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LncRNA-9560和LncRNA-9606调节猪流行性腹泻病毒复制的研究

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LncRNA-9560和LncRNA-9606调节猪流行性腹泻病毒复制的研究

作者：燕苗苗中国农业科学院

学位级别：硕士

长链非编码RNA（lncRNA）是一类具有多种功能的RNA分子,参与调控机体的生命活动。近期研究结果显示,在病毒感染的组织或细胞中lncRNA差异表达。目前,有关人类的lncRNA研究较多,而在动物体上的研究相对较少。本研究旨在分析猪流行性腹泻... 详细信息

长链非编码RNA（lncRNA）是一类具有多种功能的RNA分子,参与调控机体的生命活动。近期研究结果显示,在病毒感染的组织或细胞中lncRNA差异表达。目前,有关人类的lncRNA研究较多,而在动物体上的研究相对较少。本研究旨在分析猪流行性腹泻病毒（PEDV）感染宿主细胞后lncRNA表达谱的变化以及差异表达的lncRNA对PEDV及宿主的调节功能。首先,为探究PEDV感染是否影响宿主lncRNA的表达水平,本研究对感染PEDV的猪小肠上皮细胞（IPEC-J2细胞）样本进行转录组测序及生物信息学分析,分析结果表明,PEDV可诱导IPEC-J2细胞中的lncRNA发生差异表达,且其表达水平随PEDV感染时间推移呈现不同倍数的增多或减少;采用基因本体论（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）对差异表达的lncRNA进行功能富集,发现在PEDV感染后的不同时间点宿主lncRNA所富集的信号通路不尽相同,这表明宿主的主要生命过程随病毒感染的时间推移呈现动态变化。通过靶基因预测,发现lncRNA-9560和lncRNA-9606靶向同一个转录本,而该转录本编码的蛋白质与IgA生成密切相关。随后,进一步分析了这两条lncRNA的基本特征,发现lncRNA-9560和lncRNA-9606在IPEC-J2细胞中的含量随PEDV感染时间的推移逐渐增多,并在60 h时达到峰值,随后开始降低。通过核质分离qPCR方法确定lncRNA-9560和lncRNA-9606的亚细胞定位,结果表明,这两条lncRNA在细胞核和细胞质中均有分布,但主要分布于细胞核中。为验证lncRNA-9560和lncRNA-9606确为非编码RNA,本研究将His标签编码基因分别融合至这两条lncRNA及其突变体的3’端,将重组质粒分别转染至HEK-293T细胞并分析重组质粒能否翻译蛋白质,结果表明,lncRNA-9560和lncRNA-9606均为不编码蛋白质的非编码RNA。为探究lncRNA-9560和lncRNA-9606对PEDV复制的影响,本研究采用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹分析在lncRNA过表达的LLC-PK1细胞中PEDV的复制能力及N蛋白表达量的变化,结果表明,lncRNA-9560和lncRNA-9606均能抑制PEDV的复制。为进一步探究lncRNA-9560和lncRNA-9606是否在转录水平调节细胞因子的表达,本研究采用实时荧光定量PCR检测lncRNA过表达或缺失的IPEC-J2细胞中细胞因子表达变化,结果表明,过表达lncRNA-9606能在mRNA水平促进GM-CSF的转录,反之亦然;然而,lncRNA-9560未能影响肿瘤坏死因子?（TNF-?）和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）等细胞因子在mRNA水平的转录。综上所述,本研究全面分析了PEDV感染过程中IPEC-J2细胞中lncRNA表达谱的变化,并发现lncRNA-9560和lncRNA-9606可抑制PEDV的病毒复制,其中lncRNA-9606可促进GM-CSF mRNA的转录。该研究丰富了lncRNA调控病毒感染的知识库,也为以lncRNA作为药物靶标用于PEDV治疗提供了新思路和理论基础。

关键词：猪流行性腹泻病毒 LncRNA 病毒复制 GM-CSF

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甘肃环县道情皮影中人物、动物、场景研究

西部皮革 2022年第13期44卷 138-140页

作者：燕苗苗兰州大学艺术学院

甘肃环县道情皮影是中国皮影重要组成部分之一，在2006年被第一批列入国家级非物质文化遗产保护名录，具有悠久的历史文化特点。受皮影戏曲表演影响，环县道情皮影艺术中的人物、动物、场景具有戏曲化和舞台化的造型特点。除作为皮影表... 详细信息

