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T cells expressing cd5/cd7 bispecific chimeric antigen receptors with fully human heavy-chain-only domains mitigate tumor antigen escape

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Signal Transduction and Targeted Therapy 2022年第4期7卷 1322-1333页

作者： Zhenyu Dai Wei Mu Ya Zhao Jiali Cheng Haolong Lin Kedong Ouyang Xiangyin Jia Jianwei Liu Qiaoe Wei Meng Wang Chaohong Liu Taochao Tan Jianfeng Zhou Department of Hematology Tongji HospitalTongji Medical CollegeHuazhong University of Science and TechnologyWuhanHubei 430030China Nanjing IASO Biotherapeutics NanjingJiangsu 210000China Department of Pathogen Biology Tongji Medical CollegeHuazhong University of Science and TechnologyWuhanHubei 430030China

Bispecific chimeric antigen receptor T-cell(CAR-T)therapies have shown promising results in clinical trials for advanced B-cell malignancies.However,it is challenging to broaden the success of bispecific CAR-T therapies to treat refractory/relapse(r/r)T-cell leukemia/lymphoma because targeting multiple T-cell-expressing antigens leads to exacerbated CAR-T cell fratricide and potential safety concerns.Fully human heavy chain variable(FHVH)antibodies that specifically target cd5 or cd7 were screened and constructed to cd5/cd7 bispecific CARs.A truncated Epidermal growth factor receptor were integrated into CAR constructs to address safety concerns.To tackle the fratricidal issue of CAR-T cells targeting T-cell-pan marker(s),CRISPR/Cas9-based cd5 and cd7 genes knockout were performed before lentiviral transduction of bispecific CARs.Functional comparison between different bispecific CAR structures:tandem CARs and dual CAR were performed in vitro and in vivo to determine the optimal construct suitable for addressing T-cell malignancy antigen escape in clinical setting.Knockout of cd5 and cd7 prevents fratricide of cd5/cd7 bispecific CAR-T cells,and FHVH-derived cd5/cd7 bispecific CAR-T cells demonstrate potent antitumor activity in vitro and in vivo.The fratricide-resistant FHVH-derived cd5/cd7 bispecific CAR-T cells have potent antitumor activity against T-cell malignancies,and tandem CARs are more effective than dual CAR in preventing tumor escape in heterogeneous leukemic cells.The meaningful clinical efficacy and safety of tandem cd5/cd7 CAR-T cells deserve to be explored urgently.

关键词： cd7 CRISPR/Cas9 expressing

Acute intestinal GVHD following donor-derived cd7-CAR-T-cell infusion in a child with Omicron COVID-19

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Blood Science 2023年第4期5卷 269-273页

作者： Yu Lian Zhilin Gao Juanjuan Ti Zhuanzhuan Yu Liangming Ma Jia Wei Department of Hematology Shanxi Bethune HospitalShanxi Academy of Medical SciencesTongji Shanxi HospitalThird Hospital of Shanxi Medical UniversityTaiyuan 030032China Tongji Hospital Tongji Medical CollegeHuazhong University of Science and TechnologyWuhan 430030China

1.INTRODUCTION。cd7 is an ideal chimeric antigen receptor(CAR)target for T-cell acute lymphocytic leukemia(T-ALL).Donor-derived CAR-T-cell therapy,as an emerging treatment strategy,shows excellent efficacy in refractory/relapsed(r/r)T-ALL,with over 90%of complete remission(CR),brings new promise to improve prognosis and survival quality,and provides more opportunities for following bridging transplantation.1 However,cd7-CAR-T-cell recipients are always immunocompromised for a number of reasons:depletion of healthy T and NK cells;the need for drugs,which are lymphodepleting,prior to CAR-T-cell therapy;a history of hematological malignancies;multiple-lines chemotherapy;and hematopoietic stem-cell transplantation(HSCT).Meanwhile,patients post donor-derived CAR-T-cell therapy are at high risk of graft-versus-host disease(GVHD)considering infusion of allogeneic cell and increase incidence of infection.

