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茶树茎段再生体系的建立

茶树茎段再生体系的建立

作者：章文益贵州大学

学位级别：硕士

稳定的组培再生体系是建立遗传转化体系的前提,已经建立的茶树组织培养体系还存在不稳定、重复性较差的问题,还不适合用于茶树遗传转化。因此建立一个高效稳定的茶树再生体系对茶树基因工程的发展尤其重要。茶树茎段的器官发生能力较强... 详细信息

稳定的组培再生体系是建立遗传转化体系的前提,已经建立的茶树组织培养体系还存在不稳定、重复性较差的问题,还不适合用于茶树遗传转化。因此建立一个高效稳定的茶树再生体系对茶树基因工程的发展尤其重要。茶树茎段的器官发生能力较强,它对培养基和生长调节剂的要求较其它外植体简单,是研究外植体再生的良好材料。茎段快繁是建立无菌再生体系,保证大量的统一的外植体的基础,节间茎段作为外植体诱导效果较为理想。本研究以‘中黄1号’茶树节间茎段为外植体,对培养基及植物生长调节剂等一系列影响诱导分化的因素进行研究,优化了茶树组织培养的各种条件,建立一套完整的茶树茎段组织培养再生体系,为茶树良种繁殖和遗传转化的研究奠定了一定的基础。主要研究结果如下。1.‘中黄1号’茶树带腋芽茎段无菌体系的建立。以‘中黄1号’茶树带腋芽茎段为外植体,探索外植体的消毒组合、取材时间、带腋芽茎段形态、培养条件对建立无菌体系的影响。结果表明,以4月生长的‘中黄1号’茶树的幼嫩茎段新梢为外植体,以75%酒精浸泡1 min,无菌水清洗3-4次,再0.1%升汞浸泡12 min,无菌水清洗4-5次的消毒方式,并取节间较短的茎段,暗培养7d后转为正常光照培养为最佳培养组合从而获得无菌苗,最低污染率为11.2%,最高成活率为79.2%。2.茶树茎段组培再生体系的建立。以‘中黄1号’茶树组培苗节间茎段为外植体,结果表明:长度为1 cm的节间茎段接种于MS+70 mg/L硫酸腺嘌呤+3mg/L6-BA+0.2 mg/LTDZ培养基组合,并在光照条件下进行培养,为茶树茎段愈伤组织诱导的最佳组合,最高出愈率为97.8%,最高出芽率为72.3%;愈伤组织接种于MS+1 mg/L6-BA+1 mg/LTDZ+0.2 mg/LIBA培养基组合,并在光照条件下进行培养,为茶树茎段愈伤组织诱导不定芽的最佳组合,最高平均分化芽数为4.3;再生芽接种于MS+0.2 mg/L6-BA+2 mg/LNAA,能有效促进再生芽的生长发育,植株粗壮,长势好;茶苗接种于MS+0.7 mg/L6-BA+0.2 mg/LNAA+1mg/LIBA,能有效促进壮苗培养,最高平均株高为4.1 cm;茶苗使用200 mg/LIBA溶液浸泡底部切口处10 min后,接种于1/2MS+2 mg/LIBA+0.5 mg/LNAA,接种后暗培养7 d,能有效促进生根,生根率最高为63.3%,平均生根数最高为4.7;茶苗经过3 d的室外炼苗,再移栽至V营养土:V蛭石:V珍珠岩=2:1:1比例的土壤基质中,最高成活率为68.7%。

关键词：茶树茶树茎段植物组织培养再生体系愈伤组织生根

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翼腭缝宏观解剖及其发育模式研究

上海交通大学学报（医学版） 2024年第8期44卷 944-950页

作者：章文益郑美里谢羽番江凌勇上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颅颌面科·正颌正畸中心上海交通大学口腔医学院国家口腔医学中心国家口腔疾病临床医学研究中心上海市口腔医学重点实验室上海市口腔医学研究所中国医学科学院口腔颌面再生医学创新单元上海200011

目的·利用锥形束计算机断层扫描(cone-beam computed tomography,CBCT)技术分析中国人群中翼腭缝(pterygopalatine suture,PPS)的解剖及宏观形态特征,并初步探讨其发育模式及其与矫正上颌发育不足之间的关联。方法·纳入2023年7月—8... 详细信息

