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作者：脱广鑫甘肃中医药大学

学位级别：硕士

背景与目的食管癌的发病率排名全球恶性肿瘤第七位,死亡率排名第六位。每年全球食管癌新增病例将近一半来自于我国,是我国癌症死亡的五大主要原因之一。目前,食管癌以手术治疗为主,结合放疗、化疗等多学科综合治疗,但其预后不佳,而且... 详细信息

背景与目的食管癌的发病率排名全球恶性肿瘤第七位,死亡率排名第六位。每年全球食管癌新增病例将近一半来自于我国,是我国癌症死亡的五大主要原因之一。目前,食管癌以手术治疗为主,结合放疗、化疗等多学科综合治疗,但其预后不佳,而且放疗、化疗还可能破坏自身免疫系统,从而诱导免疫耐受。因此,探究对机体损伤小且高效的食管癌治疗手段具有极为深远的临床意义。目前研究发现,食管癌的发生发展及预后与树突状细胞密切相关,肿瘤患者体内的树突状细胞由于肿瘤微环境的影响,其数量缺乏,且大部分功能异常,从而严重影响了自身抗肿瘤免疫功能,肿瘤微环境中存在多种免疫抑制因子,其中IL-10的免疫抑制作用最强。因此,近年来有关肿瘤免疫治疗的研究主要集中在寻找并优化抗肿瘤疫苗,以及逆转机体的免疫抑制状态,克服免疫抑制因子对疫苗的抑制作用。本研究应用小干扰RNA抑制IL-10受体表达的树突状细胞进行动物体内实验,首先,应用荧光染料CFSE标记DCs,观察其在局部淋巴结的迁移能力;然后,应用TUNEL染色技术、流式细胞术等方法检测注射不同瘤苗后肿瘤细胞原位凋亡情况;最后,比较皮下、淋巴内以及静脉注射三种不同途径回输DCs瘤苗对移植瘤细胞凋亡情况的影响,以及疗效差异。初步研究IL-10R-si RNA DCs抗食管癌免疫反应的作用和机制,为临床提高DCs瘤苗的治疗效果提供实验基础和理论依据,为肿瘤免疫疫苗临床回输方式提供新的思路。总之,本研究以树突状细胞表面IL-10受体作为研究靶点,主要运用荧光标记示踪、TUNEL染色、流式细胞术及si RNA基因沉默技术研究IL-10R-si RNA DCs抗食管癌免疫反应中的作用和机制,共分为3部分。第一部分:IL-10R-si RNA DCs在局部淋巴结内的迁移能力的研究方法 1.采用人食管癌细胞TE-11接种于裸鼠右侧腋窝皮下,进行裸鼠移植瘤模型构建,并随机分为2组;2.采用荧光示踪法分别向2组小鼠足垫注射等量的CFSE标记的IL-10R-si RNA DCs及普通的DCs,观察DCs在动物体内区域淋巴结迁移的能力。结果 1.应用TE-11细胞（人食管癌细胞）接种于裸鼠皮下,可成功制备移植瘤模型;***-10R-si RNA DCs在腋窝部引流区淋巴结中聚集增多,其迁移能力明显增强。第二部分:IL-10R-si RNA DCs对小鼠体内移植瘤抑制作用的研究方法 1.采用TUNEL染色技术检测注射不同瘤苗后肿瘤细胞原位凋亡情况;2.采用流式细胞技术和Expo 32 ADCs软件分析移植瘤凋亡率;3.采用Multicycle AV软件拟合分析移植瘤细胞凋亡过程中DNA周期变化;4.采用流式细胞技术检测移植瘤组织中凋亡相关蛋白Fas和Caspase-3表达情况。结果 ***-10R-si RNA DCs可以显著降低肿瘤细胞增殖指数,提高肿瘤细胞凋亡率;***-10R-si RNA DCs可使移植瘤细胞S、M期降低,抑制移植瘤细胞的有丝分裂,增加肿瘤细胞原位凋亡;***-10R-si RNA DCs可以显著提高Fas和Caspase-3蛋白表达,促进肿瘤细胞凋亡;***-10R-si RNA DCs在体内对食管癌具有强大的细胞毒性作用。第三部分:IL-10R-si RNA DCs最佳回输方式的研究方法采用皮下、淋巴内以及静脉注射三种途径回输IL-10R-si RNA DCs,比较三种回输方式对疫苗发挥抗肿瘤免疫反应的影响,以及疗效差异。结果 1.与其他两种回输途径相比,淋巴内回输瘤苗可显著缩小移植瘤体积和重量,明显提高肿瘤抑制率;2.与其他两种回输途径相比,淋巴内回输瘤苗可显著降低移植瘤细胞增殖指数,明显提高细胞凋亡率;3.与其他两种回输途径相比,淋巴内回输瘤苗可显著增加肿瘤凋亡相关的蛋白Fas和Caspase-3的表达,促进细胞原位凋亡;4.与其他两种回输途径相比,淋巴内回输瘤苗可显著降低移植瘤细胞DNA周期中S、M期,移植瘤细胞有丝分裂明显受抑制;5.与其他两种回输途径相比,淋巴内回输瘤苗可以更好的发挥疫苗抗肿瘤免疫反应。结论 ***-10R-si RNA DCs解除了IL-10对DCs的抑制作用,增强了迁移能力,为DCs有效发挥抗肿瘤免疫反应创造了有利的前提条件;***-10R-si RNA DCs通过阻断IL-10抑制途径,提高了DCs抗肿瘤免疫反应,促进肿瘤细胞凋亡,为临床提高DCs瘤苗的治疗效果提供实验基础和理论依据;3.淋巴内途径回输IL-10R-si RNA DCs可有效保护DCs免于破坏,进而产生更强的抗肿瘤免疫作用,为肿瘤免疫疫苗临床回输方式提供新的思路。

