检索结果-南通市图书馆

作者：王琳琳辽宁大学

学位级别：硕士

自本世纪以来,越来越多的国家和地区步入老龄化行列,老年人的身心健康了人受到了人们的广泛关注。因此,本报告选取了贝卡·利维博士的作品《破译年龄密码》节选作为翻译文本。在该书中,作者利用科学研究来揭示老年人的年龄观念与其衰老... 详细信息

自本世纪以来,越来越多的国家和地区步入老龄化行列,老年人的身心健康了人受到了人们的广泛关注。因此,本报告选取了贝卡·利维博士的作品《破译年龄密码》节选作为翻译文本。在该书中,作者利用科学研究来揭示老年人的年龄观念与其衰老之间的关系,从而向社会传达积极的年龄观念有利于老年人的身心健康的科学观念。《破译年龄密码》属于社会科学类文本,以普及科学知识为目的,语言准确、严密且有逻辑。该书中大量使用专业术语及长句,句子结构比较复杂,翻译难度较大。因此,能否让目的语读者更好地理解原文信息,关键在于对文本中长句的准确翻译。尤金·奈达的功能对等理论要求译者在翻译的过程中尽量做到以原文为中心,努力创造出既符合原文语义又体现原文文化特色的译作。本报告以功能对等理论为指导,采用顺译法、逆译法、分译法、增译法等翻译策略,从句法层面分析社科类文本中的长句翻译,力求译语读者和源语读者获得相同的阅读感受。此外,译者希望通过此文本的翻译,能够让人们更加理性的认识衰老这一自然过程,社会能够更好的适应老龄化。同时,本次翻译实践可以为同类型的翻译提供借鉴。

关键词：功能对等理论长句翻译方法

MOF衍生的铋/锡负极材料在锂/钠离子电池中的应用

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MOF衍生的铋/锡负极材料在锂/钠离子电池中的应用

作者：张琳琳河南大学

学位级别：硕士

随着便携式电子设备和电动车辆的需求量不断增加,开发新型以锂/钠离子电池为代表的碱金属离子电池是满足这些需求的关键。合金型负极材料由于具有高比容量、低工作电压和价格低廉等优点被认为是下一代碱金属离子电池富有前景的电池材料... 详细信息

随着便携式电子设备和电动车辆的需求量不断增加,开发新型以锂/钠离子电池为代表的碱金属离子电池是满足这些需求的关键。合金型负极材料由于具有高比容量、低工作电压和价格低廉等优点被认为是下一代碱金属离子电池富有前景的电池材料。其中,铋储量丰富、有较低的工作电位,易于锂/钠离子合金/去合金;锡具有较高的理论比容量(990 m Ah g)和较低的工作电压。然而,锡/铋负极材料在实际应用过程中存在体积剧烈变化导致活性物质损失和循环寿命差的问题。针对上述存在的问题,本文通过金属有机框架化合物(MOF)为前驱体,制备出锡/铋纳米颗粒,其中纳米级别的锡/铋可以缓解充放电过程中的体积变化;MOF经高温热解形成碳“保护壳”避免电极粉化造成的活性物质损失,进而提升电池的循环稳定性和库伦效率。具体研究内容如下:(1)通过溶剂热法合成金属有机框架前驱体,之后前驱体经高温热解形成碳纳米束状结构的复合材料(BiSn@NC)。经高温处理后,金属铋转变为无定形态或纳米团簇,金属锡则转变为纳米颗粒。然后将合成的BiSn@NC材料组装钠离子电池。在0.5 A g的电流密度下BiSn@NC材料循环330圈后放电比容量为431.3 m Ah g,相比单一金属材料(Bi@NC/Sn@NC)的放电比容量有所提升(288.6 m Ah g/99.14 m Ah g),2 A g的大电流密度下稳定循环520圈,电池有较高的容量保持率(99.15%),同时也显示出了良好的倍率性能。同样,我们在0.5 A g和2 A g的电流密度下进行锂离子电池性能测试,循环了675/180圈之后的放电比容量为492.4/487.8 m Ah g,优于Bi@NC/Sn@NC材料的电化学性能。因此,不论是在钠离子电池还是在锂离子电池中,铋和锡的复合材料的电化学性能要优于单一金属材料的电化学性能,证明了复合材料的优越性。(2)为了缓解合金材料在充放电过程中由于体积膨胀造成的活性材料从集流体上脱落的问题,我们通过刻蚀热解-置换反应合成了MOF衍生的纳米立方体状碳材料(Bi/Sn@MCNBs),其中铋/锡纳米颗粒均匀分布在纳米立方体的结构。之后将Sn@MCNBs材料组装锂/钠离子电池,在0.5 A g的电流密度下循环103/250圈之后的放电比容量为746 m Ah g/386.8 m Ah g,无论是循环性能还是倍率性能都比Sn@C材料更加优异的电化学性能。进一步地,Bi@MCNBs材料组装钠离子电池在0.5 A g和2A g的电流密度下经过300/820圈循环后的放电比容量为355.7 m Ah g/347.1 m Ah g,表现出优于Bi@C材料的电化学性能,表明材料经过改性处理后可以有效的改善材料的电化学性能。本文针对合金材料在锂/钠离子电池中因剧烈的体积变化导致电极活性材料粉化、电接触丧失的问题,提出构筑MOF衍生锡/铋负极材料。金属有机框架具有高孔隙率、高比表面积和反应位点丰富的优点,MOF高温形成的多孔碳可以提升材料的导电性,而且碳材料中多孔结构的存在可以缓解体积膨胀;锡/铋的纳米颗粒均匀的分散在碳材料中,纳米颗粒可以减小离子、电子的传输路径,且均匀分布的纳米颗粒能提供大量的活性位点,进而提升材料的动力学性能。本文设计的纳米多孔结构和合金型材料组成的负极材料,可以促进电解质渗透,加速离子、电子传输,减小体积膨胀,提高了锂/钠离子电池的比容量和循环稳定性,为高性能锂/钠离子电池的改性提供了参考依据。

