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籽晶诱导对铸造类单晶硅锭中位错和晶界缺陷的影响

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籽晶诱导对铸造类单晶硅锭中位错和晶界缺陷的影响

作者：董莲大连理工大学

学位级别：硕士

铸造类单晶硅具有晶界少和成本低的优点,目前已成为光伏用硅铸锭的研究热点。制备类单晶硅铸锭需要采用籽晶辅助生长,然而籽晶拼接的方式对铸锭内部缺陷的产生和分布具有较大影响,研究表明,籽晶拼接处会产生大量的位错,且沿着生长方向... 详细信息

铸造类单晶硅具有晶界少和成本低的优点,目前已成为光伏用硅铸锭的研究热点。制备类单晶硅铸锭需要采用籽晶辅助生长,然而籽晶拼接的方式对铸锭内部缺陷的产生和分布具有较大影响,研究表明,籽晶拼接处会产生大量的位错,且沿着生长方向增殖扩散,严重降低了铸造类单晶硅的出成率以及电池的光电转换效率。因此本文通过分析不同籽晶拼接方式下铸锭的微观组织,获得了合适的类单晶硅制备工艺,为低缺陷类单晶硅铸锭的大规模制备提供了技术支撑。本论文系统研究了不同籽晶拼接方式下铸锭晶体形貌及缺陷产生和增殖情况,并对其机理进行了揭示,最后提出通过分步诱导凝固的方法来降低类单晶硅中的位错密度。本文主要获得以下结论:（1）采用单籽晶和多籽晶拼接进行外延生长时,光滑的外延生长面均不会成为位错的发源地。但若热场不稳定,半熔生长面的局部位置呈现锯齿形甚至尖角,这些位置容易引起应力集中从而产生大量的位错。因此在制备铸造类单晶硅时,需要尽可能改善炉体环境,保持稳定的热场分布。（2）硅料熔化后会填充籽晶拼接缝,并按照从籽晶与熔体的固液界面处到熔体轴向中心处凝固生长。研究发现拼接缝宽度越大（大于100μm）,拼接缝内熔体温度梯度越大,过冷度越大,此时会在拼接缝内形成大量细晶,充满整个拼接缝区域。在铸锭凝固过程中,拼接缝内的晶粒会持续长大,在外延界面以上形成更多其它取向差的晶粒,这些多晶会侵占外延晶粒生长的区域,大大降低铸造类单晶硅的产率。而在小尺寸拼接缝内（100μm以内）,流入后的熔体其温度梯度相对较小,过冷度也相对较低,因此生成的晶核数量少,最终拼接缝内只保留了一两个尺寸较大的晶粒。因此,相邻籽晶拼接缝宽度应该控制在100μm以内。（3）由于小角度晶界的能量会随着取向差的增加而增加,而晶粒在生长过程中晶界能量具有自发降低的趋势,因此切割籽晶造成的取向偏差会引起晶界能量上的增益,导致籽晶间取向差为0°和5°的铸锭中分布有高密度位错,而以大角度取向差拼接的籽晶所形成的晶界,其能量与取向差无关,只能通过晶界的平直化来降低晶界总能量,因此取向差角度为30°和45°的铸锭其外延晶粒间只有一条晶界,缺陷数目少。工业生产中可以使用大角度晶界取向差来拼接籽晶,生长缺陷数量低的铸造类单晶硅锭。（4）采用“熔炼—凝固—保温—凝固”的工艺实现了铸造类单晶硅锭中位错分布的调控。在保温期间,热量不断向初始硅凝固层进行传递,释放了一部分残余应力,降低了位错数量,而且初始硅凝层作为籽晶不会存在拼接缝,所以在后续的外延生长过程,外延晶粒之间没有其他取向的晶粒。因此,通过分步诱导法制备的铸锭其位错和晶界缺陷数目少。

关键词：铸造类单晶硅籽晶位错晶界

基于SINOVATION的风电轮毂铸造工艺CAD系统的开发

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基于SINOVATION的风电轮毂铸造工艺CAD系统的开发

作者：董绪山东大学

学位级别：硕士

铸造工艺设计的成功与否影响着铸件的成品率、质量、生产成本等各个方面。传统的铸造工艺设计方案的确定大多依赖于生产实践经验,比较难以精确计算。检测工艺设计的成功与否常常需要多次试铸,一旦工艺设计不合理往往需要耗费大量的人力... 详细信息

