检索结果-南通市图书馆

作者：盛斌捷苏州大学

学位级别：硕士

CD7蛋白表达在T细胞以及NK细胞上,并且在急性淋巴细胞白血病(T-ALL)以及T细胞淋巴母细胞淋巴瘤(T-LBL)细胞上表达更高。目前CD7靶向的免疫过继疗法越来越多地应用于临床,然而,对于CD7的生物学功能以及CD7蛋白对造血系统的影响目前还并... 详细信息

CD7蛋白表达在T细胞以及NK细胞上,并且在急性淋巴细胞白血病(T-ALL)以及T细胞淋巴母细胞淋巴瘤(T-LBL)细胞上表达更高。目前CD7靶向的免疫过继疗法越来越多地应用于临床,然而,对于CD7的生物学功能以及CD7蛋白对造血系统的影响目前还并不清楚。目的:本文旨在研究CD7的生物学功能以及CD7缺失后对小鼠造血系统的影响。方法:1.利用CRISPR/Cas9技术构建了CD7基因敲除小鼠,将CD7+/-小鼠杂交得到野生鼠以及CD7-/-小鼠。2.对小鼠免疫器官伊红苏木精染色(H&E)并检测脏器重量、细胞数。选择小鼠的胸腺细胞以及骨髓中的NK细胞进行RN A-sequence分析。在体外检测小鼠脾脏、胸腺细胞的增殖能力,以及小鼠胸腺细胞的迁移、粘附能力。3.利用流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测小鼠骨髓中造血系统各种类型细胞占比、胸腺中T细胞发育过程各种类型细胞占比以及脾脏中各类免疫细胞占比。利用五分类血细胞分析仪检测小鼠外周血细胞占比。4.皮下接种B16-F10细胞,利用流式细胞术检测接种肿瘤后小鼠肿瘤以及脾脏中各类免疫细胞占比,提取胸腺以及脾脏细胞的RNA,利用Q-PCR检测细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-2的相对表达含量。通过流式分选的方法分选脾脏的CD8+T细胞,在体外检测其对B16-F10肿瘤细胞的杀伤能力、迁移、侵袭、粘附以及细胞因子的相对表达含量。5.利用胞内阻断的方式(Protein Expression Blocker,PEBL)构建CD7-的正常供者外周血T细胞,利用流式细胞术检测T细胞表面常见膜蛋白以及细胞凋亡、细胞周期,体外检测其迁移、趋化、粘附以及粘附相关基因的相对表达含量。并构建阻断CD7蛋白的CAR-T细胞并持续检测其对胰腺癌肿瘤细胞株的杀伤能力。6.利用胞内阻断的方式构建CD7-的肿瘤细胞株,通过流式细胞术检测肿瘤细胞株表面常见膜蛋白以及细胞凋亡、细胞周期,体外检测其迁移、趋化、粘附以及粘附相关基因的相对表达含量。通过尾静脉注射肿瘤细胞到免疫缺陷小鼠(NSG),观察小鼠生存期、体重以及外周血肿瘤负荷,最后处死小鼠检测小鼠脏器的肿瘤浸润情况。结果:1.成功获得CD7-/-小鼠,RNA-sequence结果显示CD7的缺失造成小鼠胸腺细胞与胞外基质的相互作用以及焦点粘附作用相关基因下调。2.在正常生理条件下,小鼠造血系统、胸腺、脾脏各类型细胞占比均正常。3.接种B16-F10细胞后,CD7-/-小鼠肿瘤体积增长更快,脾脏以及肿瘤中的CD8+T细胞占比减少。4.接种B16-F10细胞后,CD7-/-小鼠脾脏CD8+T细胞的侵袭粘附能力减弱。5.阻断CD7后的正常供者外周血T细胞粘附等能力与正常外周血T细胞相比没有显著差异。6.阻断CD7后的肿瘤细胞侵袭、粘附能力减弱。在NCG小鼠中阻断CD7后的肿瘤细胞更多的富集在肝脏中。结论:本文发现了 CD7基因的缺失并不影响小鼠造血系统的发育,对小鼠的生长也没有影响。本文阐明了 CD7的生物学功能以及发挥作用的条件,为临床评估靶向治疗后CD7缺失可能会引起的副作用提供了理论依据。最后,本文发现了阻断CD7后的肿瘤细胞侵袭能力减弱,对经CD7靶向治疗后阴性复发患者的后续治疗具有重要意义。

