对称分裂细胞,原代和传代后DCMECs在激素、胰岛素样生长因子及其受体mRNA水平上差异极显著(P<0.01)。总之,在非诱导泌乳分化培养条件下,脱离泌乳生理环境的DCMECs自身具有的泌乳调控基因表达迅速受到抑制,但在一定培养时间内,DCMECs群体中能够保留一定比例疑似乳腺干/祖细胞,提示这些多能奶牛乳腺干/祖细胞在体外泌乳调控和乳腺腺泡重塑过程中可能发挥重要作用。

关键词：奶牛乳腺干/祖细胞标记滞留泌乳

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海马神经元细胞培养及神经源性中药保护作用的研究进展

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世界最新医学信息文摘 2019年第20期19卷 67-69页

作者：郝雨蒙冯玛莉山西省中医药研究院

海马神经元细胞来源于哺乳动物大脑皮层的边缘部分-海马区,参与个体学习、记忆并与多种神经、精神系统疾病的发生密切相关,体外培养的海马神经元与在体海马神经元非常相似,具有多向形态发育;神经源性中药及其生物活性成分在体内和体外... 详细信息

海马神经元细胞来源于哺乳动物大脑皮层的边缘部分-海马区,参与个体学习、记忆并与多种神经、精神系统疾病的发生密切相关,体外培养的海马神经元与在体海马神经元非常相似,具有多向形态发育;神经源性中药及其生物活性成分在体内和体外作用于多种信号通路而对神经系统产生保护作用日益引起关注。本文拟归纳、总结国内外新生大鼠海马神经元细胞的培养方法及对海马神经元具有显著的神经源性保护作用的中药,拟为研究神经、精神系统疾病提供理论支持。

关键词：海马神经元细胞细胞培养神经源性中药复方中药制剂

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异虎耳草素对原代海马神经元细胞抑制性神经递质及其受体基因表达的影响

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中国实验方剂学杂志 2019年第14期25卷 93-98页

作者：郝雨蒙王若瑜仲启明仝立国宋美卿杨钤冯玛莉山西省中医药研究院

目的:观察异虎耳草素对原代海马神经元细胞γ-氨基丁酸(GABA),5-羟色胺(5-HT)含量及受体基因表达的影响,探讨其催眠作用机制。方法:体外培养SD乳鼠原代海马神经元细胞,在细胞生长状态最佳时,经神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组化鉴定纯... 详细信息

目的:观察异虎耳草素对原代海马神经元细胞γ-氨基丁酸(GABA),5-羟色胺(5-HT)含量及受体基因表达的影响,探讨其催眠作用机制。方法:体外培养SD乳鼠原代海马神经元细胞,在细胞生长状态最佳时,经神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组化鉴定纯度并给药。分为空白组,地西泮组(25 mg·L^-1),异虎耳草素低、中、高剂量组(5,10,20 mg·L^-1),共5组,给药24 h后流式细胞术检测海马神经元细胞早期凋亡率,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测细胞上清液GABA,5-HT含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞内γ-氨基丁酸A型受体(GABAA)基因GABRA1,GABRA5,GABRB2,γ-氨基丁酸B型受体(GABAB)基因GABBR1,5-羟色胺1A型受体(5-HT1A)基因5-HT1A(A),5-HT1A(B),5-HT1A(C)表达的变化。结果:第7天海马神经元细胞生长状态良好,鉴定纯度> 90%;与空白组比较,海马神经元细胞早期凋亡率异虎耳草素中、高剂量组显著降低(P <0. 01),GABA含量异虎耳草素高剂量组显著升高(P <0. 01),GABRA1,GABRA5,5-HT1A(A),5-HT1A(C)mRNA表达异虎耳草素中、高剂量组显著升高(P <0. 05,P <0. 01),GABBR1,5-HT1A(B)mRNA表达异虎耳草素各组均显著升高(P <0. 05,P <0. 01)。结论:异虎耳草素催眠作用机制可能与抑制海马神经元细胞凋亡,升高抑制性神经递质GABA含量,上调GABA与5-HT相关受体基因表达有关。

关键词：异虎耳草素海马神经元细胞抑制性神经递质细胞凋亡体外培养

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还原“活的”历史人物及“非虚构”圆整再现——评陈歆耕的历史题材非虚构写作

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南方文坛 2024年第4期 88-91页

作者：郝雨上海大学新闻传播学院

一、历史不可虚构，历史如何“非虚构”？在文学体裁的大家族中，虚构、想象、“神与物游”和“高于生活”的创作，当然是文学的本体状态。但也一直同时存在多种不属于虚构及纯粹想象的品类，大概可以列出的报告文学、纪实文学、传记文...