关键词：锂离子电池钠离子电池负极材料金属有机框架铋锡

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子女教育水平对中老年父母健康的影响研究

子女教育水平对中老年父母健康的影响研究

作者：张琳琳南京邮电大学

学位级别：硕士

我国当前正面临快速老龄化的挑战,中老年人口的健康问题引起了全社会的广泛关注。据学者研究,子女受教育程度对父母健康影响显著,因而探究子女的受教育水平对中老年父母健康的影响及其机理对制定相关政策具有重要的现实意义。本研究利用... 详细信息

我国当前正面临快速老龄化的挑战,中老年人口的健康问题引起了全社会的广泛关注。据学者研究,子女受教育程度对父母健康影响显著,因而探究子女的受教育水平对中老年父母健康的影响及其机理对制定相关政策具有重要的现实意义。本研究利用2018年中国健康与养老追踪调查数据(CHARLS),运用回归模型和结构方程模型进行实证分析,旨在探究子女的受教育水平和中老年父母健康程度之间的关系,并在模型基础上进行中介效应检验和差异性分析,以全面评估二者关系及其影响。本文主要得出以下研究结果。常规回归模型结果发现:(1)子女的受教育水平对中老年父母的自评健康、身体健康、抑郁程度均有显著的正向直接影响(p<0.05,模型系数Exp(B)分别为1.031、1.028、1.026),而对生活满意度无显著影响(p=0.880)。(2)除直接影响外,子女的受教育水平还通过居住时间、子女收入等因素间接性地对父母健康状况产生显著影响。(3)子女的受教育水平对父母健康的显著影响在农村地区更为明显。进一步地,本研究运用结构方程模型探讨子女教育对中老年父母健康的影响机理,研究发现子女的受教育水平会通过代际联系作用于父母健康行为,进而影响父母健康状况。具体来看(1)子女较高的受教育水平会使得子女与父母间的代际联系更为密切。代际关系是联系子女与中老年父母间至关重要的中介机制,良好的代际联系将有助于提高父母的健康行为状况。(2)父母良好的健康行为(如睡眠情况、吸烟喝酒等)更有利于父母心理健康层面的改善,而父母的运动频率则有利于父母的身体健康。(3)父母性别和居住地对本研究所建立的结构方程模型具有显著的调节效应。基于以上发现,本研究探讨了子女的受教育水平对中老年父母健康的重要性,为针对中老年人健康和养老政策的制定提供参考,从而更好地满足社会的需求,本文的研究成果为该领域提供了新的思路和视角,具有创新性和重要意义。

