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中国临床康复 2006年第48期10卷 213-215,F0003页

作者：赛佳明张慧琴青岛大学医学院山东省青岛市266003 青岛大学医学院附属医院妇科山东省青岛市266003

背景:糖尿病患者溃疡创面难愈合,目前认为是由糖尿病患者创面微循环障碍以及内源性生长因子含量降低等因素所造成。目的:观察腺相关病毒介导转化生长因子β1(AAV-TGFβ1)和血管内皮生长因子(AAV-VEGF)联合转基因治疗促进糖尿病皮肤溃疡... 详细信息

背景:糖尿病患者溃疡创面难愈合,目前认为是由糖尿病患者创面微循环障碍以及内源性生长因子含量降低等因素所造成。目的:观察腺相关病毒介导转化生长因子β1(AAV-TGFβ1)和血管内皮生长因子(AAV-VEGF)联合转基因治疗促进糖尿病皮肤溃疡愈合的生物学效应。设计:随机对照动物实验。单位:青岛大学医学院和青岛大学医学院附属医院。材料:实验于2004-07/2006-01在青岛大学医学院附属医院妇科实验室进行。选用成年健康大白兔24只,单纯随机分为联合转基因组和对照组各12只。方法:①采用耳缘静脉注入四氧嘧啶(130mg/kg)建立糖尿病模型,并通过手术方法建立溃疡创面。②联合转基因组创面局部浸润注射AAV-TGFβ1和AAV-VEGF(9×106/mL病毒颗粒);对照组注射生理盐水。主要观察指标:①术后1个月,通过聚合酶链反应检测愈合组织中转化生长因子β1和血管内皮生长因子基因的转录水平。②术后3周,用微循环显微镜计数创缘毛细血管密度值。③术后6个月通过蛋白凝胶电泳和半干电转移法对Ⅰ、Ⅲ型胶原进行分离及免疫印迹检测。④术后1d,1,2,3周,1,2,3,4,5,6个月时测定溃疡愈合组织中胶原含量。⑤术后观测创面愈合厚度、颜色、质地。结果:24只兔全部进入结果分析。①联合转基因组转化生长因子β1和血管内皮生长因子基因转录表达增多。②联合转基因组创缘毛细血管密度值高于对照组[(19.18±3.56),(6.43±1.52)个/mm2,P0.05)。此后,联合转基因组胶原含量均高于对照组(P明显滞后,愈合质量差。结论:AAV-TGFβ1和AAV-VEGF可联合高效转染糖尿病兔耳皮肤溃疡创面,可使溃疡组织中毛细血管密度明显增多,愈合组织中Ⅰ型和Ⅲ型胶原构成比中Ⅰ型胶原的比例明显提高,并有效地促进溃疡愈合。

关键词：糖尿病/并发症伤口愈合转染转化生长因子β 血管内皮生长因子类

慢病毒载体GV115介导Caspase-3 siRNA转染人椎间盘髓核细胞的生物学效应

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中国脊柱脊髓杂志 2015年第12期25卷 1090-1094页

作者：赛佳明马学晓邱晨生陈伯华胡有谷青岛大学附属医院脊柱外科山东省青岛市266003

目的：研究慢病毒载体GV115介导Caspase-3 si RNA转染人椎间盘髓核细胞的生物学效应。方法：采集12例外伤致脊柱爆裂性骨折患者（22~36岁）术中切除的椎间盘髓核组织,采用组织块法分离培养髓核细胞并传代。取第2代髓核细胞,分为GV115-... 详细信息

目的：研究慢病毒载体GV115介导Caspase-3 si RNA转染人椎间盘髓核细胞的生物学效应。方法：采集12例外伤致脊柱爆裂性骨折患者（22~36岁）术中切除的椎间盘髓核组织,采用组织块法分离培养髓核细胞并传代。取第2代髓核细胞,分为GV115-Caspase3 si RNA组、GV115组和对照组,各组12个细胞培养孔。在荧光显微镜下观察计数阳性髓核细胞,计算GV115-Caspase3 siRNA对人椎间盘髓核细胞的转染效率;采用免疫荧光法检测三组髓核细胞中Caspase-3表达;采用MTT法检测三组髓核细胞活性;采用Western-Blot法和Antonopulos法分别检测三组髓核细胞的Ⅱ型胶原和蛋白多糖含量。结果：椎间盘髓核细胞被成功分离培养,培养1周后细胞达到80%融合,进行传代培养。转染后1周（85.6±1.3）%的髓核细胞可被GV115-Caspase3 si RNA转染而表达绿色荧光素。GV115-Caspase3 siRNA组Caspase-3免疫荧光阳性细胞率[（19.4±3.2）%]较GV115组[（84.3±9.2）%]和对照组[（83.9±8.7）%]明显减少（P〈0.05）,OD值（1.56±0.21）较GV115组（0.91±0.15）和对照组（0.92±0.17）高（P〈0.05）,Ⅱ型胶原免疫印迹染色强度（1.32±0.09）较GV115组（0.81±0.05）和对照组（0.79±0.04）高（P〈0.05）,蛋白多糖含量（0.56±0.09）较GV115组（0.35±0.06）和对照组（0.34±0.05）高（P〈0.05）。结论：GV115-Caspase3 siRNA可高效转染人椎间盘髓核细胞,增强髓核细胞的生物活性,并促进细胞外基质的合成。