甘肃环县道情皮影是中国皮影重要组成部分之一，在2006年被第一批列入国家级非物质文化遗产保护名录，具有悠久的历史文化特点。受皮影戏曲表演影响，环县道情皮影艺术中的人物、动物、场景具有戏曲化和舞台化的造型特点。除作为皮影表演主要道具外，也是独具观赏价值的艺术品。本文以环县道情皮影艺术中的人物、动物、场景为主要研究对象，结合当地民俗等文化背景，进行较为全面的研究，以给未来环县道情皮影艺术创新设计提供参考。

关键词：环县道情皮影艺术人物动物场景

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点、线、面在环县皮影雕刻装饰中的运用研究

西部皮革 2021年第18期43卷 137-138页

作者：燕苗苗兰州大学艺术学院

环县皮影雕刻技艺深受陕西皮影风格的影响,可谓是陕西皮影风格的一种延续与发展。伴随着环县皮影知名度的不断提高,环县也出现了大量专事皮影雕刻的艺人。以环县皮影雕刻技艺入手,对环县皮影的点、线、面的艺术形式进行分析与探索,让大... 详细信息

环县皮影雕刻技艺深受陕西皮影风格的影响,可谓是陕西皮影风格的一种延续与发展。伴随着环县皮影知名度的不断提高,环县也出现了大量专事皮影雕刻的艺人。以环县皮影雕刻技艺入手,对环县皮影的点、线、面的艺术形式进行分析与探索,让大众感受到环县皮影的艺术魅力与文化内涵,以此为未来创新设计提供参考。

关键词：环县皮影雕刻装饰点线面

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博来霉素诱导大鼠与小鼠肺纤维化模型的评价

中国实验动物学报 2023年第2期31卷 179-186页

作者：燕苗苗赵亚昆王搏邱志广田燕歌河南中医药大学呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心郑州450046 河南中医药大学河南省中医药防治呼吸病重点实验室郑州450046

目的采用一次性气管滴注不同剂量博来霉素诱导大、小鼠肺纤维化模型,明确其适宜造模剂量,并比较大、小鼠模型特征。方法将30只SD大鼠随机分为空白组、博来霉素低剂量组(3 mg/kg, BL-L组),博来霉素高剂量组(5 mg/kg, BL-H组),每组各10... 详细信息

目的采用一次性气管滴注不同剂量博来霉素诱导大、小鼠肺纤维化模型,明确其适宜造模剂量,并比较大、小鼠模型特征。方法将30只SD大鼠随机分为空白组、博来霉素低剂量组(3 mg/kg, BL-L组),博来霉素高剂量组(5 mg/kg, BL-H组),每组各10只,30只C57BL/6J小鼠分组同上。观察动物每日精神、饮食等一般情况及每周体重变化,通过非束缚小动物肺功能测量仪检测动物的潮气量(tidal volume, TV)、每分钟通气量(minute ventilation, MV)、50%潮气量呼气流量(50%tidal volume expiratory flow, EF50),采用HE和Masson染色法观察肺组织病理学改变,采用羟脯氨酸(hydroxyproline, HYP)含量检测试剂盒测定肺组织羟脯氨酸含量。结果 (1)存活率和体重C57BL/6J小鼠BL-L组和BL-H组存活率分别为70%、80%,SD大鼠分别为70%、50%。第7天起,C57BL/6J小鼠BL-H组体重显著下降(P<0.05,P<0.01),SD大鼠BL-L组和BL-H组体重均显著下降(P<0.01)。(2)肺功能与空白组比较,第10天,SD大鼠两剂量组TV均降低(P<0.01),而C57BL/6J小鼠未见显著变化;第21天,SD大鼠BL-L组肺功能TV和MV显著下降(P<0.05,P<0.01),BL-H组TV显著下降(P<0.01),C57BL/6J小鼠两剂量组TV、MV和EF50均显著下降(P<0.05,P<0.01)。(3)肺病理和羟脯氨酸含量第21天,C57BL/6J小鼠和SD大鼠BL-L组和BL-H组肺组织均出现炎性浸润和纤维条索,肺泡炎和纤维化程度评分均显著升高(P<0.01),肺组织中HYP水平均显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论博来霉素3 mg/kg与5 mg/kg均可诱导大、小鼠肺纤维化模型。综合存活率、肺功能、肺病理等各项指标,认为C57BL/6J小鼠的适宜造模剂量为5 mg/kg, SD大鼠的适宜造模剂量为3 mg/kg。