关键词：子女教育中老年父母健康代际联系回归分析结构方程差异性分析

教学行为分析视域下中学教师信息技术应用能力的研究

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教学行为分析视域下中学教师信息技术应用能力的研究

作者：尚琳琳内蒙古师范大学

学位级别：硕士

教育数字化背景下,教育教学样态需要重塑,教师信息技术应用能力亟须更新发展。提升教师信息技术应用能力是推动教育数字化发展的关键着力点与发力点。《教育信息化2.0行动计划》提出教育信息化发展的新目标,实施中小学教师信息技术应用... 详细信息

教育数字化背景下,教育教学样态需要重塑,教师信息技术应用能力亟须更新发展。提升教师信息技术应用能力是推动教育数字化发展的关键着力点与发力点。《教育信息化2.0行动计划》提出教育信息化发展的新目标,实施中小学教师信息技术应用能力提升工程计划,提升教师信息技术应用能力。《新时代基础教育强师计划》提出教师在教育实践场景中充分发挥教育技术应用能力,构建教师信息技术应用能力科学评价方法,形成教师信息化能力的助推力。课堂教学作为我国学校教学的主要形式,教师作为课堂教学过程中的关键要素,教学行为体现了课堂教学全过程。通过分析其课堂教学行为,为研究教师信息技术应用能力提供了新视角。本文以国家中小学智慧教育平台线上课程和全国初中信息技术优质课为研究对象,分析线上线下课堂教师教学行为的基础上,通过文献研究法、内容分析法和定性分析法,实现了教师信息技术应用能力层级的划分,提出了相应提升策略。首先,研究设计阶段。参考欧盟的教育工作者数字框架、联合国教科文组织的教师信息与通信技术能力框架等教师信息技术能力框架,通过对比分析我国的《中小学教师信息技术应用能力标准(试行)》、《教师数字素养》和教师信息技术微认证模型,经过多次专家论证迭代的方式进行筛选与调整。构建出基于教学行为分析视域下的教师信息技术应用能力框架。其次,在研究实施分析阶段,根据已构建的能力框架生成教师行为分析的编码体系,在内容分析一致性检验后,使用NVivo质性分析工具,对样本进行教学行为编码,将真实课堂量化,按照编码内容、参考点个数、时长覆盖率进行可视化呈现。使用GSEQ滞后序列分析工具,分别对线上线下样本的行为序列频次和行为转换模式进行可视化的对比与分析,得出线上线下两个模式的显著性行为序列分析图。通过观察行为结构模式,使用SPSS数据统计分析软件根据教学行为分析的数据结果,对线上线下样本进行聚类分析,划分出教师信息技术应用能力的四个层级。最后,在前文研究工作的基础上,对每个层级进行教学行为过程的分析,给出针对各层级教师信息技术应用能力的提升策略,拓展了教师行为的研究领域,为教师信息技术应用能力提供了新思路,从而为中学教师数字化发展提供参考价值。

关键词：教师信息技术应用能力教学行为分析中学教师

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XL轮胎公司生产车间质量管理体系优化研究

XL轮胎公司生产车间质量管理体系优化研究

作者：黄琳琳中国矿业大学

学位级别：硕士

近几年,越来越多的企业开始重视产品质量和品牌形象,视质量为企业生命。质量对于企业的发展有着重大而深远的意义。在当今如此激烈的市场竞争中,企业要想生存和发展,就必须不断提升质量管理水平,为客户提供满足甚至超越其需求的产品和... 详细信息

近几年,越来越多的企业开始重视产品质量和品牌形象,视质量为企业生命。质量对于企业的发展有着重大而深远的意义。在当今如此激烈的市场竞争中,企业要想生存和发展,就必须不断提升质量管理水平,为客户提供满足甚至超越其需求的产品和服务。在新时代背景下,企业以科学的质量管理理论为指导,探索一套适合自身发展的质量管理体系尤为重要。本文以XL轮胎公司为例,对其生产车间的质量管理体系优化进行了研究。通过对XL轮胎公司生产车间质量管理现状的调查研究,找出在质量管理方面存在的问题,主要表现在员工素质不够高、管理制度不完善、管理人员水平不高、生产过程控制薄弱和供应商管理不完善五个方面,并对其原因进行了分析。针对以上存在的不足,提出了从全员性、全面性、全过程三个方面的优化策略,包括提升全员质量管理意识、建立三级质量改善激励机制、强化质量管理培训效果、建立QC小组改善质量分析报告、完善质量管理体系文件、强化产品质量管理过程控制、加强供应商管理。此外,对于质量管理体系优化的实施还需要一些保障措施来提高效率,提出了从领导作用发挥、质量管理队伍建设、创造公司质量文化氛围、加大对质量管理的投入四个方面的保障方案。本文使用了文献研究法和问卷调查等研究方法,通过对XL轮胎公司生产车间质量管理存在的不足提出优化策略,对XL轮胎公司质量管理的提升有重要的现实和指导意义。希望XL轮胎公司通过对质量管理的进一步加强,提高综合实力和市场竞争力,同时也希望能够为整个轮胎行业实施全面质量管理提供参考和借鉴。