铸造工艺设计的成功与否影响着铸件的成品率、质量、生产成本等各个方面。传统的铸造工艺设计方案的确定大多依赖于生产实践经验,比较难以精确计算。检测工艺设计的成功与否常常需要多次试铸,一旦工艺设计不合理往往需要耗费大量的人力物力。随着计算机软件开发与硬件机能近几年的飞速发展,越来越多的企业和相关研究部门开始重视铸造相关计算机工艺设计软件的开发。最近几年铸造工艺计算机辅助设计(CAD)软件已经取得了瞩目的发展,但是相关开发工作大多是依赖于国外大型CAD软件开发商提供的二次开发包进行的二次开发。二次开发包提供的API接口功能有限并且不支持开发人员自主添加新的函数接口,因此此类软件在功能上往往有很多局限性并且难以升级和维护。本文借助山大华天软件公司的SINOVATION软件的源代码,创建了球墨铸铁风电轮毂件的铸造工艺开发包,并且设计了针对不同类型风电轮毂件的铸造工艺CAD命令,提高了工艺设计人员的工作效率,降低了风电轮穀件的研发成本。本文借助SINOVATION软件开发平台,首先整合工艺手册中通用的铸造工艺设计方法与市场上常见的风电轮毂铸造工艺,设计了新的针对风电轮毂的工艺算法,确定了系统的框架;之后利用SINOVATION软件基盘中的XML语言解析方式,并且充分考虑工艺设计人员的工作习惯,编写并设计了友好的用户界面;选择Microsoft Visual Studio 2013为开发工具,编写C++语言实现了与界面之间的数据交互,并完成了工艺计算与三维建模的功能:最后通过编译、链接、调试,完成了包括工艺参数初始化、浇注系统设计、浇口杯设计、铸件模数计算、冒口设计、冷铁设计与排布以及相关附属功能等多个子命令的开发工作。其中铸造工艺初始化命令能够将初次导入软件的铸件图按照实际生产中的位置进行摆放,使铸件的中轴线与软件的世界坐标的Z轴重合,这种摆放方式更符合实际生产中铸件在砂型中的摆放位置,方便工艺人员后续的设计工作并且有利于相关工艺部件三维图的绘制;此外该命令能够将工艺设计中需要多次使用的铸件参数保存至硬盘,避免了工艺设计人员多次输入相同工艺参数的冗繁工作。浇注系统设计采用大孔出流原理计算浇道,支持多种不同类型浇道设计且基本涵盖了市场上主流的浇注系统设计方案;并且设计了全新的浇注系统过滤部分的尺寸计算方法,能帮助用户快速的选择过滤板型号、尺寸并设计出合理的挡渣措施。模数计算命令涵盖铸件整体和局部区域的模数计算功能,并且支持将模数相关参数继承给其他工艺设计命令使用,用户无需进行重复运算。冒口设计在收缩模数法的基础上优化了冒口体积的算法,借助计算机强大的计算功能将浇道的补缩作用考虑进去,并且结合球墨铸铁自补缩的特性与均衡凝固原理精确地计算出冒口体积。冷铁设计功能针对风电轮毂的外形特征设计了专有的冷铁尺寸与排布的计算方法,能够合理有效的设计冷铁工艺。本文开发的风电轮毂铸造工艺CAD系统能够设计出满足生产需要的工艺,设计人员可以借助该系统快速生成市场上已有的风电轮毂铸造工艺方案也可以通过命令内部的工艺计算功能设计出全新的铸造工艺。整个系统的命令之间有完整的数据交互网络,避免了工艺设计人员在使用该命令的过程中频繁输入或计算相同的工艺参数,缩短了工艺研发时间。此外本文借助SINOVATION软件的XML语言并充分考虑工艺设计人员的工作习惯,设计了友好的人机交互界面。最后是从软件源代码的层面直接编写、丰富API库函数,便于后续开发人员对软件的升级与优化。

关键词：风电轮毂球墨铸铁铸造工艺软件开发计算机辅助设计

盐穗木复方提取液对奶牛乳源性金黄色葡萄球菌的抑菌效果分析

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盐穗木复方提取液对奶牛乳源性金黄色葡萄球菌的抑菌效果分析

