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藜麦CqSGAT和CqOSML13基因的克隆及霜霉病菌胁迫下的表达分析

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藜麦CqSGAT和CqOSML13基因的克隆及霜霉病菌胁迫下的表达分析

作者：解宇洁山西农业大学

学位级别：硕士

藜麦(Chenopodium quinoa Willd),属藜科藜属一年生草本植物,是一种全营养单体植物,藜麦霜霉病(Peronospora variabilis Gaüm)是各藜麦产区常见的病害,严重影响藜麦的产量和品质,给藜麦产业造成了较大经济损失。因此,筛选藜麦抗霜霉病... 详细信息

藜麦(Chenopodium quinoa Willd),属藜科藜属一年生草本植物,是一种全营养单体植物,藜麦霜霉病(Peronospora variabilis Gaüm)是各藜麦产区常见的病害,严重影响藜麦的产量和品质,给藜麦产业造成了较大经济损失。因此,筛选藜麦抗霜霉病基因,明确藜麦抗霜霉病的防御机制,进而选育抗病品种,对藜麦霜霉病的防治具有重要的理论和现实意义。基于此,本研究通过同源比对获得藜麦抗霜霉病候选基因,结合半定量RT-PCR和qRT-PCR筛选了在藜麦霜霉病菌胁迫下、抗感材料之间具有表达差异的基因CqSGAT和CqOSML13。在克隆CqSGAT和CqOSML13 CDS序列的基础上,构建了原核表达载体,获得了重组蛋白His-CqSGAT和His-CqOSML13,并验证其体外抑菌活性,构建CqOSML13基因的瞬时表达载体,通过农杆菌介导法转化烟草和藜麦叶片,以探究CqSGAT和CqOSML13在藜麦抗霜霉病防御反应中的功能。主要研究结果如下:1.通过ge Norm、Norm Finder、Best Keeper和Ref Finder 4个软件分析CqRPS18、CqUBC、CqTUA-1、CqELF3、CqACT1、CqTUB-6、CqEF-1α和CqMON1共8个候选内参基因在藜麦霜霉病菌胁迫下的表达稳定性,各软件分析结果均显示,藜麦在霜霉病菌胁迫下稳定表达的最适内参基因为CqEF-1α。2.经同源比对共获得28个藜麦抗霜霉病的候选基因,霜霉病菌侵染后,除CqSGAT和CqOSML13基因在抗感材料中的表达量有明显差异外,其余26个基因在不同供试材料中的表达量变化不大。CqSGAT和CqOSML13在抗病叶片中的表达量均高于在感病叶片中的表达量。霜霉病菌侵染后,CqSGAT基因在74421中的表达量变化很小,在2403中的表达量波动上升,12 h达到峰值,之后逐渐下降。CqOSML13基因在74421中的表达量在侵染后逐渐上升,12 h达到峰值,后逐渐下降;在2403中的表达量在侵染后显著上升,2 h达到峰值,之后略有下降,但在48 h内仍保持较高的表达水平,在72 h显著降低。因此霜霉病菌侵染可以激活CqSGAT和CqOSML13基因的表达,推测CqSGAT和CqOSML13基因参与藜麦抗霜霉病的防御反应,可作为藜麦抗霜霉病的候选基因。3.供试藜麦抗感材料中均存在高度保守的CqSGAT和CqOSML13 CDS序列,CqSGAT基因CDS序列为1206 bp,编码401个氨基酸,预测分子量为43.99 k Da,CqSGAT蛋白不含信号肽和跨膜结构域,属于膜外非分泌蛋白,预测亚细胞定位于过氧化物酶体;CqOSML13基因CDS序列为669 bp,编码222个氨基酸,预测分子量为23.27k Da,CqOSML13蛋白有信号肽但无跨膜结构域,属于经典分泌蛋白。4.通过构建原核表达载体p ET28a-SGAT和p ET28a-OSML13,获得了带有His标签的His-CqSGAT(47.38 k Da)和His-CqOSML13(26.79 k Da)重组蛋白,两个蛋白在上清和沉淀中均可表达。His-CqSGAT重组蛋白IPTG诱导的最适浓度为1 mmol/L,最佳咪唑洗脱浓度为250 mmol/L;His-CqOSML13重组蛋白IPTG诱导的最适浓度为1mmol/L,最佳咪唑洗脱浓度为200 mmol/L。5.重组蛋白His-CqSGAT和His-CqOSML13对藜麦灰霉病菌(Botrytis cinerea Pers.)无体外抑菌活性;瞬时表达载体p CAMBIA1300-EGFP-OSML13经农杆菌介导烟草叶片后,CqOSML13蛋白定位在细胞膜、细胞质和细胞核内;霜霉病菌侵染后注射p CAMBIA1300-EGFP-OSML13瞬时表达载体的74421叶片与对照组叶片相比,发病面积较小,推测CqOSML13基因参与藜麦抗霜霉病的防御机制。