关键词：全面质量管理质量管理体系优化策略

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混杂数据的动态知识获取方法研究

混杂数据的动态知识获取方法研究

作者：王琳琳广西民族大学

学位级别：硕士

随着计算机与网络技术的快速发展,各领域中的海量复杂数据推动着社会及企业的快速发展。一方面,删除海量混杂数据中的数据噪音,获取有价值的信息已经成为了当前信息科学的一大难题。另一方面,各领域中获取的数据在动态地变化着,如何有... 详细信息

随着计算机与网络技术的快速发展,各领域中的海量复杂数据推动着社会及企业的快速发展。一方面,删除海量混杂数据中的数据噪音,获取有价值的信息已经成为了当前信息科学的一大难题。另一方面,各领域中获取的数据在动态地变化着,如何有效利用新旧数据之间的关系对有价值的信息进行高效更新也是信息科学领域的重要问题之一。本文基于粒计算理论中简化复杂问题的思想,以粗糙集在动态环境下高效获取属性约简为出发点,分别针对混杂信息系统中样本动态增加、样本和属性同时动态增加的情况,高效获取属性约简的问题进行相关的研究。本文的主要研究内容如下:(1)现有的增量约简算法很少考虑动态数据集中样本的单调有序关系,针对样本动态增加的混杂信息系统,结合优势粗糙集模型,提出了面向样本集更新的增量属性约简算法。首先给出了混杂信息系统中优势关系矩阵和优势对角矩阵的定义,并提出了一种以矩阵形式计算优势条件熵的方法,探索样本增加时基于矩阵的知识粒度增量更新的规律,设计了新增样本后有序信息系统增量式属性约简的算法,并利用UCI数据集进行相关实验验证该算法的有效性。(2)针对混杂信息系统中不同类型的数据,首先分析了在布尔型、分类型、实值型等不同类型属性下的距离度量,并通过多距离融合的方式建立基于混杂数据的距离函数。在此基础上,结合模糊粗糙集模型,提出了处理混杂数据的静态属性约简方法,并通过实验验证使用多距离融合的方式处理混杂数据的可行性。(3)现有的增量约简算法只针对数据集单一维度的变化情形,针对样本和属性同时动态增加的混杂信息系统,提出了面向多维更新的增量属性约简算法。首先基于多距离融合的方式,结合模糊粗糙集模型,分析了在混杂属性下模糊信息粒度的生成,并探索了模糊信息粒度的更新机制,在同时添加样本和属性时,引入了一种基于矩阵的模糊粗糙近似表示,提出相应的增量式属性约简算法,并利用UCI数据集进行相关实验验证。

关键词：粗糙集粒计算距离函数混杂信息系统增量属性约简

车桥耦合分析中桥梁与车辆模型非线性的影响研究

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车桥耦合分析中桥梁与车辆模型非线性的影响研究

作者：王琳琳重庆交通大学

学位级别：硕士

大跨度桥梁上车辆运行的安全性和舒适性一直都是桥梁动力研究领域的热点。以往的车桥耦合分析一般采用线性车辆模型和桥梁模型,基于线性系统的逐步积分法开展动力学求解。实际上,车辆子系统和桥梁子系统均包含多种非线性因素,这些非线... 详细信息