作者：董贵塔里木大学

学位级别：硕士

盐穗木生长于荒漠和盐碱地上,具有良好的生态学价值和一定的抑菌作用。为进一步开发和利用盐穗木的应用价值,探究其在临床中的治疗效果。本试验通过分离鉴定患乳腺炎的奶牛乳液中的金黄色葡萄球菌,使用盐穗木及其复方提取液对金黄色葡... 详细信息

盐穗木生长于荒漠和盐碱地上,具有良好的生态学价值和一定的抑菌作用。为进一步开发和利用盐穗木的应用价值,探究其在临床中的治疗效果。本试验通过分离鉴定患乳腺炎的奶牛乳液中的金黄色葡萄球菌,使用盐穗木及其复方提取液对金黄色葡萄球菌进行体外抑菌试验,验证盐穗木复方的抑菌效果;通过试验观察盐穗木复方的刺激性和抗炎效果;通过动物感染试验,评价盐穗木复方对感染金黄色葡萄球菌的昆明小鼠的临床治疗效果,研究结果为盐穗木药物制剂的开发提供了基础数据参考。1.收集新疆阿拉尔市某规模化奶牛场73份患乳腺炎的奶牛乳液样本,采用细菌常规分离鉴定、革兰染色、生化试验等方法鉴定出疑似金黄色葡萄球菌32株。采用PCR扩增16S r RNA和nuc基因,通过序列比对分析,鉴定32株均为金黄色葡萄球菌。基于10种金黄色葡萄球菌毒力因子位点,采用PCR法,对32株金黄葡萄球菌进行毒力基因检测,发现同菌株间携带的毒力基因种类有所不同:其中携带tsst基因的菌株最多,占34.3%(11/32);pvl基因最少,为3.1%(1/32)。选取携带不同毒力基因的分离株分别感染小鼠,其结果显示,携带毒力基因类型越多的分离株致病力也越强。2.分别选用盐穗木、蒲公英、白头翁及其组成的复方,采用醇提的方法获取其提取液,提取液浓度均为1 g/m L。根据盐穗木在复方中所占比例的不同将盐穗木复方分为3组:复方I(盐穗木占比30%)、复方II(40%)、复方Ⅲ(50%)。通过肉汤稀释法,进行体外抑菌试验,初步测得复方中,复方Ⅰ和复方Ⅲ对金黄色葡萄球菌的MIC为300 mg/m L;复方II的MIC为250 mg/m L,MBC为250 mg/m L,复方II的抑菌效果最好。对复方II进行的药效稳定性试验结果显示,复方II的抑菌效果不受高压及p H于(6.0～7.5)之间变化的影响,可将盐穗木复方经过高压处理后用于临床治疗。3.将昆明系小鼠分为4组,其中3组试验组中的每只小鼠分别灌胃0.4 m L(1 g/m L)的盐穗木复方药剂,对照组灌胃0.4 m L生理盐水。通过连续给药的方式观察盐穗木复方药剂对小鼠胃、肠黏膜的刺激性,结果发现试验第1组和第2组中小鼠胃、肠壁黏膜与对照组中小鼠胃、肠壁黏膜并无差异,第3组的胃黏膜表面有轻微充血。通过二甲苯诱导小鼠炎症反应的试验中发现,盐穗木复方组、盐穗木组、阿司匹林组及生理盐水组对小鼠耳廓肿胀率分别59.22±10.42%,65.45±10.45%,55.71±11.71%,73.60±10.37%;将本试验分离得到的强致病性的分离株感染小鼠后,再通过比较盐穗木复方组和对照组对小鼠的治愈率发现,盐穗木复方组及抗生素组的治愈率分别为80%和90%,结果证明盐穗木复方对小鼠胃、肠黏膜无刺激性;盐穗木复方具有较好的抗炎作用;盐穗木复方在治疗小鼠感染金黄色葡萄球菌时也具有良好的治疗效果。上述结果表明,由盐穗木、蒲公英、白头翁组成的复方提取液的抑菌效果要优于盐穗木及其它单味中药,且盐穗木复方无刺激性、具有较好的抗炎效果、对感染金黄色葡萄球菌的昆明小鼠具有一定的疗效。研究结果为盐穗木复方制剂的临床开发和应用提供了基础参考资料。