关键词：藜麦 CqSGAT基因 CqOSML13基因基因克隆 qRT-PCR 原核表达亚细胞定位瞬时表达

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管理层监督对激励与风险关系影响的实证研究

经济问题 2015年第5期 90-95页

作者：翟艳黄解宇运城学院经济管理系山西运城044000

经典代理理论认为,激励和风险之间存在权衡关系,经深入分析发现事实并非总是如此。由于企业所有者控制企业管理层存在监督和激励两项基本措施,随着风险的加大,监督成本和激励成本都会加大,所有者控制措施的选择取决于两种成本的比较。... 详细信息

经典代理理论认为,激励和风险之间存在权衡关系,经深入分析发现事实并非总是如此。由于企业所有者控制企业管理层存在监督和激励两项基本措施,随着风险的加大,监督成本和激励成本都会加大,所有者控制措施的选择取决于两种成本的比较。激励与风险之间的关系曲线,由于受到监督的制约,两者并非负线性关系。基于我国上市公司样本的实证研究结果表明,我国上市公司管理层补偿与风险之间存在倒"U"形关系,管理层补偿绩效弹性与风险之间存在倒"U"形关系。同时,监督对我国上市公司管理层补偿存在负向影响,这种负向影响随着风险的逐步增大而加强。

关键词：监督激励风险

基于区域视角的企业社会责任和经济绩效关系研究

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数理统计与管理 2018年第4期37卷 662-668页

作者：赵芸黄解宇运城学院经济管理系

本文以我国东部、中部、西部、东北四个不同区域共1460家上市公司2014-2016年的数据为样本,对不同区域企业社会责任和经济绩效的关系进行了比较分析.结果显示：四个区域中,社会责任总绩效与经济绩效均呈现正相关关系;东部地区的企业社... 详细信息

本文以我国东部、中部、西部、东北四个不同区域共1460家上市公司2014-2016年的数据为样本,对不同区域企业社会责任和经济绩效的关系进行了比较分析.结果显示：四个区域中,社会责任总绩效与经济绩效均呈现正相关关系;东部地区的企业社会责任与经济绩效正相关关系最为显著;相比较于其它责任,对股东的责任绩效和对员工的责任绩效对企业经济绩效的影响更为显著.

关键词：区域企业社会责任经济绩效

从“二元结构”到“三元结构”--中国“农民工”的户籍演变路径及其解决方案

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农业现代化研究 2008年第2期29卷 134-137页

作者：岳澎黄解宇山西运城学院经济管理系

我国的"农民工"实质上构成了二元户籍之外的"第三种户籍",对"农民工"的歧视性待遇,已经严重阻碍了社会经济的进一步发展。解决"农民工"问题可以考虑实施两步走战略:首先变现在的户籍"三元结构"为"新二元结构",然后实施"新二元结构"到"... 详细信息