关键词： cd7 drugs GVHD

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右肾原发性髓外浆细胞瘤1例

中华病理学杂志 2022年第4期51卷 360-362页

作者：夏成茂朱萌姬菩忠刘斌杨艳丽解放军联勤保障部队第九四〇医院病理科兰州730000 甘肃中医药大学病理教研室兰州730000

肾原发性髓外浆细胞瘤是一种罕见的发生于骨髓外的浆细胞单克隆增生性惰性淋巴瘤。本文报道1例原发于肾脏的髓外浆细胞瘤。腹腔镜下右肾输尿管根治性切除术,术后病理组织形态表现为肿瘤由分化较成熟的具有浆细胞特征的瘤细胞构成,细胞... 详细信息

肾原发性髓外浆细胞瘤是一种罕见的发生于骨髓外的浆细胞单克隆增生性惰性淋巴瘤。本文报道1例原发于肾脏的髓外浆细胞瘤。腹腔镜下右肾输尿管根治性切除术,术后病理组织形态表现为肿瘤由分化较成熟的具有浆细胞特征的瘤细胞构成,细胞形状大小均匀一致,呈圆形或卵圆形,核偏位,光镜下呈现车辐状。免疫组织化学cd38、cd79α、MUM1、Kappa及cd56阳性。

关键词：病理组织形态瘤细胞 cd56 cd38 免疫组织化学 cd7 浆细胞细胞形状

11例原发性皮肤弥漫大B细胞淋巴瘤,腿型的临床特征和疗效分析

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中华血液学杂志 2023年第8期44卷 690-693页

作者：袁跃兴施晴赫洋裘惠玲易红梅董磊王黎程澍许彭鹏赵维莅上海交通大学医学院附属瑞金医院血液科医学基因组学国家重点实验室上海血液学研究所上海200025 福建医科大学附属龙岩第一医院血液风湿科龙岩364000

原发性皮肤弥漫大B细胞淋巴瘤,腿型(PcdLBCL,LT)多发于老年患者,是一种罕见的侵袭性非霍奇金淋巴瘤(NHL),在每年新发原发性皮肤淋巴瘤中约占4%[1]。研究表明,PcdLBCL,LT患者中存在MYD88、PIM1、cd79B等基因的高频突变,且BCR信号通路上... 详细信息

原发性皮肤弥漫大B细胞淋巴瘤,腿型(PcdLBCL,LT)多发于老年患者,是一种罕见的侵袭性非霍奇金淋巴瘤(NHL),在每年新发原发性皮肤淋巴瘤中约占4%[1]。研究表明,PcdLBCL,LT患者中存在MYD88、PIM1、cd79B等基因的高频突变,且BCR信号通路上的基因(cd79A/B或CARD11)突变与患者的不良预后相关[2]。目前,国内对于PcdLBCL,LT的研究仅见于个别病例报告及小样本量的临床病理研究,尚未开展对PcdLBCL,LT的分子病理学研究。为了进一步明确中国PcdLBCL,LT患者的临床病理特征和疗效,本文收集了11例PcdLBCL,LT患者的临床资料并进行了相关研究。

关键词：弥漫大B细胞淋巴瘤个别病例临床病理研究 cd7 分子病理学老年患者临床病理特征 DLBCL

胃非特殊类型外周T细胞性淋巴瘤伴cd20和cd79α异常表达1例

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中华病理学杂志 2022年第7期51卷 667-669页

作者：彭双双吴鸿雁杨军孙庆洋周照雅史倩芸何璐陈洁宇樊祥山南京大学医学院附属鼓楼医院病理科南京210008 南京江北医院病理科南京210044 南京医科大学鼓楼临床医学院病理科南京210008

伴cd20和cd79α异常表达的非特殊类型外周T细胞淋巴瘤(PTCL)极为罕见,本文报道1例发生于胃部的病例。虽然T细胞标志物和B细胞标志物同时阳性,但T细胞受体克隆性基因重排阳性明确了诊断。本文分析了该PTCL呈cd20和cd79α阳性表达的可能原... 详细信息