关键词：盐穗木复方金黄色葡萄球菌乳腺炎药敏试验抗炎

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基于组合方法的短期电力负荷预测

基于组合方法的短期电力负荷预测

作者：董高霞郑州大学

学位级别：硕士

随着经济的迅速发展,电力成为越来越重要的生产要素,电力负荷预测对于保证电力系统安全稳定的运行、电网的合理规划和调度起到了越来越重要的作用。如何提高电力负荷预测的精度是急需解决的重要问题。近些年来,众多研究专家对此研究和... 详细信息

随着经济的迅速发展,电力成为越来越重要的生产要素,电力负荷预测对于保证电力系统安全稳定的运行、电网的合理规划和调度起到了越来越重要的作用。如何提高电力负荷预测的精度是急需解决的重要问题。近些年来,众多研究专家对此研究和发展了多种预测方法,但是由于短期电力负荷预测受到众多因素影响,变化规律极其的复杂,非线性极强,到现在止也没有一种公认的最合适的预测方法。但单一的预测方法已经不能满足其对预测精度的要求,为了提高短期电力负荷的预测精度,本文中提出一种由过程神经网络模型、粒子群优化方法和经验模态分解法相结合的预测方法。原始数据的预处理对电力负荷预测的精度有很大的影响,而短期电力负荷预测受到众多因素的影响,规律复杂,非线性强,给数据的建模增加了很大的难度,因此,本文采用经验模态分解法对原始数据进行处理。将原始序列进行经验模态分解（EMD）为若十个独立的子序列（IMF）,这样每个子序列的规律性强、周期性较稳定,为后期的预测提高了可执行度。针对传统的神经元网络对于大样本学习和泛化问题的处理能力不足,不能反应输入过程对于时间的累积效应,难以满足工程实际中对实时性的要求,本文建立过程神经元网络,使得系统能直接处理过程式的数据,并采用正交基函数展开的方法解决了泛函逼近的问题以及大样本的泛化问题。对于过程神经元网络模型中拓扑结构繁杂,需要调节的参数较多等缺陷,本文采用粒子群优化算法来优化过程神经元网络的模型结构。粒子群优化算法是一种全局优化算法,该算法具有适应性强、简洁、易于执行、鲁棒性好等特点,已被成功应用于很多研究领域,而且有深刻的智能背景。但基本粒子群优化算法在实际应用中容易早熟、寻优能力较差并且后期算法的收敛速度较慢。为此,本文设计了加速扰动粒子群（ADPSO）,在粒子的学习过程中放弃了向自身最好经验学习的方面,而只依赖于群体最优值,同时增加扰动因子以保持粒子的多样性避免局部极值。测试结果表明改进的粒子群方法优化过程神经元网络的各项参数效果较好。最后,以郑州某地区的历史负荷数据对组合预测模型进行预测验证,仿真结果表明本文提出的组合的短期电力负荷测方法比传统电力负荷预测的精度有明显提高,时效性也有了很明显改善,这能有效助于提高电力系统的效率使得电力系统的预测更加合理、可行。

关键词：短期电力负荷预测经验模态分解过程神经元网络粒子群优化

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大连市外资物业管理企业培训管理研究

大连市外资物业管理企业培训管理研究

作者：董镭东北师范大学

学位级别：硕士

物业管理行业作为典型的服务性行业,就促进特大城市经济增长模式转型、构建服务经济为核心的产业结构模式而言,其作用十分显著,十分重要。社会及行业的发展进步要求物业管理企业借助高效率的培训活动来对劳动生产率进行提升,着力培训不... 详细信息