我国的"农民工"实质上构成了二元户籍之外的"第三种户籍",对"农民工"的歧视性待遇,已经严重阻碍了社会经济的进一步发展。解决"农民工"问题可以考虑实施两步走战略:首先变现在的户籍"三元结构"为"新二元结构",然后实施"新二元结构"到"一元结构"的转变。

关键词：农民工户籍新二元结构

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可再生生物合成基钻井液体系研究

石油钻探技术 2019年第6期47卷 34-39页

作者：解宇宁中国石油辽河油田分公司钻采工艺研究院石油工业入井流体质量监督检验中心

油基钻井液普遍存在基础油难以降解、不可再生等缺点,为此,利用天然生物油脂,通过催化加氢、分子异构等合成了生物合成基础油,以该基础油和改性有机土为主,通过优选其他钻井液添加剂及加量,形成了可再生生物合成基钻井液体系。生物合成... 详细信息

油基钻井液普遍存在基础油难以降解、不可再生等缺点,为此,利用天然生物油脂,通过催化加氢、分子异构等合成了生物合成基础油,以该基础油和改性有机土为主,通过优选其他钻井液添加剂及加量,形成了可再生生物合成基钻井液体系。生物合成基础油是C12—C24的支链异构烷烃混合物,具有优良的安全环保性和黏温特性。室内性能评价试验结果表明,可再生生物合成基钻井液体系的高温高压滤失量低于12 mL,沉降稳定性好,破乳电压在768 V以上,96 h半致死浓度大于1000000 mg/L,能抗20%地层水和10%劣土的侵入,岩屑滚动回收率达到98.06%,经其污染的岩心其渗透率恢复率为83.5%~92.3%。研究结果表明,生物合成基础油具有低毒环保、可降解、可再生等优点,可再生生物合成基钻井液在乳液稳定、抗污染、润滑、抑制、储层保护、安全环保等方面均表现出良好的性能,完全能满足复杂地质条件对钻井液的需求。

关键词：合成基钻井液生物合成基可再生钻井液性能半致死浓度防止地层损害

汉画像舞蹈图像的动态创作与思考 ——以实验作品《汉画像巾舞》为例

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汉画像舞蹈图像的动态创作与思考 ——...

作者：解宇宁江苏师范大学

学位级别：硕士

在汉画像舞蹈的研究者中,大多数人致力于从历史资料中去挖掘汉画像舞蹈的艺术面貌,如刘青弋、刘恩伯、王克芬等;一部分人致力于充分利用这些研究去进行复现创作,如孙颖、刘建等。本文主要关注汉画像舞蹈图像复现创作中“动态创作”的问... 详细信息

在汉画像舞蹈的研究者中,大多数人致力于从历史资料中去挖掘汉画像舞蹈的艺术面貌,如刘青弋、刘恩伯、王克芬等;一部分人致力于充分利用这些研究去进行复现创作,如孙颖、刘建等。本文主要关注汉画像舞蹈图像复现创作中“动态创作”的问题,即“编导在相对准确地范围内,让汉画像静态图像动起来,从而成为动态的舞蹈语汇的方式方法研究”。为使得此项研究具有理论与实践的双重基础,作者首先在充分研读巾舞相关史学研究成果的基础上,对《巾舞歌辞》等古文献以及汉画像石（砖）上的巾舞图像进行了反复地考证,然后以保持巾舞本身特色、尊重艺术发展普遍规律为前提,进行了一次巾舞的复现创作尝试,实验作品取名《汉画像巾舞》。本文的研究价值在于:“使静态汉画像图像从二维空间图像中的舞姿提炼开始,流动起来并逐渐演变为四维空间下具有连续性的动态舞蹈语汇,探索开发一条利用相关的动作词汇,实验填补静态舞姿之间动作断裂的复现之路。”本次复现中编导主要秉承历史还原主义的态度,借助汉画像石（砖）上的巾舞图像、古籍文献记载,做到在某种程度上激活复现汉画像巾舞,使得作品尽可能地贴近历史原貌。“再造”的《汉画像巾舞》与完全地“再现”巾舞表演,存在本质上的区别,由于巾舞表演本身在“垂直传承”上的基本断绝,“再现”巾舞表演几乎不可能完成,故用词“复现”。经过动态创作的过程,把汉画像巾舞图像从二维空间提炼到四维空间使其得以激活,从而直观地呈现在舞台上。这种呈现不仅要基于历史资料的研究,还必须把它置于中国传统文化的语境中,只有深入了解、挖掘中国传统舞蹈文化并将其和已经掌握的技术融合在一起,才能推陈出新。探索汉画像舞蹈复现的各种有效方法,思考舞蹈语言的提炼与再造,一则有益于传承古代舞蹈文化,二则为汉代舞蹈的教学与实践提供了丰富的舞蹈语汇。

