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人干细胞因子cDNA克隆及其在大肠杆菌中的高效表达

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中国医学科学院学报 1997年第1期19卷 29-34页

作者：陈卫东狄旭李江宋飞陈松森梁植权中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005

以超速离心法提取的HepG2细胞总RNA为模板，应用RT-PCR技术扩增得到编码人干细胞因子（SCF）全长CDNA（约0.8kb）。克隆、序列分析确证编码人SCF膜外活性区的CDNA（约0.5kb）结构正确，构建了含有该基因的表达质粒（PBV-mhSCF）并在大... 详细信息

以超速离心法提取的HepG2细胞总RNA为模板，应用RT-PCR技术扩增得到编码人干细胞因子（SCF）全长CDNA（约0.8kb）。克隆、序列分析确证编码人SCF膜外活性区的CDNA（约0.5kb）结构正确，构建了含有该基因的表达质粒（PBV-mhSCF）并在大肠杆菌中获得高效表达。

关键词：人干细胞因子 cDNA 聚合酶链反应基因重组表达

人δ珠蛋白基因启动子区－64位C－T点突变对其启动子功能的影响

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中国医学科学院学报 1996年第6期18卷 429-434页

作者：张劲秋寇海萍狄旭陈松森梁植权中国医学科学院中国协和医科大学北京基础医学研究所

以ｐＵＣ１９－δｇｌｏｂｉｎ为模板，用ＰＣＲ定点突变技术将δ珠蛋白基因启动子区－６４位的Ｃ突变为Ｔ，即将ＣＣＡＡＣ盒改变为ＣＣＡＡＴ，并获得野生及突变的δ珠蛋白基因启动子区约３００ｂｐ的两个片段。将此两片段分别克隆到... 详细信息

以ｐＵＣ１９－δｇｌｏｂｉｎ为模板，用ＰＣＲ定点突变技术将δ珠蛋白基因启动子区－６４位的Ｃ突变为Ｔ，即将ＣＣＡＡＣ盒改变为ＣＣＡＡＴ，并获得野生及突变的δ珠蛋白基因启动子区约３００ｂｐ的两个片段。将此两片段分别克隆到以虫荧光素酶为报告基因的表达载体ＰＭＧ３中，转染人ＨｅＬａ细胞，以瞬时表达分析突变的ＣＣＡＡＣ盒的启动子功能。结果表明突变组发动荧光素酶表达而产生的发光强度为野生型的５倍，说明将δ珠蛋白基因启动子区－６４位的ＣＣＡＡＣ盒改变为ＣＣＡＡＴ能够增强该启动子的功能，从而证实了δ基因启动子区ＣＣＡＡＣ盒的结构特点是该基因表达水平低的主要原因之一。

关键词： δ 珠蛋白基因启动子点突变

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辽宁省水利发展总体思路探讨

安徽农业科学 2006年第9期34卷 1988-1989页

作者：狄旭东韩旭辽宁省水利水电勘测设计研究院辽宁沈阳110006

水利是国民经济的基础设施和基础产业,是国家社会、经济、环境可持续发展的重要因素,水利要为国民经济和社会可持续发展提供防洪安全、水资源供给和水生态环境保护三大保障。通过阐述辽宁省水利发展成就,分析辽宁省面临的水资源短缺和... 详细信息

水利是国民经济的基础设施和基础产业,是国家社会、经济、环境可持续发展的重要因素,水利要为国民经济和社会可持续发展提供防洪安全、水资源供给和水生态环境保护三大保障。通过阐述辽宁省水利发展成就,分析辽宁省面临的水资源短缺和水污染严重等主要问题,坚持以人为本的原则,重点围绕防洪减灾、水资源开发利用与配置、水环境保护和水土保持生态环境综合治理等方面,提出辽宁省“十一五”期间水利发展总体思路。

关键词：水利发展防洪水资源水环境

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长尾理论视角下高校“微思政”教育研究

长尾理论视角下高校“微思政”教育研究

作者：狄旭东兰州理工大学

学位级别：硕士

习近平总书记在2016年12月召开的全国高校思想政治工作会议中指出要运用新媒体新技术使工作活起来,推动思想政治工作传统优势同信息技术高度融合,增强时代感和吸引力。①在新媒体时代下,互联网、移动智能终端技术的发展使得各种“微”... 详细信息

