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猪肠道抗PEDV乳酸菌株筛选及其体外抗病毒作用

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猪肠道抗PEDV乳酸菌株筛选及其体外抗病毒作用

作者：郑常龙河北农业大学

学位级别：硕士

乳酸菌在医药、农业及食品等行业发挥着重要的作用,其安全性已经受到认可。猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)对仔猪的致死率极高,对养猪业有极大的经济损失,PEDV的防治成为养猪行业的一大难题。为从仔猪粪便中... 详细信息

乳酸菌在医药、农业及食品等行业发挥着重要的作用,其安全性已经受到认可。猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)对仔猪的致死率极高,对养猪业有极大的经济损失,PEDV的防治成为养猪行业的一大难题。为从仔猪粪便中分离得到抗猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的乳酸菌,本研究先用MRS培养基对乳酸菌进行了初步的分离与纯化,再将得到的乳酸菌通过MTT比色法、TCID法、间接免疫荧光法在体外细胞模型上对乳酸菌的抗病毒效果进行评价,从中得到3株抑制病毒的益生菌株。本试验为乳酸菌抗病毒作用的进一步研究奠定了基础。试验利用MRS培养基先从猪粪便中分离出36株具有益生菌特性的菌株。然后通过MTT比色法初步筛选出具有抗病毒作用的10株乳酸菌。对分离的10株乳酸菌进行体外的耐酸耐胆盐试验,从中选出6株作为备用菌种。对6株菌进行生化试验以及16S rDNA鉴定得出4株为植物乳杆菌,1株粪场球菌,1株戊糖片球菌,选其中三株菌进行进一步抗病毒试验。将分离鉴定的菌株进行体外的抗病毒试验。首先利用MTT法计算出3株菌的最大无毒剂量,以此为起点将其进行稀释成不同浓度进行试验。试验在体外Vero细胞上进行。乳酸菌或其代谢产物通过三种方式(先加入乳酸菌或代谢产物后加入病毒;乳酸菌或者代谢产物和病毒同时加入;先加入病毒再加入乳酸菌或代谢产物)来评估PEDV对细胞的抑制作用。结果表明三种方式中有着不同的抑制效果,活菌试验中,乳酸菌预先处理组抑制率较好,代谢产物试验中,同时接入代谢产物和病毒组对PEDV抑制效果要比其他两组抑制效果好。将PEDV与乳酸菌共培养,然后检测病毒的TCID,结果显示通过乳酸菌处理后的TCID/100μL分别为10、10、10,与对照组未经过处理组病毒TCID/100μL(10)作对比,均有不同程度的降低,说明了乳酸菌对病毒的毒力具有显著的抑制作用。利用间接免疫荧光法检测乳酸菌处理细胞后再感染病毒的效果,同时设立病毒与空白对照。通过观察荧光的数量来判定乳酸菌的抑制作用。结果很明显,加入乳酸菌及其代谢产物的处理组荧光数量比病毒对照组均有不同程度的降低,说明乳酸菌和代谢产物对PEDV吸附细胞具有一定的阻断作用。综上所述,本试验从猪粪便中成功分离并筛选出3株具有抗PEDV作用的乳酸菌,它们的菌体及代谢产物可以降低病毒对细胞活力影响,阻断PEDV对细胞的感染。

关键词：乳酸菌猪流行性腹泻病毒分离鉴定抗病毒

Effects and Mechanism of Irbesartan on Tubulointerstitial fibrosis in 5/6 Nephrectomized Rats

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Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences) 2010年第1期30卷 48-54页

作者：赵刚赵洪凃玲徐西振郑常龙姜美华汪培华汪道文 The Institute of Hypertension and Cardiovascular Division Department of Internal MedicineTongji HospitalTongji Medical CollegeHuazhong University of Science and Technology Department of Geriatric Medicine Tongji HospitalTongji Medical CollegeHuazhong University of Science and Technology

Tubulointerstitial fibrosis(TIF)is a common pathological feature of end-stage kidney *** studies showed that upregulation of TGFβ1 notably contributed to the chronic renal injury and irbesartan halted the development of TIF in rats with 5/6 renal mass *** study was to investigate the effects of irbesartan on chronic TIF and the mechanism involved TGFβ1 in the rodent model of chronic renal failure involving 5/6 *** results showed that irbesartan significantly attenuated th...