关键词：肺纤维化博来霉素动物模型

LncRNA9606对猪流行性腹泻病毒复制的影响

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中国兽医科学 2020年第5期50卷 537-544页

作者：燕苗苗陈佳宁刘光亮中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃兰州730046

长链非编码RNA(lncRNA)是一种长度大于200 nt的非编码RNA分子,在调节多种生命活动中起着重要作用。本团队前期研究发现,宿主的lncRNA表达谱在猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染后发生显著变化。本研究选择其中一条差异表达的LncRNA TCONS_0000... 详细信息

长链非编码RNA(lncRNA)是一种长度大于200 nt的非编码RNA分子,在调节多种生命活动中起着重要作用。本团队前期研究发现,宿主的lncRNA表达谱在猪流行性腹泻病毒(PEDV)感染后发生显著变化。本研究选择其中一条差异表达的LncRNA TCONS_00009606(LncRNA9606),以研究它对PEDV复制的影响。为此,本研究首先检测LncRNA9606在PEDV感染后不同时间点的动态表达变化。结果,PEDV感染显著上调LncRNA9606的表达。随后对猪肠上皮细胞、派伊尔氏淋巴集合结以及外周血单个核细胞中LncRNA9606的表达丰度进行了分析,结果显示派伊尔氏淋巴集合结和外周血单个核细胞中的LncRNA9606含量显著高于小肠上皮细胞系细胞,并主要定位于细胞核中。在LLC-PK1细胞中过表达LncRNA9606后,PEDV复制水平显著降低。由此可见,LncRNA9606可在LLC-PK1细胞中抑制PEDV病毒的复制。

关键词：猪流行性腹泻病毒 LncRNA 病毒复制

准噶尔盆地北三台凸起侏罗系头屯河组储层特征及其控制因素

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准噶尔盆地北三台凸起侏罗系头屯河组储层特征及其控制因素

基于Pkm2/Nrf2通路探讨补肺益肾方改善线粒体氧化损伤治疗慢性阻塞性肺疾病的机制

第十五届全国古地理学及沉积学学术会议

作者：燕苗苗操应长葸克来中国石油大学地球科学与技术学院海洋国家实验室海洋矿产资源评价与探测技术功能实验室

北三台凸起为准噶尔盆地东部隆起区的一个次级凹陷,西部毗邻吉木萨尔凹陷,东连阜康凹陷,北接沙齐凸起,南至阜康断裂带。综合利用岩心观察、岩石薄片鉴定、物性测试及测井资料分析等研究方法,以北三台凸起侏罗系头屯河组储层为研究对象,... 详细信息