关键词：食管癌树突状细胞 IL-10 细胞凋亡回输途径

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红系祖细胞诱导非小细胞肺癌进展作用机制探讨

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中华肿瘤防治杂志 2020年第20期27卷 1629-1634页

作者：金刚脱广鑫朱自江甘肃省人民医院胸外二科甘肃兰州730000 甘肃中医药大学临床医学院甘肃兰州730000

目的免疫治疗只对部分人群有效,寻找新的免疫治疗靶点成为研究重点。本研究探讨红系祖细胞诱导非小细胞肺癌(non small-cell lung cancer,NSCLC)进展的作用及机制。方法选取2015-03-01-2018-03-01来甘肃省人民医院就诊的NSCLC初治患者... 详细信息

目的免疫治疗只对部分人群有效,寻找新的免疫治疗靶点成为研究重点。本研究探讨红系祖细胞诱导非小细胞肺癌(non small-cell lung cancer,NSCLC)进展的作用及机制。方法选取2015-03-01-2018-03-01来甘肃省人民医院就诊的NSCLC初治患者做为研究对象;流式细胞术检测CD45^+红系祖细胞(CD45^+CD71+TER119+细胞)、CD45^-红系祖细胞(CD45^-CD71+TER119+细胞)、T细胞和B细胞的比例;免疫组化检测Ki-67比例;MTT实验检测增殖水平。结果流式细胞术结果显示,NSCLC不合并贫血组红系祖细胞、CD45^+和CD45^-红系祖细胞比例分别为0.526%、0.428%和0.099%,NSCLC合并贫血组比例分别为1.770%、1.577%和0.206%,差异均有统计学意义,χ^2值分别为6.818、6.593和0.030,P值分别为0.009、0.010和4.711。NSCLC合并贫血患者肿瘤组织Ki-67阳性的比例为11.765%,NSCLC合并不贫血组的比例为20.689%,差异有统计学意义,χ^2=5.796,P=0.016。相关性分析结果显示,红系祖细胞比例与Ki-67阳性比例呈正相关,r=0.747;P=0.013;MTT结果显示,对照组NSCLC细胞增殖率为20.037%,CD45^-EPC组增殖率为40.671%,差异有统计学意义,χ^2=9.524,P=0.002;Artemin阻断组增殖率为21.175%,相对于CD45^-EPC组差异有统计学意义,χ^2=8.515,P=0.004。流式细胞术结果显示,CD45^+红系祖细胞能过通过分泌ROS,抑制T细胞的增殖,CD45^-红系祖细胞对T细胞增殖没有明显的作用;CD45^+红系祖细胞和CD45^-红系祖细胞对B细胞的作用均差异无统计学意义。结论红系祖细胞在NSCLC合并贫血患者外周血中比例显著升高,CD45^+和CD45^-红系祖细胞分别通过抑制T细胞免疫和分泌Artemin,促进NSCLC的进展。