伴cd20和cd79α异常表达的非特殊类型外周T细胞淋巴瘤(PTCL)极为罕见,本文报道1例发生于胃部的病例。虽然T细胞标志物和B细胞标志物同时阳性,但T细胞受体克隆性基因重排阳性明确了诊断。本文分析了该PTCL呈cd20和cd79α阳性表达的可能原因,且包含cd20单克隆抗体利妥昔单抗在内的R-cdOP(利妥昔单抗,环磷酰胺,脂质体多柔比星,长春地辛,醋酸泼尼松)治疗方案对患者具有一定疗效,为深入了解此种病例的临床病理学特征、治疗及预后提供参考依据。

关键词：利妥昔单抗异常表达克隆性基因重排 cd7 长春地辛临床病理学特征治疗及预后醋酸泼尼松

异基因造血干细胞移植联合cd7 CAR-T细胞疗法治疗T淋巴母细胞性淋巴瘤1例报告及文献复习

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中华血液学杂志 2023年第10期44卷 864-865页

作者：王祥民周屹张姣丽周泓沅张青孙倩李护君徐林艳姚书娜姚志华闫冬梅徐开林桑威徐州医科大学附属医院血液科徐州医科大学血液病研究所骨髓干细胞重点实验室徐州221002 徐州医科大学附属医院康复科徐州221002 郑州大学附属肿瘤医院淋巴综合内科郑州450000

T淋巴母细胞性淋巴瘤(T-LBL)是一种高度侵袭性的血液恶性肿瘤,其特征是骨髓和外周血中浸润未成熟的T细胞,常侵犯纵隔,骨髓和淋巴结,预后差[1]。异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)可明显改善T-LBL患者的生存[2],但复发/难治性T-LBL(R/R T-... 详细信息

T淋巴母细胞性淋巴瘤(T-LBL)是一种高度侵袭性的血液恶性肿瘤,其特征是骨髓和外周血中浸润未成熟的T细胞,常侵犯纵隔,骨髓和淋巴结,预后差[1]。异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)可明显改善T-LBL患者的生存[2],但复发/难治性T-LBL(R/R T-LBL)患者的预后仍然很差[3]。嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法作为一种新兴的治疗手段,近年来在复发/难治性血液系统恶性肿瘤患者中取得了令人鼓舞的疗效[4,5,6]。我们采用allo-HSCT联合cd7 CAR-T细胞疗法治疗1例T-LBL获得满意疗效。

关键词：血液系统恶性肿瘤 cd7 血液恶性肿瘤 LBL 高度侵袭性异基因造血干细胞移植 CAR 预后差

自然选择的cd7 CAR-T对复发/难治急性髓系白血病治疗的临床前研究

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自然选择的CD7 CAR-T对复发/难治急性髓系白血病治疗的临床前研究

作者：鲁钰河北医科大学

学位级别：硕士

目的:构建自然选择的cd7 CAR-T并探究自然选择的cd7 CAR-T在体外和体内实验中的作用机制和抗白血病效果。方法:1.利用流式细胞术和免疫组织化学分析cd7在R/R-AML病人和健康供者的正常细胞群中的表达比例,以及R/R-AML病人微小残留病(M RD... 详细信息