北三台凸起为准噶尔盆地东部隆起区的一个次级凹陷,西部毗邻吉木萨尔凹陷,东连阜康凹陷,北接沙齐凸起,南至阜康断裂带。综合利用岩心观察、岩石薄片鉴定、物性测试及测井资料分析等研究方法,以北三台凸起侏罗系头屯河组储层为研究对象,系统研究了储层特征,探讨其控制因素,对储层类型进行划分与评价。研究区头屯河组主要为辫状河三角洲沉积相,储层以长石质岩屑砂岩和岩屑砂岩为主,粒度总体较细,分选中等,磨圆较差,结构、成分成熟度均较低,共识别出砾质砂岩相、含砾砂岩相、粗砂岩相、中砂岩相、细砂岩相、粉砂岩相以及泥岩相等七种岩相。储集空间主要为原生孔隙,其次为粒间及粒内次生溶孔及少量的微裂缝和晶间孔。储层孔隙度集中分布于15%～25%,平均值17.24%;渗透率集中分布于（0.1～200）×10-3μm2,平均值105.05×10-3μm2,属于中孔-中低渗储层。储层发育压实作用、溶解作用、胶结及交代作用,综合成岩作用发育类型和强度定量分析,划分了6种成岩相和15种岩相-成岩相组合。储层主要受岩相、成岩相及不整合的控制。细砂岩相控制下储集物性最好,含砾砂岩相与中砂岩相次之,粉砂岩相物性相对较差;强压实以及强胶结类成岩相控制下的储层物性差,中压实、中胶结及弱溶解类成岩相储层物性中等,中-强溶蚀以及弱胶结类的成岩相储层物性较好。由于受燕山期抬升剥蚀的影响,研究区头屯河组与上覆地层呈区域不整合接触,导致大气淡水下渗对储层进行改造,次生溶孔发育,粒间易溶的杂基发生强烈溶蚀,距离不整合面之下250余米范围之内储层物性好,而250余米之外的储层物性相对较差。基于15种岩相成岩相,将储层划分出四类,I类储层发育有含砾砂岩相、细砂岩相及粉砂岩相与强溶蚀相组合类型,II类储层发育有含砾砂岩相、细砂岩相及粉砂岩相与中压实、中-弱溶蚀组合类型,III类储层发育有含砾砂岩相、细砂岩相及粉砂岩相与中压实、中胶结、弱溶蚀组合类型,IV类储层发育有含砾砂岩相、细砂岩相及粉砂岩相与强压实、强胶结组合类型,从I类到IV类储层平均孔隙度从24.34%下降到10.69%,平均渗透率从180.72mD下降到1.06mD,储集物性逐渐变差。

关键词：成岩作用控制因素头屯河组北三台地区

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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中华中医药杂志 2023年第5期38卷 1973-1981页

作者：刘杨张蓝熙卢瑞龙邵雪洁燕苗苗崔莉莉张彩丽田燕歌河南中医药大学呼吸疾病中医药防治省部共建协同创新中心河南中医药大学河南省中医药防治呼吸病重点实验郑州450046 河南中医药大学中医药科学院郑州450046

目的:探讨补肺益肾方调控Pkm2/Nrf2通路改善肺组织线粒体氧化损伤治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)机制。方法:将32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、补肺益肾方组(简称BYF组)和乙酰半胱氨酸组(简称NAC组),每组8只。1~8周,采用香烟暴露联合... 详细信息

目的:探讨补肺益肾方调控Pkm2/Nrf2通路改善肺组织线粒体氧化损伤治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)机制。方法:将32只SD大鼠随机分为正常组、模型组、补肺益肾方组(简称BYF组)和乙酰半胱氨酸组(简称NAC组),每组8只。1~8周,采用香烟暴露联合肺炎克雷伯杆菌反复感染的方法制备COPD大鼠模型。9~16周,正常组和模型组给予0.9%氯化钠溶液灌胃(0.5 mL/100 g),BYF组和NAC组分别给予补肺益肾方灌胃(11.61 g·kg^(-1)·d^(-1))和乙酰半胱氨酸溶液灌胃(54 mg·kg^(-1)·d^(-1)),每日1次,16周结束后取材。检测肺功能、肺病理、线粒体超微结构、氧化应激相关指标、线粒体功能相关指标、Pkm2/Nrf2通路相关指标。结果:COPD大鼠肺功能降低(VT、PEF、EF50、FVC和FEV0.3降低,FRC升高),肺组织病理损伤(MLI、BWt升高,MAN降低),肺组织氧化损伤(T-SOD、T-AOC、GSH-Px、SOD2降低,MDA升高),线粒体功能受损(线粒体膜电位、线粒体呼吸链复合物Ⅰ和Ⅲ酶活性下降),Pkm2/Nrf2信号通路表达降低(Pkm2、Nrf2、GCLM、GCLC mRNA和核蛋白表达下降)(P<0.05,P<0.01)。BYF和NAC均可改善COPD大鼠肺功能(VT、PEF、EF50、FVC、FEV0.3升高,FRC降低),减轻肺组织病理损伤(MAN升高,MLI、BWt降低),提高肺组织抗氧化水平(T-SOD、GSH-Px、SOD2升高),保护线粒体功能(线粒体膜电位、线粒体呼吸链复合物Ⅰ、线粒体呼吸链复合物Ⅲ升高),激活Pkm2/Nrf2信号通路(Pkm2、Nrf2、GCLM、GCLC mRNA和核蛋白表达升高)(P<0.05,P<0.01);BYF组T-AOC显著升高,MDA显著降低(P<0.01,P<0.05);BYF在升高MAN、GSH-Px、T-AOC、Pkm2 mRNA表达及降低MLI的作用方面优于NAC组(P<0.05,P<0.01)。结论:补肺益肾方和乙酰半胱氨酸均可减轻COPD大鼠肺组织氧化应激,改善线粒体功能,提高抗氧化能力,其机制可能与调控Pkm2/Nrf2信号通路有关,补肺益肾方在改善肺泡结构及提高抗氧化酶活性方面优于乙酰半胱氨酸。