关键词：巾舞复现动态创作汉画像图像

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基于经验观的含义研究

基于经验观的含义研究

作者：解宇红西南大学

学位级别：硕士

会话含义是语用学研究的主要话题之一。格赖斯提出“含义”这个术语旨在说明交际中有些意思需要表达,但没明说,而是暗示、或暗指。含义是句子中依赖会话语境的那部分意义,它可以是规约的,也可以是非规约的。然而,格赖斯的会话含义理论... 详细信息

会话含义是语用学研究的主要话题之一。格赖斯提出“含义”这个术语旨在说明交际中有些意思需要表达,但没明说,而是暗示、或暗指。含义是句子中依赖会话语境的那部分意义,它可以是规约的,也可以是非规约的。然而,格赖斯的会话含义理论从两方面受到了批评:从认知的角度看这个理论被认为因不够概括而无法证明它自己宣称的普遍性;从社会的角度看该理论趋于理性化因而不能处理非合作的交际或文化差异。经验主义把语用学重新定义为:使用语言将事实构建为富含意义的经验的研究。根据这个定义,语用意义产生于语言的互动交流过程中。假如经验主义者持此观点:意义源于亲身体验,我们的经验受制于我们自身与文化。那么似乎有理由认定:具有认知和文化结构的思维形成了语言。经验通过语言使用被内化。由此人类使用语言把事实构建为有意义的经验。不同于关联理论和新格赖斯语用理论,认知语言学对语言意义持语用、语境的观点,并以经验观来分析推理。有事实表明推理源于情景、认知原则与结构,产生于语言学、社会文化和使用规约的共同作用之下。而且推理还被认为与交际中被体验了的、由文化推动的认知模型有关。本论文由五章构成: 第一章是简介。简要介绍了论文写作的背景和目的。通过分析语义、语用以及认知方法对于意义的阐述,引入了含义这一概念。第二章基于格赖斯的交际会话理论和新格赖斯理论。主要从语用学角度阐述含义。这一章回顾了含义的定义、产生、分类以及其它相关事项,并提出了针对含义理论的一些批评。第三章尝试给含义提出一种特别的认知结构,并探索语言使用时这种认知结构生成特定社会文化含义的方式。第四章进一步用经验观方法分析了认知语言学研究的一些修辞,比如隐喻、重复、反讽、贬抑和夸大,这些修辞其实都可以看作是含义的应用。第五章是结论。本章回顾总结了整篇论文对含义的研究,最后指出含义可以看作是认知原则和认知结构与意义的例证。总之,尽管含义的理解最初是基于语用学的,但是所有的语言理解都可以被视为在经验范式之列,因此含义理论出现的一些问题可以用经验主义的角度来进行探索研究。从经验观出发来研究含义就是要表明会话的规约、一般含义可以由诸如认知突显、相似性、经济性等影响语言结构的认知原则来解释。因此,经验主义给语言学家研究含义提供了另一个可供选择的方法。