大跨度桥梁上车辆运行的安全性和舒适性一直都是桥梁动力研究领域的热点。以往的车桥耦合分析一般采用线性车辆模型和桥梁模型,基于线性系统的逐步积分法开展动力学求解。实际上,车辆子系统和桥梁子系统均包含多种非线性因素,这些非线性会影响车桥耦合动力学响应。为正确评价车桥耦合分析中车辆与桥梁各种非线性因素对其动力响应的影响,本文开展了如下研究工作:(1)阐述了车桥耦合分析中车辆子系统和桥梁子系统存在的非线性问题;针对车辆非线性,建立了线性车辆、几何非线性车辆、悬挂非线性车辆三种车辆模型;针对桥梁非线性,建立了桥梁动力学分析模型、考虑几何非线性和大位移非线性的桥梁动力学分析模型;介绍了四阶Runge-Kutta法、Newmark-β法等时域积分法以及用于求解非线性问题的数值迭代法—Newton-Raphson迭代法。(2)基于MATLAB平台开发了车-桥耦合动力学分析程序VBIP,该程序具有静力分析、模态分析、瞬态分析等功能,具有车桥耦合线性振动求解和非线性振动求解两大模块。随后通过诸多算例验证了VBIP对车辆非线性、桥梁非线性分析求解的有效性。(3)基于VBIP开展了车辆非线性对车桥耦合分析的影响研究:借助线性车辆、几何非线性车辆、悬挂非线性车辆三种车辆模型,开展了路面不平度激励下车辆-简支梁桥耦合振动分析、跳车冲击力作用下车辆-简支梁桥耦合振动分析、跳车冲击力作用下车辆-斜拉桥耦合振动分析,对上述三个问题中桥梁动力响应、车辆动力响应、车辆运行的舒适性进行了分析。研究结果表明:车辆的非线性应被视为影响车桥耦合分析结果的重要因素,尤其是在车辆发生跳车现象时,其非线性特性对车桥耦合振动的影响将变得更加显著。在车辆-简支梁桥的耦合振动分析中,考虑车辆悬挂系统的非线性特性,导致桥梁跨中竖向最大位移增长了111.48%,车体垂向最大加速度最大增长了23.64%。这样的非线性效应明显降低了车辆的运行舒适性。(4)基于VBIP进行了桥梁非线性对车桥耦合分析影响的研究。该研究分析了不同车辆模型、车辆速度以及路面不平度激励条件下,桥梁非线性对车桥耦合振动分析的影响,并对车辆的舒适性指标进行了评估。结果表明:桥梁的非线性对桥梁跨中竖向最大位移的影响范围在-2%至3%之间,对车辆舒适性的影响非常小。在考虑桥梁的非线性因素时,采用1/3倍频带加速度评价车辆舒适性,在各个工况下车体的垂向加速度均未超出舒适性降低界限。(5)总结了车辆非线性和桥梁非线性对桥梁动力响应的影响、对车辆动力响应的影响、对车辆运行舒适性的影响。并对本研究的局限性以及亟待解决的关键问题进行了总结。

关键词：程序开发车桥耦合车辆非线性桥梁非线性

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南钢股份数字化转型路径及绩效研究

南钢股份数字化转型路径及绩效研究

作者：王琳琳安徽财经大学

学位级别：硕士

数字经济时代到来给传统制造业带来了生产经营方式上的巨大变革。我国在“十四五”数字经济发展规划中明确表示,要实施“上云用数赋智”行动,推动数据赋能全产业链协同转型。数字化转型已成为现代制造业发展的必然趋势。那么,企业怎样... 详细信息