关键词：髓核细胞慢病毒 Caspase-3 RNA干扰基因治疗

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中华骨科杂志 2006年第4期26卷 261-266页

作者：赛佳明胡有谷王德春青岛大学医学院附属医院骨科山东省创伤骨科研究所266003

目的比较研究腺相关病毒(adeno-associatedvirus,AAV)载体介导人转化生长因子β1(humantransforminggrowthfactorβ1,hTGFβ1)与hTGFβ3逆转兔腰椎间盘细胞退变的生物学效应。方法分离、培养兔腰椎间盘髓核细胞和纤维环细胞,并传代建立... 详细信息

目的比较研究腺相关病毒(adeno-associatedvirus,AAV)载体介导人转化生长因子β1(humantransforminggrowthfactorβ1,hTGFβ1)与hTGFβ3逆转兔腰椎间盘细胞退变的生物学效应。方法分离、培养兔腰椎间盘髓核细胞和纤维环细胞,并传代建立退变早、晚期细胞模型。采用荧光标记的pSNⅡ型腺相关病毒(pSNAV2),分别检测其对不同退变程度兔腰椎间盘细胞的转染效率,并在此基础上应用pSNAV2-hTGFβ1和pSNAV2-hTGFβ3转染不同退变程度的兔腰椎间盘细胞。通过细胞形态、胶原的免疫组织化学染色和35S标记蛋白多糖等方法,检测比较pSNAV2-hTGFβ1和pSNAV2-hTGFβ3对于退变早、晚期兔腰椎间盘细胞基质合成的影响。结果pSNAV2可高效转染退变早期兔腰椎间盘髓核细胞和纤维环细胞,而对于退变晚期兔腰椎间盘细胞的转染效率低。hTGFβ1和hTGFβ3可显著促进退变早期兔腰椎间盘细胞蛋白多糖和Ⅱ型胶原的合成,其中hTGFβ1的作用较hTGFβ3强。hTGFβ1可促进退变早、晚期兔腰椎间盘纤维环细胞Ⅰ型胶原的合成。hTGFβ3可促进退变晚期兔腰椎间盘髓核细胞Ⅱ型胶原的合成。结论pSNAV2-hTGFβ1和pSNAV2-hTGFβ3可促进退变早期兔腰椎间盘髓核细胞蛋白多糖和Ⅱ型胶原的合成以及纤维环细胞Ⅰ型胶原的合成,从而延缓和逆转椎间盘退变。对于退变晚期兔腰椎间盘髓核细胞,hTGFβ3可促进Ⅱ型胶原的合成。

关键词：转化生长因子β 依赖病毒胶原Ⅰ型胶原Ⅱ型椎间盘

Tightrope系统捆绑弹性固定下胫腓分离新技术的初步研究

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中华创伤骨科杂志 2020年第10期22卷 901-907页

作者：赛佳明郑良孝于良宁刘金伟朱朝晖张增方山东大学齐鲁医院(青岛)手足外科 266035 山东大学齐鲁医院(青岛)影像中心 266035

目的评估自行设计的Tightrope绊钢板线缆系统(Tightrope系统)捆绑弹性固定下胫腓联合(ITFS)分离的安全性。方法本研究为自身前-后对照研究,选用6具正常成人踝关节尸体标本作为ITFS正常组,建立下胫腓联合分离模型作为ITFS分离组。在ITFS... 详细信息

