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拟南芥RACK1和AGB1蛋白的纯化及其相互作用研究

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拟南芥RACK1和AGB1蛋白的纯化及其相互作用研究

作者：王连连扬州大学

学位级别：硕士

蛋白质间的相互作用存在于机体的各个细胞生命活动过程。基因的复制、转录、蛋白质的翻译、剪切、分泌以及细胞周期的调控、信号转导、物质代谢等生命过程均受到蛋白质间相互作用的调控。蛋白质间相互作用的顺利进行是细胞正常生命活动... 详细信息

蛋白质间的相互作用存在于机体的各个细胞生命活动过程。基因的复制、转录、蛋白质的翻译、剪切、分泌以及细胞周期的调控、信号转导、物质代谢等生命过程均受到蛋白质间相互作用的调控。蛋白质间相互作用的顺利进行是细胞正常生命活动的保障。因此,研究蛋白质间的相互作用具有十分重要的意义。RACK1(Receptor for Activated C Kinase 1, RACK1)被认为是一种支架蛋白,在细胞信号转导中具有重要的作用。异三聚体GTP结合蛋白(heterotrimeric GTP- binding protein, G蛋白)是活细胞内一类具有重要生理调节功能的蛋白质。RACK1和AGB1蛋白都属于WD-40蛋白家族,两者具有相似的结构。RACK1和Gβ参与了植物许多生理、生化及对环境胁迫的响应过程。在动物中RACK1和Gβ间存在相互作用。那么,植物RACK1和Gβ间是否也像哺乳动物细胞中的情况一样存在相互作用,阐明这一科学问题对深入了解植物RACK1和Gβ的调节机制具有重要的科学意义。本实验首先利用大肠杆菌表达系统成功将编码拟南芥RACK1和AGB1蛋白的基因克隆到表达载体上,通过IPTG诱导分别使拟南芥RACK1和AGB1蛋白得到了有效表达,为进一步获得拟南芥RACK1和AGB1蛋白抗体奠定基础。在此基础上,还用GST pull down和酵母双杂交技术验证了拟南芥RACK1和AGB1蛋白不存在相互作用。研究结果表明:(1)将编码拟南芥RACK1蛋白的基因克隆到质粒pGEX-6P-1上,构建表达质粒pGEX-6P-1/AtRACK1,表达量占菌体总蛋白的32%;通过表达条件的优化,采用0.1mM IPTG浓度、24℃为最佳表达条件。SDS-PAGE电泳分析其可溶性,结果表明约50%的融合蛋白可溶。选择上清依次过谷胱甘肽-琼脂糖树脂亲和层析柱和Sephadex-G100凝胶柱纯化,纯度达95%。(2)将编码拟南芥G蛋白β亚基的基因克隆到质粒pET32a上,构建表达质粒pET32a/AGB1,表达量占菌体总蛋白的35%;通过表达条件的优化,采用0.1mM IPTG浓度、24℃为最佳表达条件。SDS-PAGE电泳分析其可溶性,结果表明融合蛋白全部以包涵体形式存在;将含有表达质粒pET32a/AGB1的菌体蛋白进行超声波破碎,离心后得到包涵体沉淀。分别用Triton X-100和1M的尿素洗涤包涵体,包涵体蛋白经8M尿素变性后,采用分步透析法使变性蛋白复性。将复性后得到的蛋白进行柱层析分离纯化,纯度达88%。(3)在本实验的表达系统中,AtRACK1蛋白收率为9mg/L发酵液,AGB1蛋白收率为2.1 mg/L发酵液。(4)应用离体(GST pull down)和活体(酵母双杂交技术)蛋白相互作用技术分析了拟南芥RACK1和G蛋白β亚基(AGB1)间的相互作用,结果表明,两者之间不存在相互作用。

关键词：拟南芥 RACK1 AGB1 GST pull down 酵母双杂交

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西安市医保统筹基金收支预测分析

西安市医保统筹基金收支预测分析

作者：王连连西安电子科技大学

学位级别：硕士

医疗保险是一个世界性难题。医疗保险体系能否持续健康发展的关键是保险基金收支的平衡问题，很多国家的社会医疗保险因为收支失衡并带来巨大财政赤字而难以为继。因此，综合考虑影响费用的多种因素，对医疗费用进行深入研究和定量的数... 详细信息