目的:构建自然选择的cd7 CAR-T并探究自然选择的cd7 CAR-T在体外和体内实验中的作用机制和抗白血病效果。方法:1.利用流式细胞术和免疫组织化学分析cd7在R/R-AML病人和健康供者的正常细胞群中的表达比例,以及R/R-AML病人微小残留病(M RD)中的表达比例。2.体外构建慢病毒载体,装载设计好的cd7 CAR结构。3.利用Ficoll分离液,分离来自健康供者外周血的PBMCs细胞,随后cd3磁珠用于分选cd3T细胞。4.cd3T细胞复苏,并培养2d,转染转载cd7 CAR结构的慢病毒,并持续培养12天。5.流式细胞术分析转染率,cd7 CAR-T细胞群中cd7表达率,cd7 CAR-T记忆表型,衰竭标志物。6.流式细胞术分析cd7 CAR-T细胞对cd7急性髓系白血病细胞系的杀伤效果和对cd7R/R-AML原代细胞的杀伤试验,对KG-1a细胞因子释放试验。7.构建cd7急性髓系白血病小鼠模型,小动物活体实验追踪小鼠体内肿瘤动力学。结果:1.免疫组织化学提示3例R/R-AML患者骨髓组织中cd117,cd34,MPO高表达,cd7呈现不同程度的表达。流式细胞术分析正常T细胞亚群中cd7比例,健康供者组(HD组)(91.00%-92.10%),R/R-AML组(91.70%-94.00%);正常B细胞亚群中cd7的比例,HD组(0.58%-1.42%),R.R-AML组(1.20%-3.24%);正常单核细胞亚群中cd7比例,HD组(0.21%-2.19%),R/R-AML组(1.51%-3.08%);正常中性粒细胞亚群中cd7比例,HD组(0.34%-0.46%),R/R-AML组(0.31%-0.87%)。利用流式细胞术分析AML患者微小残留病(MRD)中cd7比例,统计了16例AML-MRD阳性患者,其中MRD中cd7阳性的5例,并呈现不同水平的表达(78.89%,31.38%,79.96%,60.75%,5.11%)。2.我们体外构建了自然选择cd7 CAR结构,并在转染后day0、day7、day10、day12测定扩增倍率:day0(NTR:1.00,cd7 CAR:1.00),day7(NTR:3.38-9.00,cd7 CAR:2.80-4.67),day10(NTR:19.35-34.00,cd7 C AR:6.00-16.25),day12(NTR:108.00-158.06,cd7 CAR:18.27-36.25)。3.台盼蓝染色,分别在转染后day7和day12分析细胞活率,day7(N TR:87.20%-91.40%,cd7 CAR:78.3%-81.80%),day12(NTR:90.30%-92.50%,cd7 CAR:80.70%-85.40%)。4.流式细胞术在转染后day4和day12测定转染率和cd7表达率,结果:day4转染率(NTR:0.03%-0.37%,cd7 CAR:83.60%-93.70%),day4 cd7表达(NTR:95.20%-98.90%,cd7 CAR:0.01%-5.08%),day12转染率(NT R:0.11%-0.38%,cd7 CAR:90.80%-94.00%),day12 cd7表达(NTR:91.50%-94.50%,cd7 CAR:0.05%-2.73%)。5.在转染后第12天,细胞孵育cd3-APC-cy7,cd45RO-Percp,CC R7-PE,cd4-PE-cy7,cd8-PB并用流式细胞仪分别对cd4和cd8细胞亚群测定记忆表型。结果:cd4T(cd45ROCCR7)(NTR vs cd7 C AR=23.00%-56.10%vs 32.60%-55.90%),cd8T(NTR vs cd7 CAR=11.70-31.60%vs 38.00-41.80%);cd4T(cd45ROCCR7)(NTR vs cd7 C AR=16.30%-32.40%vs 34.70%-45.40%),cd8T(NTR vs cd7 CAR=7.92%-28.00%vs 44.90%-51.90%);cd4T(cd45ROCCR7)(NTR vs cd7 CAR=9.63-10.60%vs 7.32%-15.00%),cd8T(NTR vs cd7 CAR=14.60-32.00%vs 5.48-9.32%);cd4T(cd45ROCCR7)(NTR vs cd7 CAR=3.87-35.00%vs 2.17%-6.95%),cd8T(NTR vs cd7 CAR=17.30-65.80%vs3.92%-4.95%)。6.转染后第12天,流式细胞仪测定耗竭标志物(PD-1,TIM-3,LAG-3)表达水平,结果:PD-1(NTR vs cd7 CAR=0.05-0.65%vs 0.49-0.64%);TIM-3(NTR vs cd7