物业管理行业作为典型的服务性行业,就促进特大城市经济增长模式转型、构建服务经济为核心的产业结构模式而言,其作用十分显著,十分重要。社会及行业的发展进步要求物业管理企业借助高效率的培训活动来对劳动生产率进行提升,着力培训不同级别的职工,帮助企业构建人才队伍来满足时代需求。目前市场十分缺乏高水平人才,行业的人才素质水平相对较低,因此要想对行业人才结构模式进行改善完备,就一定要引入高效率的人才教育培训,这也是行业健康可持续发展的核心关键。培训作为人力资源管理工作的重要环节,企业也在逐渐将关注焦点集中到此。企业保持竞争优势的关键在于企业人力资源,就企业绩效而言,高效率人力资本管理是其核心决定要素。特别是目前世界经济日益全球化、国际化,企业要想在日渐白炙化竞争的市场中取胜就一定要进行引入实行高效率教育培训工作、构建高效率教育培训体系。建立完备的教育培训评估机制。目前,我国的物业管理企业就规模来说其都隶属于中小型,在职人员的专业素质也不尽相同,千差万别,知识结构层次相对较低,整体修养素质较低,缺乏专业的物业管理人员,这对物业管理企业的健康可持续发展造成了一定的困扰阻碍。本篇论文的研究对象是物业管理企业,对大连市外资物业管理企业培训现状及存在的问题开展调查研究,研究显示大连市的外资物业管理企业培训中的问题较多,诸如:没有将教育培训需求分析真正落实到实际中、不完善的培训制度、缺少教育培训监控措施、教育培训评估停留于形式,教育培训缺乏完善的激励制度措施,上述问题产生的原因是培训文化的缺失、培训组织的低效率和培训管理流程的不健全,笔者针对这些提出了有针对性、可操作的对策建议。此研究在理论层面上,立足企业人力资本理论、培训管理理论和学习型组织理论,借鉴了近些年社会学、心理学、教育学研究领域中出现的有代表性的新兴理论,丰富和完善了企业培训管理的理论基础。在实践层面,为改进和提高物业企业培训管理供了参考依据。

关键词：物业管理企业培训人力资源管理

钢琴伴奏在初中音乐教学中的应用研究 ——以曲师大附属实验学校为例

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钢琴伴奏在初中音乐教学中的应用研究 ——以曲师大附属实验学校...

作者：董幸曲阜师范大学

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音乐教学中的钢琴伴奏,不仅仅是一门音乐表演艺术,更重要的是发挥其作为教学工具的独特价值。它所具有的丰富多变的音乐表现力,能与声乐、舞蹈、器乐、音乐剧等其他艺术形式结合,表达出对音乐作品的个性化思考,传递给学生深刻的音乐感受... 详细信息

音乐教学中的钢琴伴奏,不仅仅是一门音乐表演艺术,更重要的是发挥其作为教学工具的独特价值。它所具有的丰富多变的音乐表现力,能与声乐、舞蹈、器乐、音乐剧等其他艺术形式结合,表达出对音乐作品的个性化思考,传递给学生深刻的音乐感受,从而引起学生的情感共鸣。如果教师能够将钢琴伴奏巧妙的运用在教学中,积极引导学生亲身参与艺术实践,这对于培养学生的音乐核心素养有着积极的推动作用。笔者在曲师大附属实验学校(初中部)进行教学实践,立足教师现有的钢琴伴奏水平不一和学生真实的课堂学习情况,在音乐教学层面探究“钢琴伴奏”在初中音乐课堂中的应用。首先,以“钢琴伴奏”的概念和发展为理论基础,分析了钢琴伴奏在初中音乐教学中的应用优势;其次,结合曲师大附属实验学校(初中部)现用教材,通过教师访谈的方式对曲师大附属实验学校(初中部)音乐课中“钢琴伴奏”的应用情况进行了解,并对该校初中阶段学生的音乐学习情况进行了问卷调查,分析出“钢琴伴奏”在音乐教学中的现存问题;再次,基于艺术新课标,以学生核心素养的培养为主线,围绕艺术实践和任务驱动,从“欣赏”“表现”和“联系”着手,设计了钢琴伴奏的应用策略及音乐综合课案例,将应用策略在实际教学中展开实施;最后,针对如何将“钢琴伴奏”应用于初中音乐课提出了切实有效的建议。全文旨在探讨如何在教师现有钢琴演奏基础上,将钢琴伴奏应用在教学中,物尽其用,充分的发挥其审美价值。改变传统教学中学生枯燥乏味的离身学习,借助钢琴伴奏之力,调动学生的多感官联系,鼓励学生深入参与听、唱、动、奏、创、编、演等各种音乐实践活动中,引导学生学习音乐,掌握音乐的基本知识和技能,为丰富学生音乐体验,唤醒学生的听觉审美奠定基础。

