CD7纳米抗体衍生的CAR-T细胞对CD7阳性急性髓系白血病细胞的杀伤活性

作     者：范双双 张亭亭 王恬 盛斌捷 游凤涛 陈丹 翟晓晨 安钢力 孟会敏 杨林 FAN Shuangshuang;ZHANG Tingting;WANG Tian;SHENG Binjie;YOU Fengtao;CHEN Dan;ZHAI Xiaochen;AN Gangli;MENG Huimin;YANG Lin

作者机构：苏州大学医学部唐仲英血液学研究中心江苏苏州215123 苏州大学血液协同创新中心江苏苏州215123 苏州大学放射医学与辐射防护国家重点实验室江苏苏州215123 博生吉医药科技(苏州)有限公司江苏苏州215123 

出 版 物：《中国肿瘤生物治疗杂志》 (Chinese Journal of Cancer Biotherapy)

年 卷 期：2020年第27卷第8期

页      面：852-859页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家重点研发计划资助项目(No.2016YFC1303403) 国家自然科学基金资助项目(No.81872431,31471283) 江苏省高等学校优势学科建设工程资助项目 协同创新重大项目资助(No.XYXT-2015304) 江苏省“六大人才高峰工程”资助项目(No.SWYY-CXTD-010) 江苏省高等学校自然科学基金资助项目(No.19KJD320003) 

主　　题：嵌合抗原受体修饰的T细胞 CD7 急性髓系白血病 凋亡 

摘      要：目的:针对CD7阳性的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞开发一种新型的CD7嵌合抗原受体修饰的T细胞(CD7-CAR-T),观察其对CD7阳性AML细胞的杀伤作用。方法:基于CD7纳米抗体序列、CD28和4-1BB共刺激域序列构建CD7-CAR慢病毒载体,包装病毒颗粒并与CD7蛋白阻断剂(protein expression blocker,PEBL)慢病毒共感染人T细胞,制备CD7-CAR-T;应用实时无标记动态细胞分析技术(real time cellular analysis,RTCA)验证CD7-CAR-T对CD7过表达的293T细胞的特异性杀伤能力,流式细胞术检测CD7-CAR-T对CD7高、中、低表达的AML细胞(KG-1、HEL、Kasumi-1细胞)的增殖和细胞因子分泌的影响。结果:成功构建CD7-CAR-T细胞并阻断其表面CD7的表达,与T细胞相比,CD7-CAR-T细胞可以抑制CD7-293T细胞的增殖并促进其分泌TNF、Granzyme B和INF-γ,可显著促进CD7阳性的KG-1细胞和HEL细胞的凋亡(t=147.1、P0.05)。结论:CD7-CAR-T细胞能够特异性杀伤CD7阳性的AML细胞。