关键词：红系祖细胞非小细胞肺癌贫血免疫 T细胞

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儿童郎格汗组织细胞组织增生症单纯肺侵害致死亡1例

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中华胸心血管外科杂志 2023年第4期39卷 253-254页

作者：陈志国岳芳高飞飞脱广鑫段国辰河北省儿童医院胸外科石家庄050031

6岁女性患儿, 因咳嗽6天入院, 胸部CT提示双肺弥漫性多发大小不等囊腔, 右侧气胸。2020年11月行胸腔镜下右肺组织活检术, 术中见右肺中叶外侧段漏气, 囊腔较多, 切取肺组织条长约5 cm。术后病理提示肺朗格汉斯细胞组织细胞增生症(PLCH)... 详细信息

6岁女性患儿, 因咳嗽6天入院, 胸部CT提示双肺弥漫性多发大小不等囊腔, 右侧气胸。2020年11月行胸腔镜下右肺组织活检术, 术中见右肺中叶外侧段漏气, 囊腔较多, 切取肺组织条长约5 cm。术后病理提示肺朗格汉斯细胞组织细胞增生症(PLCH)。患儿转血液科化疗后出现双侧气胸, 留置双侧胸腔引流管后持续漏气, 术后3个月因呼吸衰竭死亡。对于难治性、终末期PLCH患者, 仍然需要积极探讨更好的治疗方案。

关键词：右肺中叶郎格双侧气胸外侧段右侧气胸胸部CT 囊腔血液科

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机器人辅助胸腔镜手术与传统胸腔镜手术在肺部良性病损切除术中的对比研究

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中华胸心血管外科杂志 2019年第6期35卷 364-367页

作者：闫沛静庞瑶脱广鑫王文昊朱晓磊刘荣郭天康杨克虎朱自江甘肃省人民医院胸外二科兰州730000 甘肃中医药大学临床医学院兰州730000 甘肃省人民医院临床研究与循证医学研究所兰州730000 中国人民解放军总医院肝胆外二科北京100853 甘肃省人民医院普外科兰州730000 兰州大学基础医学院循证医学中心 730000

评价机器人辅助胸腔镜手术(RATS)与电视辅助胸腔镜手术(VATS)治疗良性肺部疾病的疗效及预后差异。回顾2013年6月至2017年10月良性肺部疾病患者110例的临床资料,建立5个多元线性回归模型。结果显示,RATS的住院时间较短,手术时间较长,总... 详细信息

评价机器人辅助胸腔镜手术(RATS)与电视辅助胸腔镜手术(VATS)治疗良性肺部疾病的疗效及预后差异。回顾2013年6月至2017年10月良性肺部疾病患者110例的临床资料,建立5个多元线性回归模型。结果显示,RATS的住院时间较短,手术时间较长,总费用较高。两组术中失血量和总引流量无显着差异。RATS已展露部分优势,若RATS手术时间缩短或降低总成本,或者两者兼得,RATS的优势将更加明显。目前仍需大量前瞻性研究评价RATS治疗肺部良性疾病的优劣。