关键词：钢琴伴奏初中音乐教学应用研究

基于HSK动态作文语料库的连词“而”的误用偏误研究

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基于HSK动态作文语料库的连词“而”的误用偏误研究

作者：董金娟安阳师范学院

学位级别：硕士

连词是用来连接词、短语、分句或句子,表示二者之间的相互关系的虚词,可分为组合连词与关联连词两类,不同的连词有不同的连接作用。现代汉语里的“而”可以是组合连词,连接两个或几个谓词性成分,表示联合、偏正、主谓等句法关系;也可以... 详细信息

连词是用来连接词、短语、分句或句子,表示二者之间的相互关系的虚词,可分为组合连词与关联连词两类,不同的连词有不同的连接作用。现代汉语里的“而”可以是组合连词,连接两个或几个谓词性成分,表示联合、偏正、主谓等句法关系;也可以是关联连词,通常置于后分句的开头用来表示分句与分句间的并列、转折、承接、递进、假设关系等。“而”虽属《汉语水平词汇与汉字等级大纲》中的乙级词,但在《高等学校外国留学生汉语长期进修教学大纲》中又被列入初等阶段词汇,是学习者汉语学习过程中接触较早且书面使用中又绕不开的一个高频词。由于其使用频率高、适用范围广,加之多样化的语法关系意义表达,学习者在学习和交际过程中难免会出现句法与语义对应关系错位的现象,这主要表现在结构的输入与输出这两个不同的习得阶段,容易成为教学与学习的重点和难点。我们在HSK动态作文语料库中检索出“而”的偏误语料共623条,其中缺漏偏误与误用偏误语料较多,都属于留学生在习得“而”这一连词时的典型偏误类型。本文选取其中的误用偏误现象作为切入点,剔除7条不在研究范围之内的语料,将符合要求的246条语料作为研究范围,首先从“而”连接词语和分句的功能入手,对其使用规则进行描述,为不同类型偏误提供界定标准与分析依据。然后从连词“而”连接的两个功能对等的成分出发,对成分的性质、所构成的联合短语的功能以及分句间关系的角度入手,对这一连词的误用偏误进行考察。从句法、语义、语用三个平面对连词“而”的误用偏误进行分类,给出相应的纠偏措施,找出不同类别偏误存在的原因,在此基础上进一步提出相应的教学策略,以期能在同类问题的处理上提供一个可资借鉴的研究个案。

关键词：连词 “而” HSK动态作文语料库偏误分析

何首乌中二苯乙烯苷对高血压大鼠血管内皮功能及血压的影响和机制

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何首乌中二苯乙烯苷对高血压大鼠血管内皮功能及血压的影响和机制

作者：董芊芊中国人民解放军空军军医大学

学位级别：硕士

研究背景高血压是发病率最高的慢病,在我国,其18岁及以上成年人的发病率高达25.2%,也是包括脑卒中、心肌梗死、心力衰竭在内等心脑血管疾病的最主要危险因素之一。遗传和环境两方面因素共同参与高血压的发生。血管内皮功能对维持正常血... 详细信息