习近平总书记在2016年12月召开的全国高校思想政治工作会议中指出要运用新媒体新技术使工作活起来,推动思想政治工作传统优势同信息技术高度融合,增强时代感和吸引力。①在新媒体时代下,互联网、移动智能终端技术的发展使得各种“微”事物“微”媒体层出不穷,“微思政”教育也应运而生。“微思政”教育是长尾理论在高校思想政治教育中的价值延伸。对于高校思想政治教育而言,社会环境和媒体环境由传统的单一性、官方性、不对等性向具有新媒体特征的交互性、开放性、虚拟性、全球性、平等性、及时性转化,新媒体的兴起深刻影响着当代大学生的行为模式、生活方式和价值观念。我国高校思想政治教育工作不应墨守成规,理应接纳和吸收新时代所产生的新技术、新理念,合理运用新的教育模式与方法以提高我国高校思想政治教育的能力。加强大学生的思想政治教育使其从心理到行为发生质的变化,有助于提高当前高校思政教育的有效性和针对性。我们应充分了解新时代高校大学生新的学习行为特征,在对大学生新的学习模式充分理解的基础上找寻合适的高校思想政治教育新理念,推动我国高校思想政治教育工作向更高的层面发展。因此,如果现阶段高校思想政治教育模式不能随着新媒体技术的发展而做出相应的反应,不能及时运用新媒体时代传播的客观规律,高校思想政治教育工作势必会走向封闭,阻碍高校思想政治教育工作的有效传播和推广,造成高校思想政治教育工作的僵硬化。在新媒体时代应用长尾理论开发好和利用好“微思政”教育,探索更加具有个性化的高校思想政治教育新途径,是我们做好新媒体时代高校思想政治教育工作的迫切需求。

关键词：高校思想政治教育长尾理论 “微思政”

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人干细胞因子在大肠杆菌中的表达研究

中国医学科学院学报 1998年第4期20卷 279-284页

作者：毛华赵峻张劲秋狄旭陈卫东陈松森梁植权中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所北京100005

目的经过改造重组人干细胞因子(human stem cell factor,hSCF),提高其表达量。方法应用人工合成寡核苷酸引物及PCR技术,改变人干细胞因子hSCF cDNA起始密码子ATG与SD序列之间的距离及在翻译起始区(即N端氨基酸)部分采用大肠杆菌... 详细信息

目的经过改造重组人干细胞因子(human stem cell factor,hSCF),提高其表达量。方法应用人工合成寡核苷酸引物及PCR技术,改变人干细胞因子hSCF cDNA起始密码子ATG与SD序列之间的距离及在翻译起始区(即N端氨基酸)部分采用大肠杆菌(***)喜用型密码子的策略,使重组表达质粒pBV220-hSCF在***中获得高效稳定表达。结果 DNA序列测定证明基因的阅读框架完全正确。重组人干细胞因子的表达量从改造前占***总蛋白的12%提高到40%左右。纯化的重组hSCF N端17个氨基酸测序结果表明,除第一个氨基酸为甲硫氨酸外,其余与天然hSCF序列完全一致。纯化的重组hSCF经Western blot证明,与标准hSCF一致。结论提示hSCF cDNA的5′侧翼区结构对其基因表达有显著的影响。

关键词：重组高效稳定表达 SD序列干细胞因子

高校个性化思想政治教育的新趋向——基于U-learning模式的探讨

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教育理论与实践 2017年第33期37卷 46-48页

作者：洪涛狄旭东马冰玉兰州理工大学马克思主义学院甘肃兰州730050

对于伴随着互联网成长的当代大学生来说,求新、标异、追求自由是其个性化生态写照。U-learning作为一种新型的学习方式,便捷运用于高校思想政治教育的同时能够体现一种个性化的学习方式,为学习者提供全新的学习体验,革新现有的高校思想... 详细信息

对于伴随着互联网成长的当代大学生来说,求新、标异、追求自由是其个性化生态写照。U-learning作为一种新型的学习方式,便捷运用于高校思想政治教育的同时能够体现一种个性化的学习方式,为学习者提供全新的学习体验,革新现有的高校思想政治教育教学模式,实现高校思想政治教育的泛在性、易获取性、交互性、适应性和情景性学习,引领当今学习趋向个性化。