关键词：电视辅助胸腔镜手术肺部良性疾病机器人辅助肺部疾病对比研究切除术多元线性回归模型病损

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原发性心包内膈疝1例报告

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甘肃医药 2020年第5期39卷 474-476页

作者：杨毅金刚脱广鑫王文昊朱自江甘肃中医药大学甘肃兰州730000 甘肃省人民医院甘肃兰州730000

患者,男,52岁,因“胸闷1周”入院。入院查体:T:36.3℃,R:19次/分,P:80次/分,Bp:100/70mmHg,一般情况良好,面颊、口唇无紫绀,无杵状指,胸廓无畸形,双肺呼吸音清,心尖搏动于第5肋间左锁骨中线内侧0.5~1.0cm,心尖搏动无弥散,范围2.5cm。未... 详细信息

患者,男,52岁,因“胸闷1周”入院。入院查体:T:36.3℃,R:19次/分,P:80次/分,Bp:100/70mmHg,一般情况良好,面颊、口唇无紫绀,无杵状指,胸廓无畸形,双肺呼吸音清,心尖搏动于第5肋间左锁骨中线内侧0.5~1.0cm,心尖搏动无弥散,范围2.5cm。未触及震颤,无心包摩擦感,心界稍大。左缘2~3肋间有收缩期杂音,未心包摩擦音。主要检查:1.心脏彩超提示:先天性心脏病;房间隔缺损(Ⅱ孔型)左向右分流、右房室增大、三尖瓣反流(轻度)、肺动脉压增高(收缩压约44mmHg),主动脉窦部增宽,主动脉瓣少量反流。2.胸部CT提示:心脏增大变性,符合先心病改变;膈疝;(图1)。3.经食管超声心动图检查提示,升主动脉及主动脉窦部扩张,最大直径45mm,主动脉瓣中重度关闭不全。术前诊断:先天性心脏病、房间隔缺损、升主动脉瘤、主动脉关闭不全、膈疝。术中所见:心包内可见结肠及大网膜,位于右心房右侧及右心室前壁,膈肌中心腱与心包结合部缺如,疝环形成,大小约15cm×10cm,升主动脉直径约45mm,主动脉窦部直径约47cm(图2)。

关键词：先天性心脏病房间隔缺损心尖搏动升主动脉左向右分流双肺呼吸音清心包内收缩期杂音

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MMP-7、TIMP-2在食管癌组织的表达及预后关系

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中国肿瘤外科杂志 2018年第2期10卷 96-101页

作者：朱晓磊朱自江王文昊庞瑶脱广鑫甘肃中医药大学临床医学院甘肃兰州730000 甘肃省人民医院胸外二科甘肃兰州730000

目的探讨MMP7/TIMP-2表达与食管癌术后转移、复发以及和预后之间的关系。方法使用组织芯片技术,采用免疫组化方法检测食管癌术后生存时间>5年生存组(A组124例),生存时间<1年(B组62例)以及在正常食管组织(62例)中MMP-7和TIMP-2的表达情... 详细信息

目的探讨MMP7/TIMP-2表达与食管癌术后转移、复发以及和预后之间的关系。方法使用组织芯片技术,采用免疫组化方法检测食管癌术后生存时间>5年生存组(A组124例),生存时间<1年(B组62例)以及在正常食管组织(62例)中MMP-7和TIMP-2的表达情况。结果 MMP-7在食管正常的鳞状上皮基底层不表达;在A组食管癌组织中呈弱阳性表达;在B组食管癌组织中呈中等以上阳性表达。MMP-7在A组的表达强度低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。A组患者肿瘤组织中MMP-7表达率为85.5%(106/124),高表达率为27.4%(34/124);B组肿瘤组织中MMP-7表达率为93.5%(58/62),高表达率为56.5%(35/62)。A组MMP-7高表达率低于B组,差异有统计学意义(χ~2=14.930,P<0.001)。TIMP-2在食管正常的鳞状上皮基底层不表达;在A组食管癌组织中呈弱阳性表达;在B组食管癌组织中呈中等以上阳性表达。TIMP-2在A组的表达强度低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。A组患者肿瘤组织TIMP-2表达率为87.1%(108/124),高表达率为22.2%(25/124);B组肿瘤组织中TIMP-2表达率为98.3%(61/62),高表达率为40.3%(25/62)。A组TIMP-2高表达率低于B组,差异有统计学意义(χ~2=4.014,P=0.045)。结论 MMP-7/TIMP-2可作为评估食管癌术后转移和复发风险的指标,MMP-7有望成为食管癌治疗的靶点。