关键词：含义经验观互动交流语用学认知语言学

基于肝细胞癌组织测序及TCGA数据库RNAs构建ceRNA网络调控机制

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基于肝细胞癌组织测序及TCGA数据库RNAs构建ceRNA网络调控机制

作者：解宇威青岛大学

学位级别：硕士

目的:原发性肝癌是主要分为肝细胞癌(hepatocelluar carcinoma HCC),肝内胆管癌(Intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)和混合型肝细胞癌-胆管癌(Combined hepatocellular-cholangiocarcinoma,cHCC-CCA)三种亚型。在我国肝细胞癌(hepatocelluar carcinoma HCC)为最常见的原发性肝癌,发病率居世界第六位,死亡率居世界第四位。尽管早诊早治、根治性手术、放化疗、免疫治疗等手段在HCC的治疗中取得进步显著,但HCC患者的生存率低及复发率高仍是当今HCC治疗亟待解决的一大难点。因此,进一步探索HCC发生发展的分子机制,发现新的诊断及治疗HCC的潜在生物标志物对HCC的研究具有重要的临床意义。本研究旨在筛选肝细胞癌组织及癌旁组织中差异表达的RNAs,根据RNAs靶向关系构建ceRNA网络,探索HCC肿瘤进展中ceRNA网络的调控机制,为下一步的研究打下基础。方法:首先,分别构建6例HCC患者的临床样本的mRNA、lncRNA、miRNA、circRNA文库,进行全转录组测序,获得差异表达的核糖核酸(RNA)图谱。然后,应用生物信息学方法对差异表达的mRNAs进行GO-BP功能富集分析、KEGG信号通路富集分析,对lncRNAs、miRNAs的靶基因进行功能富集分析。使用STRING分析差异蛋白质之间的相互作用关系,使用Cytoscape MCODE插件对PPI网络进行模块分析。根据dif-miRNA-dif-mRNA和dif-miRNA-dif-lncRNA的靶向调控关系,构建竞争性内源性RNA(ceRNA)网络。接着,筛选TCGA数据库中差异表达的RNAs进行整合分析。最后,使用临床标本验证关键miRNAs,并构建预后模型。结果:(1)高通量测序分析共筛选出1280个差异表达的mRNA(dif-mRNAs),99个差异表达的miRNA(dif-miRNAs),181个差异表达的lncRNA(dif-lncRNAs),以及31个差异表达的circRNA(dif-circRNAs)。(2)GO-BP富集分析差异mRNAs,发现差异mRNAs与细胞分裂等生物学进程有关;对差异lncRNAs、miRNAs的靶基因进行GO-BP富集分析,差异lncRNAs靶基因与蛋白k63连接的泛素化等过程显著相关,差异miRNAs靶基因与轴突引导等过程明显相关。KEGG分析显示,差异mRNAs与脂肪酸降解、补体和凝血级联信号通路等显著相关;差异lncRNAs靶基因与视黄醇代谢和化学致癌作用等显著相关,差异miRNAs靶基因与癌症、醛固酮的合成和分泌的途径相关。(3)Cytoscape MCODE对PPI网络提取的4个子网络模块(得分R≥5.0)。分别对4个模块进行GO-BP富集分析,这些模块主要富集于细胞周期及有丝分裂等生物学进程。(4)根据dif-miRNA-dif-mRNA和dif-miRNAdif-lncRNA的相互调控关系,使用Cytoscape构建ceRNA网络。(5)筛选TCGA LIHC中差异表达的RNAs与测序分析的差异RNAs进行整合分析,结果筛选出805个dif-mRNAs、6个dif-lncRNAs和7个dif-miRNAs。(6)qRT-PCR验证7个difmiRNAs,与初步筛选结果一致。在Kaplan-Meier数据库中对这7个miRNA进行生存分析,has-miR-1269a、has-miR-421和has-miR-190b高表达的HCC患者的总生存率明显低于低表达的患者。根据qRT-PCR结果建立的预后模型,has-miR-1269a、hasmiR-421的高表达与总生存期较短有关。结论:本研究基于全转录组测序数据构建了ceRNA网络,对7个差异表达的miRNAs进行分析,Kaplan-Meier数据库以及临床标本验证发现Hsa-miR-1269a,Hsa-miR-421与预后显著相关。提示,Hsa-miR-1269a,Hsa-miR-421可以作为预测HCC预后以及指导HCC治疗的潜在靶标。