目的评估自行设计的Tightrope绊钢板线缆系统(Tightrope系统)捆绑弹性固定下胫腓联合(ITFS)分离的安全性。方法本研究为自身前-后对照研究,选用6具正常成人踝关节尸体标本作为ITFS正常组,建立下胫腓联合分离模型作为ITFS分离组。在ITFS分离模型上依次采用Tightrope系统行横向弹性固定和捆绑弹性固定作为Tightrope系统横向弹性固定组(横向固定组)和Tightrope系统捆绑弹性固定组(捆绑固定组)。通过对重力应力试验X线片上测量的相关指标[下胫腓间隙(TFCS)、踝关节内侧间隙(MCS)]和CT线片上测量的相关指标[下胫腓前、中、后间距(ITFACS、ITFMCS、ITFPCS)、下胫腓前缘水平间距(AITF)、腓骨旋转角度(θfib)]进行比较,评估Tightrope系统捆绑弹性固定与横行弹性固定对下胫腓联合分离复位及稳定性作用的差异。结果在标本上采用Tightrope系统横向弹性固定下胫腓联合对腓骨、下胫腓骨间韧带及腓动脉穿支产生医源性损伤,且复位不良,采用Tightrope系统捆绑弹性固定不会造成下胫腓前、后韧带及腓骨肌腱上支持带损伤,且准确复位。4组间TFCS、踝关节MCS、ITFACS、ITFMCS、AITFI比较:ITFS正常组<捆绑固定组<横向固定组

关键词：踝关节解剖学尸体下胫腓联合弹性固定

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类风湿关节炎危险因素研究进展

齐鲁医学杂志 2007年第6期22卷 556-557,560页

作者：张亦军赛佳明青岛市骨伤医院临床骨科实验室山东青岛266021

类风湿关节炎(RA)是一种以滑膜关节慢性炎症为特征的系统性疾病,晚期病人关节畸形,出现功能障碍,预后差.国内该病的患病率为0.36%,已成为一个重大的公共卫生问题.充分了解RA危险因素,对于完善该病病因学研究及有效预防和治疗具有重要意... 详细信息

类风湿关节炎(RA)是一种以滑膜关节慢性炎症为特征的系统性疾病,晚期病人关节畸形,出现功能障碍,预后差.国内该病的患病率为0.36%,已成为一个重大的公共卫生问题.充分了解RA危险因素,对于完善该病病因学研究及有效预防和治疗具有重要意义.本文对RA危险因素的研究进展做一综述.

关键词：类风湿关节炎流行病学综述

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加强骨库网络建设的建议

中国骨肿瘤骨病 2006年第3期5卷 168-169页

作者：张亦军赛佳明山东省青岛市骨伤医院临床骨科研究室 266021

骨移植是手术治疗骨科疾病的重要手段.自体骨成骨能力强,没有免疫排斥及疾病传播的危险,但是数量有限而且自身取骨伴有很多风险并留下新的创伤,另外年龄及部位的限制亦导致很多患者得不到应有的治疗.同种骨移植来源广泛,大小形状不受限... 详细信息

骨移植是手术治疗骨科疾病的重要手段.自体骨成骨能力强,没有免疫排斥及疾病传播的危险,但是数量有限而且自身取骨伴有很多风险并留下新的创伤,另外年龄及部位的限制亦导致很多患者得不到应有的治疗.同种骨移植来源广泛,大小形状不受限制,且具有生物活性与受体部位发生生物结合,同时可保留肌肉、韧带及关节囊等附着点,为重建肢体和关节功能提供了方便和保证.现代骨库始于1950年美国海军组织库,从此深度冷冻与干燥组织保存技术迅速普及.波兰华沙组织库1965年至1990年间向临床提供约8万件辐照同种骨移植材料,美国同种骨在1990年至1999年间从每年35万件增加到65万件.

关键词：网络建设骨库同种骨移植手术治疗生物活性美国海军骨移植材料组织库成骨能力骨科疾病

腺相关病毒介导转化生长因子β3在防治增生性瘢痕愈合中的生物学效应

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腺相关病毒介导转化生长因子β3在防治增生性瘢痕愈合中的生物学...

骨水泥和骨水泥技术在人工髋关节置换中的临床应用价值及其原理

第五届全国烧伤救治专题研讨会

作者：赛佳明张慧琴青岛市骨伤医院骨科实验室

目的探讨腺相关病毒(AAV)介导转化生长因子β(TGFβ)在防治增生性瘢痕愈合中的生物学效应。方法通过改进的 Morris 法建立兔耳增生性瘢痕模型,并于术后将 AAV-TGFβ病毒转染兔耳增生性瘢痕模型创面处。通过创面愈合情况(大体形态学观察...

