检索结果-南通市图书馆

鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的制备和鉴定

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

江苏农业学报 2021年第2期37卷 412-417页

作者：吕炫张淼胡增金李佳明张冲朱英奇魏娟文吴琼张瑞辰夏伦志王桂军安徽农业大学动物科技学院安徽合肥230036 兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室安徽合肥230036 安徽省农业科学院畜牧兽医研究所安徽合肥230036

采用RT-PCR扩增获得鹅星状病毒(Goose astrovirus)的衣壳纤突蛋白基因vp27,并将其克隆至pCold-SUMO原核表达载体。重组表达载体pCold-vp27经过测序和双酶切验证正确后,转化到感受态细胞Rosetta。挑取阳性克隆子,利用异丙基硫代半乳糖苷... 详细信息

采用RT-PCR扩增获得鹅星状病毒(Goose astrovirus)的衣壳纤突蛋白基因vp27,并将其克隆至pCold-SUMO原核表达载体。重组表达载体pCold-vp27经过测序和双酶切验证正确后,转化到感受态细胞Rosetta。挑取阳性克隆子,利用异丙基硫代半乳糖苷诱导表达鹅星状病毒衣壳纤突重组蛋白,使用镍柱纯化衣壳纤突蛋白VP27,将定量的重组蛋白免疫BALB/c小鼠。利用ELISA、Western blot和IFA鉴定鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体。结果显示,鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的效价大于1∶64000,Western blot试验结果证明了鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体的特异性,IFA试验结果证明鼠抗衣壳纤突蛋白VP27多克隆抗体能够识别天然的鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27。

关键词：鹅星状病毒衣壳纤突蛋白VP27 多克隆抗体

广东规模化鸡场死鸡胚中鸡毒支原体的分离鉴定、致病性及药物敏感性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

畜牧兽医学报 2024年第1期55卷 290-299页

作者：陈玥彤刘晓涵王芷洋赵宇馨周铁忠胡增金朱悦王少辉田明星丁思羽祁晶晶于圣青中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 锦州医科大学畜牧兽医学院锦州121000 山东畜牧兽医职业学院潍坊261000 扬州优佳创生物科技有限公司扬州225261

旨在从广东某规模化鸡场死鸡胚进行鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)的分离,并进行遗传进化分析、致病性及药物敏感性研究。本研究从广东某规模化鸡场的带菌死胚卵黄组织中分离禽支原体,通过菌落观察、血清学试验、16S rRNA支... 详细信息

旨在从广东某规模化鸡场死鸡胚进行鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)的分离,并进行遗传进化分析、致病性及药物敏感性研究。本研究从广东某规模化鸡场的带菌死胚卵黄组织中分离禽支原体,通过菌落观察、血清学试验、16S rRNA支原体通用引物序列鉴定等方法,对分离的菌株进行种属鉴定,同时将分离的毒株对鸡胚和SPF鸡进行攻毒试验及抗菌药物敏感性试验。结果显示:显微镜下菌落呈典型的“荷包蛋”状。平板凝集试验显示其与MG阳性血清有凝集反应,与MS阳性血清不反应;16S rRNA序列测序发现各分离株与MG相似性达99.9%,因此确定分离株为MG。将各分离株感染7日龄SPF鸡胚,结果显示感染鸡胚大多于临近出壳时死亡;感染3周龄的SPF鸡,3周后解剖发现鸡气囊发生显著病理变化,说明其具有较强致病力;药物敏感性试验结果显示,5株分离株对盐酸沃尼妙林、多西环素、泰万菌素及泰妙菌素有较高敏感性,对替米考星、泰乐菌素、恩诺沙星、红霉素、吉他霉素、林可霉素呈现出不同程度耐药性。综上,从广东某规模化鸡场死鸡胚中成功分离到5株MG分离株,各分离株均可引起红细胞凝集,导致鸡胚死亡,对SPF鸡可引起典型的气囊炎症状,且对多种药物存在不同程度耐药性。本研究为临床MG的分离鉴定及用药选择提供了可参考的技术方法及指导,为MG攻毒模型建立提供了研究基础。