关键词：复发难治急性髓系白血病 cd7 嵌合抗原受体T细胞治疗免疫治疗微小残留病

供者cd7 CAR-T细胞治疗异基因造血干细胞移植后急性T淋巴细胞白血病复发1例

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中华血液学杂志 2023年第1期44卷 79-79页

作者：黄慧娟刘丹吴源兵姜珊珊吴雅雪侯梦佳胡晓慧马骁苏州大学附属第一医院苏州215006 苏州弘慈血液病医院苏州215006

患者,男性,28岁,2019年诊断为急性T淋巴细胞白血病(T-ALL),应用Hyper-CVAD方案治疗,A、B方案交替进行各2个疗程后,获持续分子学缓解。2019年10月予改良BU/CY方案预处理后,行异基因造血干细胞移植,供者为其胞弟,干细胞来源为骨髓+外周血... 详细信息

患者,男性,28岁,2019年诊断为急性T淋巴细胞白血病(T-ALL),应用Hyper-CVAD方案治疗,A、B方案交替进行各2个疗程后,获持续分子学缓解。2019年10月予改良BU/CY方案预处理后,行异基因造血干细胞移植,供者为其胞弟,干细胞来源为骨髓+外周血。予吗替麦考酚酯、甲泼尼龙、环孢素A预防急性移植物抗宿主病(aGVHD),移植后1个月出现皮肤及肝脏GVHD,经治疗后好转。长期口服甲泼尼龙、环孢素A控制GVHD并门诊随访减量,后调整为甲泼尼龙及他克莫司较小剂量维持,期间皮肤GVHD反复,皮肤慢性GVHD持续。

关键词：急性移植物抗宿主病急性T淋巴细胞白血病门诊随访甲泼尼龙吗替麦考酚酯 cd7 环孢素A 异基因造血干细胞移植

cd7在NK/T细胞淋巴瘤中的表达及与预后的相关性研究

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中华血液学杂志 2020年第11期41卷 921-926页

作者：付晓瑞万文娟孙振昌张旭东南飞飞葛菊蕊夏亚勤张明智郑州大学第一附属医院肿瘤科河南省淋巴瘤诊疗中心450052

目的分析cd7在NK/T细胞淋巴瘤(NKTCL)中的表达情况,并探讨其与生存及预后的相关性。方法回顾性分析2008年5月至2019年12月郑州大学第一附属医院收治或会诊的112例NKTCL患者的病例资料,免疫组织化学染色检测肿瘤组织中cd7的表达情况,分析... 详细信息

目的分析cd7在NK/T细胞淋巴瘤(NKTCL)中的表达情况,并探讨其与生存及预后的相关性。方法回顾性分析2008年5月至2019年12月郑州大学第一附属医院收治或会诊的112例NKTCL患者的病例资料,免疫组织化学染色检测肿瘤组织中cd7的表达情况,分析cd7表达对患者生存及预后的影响。结果 112例NKTCL患者中cd7阳性表达率为84.82%,其表达与性别、年龄、原发部位无关。对临床资料完整的72例患者进行分析,结果表明,cd7的表达与PINK评分、肿瘤转移、外周血EBV-DNA水平相关,而分期、骨髓是否受累、有无B症状、IPI/aaIPI评分、Ki-67、EBER、TIA-1、GranzymeB、LDH、β2-微球蛋白水平与cd7表达无关。72例患者的生存分析显示,其1、3、5年总生存(OS)率分别为81.2%、61.8%和58.8%,无进展生存(PFS)率分别为53.5%、29.4%和24.0%。中位OS期为81个月,中位PFS期为14个月。cd7阳性组与cd7阴性组的3年OS率分别为58.1%和83.9%(P>0.05),3年PFS率分别为21.7%和51.9%(P7的表达水平及cd7表达影响患者预后。多因素分析显示,Ann Arbor分期及cd7表达是PFS的独立预后因素,PINK评分及Ki-67表达水平是OS的独立预后因素。结论 cd7在NKTCL中的表达率高,且与不良预后密切相关。PINK评分中/高危、外周血EBV-DNA水平高或已出现转移的患者更易表达cd7。

关键词： cd7 NK/T细胞淋巴瘤 PINK评分 EBV-DNA 预后