目的·利用锥形束计算机断层扫描(cone-beam computed tomography,CBCT)技术分析中国人群中翼腭缝(pterygopalatine suture,PPS)的解剖及宏观形态特征,并初步探讨其发育模式及其与矫正上颌发育不足之间的关联。方法·纳入2023年7月—8月在上海交通大学医学院附属第九人民医院拍摄的134例CBCT影像资料,根据年龄分为6组。以PPS标志点为依据,计算得出PPS整体的横向位置(transverse position of PPS,X_(PPS)),PPS整体的矢状向位置(sagittal position of PPS,Y_(PPS)),以及PPS的锥突嵌入角(insertion angle of PPS,IAP)、锥突嵌入宽度(insertion width of pyramidal process,IWP)和锥突嵌入深度(insertion depth of pyramidal process,IDP),并通过多平面观察确定翼上颌联合情况。采用回归分析评估各参数与年龄、性别的相关性,并通过两两比较确定参数变化的稳定年龄段。采用配对t检验及配对χ^(2)检验分析双侧参数的差异性。结果·Y_(PPS)、IDP与年龄无显著相关性,而X_(PPS)、IAP、IWP、翼上颌连接的发生率均与年龄呈显著正相关(P<0.01)。性别差异仅在X_(PPS)中显著,男性大于女性(P<0.01)。参数的年龄变化趋势分析表明:X_(PPS)在组1(6岁≤年龄<9岁)和组2 (9岁≤年龄<12岁)间差异显著(女性:P=0.006;男性:P=0.004);IAP在组2与组3 (12岁≤年龄<15岁)间差异显著(P=0.042),98.5%样本的IAP大于45°;IWP在组1与组3间差异显著(P=0.016);翼上颌联合情况在组1、2、3间差异显著(组1、2间P<0.001,组2、3间P=0.037,组1、3间P<0.001),成人发生率高于90%。各项指标双侧比较均未见统计学差异。结论·6岁以后Y_(PPS)及IDP未表现出明显改变,上颌骨与翼突趋于融合。PPS整体横向位置在12岁左右趋于稳定,而IAP及IWP持续增长,至15岁左右达到稳定且翼腭缝锥突嵌入翼切迹的方向偏向矢状向。

关键词：翼腭缝形态学生长发育上颌扩弓上颌前方牵引

茶树ARR-B基因家族的鉴定和表达模式分析

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种子 2024年第4期43卷 7-16,26页

作者：姚新转吕纪开王芬章文益吕立堂贵州大学茶学院贵阳550025 贵州大学生命科学学院/农业生物工程研究院/山地植物资源保护与种质创新教育部重点实验室/贵州省农业生物工程重点实验室贵阳550025

ARR-B基因作为细胞分裂素信号转导的正向调节因子,在植物发育及抗逆过程中发挥着重要作用。本研究基于茶树基因组数据库,利用生物信息学软件成功鉴定出23个茶树ARR-B基因,并对其基因结构、进化关系、保守结构域、染色体定位、启动子顺... 详细信息

ARR-B基因作为细胞分裂素信号转导的正向调节因子,在植物发育及抗逆过程中发挥着重要作用。本研究基于茶树基因组数据库,利用生物信息学软件成功鉴定出23个茶树ARR-B基因,并对其基因结构、进化关系、保守结构域、染色体定位、启动子顺式作用元件以及八大组织和四种胁迫中的转录组数据等进行分析,并基于以上数据对福鼎大白茶树进行盐胁迫处理后利用荧光定量PCR技术验证表达水平。结果表明,茶树ARR-B基因家族有23个成员且在不同染色体上分布不均;根据系统进化树将茶树ARR-B基因分为9类且与拟南芥ARR-B基因同源性很高;茶树ARR-B基因相同亚家族的基因结构和保守结构域基本一致;茶树ARR-B基因在茎和根组织中具有较高的表达水平及在干旱、低温、盐和茉莉酸甲酯胁迫处理下存在差异表达;实时荧光定量PCR结果可知,经盐胁迫处理后,8个茶树ARR-B基因表达水平与转录组数据存在差异。本研究初步分析了茶树ARR-B基因家族的功能和抗逆作用,为进一步研究茶树的生长发育提供参考和依据。