关键词：鸡毒支原体死鸡胚分离鉴定致病性药物敏感性

鸡毒支原体VLHA3.03蛋白的原核表达及免疫原性分析

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国动物传染病学报 2022年第2期30卷 134-141页

作者：陈玥彤祁晶晶胡增金赵宇馨李浩然刘晓涵王少辉田明星郭伶于圣青周铁忠锦州医科大学畜牧兽医学院锦州121000 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 安徽农业大学动物科技学院合肥230036

为研究鸡毒支原体(MG)的可变脂蛋白血凝素(VLHA)的生物学功能,对VLHA 3.03蛋白进行原核表达,然后进行了免疫原性和免疫反应性分析。通过Overlap PCR方法对MG Rlow株的vlha 3.03基因进行点突变扩增,将突变成功的vlha 3.03基因全长与原核... 详细信息

为研究鸡毒支原体(MG)的可变脂蛋白血凝素(VLHA)的生物学功能,对VLHA 3.03蛋白进行原核表达,然后进行了免疫原性和免疫反应性分析。通过Overlap PCR方法对MG Rlow株的vlha 3.03基因进行点突变扩增,将突变成功的vlha 3.03基因全长与原核表达载体pCold Ⅰ连接,连接产物转入大肠杆菌BL21进行诱导表达和纯化。用纯化后的重组蛋白rVLHA3.03免疫新西兰大白兔,制备兔多克隆抗体,并用ELISA检测抗体效价,再用制备的兔多克隆抗体、MG不同分离株阳性鸡血清及MS标准阳性血清分别与rVLHA3.03蛋白进行Western blot反应,分析rVLHA3.03蛋白的免疫原性和免疫反应性。结果表明,在大肠杆菌BL21中成功表达rVLHA3.03蛋白,且该蛋白具有较好的免疫原性和免疫反应性。

关键词：鸡毒支原体 VLHA 原核表达免疫原性免疫反应性

滑液囊支原体NADH氧化酶单克隆抗体的制备

同方期刊数据库博看期刊评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国动物传染病学报 2023年第6期31卷 20-27页

作者：刘晓涵祁晶晶胡增金李浩然宋翠萍尚原冰王少辉田明星李涛丁铲蔡玉梅于圣青山东农业大学动物科技学院泰安271000 中国农业科学院上海兽医研究所上海200241 安徽农业大学动物科技学院合肥230036

为制备滑液囊支原体NADH氧化酶(NOX)的单克隆抗体。将本实验室前期构建好的重组菌株***21(pET28a-NOX),进行诱导表达,经过纯化后免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选结合有限稀释法克隆化,得到1株稳定分... 详细信息

为制备滑液囊支原体NADH氧化酶(NOX)的单克隆抗体。将本实验室前期构建好的重组菌株***21(pET28a-NOX),进行诱导表达,经过纯化后免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选结合有限稀释法克隆化,得到1株稳定分泌抗MSNOX抗体的杂交瘤细胞株,命名为2F4。单克隆抗体亚型鉴定结果显示,该单克隆抗体为IgG2b亚类,间接ELISA测定单克隆抗体腹水效价为1∶2048000。经Westernblot和悬浮免疫荧光试验鉴定,该株单克隆抗体与MS不同分离株均发生特异性反应,与其他禽致病菌不发生反应。通过染色体分析,该杂交瘤细胞株2F4有98±5条染色体,符合杂交瘤细胞染色体的数目,证实细胞融合成功。本研究成功制备NADH氧化酶单克隆抗体,为建立滑液囊支原体的检测方法及进一步研究NADH氧化酶在MS致病机制中的作用提供了重要的生物材料。

关键词：滑液支原体 NADH氧化酶单克隆抗体

农地转入对农户黑土地保护性耕作行为的影响研究——基于农地细碎化的中介效应

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

农业现代化研究 2025年

作者：黄善林金芷旭东北农业大学公共管理与法学院东北农业大学现代农业发展研究中心

探究农地转入对农户黑土地保护性耕作行为的影响，为政府制定促进农户采纳黑土地保护性耕作技术相关政策提供参考。本文利用黑龙江省三江平原典型县市的农户微观调研数据，运用多元有序Logistic回归模型、中介效应模型等方法探究农地转... 详细信息