一、历史不可虚构，历史如何“非虚构”？在文学体裁的大家族中，虚构、想象、“神与物游”和“高于生活”的创作，当然是文学的本体状态。但也一直同时存在多种不属于虚构及纯粹想象的品类，大概可以列出的报告文学、纪实文学、传记文学、历史散文、情景散文等，都是经典规范的文学品种，基本上对于非虚构类创作无所不包。

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miR-142-3p对小鼠泌乳量、乳成分及乳腺组织结构的影响

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中国乳品工业 2015年第6期43卷 13-15页

作者：栾生谢雪娇郝雨蒙王媛王春梅李庆章东北农业大学乳品科学教育部重点实验室哈尔滨150030

MicroRNA（miRNA）是一类长度约18～25个核苷酸序列的非编码小分子RNA，miR-142-3p能通过调控靶基因表达，来调控乳腺发育和泌乳。通过尾静脉注射实验技术，改变miR-142-3p在小鼠乳腺组织中的表达量，观察记录48h内泌乳量的变化，使用... 详细信息

MicroRNA（miRNA）是一类长度约18～25个核苷酸序列的非编码小分子RNA，miR-142-3p能通过调控靶基因表达，来调控乳腺发育和泌乳。通过尾静脉注射实验技术，改变miR-142-3p在小鼠乳腺组织中的表达量，观察记录48h内泌乳量的变化，使用乳成分分析仪、光镜技术检测和观察miR-142-3p对小鼠乳汁成分和乳腺组织结构的影响。结果表明，miR-142-3p过表达后，泌乳量降低、乳品质下降、泌乳期乳腺组织中腺泡数量减少，腺泡体积变小。miR-142-3p沉寂后，泌乳量增加、乳品质提高、泌乳期乳腺组织中腺泡数量增加，腺泡体积增大。研究表明，miR-142-3p对乳腺发育、泌乳以及乳品质具有负向调控作用。

关键词： miR-142-3p 泌乳量乳成分乳腺结构

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蛇床子催眠活性组分对原代海马神经元细胞神经递质与钟基因表达的影响

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中药材 2019年第5期42卷 1133-1138页

作者：郝雨蒙王若瑜仲启明仝立国宋美卿杨钤冯玛莉山西省中医药研究院山西太原030012

目的:观察蛇床子催眠活性组分对体外培养原代海马神经元细胞神经递质及钟基因表达的影响,探讨其催眠作用机制。方法:体外培养SD乳鼠原代海马神经元细胞,CCK-8法检测细胞活性,绘制细胞生长曲线,在细胞生长状态最佳时,经神经元特异性烯醇... 详细信息

目的:观察蛇床子催眠活性组分对体外培养原代海马神经元细胞神经递质及钟基因表达的影响,探讨其催眠作用机制。方法:体外培养SD乳鼠原代海马神经元细胞,CCK-8法检测细胞活性,绘制细胞生长曲线,在细胞生长状态最佳时,经神经元特异性烯醇化酶(NSE)免疫组化鉴定纯度并给药。将海马神经元细胞随机分为为空白对照组、地西泮(25μg/mL)阳性对照组及蛇床子催眠活性组分低(25μg/mL)、中(50μg/mL)、高(100μg/mL)浓度组共5组,给药24 h后流式细胞术分析海马神经元细胞早期凋亡,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液γ-氨基丁酸(GABA)、5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NA)等神经递质的含量,实时荧光定量PCR检测细胞内GABA、5-HT相关受体基因及钟基因Clock、Bmal1、Cry1、Per1、Per2 mRNA的表达。结果:体外原代培养第7天海马神经元细胞生长状态良好,鉴定纯度大于90%。与空白对照组比较,蛇床子催眠活性组分低、中浓度组海马神经元细胞凋亡率显著降低,中、高浓度组神经递质GABA、5-HT分泌及Gabra1、Gabra5、Gabbr1、5-HT1A(B)、5-HT1A(C)、5-HT1B、5-HT1D、Cry1、Per1、Per2 mRNA表达显著升高,蛇床子催眠活性组分高浓度组5-HT1A(A) mRNA表达显著升高,Bmal1 mRNA表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:蛇床子催眠活性组分能降低体外培养的海马神经元细胞凋亡率,增强抑制性神经递质分泌与表达,并能调节钟基因。

关键词：蛇床子海马神经元细胞体外培养细胞凋亡神经递质钟基因

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