关键词：茶树 ARR-B基因家族生物信息学分析基因组鉴定

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生物菌肥对白叶1号产量及品质的影响

中国茶叶 2022年第3期44卷 50-55页

作者：陈凌霄艾安涛章文益吕立堂贵州大学茶学院贵州贵阳550025 贵州大学生命科学学院贵州省农业生物工程重点试验室山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点试验室贵州贵阳550025

为探索植物根际促生菌与复合肥配施对茶树产量及品质的影响,文章选用白叶1号为研究对象,选择恶臭假单胞菌、贝莱斯芽孢杆菌、弯曲芽孢杆菌和洋葱伯克氏菌4种根际促生菌,通过冷冻干燥制备成生物菌剂,设不施肥、只施生物菌剂、只施复合肥... 详细信息

为探索植物根际促生菌与复合肥配施对茶树产量及品质的影响,文章选用白叶1号为研究对象,选择恶臭假单胞菌、贝莱斯芽孢杆菌、弯曲芽孢杆菌和洋葱伯克氏菌4种根际促生菌,通过冷冻干燥制备成生物菌剂,设不施肥、只施生物菌剂、只施复合肥、生物菌剂和复合肥混施4种不同处理,研究不同施肥处理对白叶1号茶树产量和品质的影响。结果表明,生物菌剂与复合肥混施能够显著提高白叶1号的产量和品质,生物菌剂与复合肥混施比只施复合肥的百芽质量增加12%、发芽密度增加8.8%、茶叶产量增加18.3%、氨基酸含量增加7.3%,生物菌剂和复合肥混合配施可提高白叶1号产量和品质。

关键词：白叶1号植物根际促生菌茶叶产量茶叶品质

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茶树COBRA基因家族全基因组鉴定及表达分析

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茶叶学报 2021年第3期62卷 95-104页

作者：艾安涛李燕丽章文益吕立堂贵州大学茶学院贵州贵阳550025 湄潭县茶产业发展中心贵州湄潭564100 贵州大学农业生物工程研究院/生命科学学院山地植物资源保护与种质创新省部共建教育部重点实验室贵州贵阳550025

COBRA基因编码糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白,是次生壁加厚和纤维素含量的调节因子,对植物生长、纤维素含量等有重要作用。本研究通过对茶树基因组数据进行分析,成功的从中鉴定到COBRA基因,并对该基因家族成员的蛋白理化性质、亚细胞定位、进... 详细信息

COBRA基因编码糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白,是次生壁加厚和纤维素含量的调节因子,对植物生长、纤维素含量等有重要作用。本研究通过对茶树基因组数据进行分析,成功的从中鉴定到COBRA基因,并对该基因家族成员的蛋白理化性质、亚细胞定位、进化关系、保守结构域、染色体定位等进行生物信息学分析,同时分析了茶树COBRA成员在PEG诱导的干旱胁迫、茉莉酸甲酯处理、盐胁迫、冷胁迫处理中的转录组数据,最后对茶树进行茉莉酸甲酯处理,基于荧光定量PCR技术的表达水平验证。结果表明:茶树COBRA基因有16个家族成员,相对分子质量24807.70~74813.12,等电点5.43~9.14,亚细胞定位显示在细胞膜和细胞外;根据系统进化树将茶树COBRA基因家族分为5类;保守结构域和motif分析发现相同亚家族的基因结构,保守结构域都属于COBRA基因家族;基因表达分析显示COBRA基因在不同茶树部位和胁迫的表达量有不同差异,说明茶树COBRA基因广泛参与茶树生长发育和非生物胁迫响应。实时荧光定量PCR显示经茉莉酸甲酯处理后,3个CsCOBRA基因表达量趋势大致与转录组数据一致,本研究将为进一步开展茶树COBRA基因家族的功能验证和抗逆作用机理研究等提供参考。

关键词：茶树 COBRA基因家族生物信息学表达量分析

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不同种植模式黄金芽茶园冠层光合特性分析

中国茶叶 2022年第4期44卷 34-40页

作者：章文益艾安涛周为姚新转吕立堂贵州大学茶学院贵州贵阳550000 贵定县茶叶产业化发展中心贵州贵定551300 贵州大学农业生物工程研究院山地植物资源保护与保护种质创新教育部重点实验室山地生态与农业生物工程协同创新中心贵州贵阳55000