关键词：食管鳞状细胞癌复发转移 MMP7 TIMP-2

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胸腺瘤的外科治疗和预后分析

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中华胸部外科电子杂志 2018年第2期5卷 107-112页

作者：朱晓磊朱自江庞瑶王文昊脱广鑫甘肃中医药大学临床医学院兰州730000 甘肃省人民医院胸外科兰州730000

目的探讨外科治疗在胸腺瘤治疗中的作用及预后的影响因素。方法回顾性分析2004年1月—2017年1月就诊于甘肃省人民医院胸外科并接受手术治疗的55例胸腺瘤患者的临床资料。生存率的计算及单因素生存分析采用Kaplan-Meier法进行,组间差异使... 详细信息

目的探讨外科治疗在胸腺瘤治疗中的作用及预后的影响因素。方法回顾性分析2004年1月—2017年1月就诊于甘肃省人民医院胸外科并接受手术治疗的55例胸腺瘤患者的临床资料。生存率的计算及单因素生存分析采用Kaplan-Meier法进行,组间差异使用Log-rank检验进行计算,所有经单因素生存分析有意义的参数均纳入多因素生存,采用Cox分析确定与预后相关的因素。结果 55例胸腺瘤患者中,成功随访53例,失访2例。53例患者均接受手术治疗,中位随访时间75.3个月,1、3、5、10年生存率分别为71.1%、56.7%、39.3%和23.3%。单因素分析结果显示:临床症状、肿瘤直径、肿瘤切除范围、Masaoka分期、WHO组织学分类及放化疗对胸腺瘤患者术后长期生存率均有显著影响(P<0.01);多因素Cox分析表明肿瘤切除方式(HR=5.15,95%CI:1.573~16.883,P<0.05)、肿瘤直径(HR=5.53,95%CI:1.879~11.797,P<0.05)、WHO分型(HR=13.23,95%CI:3.015~29.230,P<0.05)、Masaoka分期(HR=5.18,95%CI:1.597~13.737,P<0.05)以及放化疗(HR=12.14,95%CI:2.979~49.503,P<0.05)是影响胸腺瘤术后生存率的独立因素。结论肿瘤直径、肿瘤切除方式、WHO分型、Masaoka分期以及术后放化疗是影响胸腺瘤患者预后的独立因素。

关键词：胸腺瘤肿瘤直径肿瘤切除方式 WHO分型 Masaoka分期放疗化疗

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食管癌根治术后应用网膜包裹吻合口荟萃分析

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中华胸部外科电子杂志 2019年第3期6卷 170-176页

作者：脱广鑫庞瑶王文昊朱晓磊朱自江甘肃中医药大学临床医学院兰州730000 甘肃省人民医院胸外科

目的比较食管癌根治术后网膜包裹吻合口对于预防术后吻合口瘘的疗效,并探讨网膜成形术的安全性。方法在Medline、EMBASE和Cochrane图书馆3个数据库进行文献检索,选择比较食管癌根治术后使用网膜包裹吻合口与未行网膜包裹吻合口的疗效比... 详细信息

目的比较食管癌根治术后网膜包裹吻合口对于预防术后吻合口瘘的疗效,并探讨网膜成形术的安全性。方法在Medline、EMBASE和Cochrane图书馆3个数据库进行文献检索,选择比较食管癌根治术后使用网膜包裹吻合口与未行网膜包裹吻合口的疗效比较的研究。对吻合口瘘、吻合口狭窄、住院病死率和住院时间进行萃取分析,结果数据以比值(OR)、加权均数差(WMD)或相对风险(RR)报告,同时报告了95%的置信区间(95%CI)。结果共纳入6项研究,涉及1 608名患者。与未行网膜包裹组(对照组)比较,网膜包裹组吻合口瘘的发生率显著降低(OR=0.37,95%CI:0.23~0.60,P<0.001),住院时间显著缩短(WMD=-2.13,95%CI:3.57~0.69,P=0.004);但两组间吻合口狭窄发生率和院内病死率比较,差异无统计学意义(OR=0.82,95%CI:0.37~1.80,P=0.61;OR=0.61,95%CI:0.25~1.51,P=0.29)。结论食管癌根治术后使用大网膜包裹吻合口是一种安全、有效地预防吻合口瘘的方法。