关键词：慢性阻塞性肺疾病补肺益肾方氧化应激线粒体损伤 Pkm2/Nrf2信号通路

玄武岩方解石脉成因及其对储集层质量的影响——以准噶尔盆地玛湖凹陷东斜坡石炭系为例

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石油勘探与开发 2021年第4期48卷 745-755页

作者：夏鲁操应长卞保力刘海磊王晓雪赵一伟燕苗苗中国石油大学(华东)深层油气重点实验室山东青岛266580 中国石油新疆油田勘探开发研究院新疆克拉玛依834000 中国石油塔里木油田勘探开发研究院新疆库尔勒841000

基于岩心、岩石薄片观察,结合X射线荧光分析、微区原位主微量和稀土元素、碳氧锶同位素组成、流体包裹体等测试分析及盆地模拟,对准噶尔盆地玛湖凹陷东斜坡石炭系玄武岩方解石脉特征及成因进行研究。结果表明研究区脉体发育3期方解石充... 详细信息

基于岩心、岩石薄片观察,结合X射线荧光分析、微区原位主微量和稀土元素、碳氧锶同位素组成、流体包裹体等测试分析及盆地模拟,对准噶尔盆地玛湖凹陷东斜坡石炭系玄武岩方解石脉特征及成因进行研究。结果表明研究区脉体发育3期方解石充填:第Ⅰ期贫锰,稀土元素配分曲线平坦,强负铈异常,弱—中等负铕异常,碳同位素组成偏轻,表明其形成受到大气淡水影响;第Ⅱ期富锰和轻稀土,具有弱正铈异常和轻微正铕异常,碳同位素组成相对较重而锶同位素比值较低,表明深部成岩流体对其形成有一定影响;第Ⅲ期富铁和锰,稀土元素配分曲线与第Ⅱ期相似但铈异常和铕异常波动较大。第Ⅰ、Ⅱ期形成于距今约250~260 Ma的浅埋藏环境,对应于二叠纪末期晚海西运动;第Ⅲ期很可能形成于晚三叠世印支运动。研究认为不整合面附近玄武岩裂缝中的方解石沉淀主要与大气淡水淋滤上覆下二叠统风城组碳酸盐矿物有关,较早地破坏了石炭系风化壳储集层,但是在充填程度较弱或后期溶蚀作用较强的位置仍可发育相对优质储集层,如风城组缺失的构造高部位、垂向上距离风城组较远的位置以及靠近湖盆内部的古潜山等地区。图16表1参40。

关键词：准噶尔盆地玛湖凹陷石炭系方解石脉地球化学特征流体来源储集层质量

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创客教育的形态、功能和现实思考

教育评论 2017年第4期 67-71页

作者：任苗苗马燕重庆师范大学计算机与信息科学学院重庆401331 重庆师范大学研究生院院长教授博士重庆401331

创客教育的发展为培养创新人才提供了一条新路径。文章从教育变革视角对创客教育的教育理念、教学内容、教学环境、师生角色以及教学评价进行剖析,分析其对学习者发展、教育改革创新以及社会经济发展的作用,审视其现实发展,分析其存在... 详细信息

创客教育的发展为培养创新人才提供了一条新路径。文章从教育变革视角对创客教育的教育理念、教学内容、教学环境、师生角色以及教学评价进行剖析,分析其对学习者发展、教育改革创新以及社会经济发展的作用,审视其现实发展,分析其存在的问题,并提出相应对策。

关键词：创客教育形态辨析教育改革现实思考