为比较单行双株、双行双株两种种植模式下黄金芽茶园的冠层光合特性,试验采用植物冠层分析仪、便携式光合作用测定系统对其叶面积指数(LAI)、光合有效辐射(PAR)、净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、水分利用效率(WUE)等因素进行分析研究。... 详细信息

为比较单行双株、双行双株两种种植模式下黄金芽茶园的冠层光合特性,试验采用植物冠层分析仪、便携式光合作用测定系统对其叶面积指数(LAI)、光合有效辐射(PAR)、净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、水分利用效率(WUE)等因素进行分析研究。结果显示,单行双株种植模式下叶面积指数平均值为4.60,较双行双株更接近高产茶园标准值;两种种植模式下光合有效辐射均呈现上冠层>中冠层>下冠层的趋势,说明单行双株种植模式下上、中、下冠层间密度分布更合理;综合分析净光合速率、蒸腾速率、水分利用效率等因素,在茶园中单行双株种植模式优于双行双株。因此,黄金芽单行双株种植模式更适用于茶园生产中。

关键词：黄金芽茶树冠层指标光合特性蒸腾速率

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谁为主题，教材有“旨”

高中生 2025年第1期 5-7页

作者：谢长益湖南邵东市一中

新高考语文作文不仅要做到“言之有物”，更要做到“文以载道”。也就是说，作文要准确把握主旨，明确中心。教材是获取知识的主要来源，也是高考命题的重要依据。近年来，对于高考命题回归教材的探讨越来越深入，高考作文题涉及的主题...

新高考语文作文不仅要做到“言之有物”，更要做到“文以载道”。也就是说，作文要准确把握主旨，明确中心。教材是获取知识的主要来源，也是高考命题的重要依据。近年来，对于高考命题回归教材的探讨越来越深入，高考作文题涉及的主题在部编版高中语文教材中基本有迹可循——高考作文谁为主题，教材有“旨”。

关键词：

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创客教育课程的多视角开发和多场域应用

小学科学 2025年第2期 13-15页

作者：林宗益平和县山格中心小学福建

在核心素养视域下,农村小学教师应以核心素养为起点,多视角开发创客教育课程;以核心素养为落点,多场域应用创客教育课程。此举,不仅能够丰富课堂教学、社团活动和实践活动的内容,而且能够拓宽学生的视野、提升学生的能力、培养学生的创... 详细信息

在核心素养视域下,农村小学教师应以核心素养为起点,多视角开发创客教育课程;以核心素养为落点,多场域应用创客教育课程。此举,不仅能够丰富课堂教学、社团活动和实践活动的内容,而且能够拓宽学生的视野、提升学生的能力、培养学生的创新意识,促进学生核心素养全面发展。

关键词：小学科学创客教育课程开发应用核心素养

高压下Fe_(2)S的相变及热力学性质的第一性原理研究

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原子与分子物理学报 2025年第5期42卷 102-107页

作者：余柏树焦亩鑫杨学楠曾召益重庆师范大学物理与电子工程学院重庆401331

本文采用基于密度泛函理论的赝势平面波方法研究了高压下Fe_(2)S的结构相变、弹性性质和热力学性质.计算表明,当压强增加到124±10 GPa时,Fe_(2)S(Co_(2)P型)的晶格常数发生了突变,轴向比c/a从1.20跃迁到1.35,向C37结构(Co_(2)Si型)转变... 详细信息

本文采用基于密度泛函理论的赝势平面波方法研究了高压下Fe_(2)S的结构相变、弹性性质和热力学性质.计算表明,当压强增加到124±10 GPa时,Fe_(2)S(Co_(2)P型)的晶格常数发生了突变,轴向比c/a从1.20跃迁到1.35,向C37结构(Co_(2)Si型)转变.弹性模量的计算结果也证实了Fe_(2)S的这一结构相变.根据弹性模量,获得了高压下Fe_(2)S的声速,相对于纯Fe,S元素提升了纵波声速.通过准谐德拜模型预测了200 GPa,2000 K范围内Fe_(2)S的热力学性质.

关键词：相变弹性性质热力学性质第一性原理