关键词： HCC 高通量测序预后 ceRNA 生物标记物

库车坳陷博孜—大北地区白垩系沉积储层测井精细描述

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库车坳陷博孜—大北地区白垩系沉积储层测井精细描述

作者：解宇强中国石油大学(北京)

学位级别：硕士

库车坳陷克拉苏构造带博孜-大北地区白垩系巴什基奇克组（Kbs）、巴西改组（Kbx）已探明的天然气地质储量超万亿立方米。储层质量评价与预测成为油气勘探开发的关键,库车坳陷白垩系储层沉积微相对有利储层形成与发育控制作用明显,因此... 详细信息

库车坳陷克拉苏构造带博孜-大北地区白垩系巴什基奇克组（Kbs）、巴西改组（Kbx）已探明的天然气地质储量超万亿立方米。储层质量评价与预测成为油气勘探开发的关键,库车坳陷白垩系储层沉积微相对有利储层形成与发育控制作用明显,因此需要对研究区白垩系沉积相展开深入研究,建立不同沉积微相测井识别方法,并阐明沉积微相对优质储层发育的控制作用。本论文综合地质和测井资料,采用“常规测井+成像测井+岩心+粒度概率累计曲线+地质模式”方法,建立了典型沉积微相测井识别图版库。博孜-大北地区白垩系共发育三种沉积体系,五种沉积微相,分别为:巴什基奇克组二段（Kbs）发育辫状河三角洲沉积体系、巴什基奇克组三段（Kbs）发育扇三角洲沉积体系、巴西改组（Kbx）发育湖泊三角洲沉积体系。主要沉积微相包括:水下分流河道微相、水下分流河道间微相、河口坝微相、席状砂微相和滨浅湖微相。通过成像测井恢复了研究区白垩系古水流方向,结果表明研究区白垩系呈现以自北向南的南天山物源供给方向为主,西南部的温宿凸起为辅的双物源供给格局。通过对沉积微相与储层物性、成岩作用和裂缝发育之间的对应关系研究表明:水下分流河道微相与河口坝微相砂体物性最好,席状砂微相次之,滨浅湖微相和水下分流河道间微相最差。水下分流河道微相和河口坝微相水动力强,形成的砂体较纯,颗粒粒度粗、分选好,抗压实能力强,因此在埋藏过程中更容易保存原生粒间孔。同时,在后期易于发生溶蚀,形成次生溶孔。然而,水下分流河道砂体底部常与水下分流河道间微相毗邻,容易发生强烈碳酸岩胶结,导致储层物性变差,主要是由于水下分流河道间微相沉积的泥岩中Ca、Mg在成岩演化过程中易迁移到邻近的砂体中从而发生碳酸岩胶结。薄层（层厚≈3米）的水下分流河道微相砂体常发育网状裂缝,对储层物性的改善效果最佳,在厚层砂体（层厚>10米）的顶部和底部常发育高角度裂缝、中部常发育低角度裂缝。沉积微相、成岩作用和裂缝与有利储层发育的耦合关系表明,高能水动力环境砂体经历中等压实和弱胶结组合的成岩作用,且裂缝发育叠加,往往形成有利储层。通过对沉积微相的研究以及沉积微相约束下成岩作用强度及裂缝发育特征评价可实现库车坳陷白垩系致密储层综合评价及为有利储层预测提供指导。研究成果可为白垩系沉积储层的精细描述与开发方案的设计提供理论指导与技术支撑。

关键词：白垩系博孜-大北地区沉积微相测井评价有利储层