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关中奶山羊BAC文库构建条件研究

西北农林科技大学学报（自然科学版） 2004年第6期32卷 18-22页

作者：贾玉艳陈宏邓继先军事医学科学院生物工程研究所北京100071 西北农林科技大学动物科技学院

　BAC(bacterialartificialchromosome,细菌人工染色体)是一种新发展起来的构建高等生物基因组文库的重要方法。由于关中奶山羊产奶性能好,成为制备乳腺生物反应器的理想动物之一,故对关中奶山羊BAC文库的构建条件进行了研究。用BamH ... 详细信息

　BAC(bacterialartificialchromosome,细菌人工染色体)是一种新发展起来的构建高等生物基因组文库的重要方法。由于关中奶山羊产奶性能好,成为制备乳腺生物反应器的理想动物之一,故对关中奶山羊BAC文库的构建条件进行了研究。用BamH 部分酶切关中奶山羊的基因组,用CHEF(箝位匀强电场)凝胶电泳分离大片段DNA,以电透析法回收DNA后,与酶切脱磷的pBeloBAC11载体连接,然后电激转化感受态细胞DH10β,得到了数千个阳性克隆,插入片段平均为30～40kb。在此过程中摸索了BAC载体制备、高分子量DNA制备、酶切、连接和电激转化等一系列环节对高效转化产生大片段DNA克隆的影响。

关键词：关中奶山羊 BAC文库构建条件基因组文库细菌人工染色体乳腺生物反应器

关中奶山羊BAC文库构建及其利用Red系统同源重组的研究

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关中奶山羊BAC文库构建及其利用Red系统同源重组的研究

作者：贾玉艳西北农林科技大学

学位级别：硕士

一种新型的载体系统——细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome，BAC)已经发展成为构建复杂基因组文库的重要方法。BAC文库在基因组研究中起着关键作用，对BAC的修饰在分析和研究基因体内和体外的功能和表达方面也有很重要的... 详细信息

一种新型的载体系统——细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome，BAC)已经发展成为构建复杂基因组文库的重要方法。BAC文库在基因组研究中起着关键作用，对BAC的修饰在分析和研究基因体内和体外的功能和表达方面也有很重要的作用。利用Red系统进行的基因同源重组技术扩展了BAC文库的应用范围，并为转基因动物研究克服转基因表达的“位置效应”提供了新的思路。本研究的目的就是构建具有高产奶性能的关中奶山羊基因组DNA的BAC文库，及利用Red重组系统将天然的人组织型纤溶酶原激活剂(ht-PA)的编码序列置换掉BAC克隆中的β-酪蛋白的编码序列，用β-酪蛋白的调控序列指导ht-PA的表达，以消除转基因动物外源基因的“位置效应”, 为制备表达ht-PA的动物乳腺生物反应器提供一个有效的载体。本论文由2部分组成: 1. 用脉冲电泳技术分离大片段DNA，以电透析法回收DNA后,与用BamHI酶切和CIAP（牛小肠碱性磷酸酶）脱磷的pBeloBAC11载体连接，然后电击转化感受态细胞DH10B，得到了关中奶山羊基因组的部分BAC文库，插入片段平均大小为30～40 kb。摸索了BAC载体制备、高分子量DNA制备、酶切、连接和电击转化等一系列环节对高效转化产生大片段DNA的BAC的影响，为整个文库的构建奠定了基础。 2．构建了两个携带Zeocin抗性的ht-PA的载体，一个含有牛生长激素polyA 信号 (Bovine growth hormone polyadenylation signal, BGHpA)，另一个没有BGHpA。Zeocin抗性基因含有真核和原核两个启动子，可以在真核和原核细胞中进行抗性筛选。用PCR方法获得上述两个载体的DNA片段，然后电击转化至含有BAC的*** DH10B细胞中，在λ Red重组系统的作用下，与BAC发生同源重组，置换了BAC中β-酪蛋白的编码区。用PCR和基因序列分析技术对BAC克隆进行了鉴定，证明获得了在β-酪蛋白基因座定位整合天然ht-PA基因的阳性克隆。

关键词：山羊 BAC文库构建 Red系统同源重组

培哚普利与硝苯地平治疗低氧性肺动脉高压的疗效对比

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医学理论与实践 2018年第13期31卷 61-63页

作者：贾玉艳天津市武清区第二人民医院内科 301700

目的:比较培哚普利与硝苯地平治疗低氧性肺动脉高压的临床疗效。方法:选取我院2016年8月—2017年9月收治的110例高原地区低氧性肺动脉高压患者,采取随机数字表将其分成观察组与对照组,每组55例。观察组给予培哚普利片口服治疗,对照组给... 详细信息

目的:比较培哚普利与硝苯地平治疗低氧性肺动脉高压的临床疗效。方法:选取我院2016年8月—2017年9月收治的110例高原地区低氧性肺动脉高压患者,采取随机数字表将其分成观察组与对照组,每组55例。观察组给予培哚普利片口服治疗,对照组给予硝苯地平片口服治疗。两组均连续服用3个月后进行疗效评定。结果:两组患者治疗后LVEF、CO均较治疗前显著上升,肺动脉压显著下降(P<0.05);治疗后观察组LVEF、CO明显高于对照组,肺动脉压明显低于对照组(P<0.05)。两组治疗后6min步行距离均较治疗前有明显增加(P<0.05);观察组明显大于对照组(P<0.05)。结论:在低氧性肺动脉高压的治疗上,培哚普利与硝苯地平均能有效增强患者的心肺功能,提高运动耐力,但培哚普利疗效要明显优于硝苯地平。