关键词：造血系统肿瘤浸润 IFN-γ 肿瘤侵袭

来源：

同方学位论文库评论

在线全文

同方学位论文库

学校读者我要写书评

暂无评论

CD7纳米抗体衍生的CAR-T细胞对CD7阳性急性髓系白血病细胞的杀伤活性

引用

中国肿瘤生物治疗杂志 2020年第8期27卷 852-859页

作者：范双双张亭亭王恬盛斌捷游凤涛陈丹翟晓晨安钢力孟会敏杨林苏州大学医学部唐仲英血液学研究中心江苏苏州215123 苏州大学血液协同创新中心江苏苏州215123 苏州大学放射医学与辐射防护国家重点实验室江苏苏州215123 博生吉医药科技(苏州)有限公司江苏苏州215123

目的:针对CD7阳性的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞开发一种新型的CD7嵌合抗原受体修饰的T细胞(CD7-CAR-T),观察其对CD7阳性AML细胞的杀伤作用。方法:基于CD7纳米抗体序列、CD28和4-1BB共刺激域序列构建CD7-CAR慢病毒... 详细信息

目的:针对CD7阳性的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞开发一种新型的CD7嵌合抗原受体修饰的T细胞(CD7-CAR-T),观察其对CD7阳性AML细胞的杀伤作用。方法:基于CD7纳米抗体序列、CD28和4-1BB共刺激域序列构建CD7-CAR慢病毒载体,包装病毒颗粒并与CD7蛋白阻断剂(protein expression blocker,PEBL)慢病毒共感染人T细胞,制备CD7-CAR-T;应用实时无标记动态细胞分析技术(real time cellular analysis,RTCA)验证CD7-CAR-T对CD7过表达的293T细胞的特异性杀伤能力,流式细胞术检测CD7-CAR-T对CD7高、中、低表达的AML细胞(KG-1、HEL、Kasumi-1细胞)的增殖和细胞因子分泌的影响。结果:成功构建CD7-CAR-T细胞并阻断其表面CD7的表达,与T细胞相比,CD7-CAR-T细胞可以抑制CD7-293T细胞的增殖并促进其分泌TNF、Granzyme B和INF-γ,可显著促进CD7阳性的KG-1细胞和HEL细胞的凋亡(t=147.1、P0.05)。结论:CD7-CAR-T细胞能够特异性杀伤CD7阳性的AML细胞。

关键词：嵌合抗原受体修饰的T细胞 CD7 急性髓系白血病凋亡

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

CD28突变的CAR T细胞疗法展现出良好的安全性

引用

现代免疫学 2022年第6期42卷 474-481页

作者：张亭亭王恬游凤涛李自宣田帅雨张凯露盛斌捷吴海安钢力孟会敏汪敏王兴兵杨林苏州大学唐仲英血液学研究中心血液学协同创新中心放射医学与辐射防护国家重点实验室苏州215123 博生吉医药科技(苏州)有限公司苏州215000 中国科学技术大学附属第一医院血液科合肥230001 中国科学技术大学生命科学与医学部合肥230001

为改善CD19靶向的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)修饰的T细胞治疗后潜在的细胞因子风暴问题,提高临床应用的安全性,将CD28共刺激结构域中的YMNM和PYAP基序双突变,并分别构建包含CD28结构域(19-CD28)和CD28突变结构域(19-C... 详细信息

为改善CD19靶向的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)修饰的T细胞治疗后潜在的细胞因子风暴问题,提高临床应用的安全性,将CD28共刺激结构域中的YMNM和PYAP基序双突变,并分别构建包含CD28结构域(19-CD28)和CD28突变结构域(19-CD28M)的CD19-CAR,利用慢病毒载体构建CD19-CAR T细胞和CD19-CAR Jurkat细胞。将CD19-CAR Jurkat细胞株与肿瘤细胞共孵育来验证CD19-CAR对Jurkat细胞的特异性活化效果,随后检测CD19-CAR T细胞与靶细胞共孵育后的细胞毒性和细胞因子释放量。结果显示,与对照组比较,19-CD28-CAR Jurkat细胞和19-CD28M-CAR Jurkat细胞与Raji(CD19~+)细胞共孵育后CD69表达水平上调60%以上,CD25表达水平上调10%左右。在效应细胞∶靶细胞分别为0.5∶1、1∶1、5∶1的条件下,19-CD28-CAR T细胞和19-CD28M-CAR T细胞诱导Raji(CD19~+)细胞的凋亡率比对照组分别增加了15%、25%和40%左右,并于效应细胞∶靶细胞为5∶1时达到饱和。与此同时,19-CD28M-CAR T细胞释放细胞因子Granzyme B、IFN-γ、IL-2、TNF-α的量分别下降了14%、28%、34%和33%。该研究提示,CD28共刺激结构域突变的CD19-CAR T细胞毒性并未减弱,同时安全性显著增强。

关键词：嵌合抗原受体修饰的T细胞 CD28突变细胞因子释放综合征

来源：

维普期刊数据库

同方期刊数据库评论

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

欢迎您,

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

欢迎您,

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

在线全文

在线全文

在线全文

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：