关键词：高校思想政治教育个性化 U-learning

一种新型人源化鲑鱼降钙素突变体的构建与表达

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中国医学科学院学报 2001年第4期23卷 351-355页

作者：刘深基陈松森狄旭熊安琪张友鸿中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所生物化学与分子生物学研究室北京100005

目的降低鲑鱼降钙素（sCT）对人体的免疫原性。方法设计并合成人源化鲑鱼降钙素（11 ～ 17）hsCT基因，用基因重组方法构建表达载体，转入大肠杆菌G1724中，经色氨酸诱导表达；用渗透压法处理菌体纯化融合蛋白；以大鼠血清钙浓度降低... 详细信息

目的降低鲑鱼降钙素（sCT）对人体的免疫原性。方法设计并合成人源化鲑鱼降钙素（11 ～ 17）hsCT基因，用基因重组方法构建表达载体，转入大肠杆菌G1724中，经色氨酸诱导表达；用渗透压法处理菌体纯化融合蛋白；以大鼠血清钙浓度降低方法测定hsCT生物活性；用定量Western blot法测定hsCT免疫原性。结果重组pTrxFus-hsCT质粒在大肠杆菌中获得高效可溶性融合蛋白表达, 表达水平达46%以上, 并得到纯度约90%的融合蛋白,rhsCT保存了鲑鱼降钙素前体活性的一半以上, 免疫原性降低了55%。结论获得一种新型人源化降钙素（11 ～ 17）hsCT，其保存较高sCT前体的活性，免疫原性明显降低。

关键词：人源化降钙素重组免疫原性生物活性

腺病毒介导酪氨酸羟化酶基因体外治疗大鼠泌乳素瘤

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中国医学科学院学报 2003年第2期25卷 185-189页

作者：许志勤苏长保陈松森任祖渊狄旭马文斌中国医学科学院

目的探讨腺病毒介导酪氨酸羟化酶(TH)基因治疗大鼠垂体泌乳素(PRL)瘤的可能性。方法应用细菌内同源重组法构建携带大鼠TH基因并含绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的复制缺陷型腺病毒载体Ad-GFP-TH和未携带任何外源基因的复制缺陷型空载体... 详细信息

目的探讨腺病毒介导酪氨酸羟化酶(TH)基因治疗大鼠垂体泌乳素(PRL)瘤的可能性。方法应用细菌内同源重组法构建携带大鼠TH基因并含绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的复制缺陷型腺病毒载体Ad-GFP-TH和未携带任何外源基因的复制缺陷型空载体腺病毒Ad-GFP,并以大鼠泌乳素瘤细胞株MMQ为靶细胞,探讨腺病毒介导TH基因治疗对MMQ细胞生长和PRL分泌的影响。结果成功构建重组腺病毒Ad-GFP-TH及Ad-GFP;转染重组腺病毒Ad-GFP-TH后,MMQ细胞的生长和PRL分泌均受到明显的抑制。结论基因治疗可能成为垂体泌乳素瘤,尤其是侵袭性垂体泌乳素瘤的有效治疗方法之一。

关键词：垂体泌乳素瘤基因治疗腺病毒酪氨酸经化酶基因大鼠

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新时期加强高校财务监督的思考

当代经济 2010年第4期27卷 104-105页

作者：狄旭军事经济学院湖北武汉430035

随着国家对高校投入的增加和高校办学自主性的提高,高校经济活动日益复杂,这给高校的财务管理工作带来了新的挑战。最近发生的几起高校腐败案,引起了全社会的关注,高校财务监督弱化的现实也暴露无疑。进一步强化财务监督意识,健全财务... 详细信息

随着国家对高校投入的增加和高校办学自主性的提高,高校经济活动日益复杂,这给高校的财务管理工作带来了新的挑战。最近发生的几起高校腐败案,引起了全社会的关注,高校财务监督弱化的现实也暴露无疑。进一步强化财务监督意识,健全财务监督制度,创新财务方法,提高财务人员综合素质,努力提升高校财务监督水平刻不容缓。

关键词：高校财务监督问题对策