探究农地转入对农户黑土地保护性耕作行为的影响，为政府制定促进农户采纳黑土地保护性耕作技术相关政策提供参考。本文利用黑龙江省三江平原典型县市的农户微观调研数据，运用多元有序Logistic回归模型、中介效应模型等方法探究农地转入对农户黑土地保护性耕作行为的影响效应及影响机制，研究结果表明：1）农地转入对农户黑土地保护性耕作行为有显著正向作用，具体表现为转入面积、转入费用、转入市场化程度对农户黑土地保护性耕作行为具有显著正向作用。2)农地转入、转入面积及转入市场化程度能够通过缓解农地细碎化显著促进农户黑土地保护性耕作行为。3)相对于小农户，农地细碎化在农地转入对规模户黑土地保护性耕作行为影响中的中介作用更显著。据此本文从优化农地流转政策、财政与金融激励并举和推进“小田变大田”改革三个方面提出了对策建议。

关键词：农地转入黑土地保护性耕作农户行为农地细碎化三江平原

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

焰色反应演示器、手持分光镜的设计

化学教学 2025年第1期 70-72页

作者：马东张贤金韩书影福州第一中学福建教育学院化学教育研究所福建师范大学附属中学

针对焰色反应实验存在的不足，设计纳米喷雾器进行焰色反应实验改进。改进实验用自制手持分光镜观察焰色反应形成的原子光谱，将焰色反应与原子结构建立联系，从宏微结合视角认识焰色反应。验证了钾的焰色呈紫红色，改进装置同时兼有操... 详细信息

针对焰色反应实验存在的不足，设计纳米喷雾器进行焰色反应实验改进。改进实验用自制手持分光镜观察焰色反应形成的原子光谱，将焰色反应与原子结构建立联系，从宏微结合视角认识焰色反应。验证了钾的焰色呈紫红色，改进装置同时兼有操作简单、焰色稳定、功能多样等优点，有助于提高实验教学效果，促进学生深度学习。

关键词：焰色反应光谱分光镜实验改进

会厌囊肿感染并发急性会厌炎呼吸道分泌物病原菌及血清NO、MMP-2、IL-8表达

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医院感染学杂志 2025年 687-691页

作者：黄应亮张健金开林杭州市临平区第一人民医院耳鼻咽喉科

目的分析会厌囊肿感染并发急性会厌炎患者呼吸道分泌物病原菌分布及血清一氧化氮（NO）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、白细胞介素-8（IL-8）表达及临床意义。方法收集2019年1月—2023年6月杭州市临平区第一人民医院收治的98例会厌囊肿... 详细信息

目的分析会厌囊肿感染并发急性会厌炎患者呼吸道分泌物病原菌分布及血清一氧化氮（NO）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、白细胞介素-8（IL-8）表达及临床意义。方法收集2019年1月—2023年6月杭州市临平区第一人民医院收治的98例会厌囊肿感染并发急性会厌炎患者临床资料,记录会厌部呼吸道分泌物病原菌分布情况;45例行保守治疗（非手术组）,53例行支撑喉镜下电刀切除治疗（手术组）,比较两组患者血清NO、MMP-2和IL8水平变化、出院6个月后复发情况,使用受试者工作特征（ROC）曲线评估入院时血清NO、MMP-2和IL-8水平对非手术组6个月复发的预测价值。结果 98例患者共检出61株病原菌,其中革兰阴性菌占比63.93%,革兰阳性菌占比36.07%。两组患者入院后血清NO、MMP-2和IL-8水平均低于入院时（P<0.05）,且入院第7天均低于入院第3天（P<0.05）;手术组入院第7天血清NO、MMP-2和IL-8均低于非手术组（P<0.05）。出院后6个月,手术组复发率低于非手术组（0.00%vs.13.33%,连续校正χ2=5.387,P=0.020）。ROC曲线分析显示,入院时血清NO、MMP-2和IL-8对预测非手术组出院后6个月复发具有统计学意义（P<0.05）。结论相较于保守治疗,支撑喉镜下电刀切除治疗能降低会厌囊肿感染并发急性会厌炎的复发率,入院时血清NO、MMP-2和IL-8可辅助预测保守治疗的复发风险。