关键词：培哚普利硝苯地平低氧性肺动脉高压心肺功能运动耐力

阿加曲班治疗急性缺血性脑卒中患者的临床研究进展

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医疗装备 2021年第8期34卷 193-194页

作者：贾玉艳天津市武清区第二人民医院天津301725

近年来,急性缺血性脑卒中的发病率与病死率日益上升,使得医疗领域学者对该病的重视程度逐渐提高。在急性缺血性脑卒中患者的治疗中,抗凝治疗是一种主要的措施,而阿加曲班是抗凝治疗常用的凝血酶抑制药,其可迅速结合凝血酶催化活性中心,... 详细信息

近年来,急性缺血性脑卒中的发病率与病死率日益上升,使得医疗领域学者对该病的重视程度逐渐提高。在急性缺血性脑卒中患者的治疗中,抗凝治疗是一种主要的措施,而阿加曲班是抗凝治疗常用的凝血酶抑制药,其可迅速结合凝血酶催化活性中心,对凝血酶各种效应进行阻断,实现抗凝,现就阿加曲班对急性缺血性脑卒中患者的临床治疗效果进行深入探析。

关键词：阿加曲班急性缺血性脑卒中抗凝治疗抗凝作用

倍他乐克联合非洛地平、氢氯噻嗪治疗高原性高血压的疗效观察

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医学理论与实践 2018年第8期31卷 1152-1154页

作者：贾玉艳天津市武清区第二人民医院内科 301700

目的:探讨倍他乐克联合非洛地平、氢氯噻嗪治疗高原性高血压的临床疗效。方法:观察对象选自昌都市藏医院2016年8月-2017年7月收治的130例高原性高血压患者,根据患者的入院顺序分成观察组与对照组,每组65例。两组患者均给予非洛地平缓释... 详细信息

目的:探讨倍他乐克联合非洛地平、氢氯噻嗪治疗高原性高血压的临床疗效。方法:观察对象选自昌都市藏医院2016年8月-2017年7月收治的130例高原性高血压患者,根据患者的入院顺序分成观察组与对照组,每组65例。两组患者均给予非洛地平缓释片联合氢氯噻嗪片治疗,观察组在此基础上联合倍他乐克治疗,在完成8周治疗后对两组患者进行疗效及安全性评估。结果:观察组治疗总有效率为96.92%(63/65),相对于对照组的84.62%(55/65)明显上升(P0.05)。结论:倍他乐克联合非洛地平、氢氯噻嗪治疗高原性高血压疗效显著,安全性高,值得临床推广应用。

关键词：倍他乐克非洛地平氢氯噻嗪高原性高血压

利用Red系统快速改构含鼠β-酪蛋白基因的细菌人工染色体

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中国生物工程杂志 2005年第8期25卷 45-50页

作者：辛艳丽贾玉艳王恒梁邓继先军事医学科学院生物工程研究所北京100071

采用Red系统介导的同源重组方法对含有鼠β-酪蛋白基因的RPCI23-440C1BAC进行快速改构。首先通过PCR方法,获得两端带有鼠β-酪蛋白基因同源序列的tPAm-Zeo同源重组片段,然后将此同源重组片段电击转化至已含有编码Red重组酶质粒的RPCI23-... 详细信息

采用Red系统介导的同源重组方法对含有鼠β-酪蛋白基因的RPCI23-440C1BAC进行快速改构。首先通过PCR方法,获得两端带有鼠β-酪蛋白基因同源序列的tPAm-Zeo同源重组片段,然后将此同源重组片段电击转化至已含有编码Red重组酶质粒的RPCI23-440C1BAC菌中,在λRed重组系统的帮助下,通过同源重组片段两端与RPCI23-440C1中β-酪蛋白同源的序列在菌体内与β-酪蛋白基因发生同源重组,将其置换。最后利用Zeocin抗性基因两侧的FRT位点,通过FLP位点专一性重组将抗性基因剔除。经Southern blot和序列分析鉴定表明,获得了重组正确且无编码两种重组酶质粒的tPAm-RPCI23-440C1BAC克隆。

关键词：细菌人工染色体 λ Red重组系统 β-酪蛋白基因 FLP Southern 同源重组 BAC克隆鼠同源序列

舒适护理模式在胫腓骨骨折术后护理中的干预价值

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中文科技期刊数据库（文摘版）医药卫生 2021年第11期 196-197页

作者：贾玉艳山东省莱阳市穴坊镇中心卫生院山东莱阳265219

针对舒适护理模式在胫腓骨骨折术后护理中的干预价值进行分析。方法:62例胫腓骨骨折患者,随机抽签均分两组。对照组实施骨科常规护理模式,观察组同时开展舒适护理模式,比较应用效果差异。结果:相比于对照组,护理后VAS评分、生活质量评... 详细信息

针对舒适护理模式在胫腓骨骨折术后护理中的干预价值进行分析。方法:62例胫腓骨骨折患者,随机抽签均分两组。对照组实施骨科常规护理模式,观察组同时开展舒适护理模式,比较应用效果差异。结果:相比于对照组,护理后VAS评分、生活质量评分和满意度三项观察组优势明显(P<0.05)。结论:胫腓骨骨折术后护理中舒适护理模式干预效果显著,具有优势推广应用价值。

关键词：胫腓骨骨折舒适护理模式疼痛

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SNP分子标记的研究及应用

黄牛杂志 2003年第1期29卷 42-45页

作者：贾玉艳陈宏西北农林科技大学动物科技学院

SNP作为一种新的遗传标记 ,越来越受到世人的关注。本文主要介绍了 SNP的概念、特点、检测分析技术。

关键词： SNP 遗传标记检测技术

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利用Red系统对BAC进行同源重组

利用Red系统对BAC进行同源重组