关键词： chronic tubulointerstitial fibrosis irbesartan 5/6 nephrectomy signaling pathway

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猪流行性腹泻的研究进展

畜牧兽医科技信息 2017年第9期33卷 12-13页

作者：郑常龙河北农业大学河北保定071000

猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea，PED）是近年来出现在猪身上的一种急性接触性肠道疾病。具有传染速度快、传染方式多、发病速度快等特点，同时猪携带此类病毒时会产生呕吐、腹泻、脱水等症状。PED的传播范围遍及全世界，世... 详细信息

猪流行性腹泻（porcine epidemic diarrhea，PED）是近年来出现在猪身上的一种急性接触性肠道疾病。具有传染速度快、传染方式多、发病速度快等特点，同时猪携带此类病毒时会产生呕吐、腹泻、脱水等症状。PED的传播范围遍及全世界，世界多个国家媒体对此都有详细的报道。近几年，PED在我国开始大面积暴发。感染PED的幼年仔猪对PED的感染率和死亡率都在90％以上，因此，我国急需对PED展开研究，找到有效的预防和治疗途径。

关键词：猪流行性腹泻致病机理疾病防控

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浅谈施工企业项目内部审计的措施和方法

中国总会计师 2014年第6期 84-85页

作者：郑常龙中铁十九局第二工程有限公司

随着现代建筑行业的不断发展,施工企业面临的市场竞争压力增大,给企业内部审计工作提出了许多新的课题,审计工作面临的问题也越来越复杂。施工企业的内部审计是一项独立于企业其他职能部门的工作,是企业内部结构中的重要组成。而施工企... 详细信息

随着现代建筑行业的不断发展,施工企业面临的市场竞争压力增大,给企业内部审计工作提出了许多新的课题,审计工作面临的问题也越来越复杂。施工企业的内部审计是一项独立于企业其他职能部门的工作,是企业内部结构中的重要组成。而施工企业的项目又是施工企业的根本,对施工企业项目的审计是做好施工企业内部审计的基础。本文针对施工项目目前管理的现状、施工项目内部审计的措施和方法作粗略探讨,以强化施工企业的审计效能,充分发挥内部审计"免疫"系统功能及作用,提高企业的经济效益。

关键词：施工项目内部审计措施方法

急诊使用中心静脉导管治疗原发性自发性气胸的疗效

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实用医学杂志 2014年第12期30卷 1909-1911页

作者：郑常龙符永玫周伟雄张永标中山大学附属第三医院急诊科广州市510630

目的:评价在急诊科使用中心静脉导管胸腔闭式引流治疗原发性自发性气胸的临床疗效。方法:2009年1月至2011年10月在我院急诊科留观的原发性自发性气胸患者80例,随机分为中心静脉导管接水封瓶闭式引流组(水封瓶组,n=39)和中心静脉导管接... 详细信息

目的:评价在急诊科使用中心静脉导管胸腔闭式引流治疗原发性自发性气胸的临床疗效。方法:2009年1月至2011年10月在我院急诊科留观的原发性自发性气胸患者80例,随机分为中心静脉导管接水封瓶闭式引流组(水封瓶组,n=39)和中心静脉导管接负压瓶闭式引流组(负压瓶组,n=41)。比较两组治疗的有效率、肺复张时间、平均住院时间、平均治疗费用、并发症等指标。电话随访2年内患者复发情况并比较两组复发率。结果:负压瓶组治疗有效率、复发率、并发症发生率(分别为90.2%、26.8%、14.6%)与水封瓶组(分别为92.3%、23.1%、15.4%)相比,均无统计学差异(P>0.05);负压瓶组肺复张时间、平均留院时间、平均治疗费用[分别为(33.4±8.5)h、(38.7±10.1)h、(1 047.5±98.7)元]均明显低于水封瓶组[分别为(49.5±10.3)h、(56.2±12.6)h、(1 356.3±109.6)元](均P<0.05)。结论:在急诊科使用中心静脉导管闭式引流治疗原发性自发性气胸疗效满意,中心静脉导管接负压瓶治疗更能缩短疗程,降低治疗费用,适合在临床推广。

关键词：原发性自发性气胸中心静脉导管负压引流瓶胸腔闭式引流

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城市居民出行方式选择影响因素分析

中国经贸导刊 2012年第24期 85-87页

作者：郑常龙北京工业大学经济与管理学院

基于北京市第三次居民出行调查数据,对影响城市居民出行方式选择的因素进行了分析,运用SPSS中的二项logistic分析方法,给出了详细筛选标准与详细筛选过程,确定了每种出行方式的主要影响因素,并利用所得结果建模,得到了北京市5种主要出... 详细信息

基于北京市第三次居民出行调查数据,对影响城市居民出行方式选择的因素进行了分析,运用SPSS中的二项logistic分析方法,给出了详细筛选标准与详细筛选过程,确定了每种出行方式的主要影响因素,并利用所得结果建模,得到了北京市5种主要出行方式分担率距离曲线,反映了居民选择的出行方式,能够为交通管理部门合理地制定政策提供参考。

关键词：城市交通出行方式选择影响因素二项logistic分析

Bax/Bcl-2在野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺组织中的表达及意义

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实用医学杂志 2015年第21期31卷 3486-3488页