数字经济时代到来给传统制造业带来了生产经营方式上的巨大变革。我国在“十四五”数字经济发展规划中明确表示,要实施“上云用数赋智”行动,推动数据赋能全产业链协同转型。数字化转型已成为现代制造业发展的必然趋势。那么,企业怎样进行数字化转型?数字化转型会对企业绩效产生什么影响?这成为我们关注的重点。钢铁行业作为传统制造业的代表,近年来,也面临着低端产品过剩,高端产品不足、同质化竞争加剧、环保安全压力明显增大等问题。提高钢铁企业管理水平,实现精益化生产显得尤为重要。数字化改造可以较好解决传统制造企业痛点,从而促进了企业生产效率的提高,切实提高产品质量,减少能源消耗。随着信息技术和互联网技术发展,企业面临着新的机遇与挑战,而如何实现数字化转型成为当前企业亟需解决的关键问题之一。2017年,南钢股份把数字化转型列为关键的战略要务,且其转型效果明显,被称为行业数字化转型标杆。因此,文章选择南钢股份进行案例研究,采用财务分析法和EVA分析法探讨企业数字化转型的实现效果。本文首先阐述研究背景及意义、文献综述和研究内容与方法等。在回顾总结前人关于企业数字化转型研究文献的基础上,阐述了与企业数字化转型有关的概念,与组织变革理论,权变理论、流程再造等理论相结合,探讨数字化转型给企业带来的启发。其次对南钢股份进行简要的介绍,剖析其数字化转型动因。最后,梳理了南钢股份数字化转型对企业绩效的影响机制,发现数字化转型可以促进企业加大创新投入,进而促进创新产出;数字化转型有助于提高管理效率;数字化转型可以实现智能制造,降低成本费用;数字化转型拓宽营销渠道,增加销售收入。文章以南钢股份数字化转型为例,最后得到如下结论:数字化转型是企业发展的必然趋势;数字化转型有助于提升企业绩效,增强企业综合实力。得到的启示包括:加强企业管理层对数字化转型的认知;完善数字化转型的战略规划;明确以客户为中心的数字化转型方向;重视组建和培育专业技术团队;依据自身实际情况确定数字化转型路径。本文既丰富了数字化转型对钢铁企业绩效影响的理论成果,也为钢铁行业其他企业提供了案例支持。

关键词：数字化转型企业绩效财务分析

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魏源的文学思想研究

魏源的文学思想研究

作者：张琳琳黑龙江大学

学位级别：硕士

魏源是中国近代史上著名的思想家、政治家和文学家,他的“经世致用”思想对近代中国产生了深远影响。魏源以政治家和思想家的身份出现在公众视野,而他的文学成就往往被其政治思想成就的光辉所遮掩。魏源作为清末经世派文学的代表,一生... 详细信息

魏源是中国近代史上著名的思想家、政治家和文学家,他的“经世致用”思想对近代中国产生了深远影响。魏源以政治家和思想家的身份出现在公众视野,而他的文学成就往往被其政治思想成就的光辉所遮掩。魏源作为清末经世派文学的代表,一生创作了大量诗歌和散文,其文学思想最突出的特点就是“经世致用”,最终形成了魏源的经世文学观。全文从文学本质论、文学创作论和文学功能论三个方面论述魏源的文学思想,首先,梳理了两种本质论的历史发展脉络,探讨了魏源文学本质论的内涵,并将理论与其文学创作实践相结合,对魏源的文学本质论加以直观展现。其次,基于魏源本人的理论观点,从“厚”“真”“重”三个方面分析了魏源对作家和作品的要求,阐明了魏源文学创作论的内容。最后,聚焦文学与政治的关系问题,论述了魏源文学功能论的内容。总结出魏源文学功能论以政治教化功能为主、审美功能为辅的特征,并分析指出其理论思想的先进性和局限性。在分析魏源理论观点的基础上,结合魏源的诗歌散文创作,论述了魏源经世致用的文学思想理论。

关键词：魏源文学思想经世致用

miR-145靶向SOX9调控鹿茸间充质干细胞成软骨分化的作用机制研究

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miR-145靶向SOX9调控鹿茸间充质干细胞成软骨分化的作用机制研究

作者：张琳琳吉林农业大学

学位级别：硕士

鹿茸是唯一哺乳动物可以割后再生的器官,其生长速度远超过肿瘤却没有引发组织癌变,在保持高速生长分化的同时呈现高度有序状态。目前已证实,鹿茸内部和外部组织的再生依赖于鹿茸间充质干细胞(Antler Reserve mesenchymal cells,RMCs)表... 详细信息