医疗保险是一个世界性难题。医疗保险体系能否持续健康发展的关键是保险基金收支的平衡问题，很多国家的社会医疗保险因为收支失衡并带来巨大财政赤字而难以为继。因此，综合考虑影响费用的多种因素，对医疗费用进行深入研究和定量的数据测算，全面分析预测医疗保险统筹基金损失支出，是保证基金平衡的重中之重。本文研究以风险理论、损失分布理论和贝叶斯预测理论为基础，将研究视角集中在社会医疗保险的精算中，分析影响医疗保险基金费用支出的多种因素中的疾病种类因素，建立按照疾病类型分组的风险损失预测模型，并与常用的线性回归模型作比较，以期建立医疗保险费用的控制方法、把握控制程度，并为医疗保险的筹资或待遇水平的调整提供参考。本文的主要工作包括以下几点：第一，通过相关参考文献的梳理，在国内外研究的基础上，建立了基于疾病分组的风险损失保险精算模型，并提出了模型构建需要的参数、参数的获得方法或参数数据的预测方法，并对2634例住院病人的病历样本数据利用统计分析软件SPSS17.0进行实证分析，进而进行预测。第二，利用SPSS17.0及Excel对统筹基金收支及其影响因素的历史数据建立收入和支出的多元线性回归模型并检验，预测出该模型下未来5年的统筹基金收入及支出值。第三，通过比较两模型，分析风险损失预测模型的社会适用性和优劣势。实证结果表明：（1）将疾病细分建立的风险损失预测模型在预测数据的具体细节方面的合理性优于多元线性回归模型，有助于增强对保险损失赔付的控制力度;（2）风险损失预测模型比多元线性回归模型更多地考虑了形成基金支出的影响因素。最后，在实证研究的基础上，本文提出了风险损失预测模型灵活应用的各个方面，对于实现医疗保险基金损失支出的多方面影响因素的具体研究提供了新的思路和方法，并在本文实证研究的局限性的基础上，提出了电子病历及信息系统建立的重要性及其建立后所能带来的就解决本文研究局限的好处，期望电子病历信息系统能够尽快建立，在实现医院管理、基金支出管理等的数字化、科学化中发挥重要作用。

关键词：医疗保险收支预测线性回归模型风险损失模型贝叶斯

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辽代妇女社会生活研究

辽代妇女社会生活研究

作者：王连连西北师范大学

学位级别：硕士

辽是以契丹族为主要统治民族建立的封建王朝,由于辽代社会在各个时期发展的渐进性和不平衡性,以及国内阶级、民族和地域上的差异,使得妇女的社会生活在不同时期和不同阶级、民族、地域上的表现存在一定的差异。在政治方面,由于王族惟与... 详细信息

辽是以契丹族为主要统治民族建立的封建王朝,由于辽代社会在各个时期发展的渐进性和不平衡性,以及国内阶级、民族和地域上的差异,使得妇女的社会生活在不同时期和不同阶级、民族、地域上的表现存在一定的差异。在政治方面,由于王族惟与后族通婚的婚姻体制和官分南北的政治体制,导致后妃频繁参与政治。在经济方面,广大平民妇女是社会财富的直接创造者和被剥削者,而拥有头下军州的公主则可以直接享有社会财富。在妇女的教育方面,主要包括文化教育和妇道教育。文化教育受辽社会尊儒的文化政策影响,妇女的文化教育以儒学为主,并且大多直接受教于父母或姆师,这一般是贵族妇女才能得到的;而广大平民妇女很少或根本就没有文化教育。妇道教育则是全体女性都要接受的教育,并且影响了辽代中后期妇女的节烈观念,使得妇女的离婚再嫁从自由趋向保守。辽代的婚姻还呈现出门当户对和民族融合的特点。在家庭中,妇女除了要孝敬父母、生儿育女、相夫教子外,还要管理家业,这样才能称得上是“贤妇”。由于受辽代社会和家庭崇佛的双重影响,有很多妇女信仰佛教,并且出资修建佛教场所,说明妇女在家庭中有一定的财产支配权。但是,很多妇女或出家为尼,或在家吃斋念佛,对商业和农牧业的发展产生了不利影响。在对妇女的保护上,没有专门的法律对妇女进行保护。生活在社会最底层的婢女,至辽代中后期,在法律上才有了人身安全的保障,这虽然是辽代社会的一大进步,但至辽末,婢女仍可以被自由买卖。

关键词：辽代妇女社会生活

新型稀土荧光探针的设计、合成及在检测杀草强中的应用

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稀土 2021年第5期42卷 95-103页

作者：刘文芳王连连王娜刘积包头师范学院化学学院内蒙包头014030

以二乙基三胺五乙酸(dtpa)、杀草强(amitrole)及钐稀土盐为原材料,设计了一种新型稀土荧光探针SmⅢ-dtpaa-bis(amitrole)来检测amitrole。合成的荧光探针采用红外光谱对其结构进行了表征,采用紫外可见光谱和荧光光谱对其光学性质进行了... 详细信息

以二乙基三胺五乙酸(dtpa)、杀草强(amitrole)及钐稀土盐为原材料,设计了一种新型稀土荧光探针SmⅢ-dtpaa-bis(amitrole)来检测amitrole。合成的荧光探针采用红外光谱对其结构进行了表征,采用紫外可见光谱和荧光光谱对其光学性质进行了研究。探究了反应温度、反应时间、溶液酸碱度以及杀草强浓度对SmⅢ-dtpaa-bis(amitrole)荧光光谱的影响。实验结果表明,新型稀土荧光探针SmⅢ-dtpaa-bis(amitrole)的最佳反应温度为393 K,最佳反应时间为7 h,最佳溶液pH为7.00。SmⅢ-dtpaa-bis(amitrole)具有较宽的线性范围0.1μmol/L~210μmol/L和较低的检测限0.975μmol/L。将amitrole加入新型荧光探针SmⅢ-dtpa-bis(amitrole)溶液中后,溶液的荧光发生明显的猝灭现象。