研究背景高血压是发病率最高的慢病,在我国,其18岁及以上成年人的发病率高达25.2%,也是包括脑卒中、心肌梗死、心力衰竭在内等心脑血管疾病的最主要危险因素之一。遗传和环境两方面因素共同参与高血压的发生。血管内皮功能对维持正常血液循环具有重要意义,内皮损伤、血脂异常、高血糖、长期应激状态及吸烟等刺激可诱导血管内皮功能障碍,进而引发相关疾病。血管内皮功能障碍是高血压等各种心脑血管病的共同始动环节,然而迄今其诱发机制尚未完全阐明。自噬是真核细胞一种进化保守的分解代谢过程,指双层膜包裹部分胞质和细胞内需降解的成分形成自噬小体,后者与溶酶体融合,然后形成自噬溶酶体并进一步降解其所包裹的内容物,以实现细胞代谢的需要和细胞器的更新。已证实血管内皮细胞存在自噬现象,而自噬在高血压发生以及肥胖相关高血压的发展进程中的作用尚不清楚。何首乌是我国著名传统中药,有补精血、补肝肾、强筋骨之效。近年来何首乌对心脑血管疾病的保护作用亦受到国内外研究者广泛关注。但由于何首乌所含的成分复杂,难以清晰阐明其作用机制和具体靶点。随着天然药物化学和中药药理学的研究发展,何首乌的主要生物活性成分——2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(可简称为二苯乙烯苷,2,3,5,4’-Tetrahydroxystilbene-2-O-β-D-Glucoside,TSG),已被报道具有抗氧化、抗衰老、降血脂和增加血流量等的药理活性,然而其对高血压的血管内皮功能和动脉血压有何影响尚不清楚。研究目的本研究旨在探讨自噬在肥胖相关和自发性高血压大鼠的血管内皮功能障碍中发挥的作用及其机制,并进一步研究何首乌及其主成分二苯乙烯苷是否对其血管内皮功能和血压有影响及其机制。研究方法1)自发性高血压大鼠(SHR)、肥胖(ZDF)大鼠和高脂饮食(HFD)小鼠无创血压的测量:清醒、安静状态下,用Softron BP-2010A大小鼠无创血压仪测量给何首乌提取物(PME,250 mg/kg/day)、TSG(100 mg/kg/day)、大黄素(emodin,80 mg/kg/day)灌胃2周处理前后的大、小鼠尾动脉收缩压(SBP),测量前大鼠在39℃加热套中适应10 min左右,连续测量3次,计算平均值。2)血糖水平测定及腹腔注射葡萄糖耐受性测试(IPGTT):大鼠禁食16 h后进行IPGTT实验。0.5 g/mL的葡萄糖溶液按2 g/kg剂量腹腔注射入大鼠,剪尾尖取血,血糖仪测定全血血糖水平。测定时间点为注射葡萄糖后0,30,60,90,120 min。3)肠系膜微动脉的分离及动脉环功能检测:分离肠系膜微动脉,置于0℃预冷的生理盐溶液(PSS)中,分离血管周围脂肪及结缔组织,然后截取长约1mm的血管段。持续通入含95%O和5%CO混合气并维持37℃,基础张力2 mN平衡60 min。高钾(60 mM)溶液使血管预收缩,弃用活性差的血管。苯肾上腺素(PE)引起血管收缩,平台后浓度累加法加入乙酰胆碱(ACh)以观察内皮依赖性舒张反应,或硝普钠(SNP)以观察非内皮依赖性舒张反应;PE的预收缩幅度为100%,舒张率(%)=药物引发的舒张张力/PE的预收缩张力×100%,从而评定血管内皮的功能。4)主动脉的分离及动脉环功能检测:分离主动脉,在0℃预冷的PSS液中小心地清除主动脉周围的脂肪和结缔组织,剪成长约3 mm的主动脉环。持续通入含95%O和5%CO混合气并维持37℃,钢丝另一端连接张力传感器。动脉环的基础张力1 g平衡60 min。高钾(60 mM)溶液使血管预收缩,苯肾上腺素(PE)引起血管收缩,平台后浓度累加法加入ACh观察血管内皮依赖性舒张反应,或SNP(累积浓度为10--10 mol/L)以观察血管非内皮依赖性舒张反应。依照血管的舒张程度,评定血管内皮功能。5)体外模拟肥胖状态培养血管内皮细胞:用棕榈酸钠模拟肥胖状态培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs),无血清饥饿处理6 h模拟细胞过度自噬状态,并给予TSG、IGF-1和rapamycin处理细胞。6)siRNA转染血管内皮细胞:HUVECs在无抗生素的培养基培养24 h后,分别加入Akt或mTOR的siRNA和阴性对照siRNA,利用Lipofectamine RNAiMAX进行转染。转染5 h后换液,继续培养48 h,收集细胞提取蛋白。7)自噬LC3双标腺病毒Ad-mRFP–GFP–LC3转染血管内皮细胞:以细胞密度10培养HUVECs于共聚焦培养皿中,以最适感染MOI=50转染腺病毒,2 h后换培养液,感染36 h后给予TSG孵育,加药结束后使用激光共聚焦显微镜观察自噬流结果。8)蛋白免疫印迹:蛋白样品行SDS-PAGE电泳,后用湿转法恒流将凝胶转移到PVDF膜。放入脱脂奶粉室温封闭,用对应的一抗和二抗孵育PVDF膜,

关键词：何首乌二苯乙烯苷高血压肥胖血管内皮功能障碍自噬