鹿茸是唯一哺乳动物可以割后再生的器官,其生长速度远超过肿瘤却没有引发组织癌变,在保持高速生长分化的同时呈现高度有序状态。目前已证实,鹿茸内部和外部组织的再生依赖于鹿茸间充质干细胞(Antler Reserve mesenchymal cells,RMCs)表达关键胚胎干细胞标志物,RMCs的增殖和分化直接形成内部鹿茸组分。由此可见,RMCs在鹿茸生长过程中一直存在,它不断增殖更新干细胞库,并不断向软骨分化,维持鹿茸快速生长却不发生癌变。因此,揭示鹿茸RMCs成软骨分化的分子机制可为鹿茸快速生长提供理论支持。近年来,一些报道发现micro RNA(miRNAs)具有参与间充质干细胞(mesenchymal cells,MSCs)的干性维持和分化过程中的重要调节作用。miRNAs可以稳定软骨细胞表型,阻止其进入软骨内成骨肥大分化进程,阻止纤维软骨的形成,从而实现软骨缺损的稳定修复。因此,从miRNAs角度研究鹿茸RMCs成软骨分化的调控网络,可为鹿茸RMCs成软骨分化机制的解析提供全新的视角。鉴于此,我们开展以下几个方面的研究。第一部分研究,我们成功分离并鉴定鹿茸RMCs,并利用外源TGF-β1诱导建立鹿茸RMCs成软骨分化的三维立体模型-微粒体。通过Small RNA测序技术检测诱导不同时期(0 d、7 d、14 d)的微粒体以及鹿茸软骨细胞。结果共鉴定出475个已知miRNAs和70个新miRNAs,其中288个miRNAs差异表达。通过GO和KEGG分析确定了差异表达miRNAs富集在细胞增殖、生存、凋亡和免疫反应、AMPK信号通路、钙信号通路、m TOR信号通路等途径。通过对比CP＿7 vs CP＿0、CP＿14 vs CP＿7、CC vs CP＿14组间差异miRNAs的表达,发现有74个miRNAs在这三个对比组之间均差异表达,结合我们之前在不同组织中得到的与鹿茸生长有关的miRNAs的集合,最终确定12个候选miRNAs,其中miR-145与软骨增殖、分化、迁移作用密切相关。因此,我们推测miR-145在鹿茸RMCs成软骨分化过程中可能发挥重要作用。第二部分研究,为明确miR-145对鹿茸RMCs成软骨分化的作用,将转染miR-145mimic和miR-145 inhibitor的RMCs体外诱导成微粒体,于第14 d收集样品。阿利新蓝染色结果发现miR-145 inhibitor组酸性粘多糖的阳性率明显升高,miR-145 mimic组则与之相反。此结果提示miR-145可能抑制RMCs成软骨分化进程。继而采用Q-PCR、IFA和Western Blot对软骨相关基因进行检测,结果发现miR-145 inhibitor组成软骨标志基因Ⅱ型胶原蛋白(Collagen II,COLⅡ)和软骨寡聚蛋白(Cartilage oligomeric matrix protein,COMP)表达显著上调,软骨肥大标志基因X型胶原蛋白(Collagen X,COLⅩ)表达下调。miR-145 mimic组COLⅡ、COMP表达显著下调,COLⅩ表达上调。以上结果表明miR-145抑制RMCs成软骨分化进程。第三部分研究,首先,为了明确miR-145的下游调控基因,我们利用生物信息学软件预测miR-145的靶向调控基因是关键转录因子性别决定区Y框蛋白9(Sex determining region Y-box 9,SOX9)。通过Q-PCR检测RMCs成软骨分化第0 d、7 d、14 d时SOX9的表达趋势与miR-145显著负相关。进一步利用双荧光素酶报告系统证实,miR-145能与SOX9的3’UTR预测靶点有效结合,发挥抑制效应。以上结果证实miR-145的靶基因是SOX9。其次,为了阐明miR-145能否通过靶向SOX9在RMCs成软骨分化进程中发挥作用,利用Q-PCR、IFA、Western Blot对转染miR-145 mimic和miR-145 inhibitor的RMCs所诱导第14 d的微粒体进行SOX9表达量的检测,结果均显示,miR-145 inhibitor组SOX9表达量显著升高,miR-145 mimic组SOX9的表达量显著降低。以上结果表明miR-145具有负向调控SOX9的作用。最后,为了探讨miR-145靶向SOX9调控RMCs成软骨分化的作用机制,本试验利用慢病毒系统将以下8组转染RMCs中:miR-145 mimic、miR-145inhibitor、LV-SOX9、LV-SOX9 sh RNA、miR-145 mimic+LV-SOX9、miR-145 mimic+LVSOX9 sh RNA、miR-145 inhibitor+LV-SOX9、miR-145 inhibitor+LV-SOX9 sh RNA,然后诱导成软骨分化至第14 d收集微粒体样品。阿利新蓝染色结果显示LV-SOX

关键词：鹿茸 RMCs miR-145 SOX9 软骨分化