关键词：网膜食管癌吻合口瘘荟萃分析

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食管癌术后手工吻合和机械吻合安全性比较的系统评价与Meta分析

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中国胸心血管外科临床杂志 2019年第5期26卷 480-488页

作者：朱晓磊朱自江王文昊庞瑶脱广鑫甘肃中医药大学临床医学院兰州730000 甘肃省人民医院胸外二科兰州730000

目的比较食管癌术后手工吻合和机械吻合的安全性。方法计算机检索PubMed、EMbase、The Cochrane Library数据库,人工查找有关食管癌术后患者手工吻合和机械吻合的随机对照试验(RCT),检索时间为建库至2018年1月。由两位作者按纳入、排除... 详细信息

目的比较食管癌术后手工吻合和机械吻合的安全性。方法计算机检索PubMed、EMbase、The Cochrane Library数据库,人工查找有关食管癌术后患者手工吻合和机械吻合的随机对照试验(RCT),检索时间为建库至2018年1月。由两位作者按纳入、排除标准独立地筛选文献、提取资料和评价偏倚风险,再采用R软件的Meta包进行Meta分析。结果最终纳入17篇RCTs,包括2 159例患者,其中手工吻合组1 230例,机械吻合组1 289例。Meta分析结果显示:手工吻合和机械吻合相比吻合口漏发生率差异无统计学意义[RR=1.00,95%CI(0.67,1.48),P=0.181]、术后30 d死亡率差异无统计学意义[RR=0.95,95%CI(0.61,1.49),P=0.631];与手工吻合组相比,机械吻合组可能会增加吻合口狭窄的风险[RR=0.74,95%CI(0.48,1.14),P<0.001]。结论食管癌手术使用线形或圆形吻合器可以增加术后发生吻合口狭窄的发生;而吻合口漏发生率和30 d死亡率与手工吻合、线形吻合器吻合和圆形吻合器吻合不相关。

关键词：食管癌机械吻合手工吻合吻合口漏吻合口狭窄随机对照试验系统评价/Meta分析

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小干扰RNA抑制树突细胞瘤苗白细胞介素-10受体对食管癌细胞免疫效应的研究进展

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中国肿瘤外科杂志 2018年第3期10卷 21-25页

作者：朱晓磊朱自江王文昊庞瑶脱广鑫甘肃中医药大学临床医学院甘肃兰州730000 甘肃省人民医院胸外二科甘肃兰州730000

食管癌是我国最常见的致死性恶性肿瘤之一,传统手术、放射性治疗及化疗效果难以令人满意。树突细胞(dendritic cell,DC)瘤苗是目前最具前景治疗方式之一,但传统瘤苗效果欠佳,原因可能与其分化抑制有关。其中,白细胞介素-10(IL-10)是免... 详细信息

食管癌是我国最常见的致死性恶性肿瘤之一,传统手术、放射性治疗及化疗效果难以令人满意。树突细胞(dendritic cell,DC)瘤苗是目前最具前景治疗方式之一,但传统瘤苗效果欠佳,原因可能与其分化抑制有关。其中,白细胞介素-10(IL-10)是免疫抑制作用比较强的一种抑制因子,几乎所有DC细胞和单核巨噬细胞都是IL-10抑制性作用的靶细胞。通过小干扰RNA技术抑制树突细胞IL-10受体的表达,培养IL-10受体缺失的树突细胞,制备负载食管癌细胞抗原的树突细胞,从而制备负载食管癌细胞的DC高效瘤苗,提高DC瘤苗的肿瘤治疗作用,为食管癌的肿瘤免疫治疗和肿瘤基因治疗提供新思路。

关键词：食管肿瘤树突细胞肉瘤白细胞介素-10 小干扰RNA 免疫治疗

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