关键词：会厌囊肿感染急性会厌炎病原菌一氧化氮基质金属蛋白酶2 白细胞介素-8 复发

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

考虑频率安全及风能转移的风电场规划与运行

电力建设 2025年

作者：金楚李作红林勇刘若平魏繁荣广东电网有限责任公司电网规划研究中心强电磁工程与新技术国家重点实验室(华中科技大学)

大规模风电持续并网显著影响大电网运行的频率安全性和经济性，为此，提出一种考虑系统频率安全及场间风能转移的风电场协同规划与运行方法。首先，考虑风电场场间出力相关性，构建场间风能转移模型。其次，基于风机综合惯性控制与减载... 详细信息

大规模风电持续并网显著影响大电网运行的频率安全性和经济性，为此，提出一种考虑系统频率安全及场间风能转移的风电场协同规划与运行方法。首先，考虑风电场场间出力相关性，构建场间风能转移模型。其次，基于风机综合惯性控制与减载运行策略，建立了风机参与调频的系统频率响应模型，并据此制定了系统频率最大偏差约束条件。进而，设计了考虑系统频率安全及场间风能转移的风电场协同规划与运行方法。基于IEEE 30节点系统算例分析表明，所提风电场规划方法能够提高风电场风能利用率，保证系统频率安全稳定。

关键词：风电场规划频率安全频率响应风电出力相关性场间风能转移

汞示踪古新世—始新世极热事件火山沉积记录研究进展

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

沉积学报 2025年

作者：杨晨林雯洁金思敏李明松沈俊中国地质大学(武汉)生物地质与环境地质国家重点实验室中国地质大学(武汉)环境学院北京大学地球与空间科学学院造山带与地壳演化教育部重点实验室

【意义】自工业革命以来，人类在使用化石燃料的过程中不断向大气排放CO2等温室气体，引起了剧烈的气候环境扰动和严重的生物危机。古新世—始新世极热事件（Paleocene-Eocene Thermal Maximum， PETM，～56 Ma）转折期发生了巨量的碳... 详细信息

【意义】自工业革命以来，人类在使用化石燃料的过程中不断向大气排放CO2等温室气体，引起了剧烈的气候环境扰动和严重的生物危机。古新世—始新世极热事件（Paleocene-Eocene Thermal Maximum， PETM，～56 Ma）转折期发生了巨量的碳排放事件，碳排放速率与当前的排放进程最为接近，探索PETM时期的碳排放对地球宜居性影响的过程和机制，可以为预估地球未来气候变化趋势提供地质案例，具有重要的科学意义。【进展】近年来，对于PETM碳排放的触发机制问题仍存在争议，已有研究证实北大西洋火成岩省（North Atlantic Large Igneous Province， NAIP）的岩浆活动与PETM之间存在时间耦合性，表明NAIP可能触发了这一地球宜居性扰动事件，但是目前该转折期火山活动和气候环境波动的因果关系还不明晰，其最大的难点在于如何在沉积岩中示踪火山活动记录。【结论与展望】近年来，沉积物中的汞元素浓度及其同位素已被广泛用于示踪地质历史时期的火山活动。但是，目前对PETM事件的汞记录研究主要集中在靠近NAIP喷发区域的近岸地区，而缺乏对远离喷发中心的开阔海地区的研究，制约了对NAIP活动影响范围和环境效应的认知。本文针对PETM事件汞沉积示踪古火山活动的研究现状进行了系统的回顾，阐述其存在的问题和未来的研究方向，梳理了NAIP与PETM之间的联系。

关键词：古新世—始新世极热事件北大西洋火成岩省汞浓度及同位素海洋缺氧