目的探讨腺相关病毒(AAV)介导转化生长因子β(TGFβ)在防治增生性瘢痕愈合中的生物学效应。方法通过改进的 Morris 法建立兔耳增生性瘢痕模型,并于术后将 AAV-TGFβ病毒转染兔耳增生性瘢痕模型创面处。通过创面愈合情况(大体形态学观察)、创面愈合组织中主胶原Ⅰ、Ⅲ型胶原的含最(免疫印迹检测)以及创面愈合组织中羟脯氨酸(HP)含量(氯胺-T 法)等方面的

关键词：

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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中国骨与关节损伤杂志 2007年第6期22卷 526-528页

作者：赛佳明胡有谷张亦军山东省青岛市骨伤医院骨科实验室 266021 青岛大学医学院附属医院骨科(山东省创伤骨科研究所)

髋关节置换已经是临床上非常遍采用的手术,早期骨水泥技应用导致较高的静脉血栓及假体松动等副作用的发生率.至今,第1代骨水泥技术已逐步完善发至目前的第3代骨水泥技术并在临床运用中取得可喜的结果.笔者结合骨水泥的特点、骨水泥固定... 详细信息

髋关节置换已经是临床上非常遍采用的手术,早期骨水泥技应用导致较高的静脉血栓及假体松动等副作用的发生率.至今,第1代骨水泥技术已逐步完善发至目前的第3代骨水泥技术并在临床运用中取得可喜的结果.笔者结合骨水泥的特点、骨水泥固定的原理、骨水泥技术的原理,以及骨水泥的临床使用价值等方面进行综合讨论.

关键词：人工髋关节置换临床应用价值骨水泥技术骨水泥固定假体松动静脉血栓临床运用综合讨论

AAV-TGFβ3的构建及其与AV-TGFβ1表达系统对反分化髓核细胞蛋白多糖合成的影响

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中国脊柱脊髓杂志 2006年第12期16卷 946-950,I0024页

作者：赛佳明胡有谷王德春青岛大学医学院附属医院骨科山东省创伤骨科研究所山东省青岛市266003

目的:比较转化生长因子(TGF)β3腺相关病毒(AAV-TGFβ3)与TGFβ1腺病毒(AV-TGFβ1)表达系统对反分化早、晚期髓核细胞蛋白多糖合成的生物学效应。方法:制备具有感染活性的AAV-TGFβ3并采用酶切电泳和免疫荧光对其进行鉴定。将AAV-TGFβ3... 详细信息

目的:比较转化生长因子(TGF)β3腺相关病毒(AAV-TGFβ3)与TGFβ1腺病毒(AV-TGFβ1)表达系统对反分化早、晚期髓核细胞蛋白多糖合成的生物学效应。方法:制备具有感染活性的AAV-TGFβ3并采用酶切电泳和免疫荧光对其进行鉴定。将AAV-TGFβ3和AV-TGFβ1分别转染反分化早、晚期髓核细胞,采用免疫印迹法检测TGFβ3和TGFβ1蛋白的表达,并通过Antonopulos法分别检测AAV-TGFβ3和AV-TGFβ1对蛋白多糖合成的生物学效应。结果:AAV-TGFβ3转染可提高反分化早、晚期髓核细胞TGFβ3蛋白的表达,并促进其蛋白多糖的合成。转染后第12天,蛋白多糖含量达到峰值,分别为0.399±0.029和0.152±0.011,此后蛋白多糖含量缓慢降低;于转染后第2个月,蛋白多糖含量稳定在较高水平,分别为0.309±0.021和0.115±0.009。AV-TGFβ1转染亦可提高反分化早、晚期髓核细胞TGFβ1蛋白的表达,但其仅促进反分化早期髓核细胞蛋白多糖的合成,转染后第10天蛋白多糖含量达到峰值(0.413±0.041),此后蛋白多糖含量快速降低,转染后第2个月时蛋白多糖含量降至较低水平(0.198±0.013);对于反分化晚期髓核细胞,AV-TGFβ1则抑制其蛋白多糖的合成。结论:AAV-TGFβ3可稳定地促进反分化早、晚期髓核细胞蛋白多糖的合成;AV-TGFβ1仅一过性地促进反分化早期髓核细胞蛋白多糖的合成,而且抑制反分化晚期髓核细胞蛋白多糖的合成。

关键词：腺相关病毒腺病毒转化生长因子β3 转化生长因子β1 髓核蛋白多糖