作者：郑常龙杨晓燕梁彩倩钟丽君凃玲中山大学附属第三医院急诊科广州市510630 华中科技大学同济医学院附属同济医院综合科武汉市430030

目的:研究Bax/Bcl-2在野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺组织中的表达及意义。方法:18只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=8)和模型组(n=10),采用皮下注射野百合碱(60 mg/kg)的方法建立肺动脉高压模型。野百合碱注射5周后,测定大鼠右心室收缩压... 详细信息

目的:研究Bax/Bcl-2在野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺组织中的表达及意义。方法:18只雄性SD大鼠随机分为对照组(n=8)和模型组(n=10),采用皮下注射野百合碱(60 mg/kg)的方法建立肺动脉高压模型。野百合碱注射5周后,测定大鼠右心室收缩压(RVSP)和右心室肥厚指数(RVHI),肺组织切片行van Geison染色,高倍镜下观察肺内小动脉形态学改变,Western blot检测肺组织中Bax、Bcl-2的表达水平。结果:模型组大鼠的RVSP、RVHI明显高于对照组(P<0.05),与对照组相比,模型组大鼠肺内小动脉中膜明显增厚、管腔狭窄,肺组织中Bax的表达明显下调,而Bcl-2的表达明显上调(均P<0.05)。结论:Bax/Bcl-2信号通路可能参与了肺动脉高压的发病。

关键词：高血压,肺性 Bax Bcl-2 野百合碱

不同血糖控制对老年危重症合并应激性高血糖患者预后的影响

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中国全科医学 2014年第21期17卷 2437-2439页

作者：刘旭辉郑常龙冯亚群叶志强中山大学附属第三医院急诊科广东省广州市510630

目的：探讨不同血糖控制水平对老年危重症合并应激性高血糖患者近期预后的影响。方法选取2010年10月-2013年2月入住本院内科重症监护病房（ MICU）的老年危重症患者82例，将其随机分为对照组和观察组，各41例。两组均采用微量泵泵入胰... 详细信息

目的：探讨不同血糖控制水平对老年危重症合并应激性高血糖患者近期预后的影响。方法选取2010年10月-2013年2月入住本院内科重症监护病房（ MICU）的老年危重症患者82例，将其随机分为对照组和观察组，各41例。两组均采用微量泵泵入胰岛素，对照组、观察组血糖控制目标分别为8.0～10.0 mmol/L和4.4～7.8 mmol/L。比较两组患者胰岛素用量、胰岛素使用时间、 MICU住院时间、低血糖发生率、院内感染发生率、28 d病死率、多器官功能障碍综合征（ MODS）发生率；检测两组患者入住MICU第1天和第5天血清C反应蛋白（ CRP）、白介素6（IL-6）水平。结果观察组患者胰岛素用量和低血糖发生率高于对照组，而胰岛素使用时间、 MICU住院时间、院内感染发生率低于对照组（P＜0.05）；两组患者28 d病死率及MODS发生率间无差异（P＞0.05）。入住MICU第5天观察组患者血清CRP、 IL-6水平均低于对照组（P＜0.05）。结论强化血糖控制不能降低老年危重症合并应激性高血糖患者的28 d病死率和MODS发生率，反而会增高老年危重症患者低血糖风险。

关键词：老年人危重病应激高血糖症低血糖症

银杏叶提取物对转化生长因子β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化的影响及其机制

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中国病理生理杂志 2008年第11期24卷 2235-2238页

作者：徐西振郑常龙凃玲赵刚汪道文华中科技大学同济医学院附属同济医院心血管内科湖北武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院老年医学科湖北武汉430030

目的:研究银杏叶提取物(extract of ginkgo biloba,EGB)对转化生长因子β1(transforming growth factor-β1 TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞HK2(human tubular epithelial cells)转分化的影响及其机制。方法:复苏并传代培养HK2细胞,应用10μg/LTGF-β1诱导HK2细胞向间充质的转分化,给予EGB干预。应用West-ern印记法检测HK2细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、NADPH氧化酶p67phox以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的表达,检测细胞培养液上清中丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量。结果:EGB显著抑制TGF-β1诱导的E-cadherin下调(P<0.05)和α-SMA上调(P<0.05);EGB显著抑制TGF-β1诱导的p67phox表达增加(P<0.05),显著抑制TGF-β1诱导的SOD表达降低(P<0.05);同时,TGF-β1显著促进了MDA的产生(P<0.05),EGB可以部分抑制TGF-β1刺激的MDA浓度的升高(P<0.05)。结论:EGB显著抑制TGF-β1诱导的HK2细胞转分化,其机制可能是EGB抑制了TGF-β1诱导的p67phox上调并上调SOD的表达。

关键词：银杏叶提取物转化生长因子β 肾小管上皮细胞