关键词：二乙基三胺五乙酸(dtpa)配合物稀土荧光探针杀草强

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初中英语听说教学与多媒体技术的融合

天津教育 2023年第4期 183-185页

作者：王连连福建省福清市福清海口中学

听和说是学生英语学习中必须要掌握的技能,与学生的英语交际能力发展以及读写能力的提升等方面有着密切联系,在听的过程中学生可以辨别发音的准确性,锻炼英语语言理解能力;在说的过程中提升语言表达能力,获得逻辑思维以及交际能力的锻... 详细信息

听和说是学生英语学习中必须要掌握的技能,与学生的英语交际能力发展以及读写能力的提升等方面有着密切联系,在听的过程中学生可以辨别发音的准确性,锻炼英语语言理解能力;在说的过程中提升语言表达能力,获得逻辑思维以及交际能力的锻炼。听与说是人际交往中必不可少的技能,对学生的英语学习以及语用能力发展有着十分重要的作用。但是,就目前的初中英语听说教学情况来看,不少教师在听说教学的意识和观念上存在偏差,教学指导方法不当,仍然以传统的“填鸭式”方法为主要教学手段,学生在刻板、单一的听说训练中难以提起学习的兴趣,在重复性的单词或短文朗读训练中未能充分发挥学生的主体作用,或给予学生听说实践的机会较少。

关键词：学生的主体作用语言表达能力听说训练语言理解能力多媒体技术听说教学教学指导读写能力

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辽夏金的女性社会群体研究

辽夏金的女性社会群体研究

2016年

作者：黄兆宏王对萍王连连李娜

该选题是一部有关辽夏金三个少数民族建立的政权中女性社会形态的专题研究文集。主要内容是根据史料与考古发现，阐述了辽、西夏、金等三个政权中女性在社会生活各个方面的表现，上至皇族，下至普通百姓，从政治、经济、教育、婚姻、家... 详细信息

ISBN: (纸本)9787226048795

该选题是一部有关辽夏金三个少数民族建立的政权中女性社会形态的专题研究文集。主要内容是根据史料与考古发现，阐述了辽、西夏、金等三个政权中女性在社会生活各个方面的表现，上至皇族，下至普通百姓，从政治、经济、教育、婚姻、家庭、宗教信仰等多重角度进行研究，展示了这一特定历史时期女性的社会生活面貌。

关键词：女性群体社会学研究中国辽宋金元时代

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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原发性高血压晨峰血压增高的分析与治疗

原发性高血压晨峰血压增高的分析与治疗

全国高血压防治知识推广培训班暨健康血压中国行福建漳州会

作者：王连连北京燕化医院心内科

目的:探讨原发性高血压患者血压晨峰与年龄和性别的相关性,晨峰高血压患者心血管事件的风险,探讨血压晨峰的治疗方法。方法:采用动态血压监测仪分析200例高血压患者的血压,确认晨峰组与非晨峰组,观察不同的给药时间对血压晨峰的治疗方... 详细信息

目的:探讨原发性高血压患者血压晨峰与年龄和性别的相关性,晨峰高血压患者心血管事件的风险,探讨血压晨峰的治疗方法。方法:采用动态血压监测仪分析200例高血压患者的血压,确认晨峰组与非晨峰组,观察不同的给药时间对血压晨峰的治疗方法。结果:1与非晨峰组相比较,晨峰组凌晨收缩压、脉压较高,(P0.05)。2早、晚一日两次服药组晨峰血压下降程度大于单纯凌晨服药组(P<0.001)。结论:1血压晨峰与年龄相关。2血压晨峰使心血管事件的风险增加。3睡前服药对晨峰血压的治疗效果较好。

关键词：高血压晨峰血压心血管事件

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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教师应正确认识学生

吕梁教育学院学报 2020年第2期37卷 25-27,31页

作者：王连连兴县北关小学山西兴县035300

教育活动是促进学生成长的自觉实践。正确认识学生是教师对学生的基本认识和根本态度,是直接影响教育活动的目的、方式和效果的重要因素。目前我国教育正处在改革和发展历史进程的关键阶段,存在着各种各样对学生的认识观念,其中不少是... 详细信息

教育活动是促进学生成长的自觉实践。正确认识学生是教师对学生的基本认识和根本态度,是直接影响教育活动的目的、方式和效果的重要因素。目前我国教育正处在改革和发展历史进程的关键阶段,存在着各种各样对学生的认识观念,其中不少是陈旧的、不符合现代教育要求的。为了迎接新的挑战,适应新的形势,也为了更好地培养高素质的现代公民,教育者必须正确、科学地认识学生。

关键词：学生发展的人独特的人教育主体责权主体

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浅谈农村学校管理存在的问题及应对策

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